布包繞，暴露右側(cè)輸尿管，在距離右腎下級(jí)15cm處，用 長(zhǎng)2cm，寬Icm的聚乙烯片包繞，并在聚乙烯片上沿兩端用10號(hào)手術(shù)線結(jié)扎，使右側(cè)輸尿管 完全梗阻，還納腸攀，37°C，0. 9%生理鹽水反復(fù)沖洗腸攀并用吸引器吸出鹽水，腹腔注入青 霉素16萬單位/kg，逐層縫合關(guān)閉腹腔；
[0031](三）再通手術(shù)：5天后按照上述操作步驟進(jìn)行麻醉，待麻醉生效后將豬至于恒溫 37°C手術(shù)臺(tái)上，所有步驟遵循無菌操作，常規(guī)備皮、鋪無菌洞巾，將原切口打開，逐層分離皮 膚直達(dá)臟層腹膜，打開腹腔，翻開腸攀，將腸攀用37°C生理鹽水浸濕的紗布包繞，找到右側(cè) 輸尿管，充分暴露結(jié)扎處輸尿管，此時(shí)可見結(jié)扎處輸尿管較正常狹窄，將結(jié)扎輸尿管的手術(shù) 線及聚乙烯管一并去除，用手輕輕按摩結(jié)扎處輸尿管，可見狹窄、迂曲、發(fā)白的輸尿管逐漸 恢復(fù)正常粗細(xì)，且血運(yùn)豐富，梗阻的輸尿管完全再通，留取雙側(cè)腎活檢組織約200毫克，并 留取雙側(cè)分腎靜脈血清標(biāo)本，還納腸攀，37°C，0. 9%生理鹽水反復(fù)沖洗腸攀并用吸引器吸 出鹽水，腹腔注入青霉素16萬單位/kg，逐層縫合關(guān)閉腹腔；
[0032](四）繼續(xù)將梗阻再通后的實(shí)驗(yàn)豬于動(dòng)物室內(nèi)行標(biāo)準(zhǔn)觀察、飼養(yǎng)，再通7天、14天 及21天時(shí)分別再次行手術(shù)，打開腹腔留取腎組織及血清標(biāo)本，動(dòng)態(tài)觀察腎臟功能及組織病 理學(xué)改變。
[0033] 實(shí)施例2
[0034] 包括下列步驟：
[0035](一）選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，所選實(shí)驗(yàn)豬為廣西巴馬香豬，月齡3個(gè)月，體重8-10公斤，飼 養(yǎng)符合標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件，18_25°C，12小時(shí)光/暗周期，每只豬每天喂養(yǎng)豬飼料2次，每次 250g；
[0036](二）造模手術(shù)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)前禁食水12小時(shí)，用地西泮、氯胺酮和速眠新II聯(lián)合 麻醉法，麻醉具體操作過程：先給予氯胺酮20mg/kg肌肉注射，60秒后動(dòng)物搖晃倒地，肌肉 松弛，再給予地西泮lmg/kg肌肉注射，速眠新0. 15ml/kg肌肉注射，120秒麻醉生效，將豬置 于37°C恒溫手術(shù)臺(tái)，所有手術(shù)步驟遵循無菌操作，常規(guī)備皮、鋪無菌洞巾，戴無菌帽子、口罩 及手套，皮膚消毒后取腹部正中切口，l〇cm，逐層分離皮膚直達(dá)臟層腹膜，打開腹腔，翻開腸 攀，將腸攀用37°C生理鹽水浸濕的紗布包繞，暴露右側(cè)輸尿管，在距離右腎下級(jí)15cm處，用 長(zhǎng)2cm，寬Icm的聚乙烯片包繞，并在聚乙烯片上沿兩端用10號(hào)手術(shù)線結(jié)扎，使右側(cè)輸尿管 完全梗阻，還納腸攀，37°C，0. 9%生理鹽水反復(fù)沖洗腸攀并用吸引器吸出鹽水，腹腔注入青 霉素16萬單位/kg，逐層縫合關(guān)閉腹腔；
[0037](三）再通手術(shù)：5天后按照上述操作步驟進(jìn)行麻醉，待麻醉生效后將豬至于恒溫 37°C手術(shù)臺(tái)上，所有步驟遵循無菌操作，常規(guī)備皮、鋪無菌洞巾，將原切口打開，逐層分離皮 膚直達(dá)臟層腹膜，打開腹腔，翻開腸攀，將腸攀用37°C生理鹽水浸濕的紗布包繞，找到右側(cè) 輸尿管，充分暴露結(jié)扎處輸尿管，此時(shí)可見結(jié)扎處輸尿管較正常狹窄，將結(jié)扎輸尿管的手術(shù) 線及聚乙烯管一并去除，用手輕輕按摩結(jié)扎處輸尿管，可見狹窄、迂曲、發(fā)白的輸尿管逐漸 恢復(fù)正常粗細(xì)，且血運(yùn)豐富，梗阻的輸尿管完全再通，留取雙側(cè)腎活檢組織約200毫克，并 留取雙側(cè)分腎靜脈血清標(biāo)本，還納腸攀，37°C，0. 9%生理鹽水反復(fù)沖洗腸攀并用吸引器吸 出鹽水，腹腔注入青霉素16萬單位/kg，逐層縫合關(guān)閉腹腔；
[0038](四）繼續(xù)將梗阻再通后的實(shí)驗(yàn)豬于動(dòng)物室內(nèi)行標(biāo)準(zhǔn)觀察、飼養(yǎng)，再通7天、14天 及21天時(shí)分別再次行手術(shù)，打開腹腔留取腎組織及血清標(biāo)本，動(dòng)態(tài)觀察腎臟功能及組織病 理學(xué)改變。
[0039] 實(shí)施例3
[0040] 包括下列步驟：
[0041](一）選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，所選實(shí)驗(yàn)豬為廣西巴馬香豬，月齡3個(gè)月，體重8-10公斤，飼 養(yǎng)符合標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件，18_25°C，12小時(shí)光/暗周期，每只豬每天喂養(yǎng)豬飼料2次，每次 250g；
[0042](二）造模手術(shù)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)前禁食水12小時(shí)，用地西泮、氯胺酮和速眠新II聯(lián)合 麻醉法，麻醉具體操作過程：先給予氯胺酮20mg/kg肌肉注射，70秒后動(dòng)物搖晃倒地，肌肉 松弛，再給予地西泮lmg/kg肌肉注射，速眠新0. 15ml/kg肌肉注射，130秒麻醉生效，將豬置 于37°C恒溫手術(shù)臺(tái)，所有手術(shù)步驟遵循無菌操作，常規(guī)備皮、鋪無菌洞巾，戴無菌帽子、口罩 及手套，皮膚消毒后取腹部正中切口，11cm，逐層分離皮膚直達(dá)臟層腹膜，打開腹腔，翻開腸 攀，將腸攀用37°C生理鹽水浸濕的紗布包繞，暴露右側(cè)輸尿管，在距離右腎下級(jí)15cm處，用 長(zhǎng)2cm，寬Icm的聚乙烯片包繞，并在聚乙烯片上沿兩端用10號(hào)手術(shù)線結(jié)扎，使右側(cè)輸尿管 完全梗阻，還納腸攀，37°C，0. 9%生理鹽水反復(fù)沖洗腸攀并用吸引器吸出鹽水，腹腔注入青 霉素16萬單位/kg，逐層縫合關(guān)閉腹腔；
[0043](三）再通手術(shù)：5天后按照上述操作步驟進(jìn)行麻醉，待麻醉生效后將豬至于恒溫 37°C手術(shù)臺(tái)上，所有步驟遵循無菌操作，常規(guī)備皮、鋪無菌洞巾，將原切口打開，逐層分離皮 膚直達(dá)臟層腹膜，打開腹腔，翻開腸攀，將腸攀用37°C生理鹽水浸濕的紗布包繞，找到右側(cè) 輸尿管，充分暴露結(jié)扎處輸尿管，此時(shí)可見結(jié)扎處輸尿管較正常狹窄，將結(jié)扎輸尿管的手術(shù) 線及聚乙烯管一并去除，用手輕輕按摩結(jié)扎處輸尿管，可見狹窄、迂曲、發(fā)白的輸尿管逐漸 恢復(fù)正常粗細(xì)，且血運(yùn)豐富，梗阻的輸尿管完全再通，留取雙側(cè)腎活檢組織約200毫克，并 留取雙側(cè)分腎靜脈血清標(biāo)本，還納腸攀，37°C，0. 9%生理鹽水反復(fù)沖洗腸攀并用吸引器吸 出鹽水，腹腔注入青霉素16萬單位/kg，逐層縫合關(guān)閉腹腔；
[0044](四）繼續(xù)將梗阻再通后的實(shí)驗(yàn)豬于動(dòng)物室內(nèi)行標(biāo)準(zhǔn)觀察、飼養(yǎng)，再通7天、14天 及21天時(shí)分別再次行手術(shù)，打開腹腔留取腎組織及血清標(biāo)本，動(dòng)態(tài)觀察腎臟功能及組織病 理學(xué)改變。
[0045] 參見圖4,可以看到梗阻2周及3周時(shí)腎臟病變明顯，甚至出現(xiàn)纖維化改變，說明梗 阻模型成功。
[0046] 參見圖5,梗阻時(shí)血肌酐顯著增高，再通后肌酐明顯下降，模型成功。
[0047] 參見圖6,梗阻時(shí)腎間質(zhì)出現(xiàn)明顯病變，再通至21天時(shí)腎臟病理基本恢復(fù)至正常， 此動(dòng)態(tài)變化均在同一只模型豬上觀察到。
[0048] 下面通過實(shí)驗(yàn)例進(jìn)一步說明本發(fā)明的效果。
[0049] 實(shí)驗(yàn)例1動(dòng)物麻醉比較
[0050] 以往資料顯示波器，大多數(shù)實(shí)驗(yàn)豬的麻醉，在單獨(dú)應(yīng)用一種麻醉藥物的情況下麻 醉效果均欠佳，而本發(fā)明聯(lián)合麻醉能達(dá)到較好的麻醉效果，本發(fā)明采用的麻醉藥物為速眠 新II，0. 15ml/kg肌肉注射、地西泮lmg/kg肌肉注射，及氯胺酮20mg/kg肌肉注射，為了觀 察不同麻醉藥物的麻醉效果，進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)：將實(shí)驗(yàn)小型豬隨機(jī)分為A、B、C三組，每組6 頭豬，麻醉藥物劑量及麻醉方法同上。A組為速眠新II聯(lián)合地西泮復(fù)合麻醉，B組為氯胺酮 聯(lián)合速眠新II復(fù)合麻醉，C組為氯胺酮、速眠新II、地西泮三種藥物不同復(fù)合麻醉，觀察誘 導(dǎo)期、維持期和蘇醒期時(shí)間，監(jiān)測(cè)動(dòng)物體溫、呼吸頻率和心率。結(jié)果表明，氯胺酮、速眠新II 及地西泮三種藥物聯(lián)合麻醉的效果明顯優(yōu)于兩種藥物聯(lián)合應(yīng)用，如表1所示。
[0051] 表1各組麻醉各個(gè)時(shí)期監(jiān)測(cè)結(jié)果（min)
[0052]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種豬單側(cè)輸尿管梗阻再通模型的建立方法，其特征在于包括下列步驟： (一） 選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，所選實(shí)驗(yàn)豬為廣西巴馬香豬，月齡3個(gè)月，體重8-10公斤，飼養(yǎng) 符合標(biāo)準(zhǔn)動(dòng)物飼養(yǎng)條件，18_25°C，12小時(shí)光/暗周期，每只豬每天喂養(yǎng)豬飼料2次，每次 250g； (二） 造模手術(shù)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)前禁食水12小時(shí)，用地西泮、氯胺酮和速眠新II聯(lián)合麻 醉法，麻醉具體操作過程：先給予氯胺酮20mg/kg肌肉注射，50~70秒后動(dòng)物搖晃倒地，肌 肉松弛，再給予地西泮lmg/kg肌肉注射，速眠新0. 15ml/kg肌肉注射，110~130秒麻醉生 效，將豬置于37 °C恒溫手術(shù)臺(tái)，所有手術(shù)步驟遵循無菌操作，常規(guī)備皮、鋪無菌洞巾，戴無菌 帽子、口罩及手套，皮膚消毒后取腹部正中切口，9~11cm，逐層分離皮膚直達(dá)臟層腹膜，打 開腹腔，翻開腸攀，將腸攀用37°C生理鹽水浸濕的紗布包繞，暴露右側(cè)輸尿管，在距離右腎 下級(jí)15cm處，用長(zhǎng)2cm，寬Icm的聚乙烯片包繞，并在聚乙烯片上沿兩端用10號(hào)手術(shù)線結(jié) 扎，使右側(cè)輸尿管完全梗阻，還納腸攀，37°C，0. 9%生理鹽水反復(fù)沖洗腸攀并用吸引器吸出 鹽水，腹腔注入青霉素16萬單位/kg，逐層縫合關(guān)閉腹腔； (三） 再通手術(shù)：5天后按照上述操作步驟進(jìn)行麻醉，待麻醉生效后將豬至于恒溫37°C 手術(shù)臺(tái)上，所有步驟遵循無菌操作，常規(guī)備皮、鋪無菌洞巾，將原切口打開，逐層分離皮膚直 達(dá)臟層腹膜，打開腹腔，翻開腸攀，將腸攀用37°C生理鹽水浸濕的紗布包繞，找到右側(cè)輸尿 管，充分暴露結(jié)扎處輸尿管，此時(shí)可見結(jié)扎處輸尿管較正常狹窄，將結(jié)扎輸尿管的手術(shù)線及 聚乙烯管一并去除，用手輕輕按摩結(jié)扎處輸尿管，可見狹窄、迂曲、發(fā)白的輸尿管逐漸恢復(fù) 正常粗細(xì)，且血運(yùn)豐富，梗阻的輸尿管完全再通，留取雙側(cè)腎活檢組織約200毫克，并留取 雙側(cè)分腎靜脈血清標(biāo)本，還納腸攀，37°C，0. 9%生理鹽水反復(fù)沖洗腸攀并用吸引器吸出鹽 水，腹腔注入青霉素16萬單位/kg，逐層縫合關(guān)閉腹腔； (四） 繼續(xù)將梗阻再通后的實(shí)驗(yàn)豬于動(dòng)物室內(nèi)行標(biāo)準(zhǔn)觀察、飼養(yǎng)，再通7天、14天及21 天時(shí)分別再次行手術(shù)，打開腹腔留取腎組織及血清標(biāo)本，動(dòng)態(tài)觀察腎臟功能及組織病理學(xué) 改變。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種豬單側(cè)輸尿管梗阻再通模型的建立方法，屬于一種動(dòng)物模型的建立方法。選擇巴馬香豬，采取聯(lián)合麻醉，將聚乙烯片卷曲成為聚乙烯管，包繞在腎輸尿管上，兩端用10號(hào)手術(shù)線結(jié)扎，使右側(cè)輸尿管完全梗阻。優(yōu)點(diǎn)是成功建立了大動(dòng)物豬的單側(cè)輸尿管梗阻再通模型，為研究腎間質(zhì)纖維化提供了很好的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，同時(shí)此模型也為藥物實(shí)驗(yàn)提供了很好的工具，通過對(duì)梗阻及再通各個(gè)時(shí)間點(diǎn)血清標(biāo)志物及病理的分析，有助于發(fā)現(xiàn)梗阻不同時(shí)間點(diǎn)再通后腎臟在大體、病理及生理功能上發(fā)生的不同程度的變化。
【IPC分類】A61D1-00
【公開號(hào)】CN104720917
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510158663
【發(fā)明人】孫晶, 劉盈盈, 紀(jì)磊, 劉樹軍, 李兵, 羅曼宇, 王楊威, 董文鵬, 苗里寧
【申請(qǐng)人】吉林大學(xué)
【公開日】2015年6月24日
【申請(qǐng)日】2015年4月7日