地黃葉提取物在制備降血糖類藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種地黃葉提取物在制備降血糖類藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 地黃葉為玄參科植物地黃Wwiifliasa Libosch.的葉，首次載于《食療 本草》:"(地黃)葉可以羹"，后收入1988年版《北京市中藥材標(biāo)準(zhǔn)》:"地黃葉苦、寒，歸心、肝、 腎經(jīng)，清熱，活血，益氣養(yǎng)陰，補(bǔ)腎，用于少氣乏力，面色無華，口干咽燥，氣陰兩虛證，外用于 惡瘡，手足癬"。地黃葉與塊根是同株植物不同的營養(yǎng)器官，且現(xiàn)代研究表明地黃葉具有多 種化學(xué)成分，又研究報(bào)道提取地黃葉總苷制備成為膠囊臨床用于治療腎炎，但至今未見關(guān) 于地黃葉降血糖作用的研究報(bào)道。傳統(tǒng)用藥時(shí)，地黃僅地下塊根經(jīng)不同炮制而入藥，地上部 分基本全部舍棄，在資源日益緊張的今天，無疑是一種極大的浪費(fèi)，有必要對(duì)地黃葉進(jìn)行綜 合開發(fā)利用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種地黃葉提取 物在制備降血糖類藥物中的應(yīng)用，可有效解決糖尿病患者的治療用藥問題。
[0004] 本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，地黃葉提取物在制備降血糖類藥物中的應(yīng)用，該地黃 葉提取物是，將地黃葉每次加地黃葉重量10-12倍的水提取2次，每次1-1. 5h，合并兩次提 取液，減壓濃縮至55°C相當(dāng)于含生藥0. 5-2g/ml的濃縮液，濃縮液加入質(zhì)量濃度為95%的 乙醇使其醇濃度達(dá)到60-80%，4°C靜置24h，取上清液，上清液減壓濃縮至55°C相當(dāng)于含生 藥1-4. 5mg/ml的濃縮液，再采用H103樹脂柱分離純化，上樣量為2-7個(gè)柱體積，上樣時(shí)間 2_4h，然后用質(zhì)量濃度10-20%的乙醇作洗脫劑對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，洗脫劑用量為2-15個(gè)柱 體積，洗脫流速為〇. 4-0. 5ml/min，收集洗脫液，洗脫液減壓濃縮，干燥，得干燥物，即地黃葉 提取物，可用于制備降血糖類藥物。
[0005] 該地黃葉提取物作為唯一的活性部位用于制備降血糖類的藥物，實(shí)現(xiàn)地黃葉提取 物唯一活性部位在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
[0006] 本發(fā)明原料豐富，制備方法簡單，易操作，穩(wěn)定可靠，采用本發(fā)明方法將地黃葉水 提醇沉后，用H103樹脂分離純化，可以通過工業(yè)化生產(chǎn)制得任意量的地黃葉提取物，可有 效利用地黃葉提取物制備降血糖類的藥物，實(shí)現(xiàn)地黃葉的綜合開發(fā)和廢物利用，開拓了制 備降糖藥物的新途徑，經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益巨大。
【附圖說明】
[0007] 圖1本發(fā)明對(duì)給藥后糖尿病小鼠體重、攝食量、飲水量的影響圖。
[0008] 圖2本發(fā)明對(duì)糖尿病小鼠體重的影響圖。
[0009] 圖3本發(fā)明對(duì)糖尿病小鼠日均攝食量的影響圖。
[0010] 圖4本發(fā)明對(duì)糖尿病小鼠日均飲水量的影響圖。
[0011] 圖5本發(fā)明對(duì)糖尿病小鼠空腹血糖（mmol/L)的影響圖。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】作詳細(xì)說明。
[0013] 本發(fā)明在具體實(shí)施中，可由以下實(shí)施例實(shí)現(xiàn)。
[0014] 實(shí)施例1 一種地黃葉提取物在制備降血糖類藥物中的應(yīng)用，該地黃葉提取物是，取地黃葉500g， 洗去泥沙，切寬絲，置40°C以下通風(fēng)干燥，置于提取設(shè)備(如提取罐）內(nèi)，每次加地黃葉10倍 重量的水回流提取2次，每次lh，過濾，合并濾液（即提取液)，濾液置入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞 榮生化儀器廠，型號(hào)：RE52-99)內(nèi)，減壓至-0. lMPa，55°C濃縮至為相當(dāng)于含生藥量lg/ml的 濃縮液，加入質(zhì)量濃度95%的乙醇使其醇濃度達(dá)到70%，4°C靜置24h，取上清液，減壓濃縮， 上清液減壓濃縮至55°C相當(dāng)于含生藥lmg/ml的濃縮液，再采用H103樹脂分離純化，上樣體 積為2個(gè)柱體積，上樣時(shí)間為4h，然后用質(zhì)量濃度10%的乙醇作洗脫劑對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫， 洗脫劑用量為8個(gè)柱體積，洗脫流速為0. 5ml/min，收集洗脫液，洗脫液減壓濃縮，干燥，得 干燥物，即地黃葉提取物。
[0015] 實(shí)施例2: 一種地黃葉提取物在制備降血糖類藥物中的應(yīng)用，該地黃葉提取物是，取地黃葉500g， 洗去泥沙，切寬絲，置40°C以下通風(fēng)干燥，置于提取設(shè)備內(nèi)，每次加地黃葉12倍重量的水回 流提取2次，每次lh，過濾，合并濾液，濾液置入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器內(nèi)，減壓至-0.1 MPa，55°C濃縮至 為相當(dāng)于含生藥量2g/ml的濃縮液，加入質(zhì)量濃度95%的乙醇使其醇濃度達(dá)到80%，4°C靜置 24h沉淀，取上清液，減壓濃縮，上清液減壓濃縮至55°C相當(dāng)于含生藥2. 5mg/ml的濃縮液， 再采用H103樹脂分離純化，上樣體積為6個(gè)柱體積，上樣時(shí)間為2h，然后用質(zhì)量濃度20%的 乙醇作洗脫劑對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，洗脫劑用量為10個(gè)柱體積，洗脫流速為〇. 8ml/min，收集 洗脫液，洗脫液減壓濃縮，干燥，得干燥物，即地黃葉提取物。
[0016] 實(shí)施例3: 一種地黃葉提取物在制備降血糖類藥物中的應(yīng)用，該地黃葉提取物是，取地黃葉500g， 洗去泥沙，切寬絲，置40°C以下通風(fēng)干燥，置于提取設(shè)備內(nèi)，每次加地黃葉11倍重量的水回 流提取2次，每次I. 5h，過濾，合并濾液，濾液置入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器內(nèi)，減壓至-0.1 MPa，55°C濃縮 至為相當(dāng)于含生藥量〇. 5g/ml的濃縮液，加入質(zhì)量濃度95%的乙醇使其醇濃度達(dá)到60%，4°C 靜置24h，取上清液，減壓濃縮，上清液減壓濃縮至55°C相當(dāng)于含生藥4. 5mg/ml的濃縮液， 再采用H103樹脂分離純化，上樣體積為7個(gè)柱體積，上樣時(shí)間為3h，然后用質(zhì)量濃度15%的 乙醇作洗脫劑對(duì)樹脂柱進(jìn)行洗脫，洗脫劑用量為15個(gè)柱體積，洗脫流速為0. 4ml/min，收集 洗脫液，洗脫液減壓濃縮，干燥，得干燥物，即地黃葉提取物。
[0017] 實(shí)驗(yàn)研究 上述給出的實(shí)施例僅是用于說明本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】，并不是用于本發(fā)明的保護(hù)范 圍，采用本發(fā)明方法可以通過工業(yè)化生產(chǎn)，制得任意量的地黃葉提取物該地黃葉提取物經(jīng) 反復(fù)試驗(yàn)，具有降糖之功效，有效用于制備降血糖類藥物，實(shí)現(xiàn)地黃葉提取物在制備降血糖 類藥物中的應(yīng)用，并經(jīng)反復(fù)試驗(yàn)，均取得了相同或相近似的效果，有關(guān)試驗(yàn)資料如下 ： 1實(shí)驗(yàn)材料 I. 1動(dòng)物KM雄性小鼠，SPF級(jí)，體重18-20g，由鄭州大學(xué)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供， 動(dòng)物許可證號(hào)SCXK (豫）2010-0002,合格證號(hào)41003100000829。
[0018] 1.2儀器BMG型多功能酶標(biāo)儀(江蘇萬科科教儀器有限公司）;BS 210S電子天平 (北京賽多利斯天平有限公司）；DZKW-4電子恒溫不銹鋼水浴鍋(上海東星建材試驗(yàn)設(shè)備有 限公司）； 1. 3試劑鹽酸二甲雙胍片（天津中新藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，批號(hào)：P3813021);葡萄 糖試劑盒（中生北控生物科技股份有限公司，批號(hào)：143231);四氧嘧啶（Sigma，美國）；生理 鹽水(河南雙鶴華利藥業(yè)有限公司，批號(hào)：13103107B) 1. 4藥材地黃葉藥材購自焦作溫縣宛西制藥地黃種植基地，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院董誠明 教授鑒定為玄參科植物地黃Rehmannia glutinosa Libosch.的葉。桑葉(批號(hào)120501)購 自鄭州瑞龍制藥股份有限公司，經(jīng)河南中醫(yī)學(xué)院董誠明教授鑒定為桑科植物桑Morus alba L.的干燥葉。
[0019] 1.5灌胃藥液的制備 1. 5. 1地黃葉提取物地黃葉水提醇沉后，用H103樹脂分離純化所得的地黃葉提取 物，加蒸餾水調(diào)節(jié)含藥量為〇. 6g · mL'冷藏保存?zhèn)溆谩?br>[0020] 1.5. 2桑葉醇提 取桑葉，80°C水浴回流提取3次，每次1.5h，每次加20倍70% 乙醇，紗布過濾，合并濾液，減壓濃縮至無醇味，加蒸餾水調(diào)節(jié)含藥量為0. 6g · ml/1，冷藏保 存?zhèn)溆谩?br>[0021] 1. 5. 3地黃葉/桑葉1 :1 每次灌胃前取1. 5. 1項(xiàng)下的地黃葉提取液及1. 5. 2項(xiàng) 下的桑葉醇提液等量，混合均勻，備用。