抑制感染組合物及含有該組合物的飲食品的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及以異傘菌萃取物和乳酸菌的加熱處理菌體為有效成分的抑制感染組 合物及含有該組合物的飲食品。
【背景技術(shù)】
[0002] 眾所周知，屬于擔(dān)子菌綱傘菌科真菌的異傘菌(Agaricus blazei Murill)是具有 癌癥、過敏癥、糖尿病、高血壓等的預(yù)防和治療效果的成分，例如，作為抗腫瘤活性成分，可 分別從其子實(shí)體分離出酸性多糖體（日本專利公開公報(bào)昭64-67194號(hào)）、中性多糖體（日 本專利公開公報(bào)昭64-67195號(hào)）及蛋白多糖體（日本專利公開公報(bào)平2-78630號(hào)），從菌 絲體中分離出蛋白多糖體（日本專利公開公報(bào)昭61-47518號(hào)），進(jìn)一步從菌絲體的培養(yǎng)濾 液中分離出蛋白多糖體（日本專利公開公報(bào)昭61-47519號(hào)）。
[0003] 異傘菌作為健康食品原料被廣泛利用。例如，日本專利公開公報(bào)2001-103927號(hào) 揭示了在加壓條件下用水性溶劑對(duì)傘菌進(jìn)行萃取，然后用50%的乙醇對(duì)該萃取物進(jìn)行處 理，再將所得傘菌浸膏混入食品而制得的食用組合物。
[0004] 日本專利公開公報(bào)2001-17130號(hào)揭示了含有傘菌的健康飲料食品，該健康飲料 食品的特征是在傘菌的煎液中混入了醋和蜂蜜。
[0005] 日本專利公開公報(bào)平11-32723號(hào)揭示了利用以半纖維素酶為主的酶對(duì)傘菌的菌 絲體、子實(shí)體及它們的混合物或它們的培養(yǎng)殘液進(jìn)行分解處理，獲得P -葡聚糖，以含有大 量這種B -葡聚糖的生理活性物質(zhì)為主成分的健康食品。
[0006] 此外，乳酸菌也已作為健康食品被廣泛攝取，具有改善腸內(nèi)菌叢的平衡、減少腸內(nèi) 腐敗物的產(chǎn)生、改善糞便性狀和免疫激活的效果。例如，日本專利公開公報(bào)2001-48796號(hào) 揭示了以糞腸球菌ADlOl菌株的死菌體為主成分的免疫調(diào)節(jié)劑。
[0007] 日本專利公開公報(bào)平10-29946號(hào)揭示了以乳酸菌或其處理物為有效成分的體液 免疫恢復(fù)劑，該恢復(fù)劑具有使因藥劑而下降的體液免疫機(jī)能恢復(fù)的作用。日本專利公開公 報(bào)平6-80575號(hào)揭示了以乳酸菌菌體及/或菌體含有物為有效成分的經(jīng)口免疫激活劑。
[0008] 日本專利公開公報(bào)平5-252900號(hào)揭示了包含乳酸菌菌體的細(xì)胞質(zhì)成分及/或細(xì) 胞質(zhì)成分含有物的免疫激活組合物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0009] 異傘菌和乳酸菌作為健康食品被廣泛利用，但它們單獨(dú)被攝取時(shí)的生理效果并不 理想。
[0010] 因此，本發(fā)明的目的是提供經(jīng)口攝取對(duì)病原菌等的感染可顯現(xiàn)出良好的抑制效果 的抑制感染組合物及含有該組合物的飲食品。
[0011] 為了達(dá)到上述目的，并用異傘菌的萃取物和乳酸菌的加熱處理菌體，能夠?qū)Σ≡?菌的感染顯現(xiàn)出較強(qiáng)的抑制作用。
[0012] 抑制感染組合物，該組合物的特征是含有作為有效成分的異傘菌的子實(shí)體及/或 菌絲體培養(yǎng)物的萃取物和乳酸菌的加熱處理菌體。利用異傘菌的子實(shí)體及/或菌絲體培養(yǎng) 物的萃取物及乳酸菌的加熱處理菌體所具備的免疫賦活活性的協(xié)同效果，提供了對(duì)病原菌 等的感染顯現(xiàn)出較強(qiáng)抑制作用的抑制感染組合物。
[0013] 乳酸菌較好為奠腸球菌（EnterococQJS faecalis)，此外，最好含有0. 5~99. 5質(zhì) 量％的前述異傘菌（Agaricus blazei Murill)的子實(shí)體及/或菌絲體培養(yǎng)物的萃取物和 99. 5~0. 5質(zhì)量％的前述乳酸菌的加熱處理菌體。這樣可提供能夠更有效地對(duì)病原菌等的 感染進(jìn)行抑制的抑制感染組合物。
[0014] 另一種發(fā)明提供含有上述抑制感染組合物的飲食品。抑制感染組合物對(duì)應(yīng)于1餐 份的含量為0. 01~l〇g，最好為0. 005~2g。
[0015] 本發(fā)明的抑制感染組合物中由于含有作為食品攝入的異傘菌的子實(shí)體及/或菌 絲體培養(yǎng)物的萃取液和乳酸菌的加熱處理菌體作為有效成分，所以比以往安全性高，通過 攝入上述萃取液和加熱處理菌體，可對(duì)病原菌等產(chǎn)生良好的感染預(yù)防效果。將本發(fā)明的抑 制感染組合物添加到飲食品中，可提供能夠預(yù)防病原菌等的感染的飲食品。
[0016] 雖然目前還未明確本發(fā)明的抑制感染組合物的抑制感染效果的作用機(jī)理，但通過 同時(shí)攝入異傘菌的子實(shí)體及/或菌絲體培養(yǎng)物的萃取液和乳酸菌的加熱處理菌體，可使以 巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞及T細(xì)胞為中心的細(xì)胞免疫系統(tǒng)活化，有效排除病原菌等。
【附圖說明】
[0017] 圖1表示感染單核細(xì)胞增生利斯特氏菌后的小鼠脾臟中的單核細(xì)胞增生利斯特 氏菌數(shù)的測(cè)定結(jié)果。
[0018] 圖2表示通過ELISA法測(cè)定的腸系膜淋巴結(jié)細(xì)胞（MLN)培養(yǎng)液的上清液中的細(xì)胞 因子量（IL-2、IL-10、IL-12、IFN-Y)。
【具體實(shí)施方式】
[0019] 作為本發(fā)明的抑制感染組合物的有效成分之一的異傘菌的子實(shí)體萃取物可由水、 乙醇等溶劑直接萃取獲得，也可用水、乙醇等溶劑萃取其干燥物而獲得。例如，加入干燥異 傘菌子實(shí)體質(zhì)量的約20倍的水，于120°C進(jìn)行30分鐘萃取，然后對(duì)所得萃取液進(jìn)行適當(dāng)濃 縮和干燥。
[0020] 此外，可在含有碳源及氮源的培養(yǎng)基中對(duì)異傘菌的種菌進(jìn)行培養(yǎng)，然后直接萃取 而獲得異傘菌的菌絲體培養(yǎng)物的萃取物，或者如前所述對(duì)其干燥品進(jìn)行萃取。
[0021] 本發(fā)明還可使用市售的異傘菌子實(shí)體及/或菌絲體培養(yǎng)物的萃取物。
[0022] 作為本發(fā)明的抑制感染組合物的另一有效成分的乳酸菌的加熱處理菌體是對(duì)乳 酸菌體進(jìn)行加熱處理而獲得的死菌體，例如可通過以下方法獲得。
[0023] 在培養(yǎng)基中，于30~45°C對(duì)乳酸菌培養(yǎng)12~72小時(shí)后，通過離心分離等適當(dāng)手 段回收菌體。對(duì)回收的菌體進(jìn)行水洗和濃縮，在80~115°C對(duì)該濃縮的菌體懸浮液進(jìn)行30 分鐘~3秒鐘的加熱處理后，通過噴霧干燥和冷凍干燥等適當(dāng)手段進(jìn)行干燥而獲得上述死 菌體。上述乳酸菌包括糞腸球菌、屎腸球菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、德氏乳桿菌、瑞士乳 桿菌、長(zhǎng)雙歧桿菌、短雙歧桿菌、唾液鏈球菌嗜熱亞種等。本發(fā)明最好使用具有更強(qiáng)的免疫 賦活活性的糞腸球菌（ATCC19433，ATCC14508，ATCC23655)?？墒褂玫募S腸球菌的加熱處理 菌體包括EFPOWER、EF-2001 (商品名，康貝株式會(huì)社制）和FK-23 (商品名，koqikoqi制藥 株式會(huì)社制）等市售品。
[0024] 發(fā)明的抑制感染組合物中最好包含0. 5-99. 5質(zhì)量％的前述異傘菌的子實(shí)體及/ 或菌絲體培養(yǎng)物的萃取物和99. 5~0. 5質(zhì)量％的前述乳酸菌的加熱處理菌體。更好是包 含10~90質(zhì)量％的異傘菌的子實(shí)體及/或菌絲體培養(yǎng)物的萃取物和90~10質(zhì)量％的乳 酸菌的加熱處理菌體。各有效成分的含量如果在上述范圍之外，則協(xié)同抑制感染效果不理 想。
[0025] 本發(fā)明的抑制感染組合物中除了包含上述基本成分之外，還可包含賦形劑、甜味 劑、酸味劑、維生素和礦物質(zhì)。此外，對(duì)其形態(tài)無特別限定，可以是粉末、顆粒、片劑、膠囊劑、 溶液劑等，可根據(jù)使用目的的不同作適當(dāng)選擇。
[0026] 本發(fā)明的抑制感染組合物的有效攝入量是成人1天為0. 05~2g。
[0027] 本發(fā)明的抑制感染組合物可添加到各種飲食品中，例如，飲料、凍膠、糖果、口香 糖、可加熱食品、快餐食品等。上述抑制感染組合物的添加量對(duì)應(yīng)于1餐份為〇. 005~2g。 抑制感染組合物的添加量如果不足0. 〇lg，則即使攝入也不能夠獲得足夠的抑制感染效果， 如果超過l〇g，則成本過高。
[0028] 以下，通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體說明。以下例子中的試樣使用作為異傘菌的 子實(shí)體萃取物的"仙生露"（商品名，協(xié)和工程株式會(huì)社制）和作為糞腸球菌（Enterococcus faecalis)的加熱處理菌體的"EF-2001"（商品名，康貝株式會(huì)社制）。
[0029] 試驗(yàn)例（糞腸球菌的加熱處理菌體的急性口服毒性試驗(yàn)）
[0030] 以 OECD Guide"nes for the Chemicals401(1981)為基準(zhǔn)，用小鼠進(jìn)行急性口服 毒性試驗(yàn)。
[0031] 具體來講，將糞腸球菌的加熱處理菌體懸浮于精制水中，調(diào)制出試驗(yàn)溶液 (250mg / mL)。灌入上述試驗(yàn)溶液和精制水后，1天觀察1次（觀察期為14天），兩組都未 出現(xiàn)死亡例。觀察期結(jié)束后對(duì)所有小鼠進(jìn)行解剖，其主要臟器也未見異常。
[0032] 此外，灌入試驗(yàn)溶液和精制水后第7天和第14天測(cè)定小鼠體重，通過t檢驗(yàn)法以 顯著性水平5%進(jìn)行組間的比較，其結(jié)果如表1所示.
[0033] 表 1
[0034]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 抑制感染組合物，含有作為有效成分的異傘菌的子實(shí)體和/或菌絲體培養(yǎng)物的萃取 物和乳酸菌的加熱處理菌體，其特征在于，含有0. 5~99. 5質(zhì)量％的所述異傘菌的子實(shí)體 及/或菌絲體培養(yǎng)物的萃取物和99. 5~0. 5質(zhì)量％的前述乳酸菌的加熱處理菌體。
2. 如權(quán)利要求1所述的抑制感染組合物，其特征在于，所述的乳酸菌為糞腸球菌。
3. -種飲食品，所述的飲食品含有權(quán)利要求1~3中任一項(xiàng)所述的抑制感染組合物其 特征在于，1餐份含有0. 005~2g所述抑制感染組合物。
【專利摘要】本發(fā)明涉及以異傘菌萃取物和乳酸菌的加熱處理菌體為有效成分的抑制感染組合物及含有該組合物的飲食品，該飲食品經(jīng)口攝入后對(duì)病原菌等的感染顯現(xiàn)出良好抑制效果。所述組合物含有0.5～99.5質(zhì)量％的所述異傘菌的子實(shí)體及／或菌絲體培養(yǎng)物的萃取物和99.5～0.5質(zhì)量％的前述乳酸菌的加熱處理菌體，所述的飲食品1餐份含有0.005～2g所述抑制感染組合物，本發(fā)明可使以巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞及T細(xì)胞為中心的細(xì)胞免疫系統(tǒng)活化，有效排除病原菌。
【IPC分類】A23L1-30, A61P31-04, A23L2-38, A61K35-744, A61K36-07
【公開號(hào)】CN104666366
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201310642577
【發(fā)明人】不公告發(fā)明人
【申請(qǐng)人】青島碧水藍(lán)天生物技術(shù)有限公司
【公開日】2015年6月3日
【申請(qǐng)日】2013年12月3日