0,轉動30— 120min,控干廢液,加水調節(jié)液比
2.0—4.0,轉動 30— 120min,控干廢液;
(5)第三次清洗:加溫度為35—45°C的熱水,調節(jié)液比2.0—4.0,浴溫30— 35°C,加入烷基多苷0.2—3.0重量份,轉動30— 180min,控干廢液;
(6)水洗:加水調節(jié)液比2.0—6.0,流水洗10—30min ;
(7)浸水:加水調節(jié)液比2.0—6.0,加入烷基多苷0.2—3.0重量份、食鹽1.0—6.0重量份,轉動30— 180min,停鼓過夜;次晨轉動30— 60min,控干廢液;
(8)水洗:加水調節(jié)液比2.0—6.0,流水洗10—30min ;
(9)第一次脫脂:加入40—45°C的熱水調節(jié)液比1.0—4.0,浴溫為30— 38°C,加入烷基多苷0.3—3.0重量份,轉動60— 180min,控干廢液;
(10)第二次脫脂:加入40—45°C的熱水調節(jié)液比1.0—4.0,浴溫為30— 38°C,加入烷基多苷0.3—3.0重量份,轉動60— 180min,控干廢液;
(11)第二次脫脂:加入40—45°C的熱水調節(jié)液比1.0—4.0,浴溫為30—38°C,加入燒基多苷0.3—3.0重量份,轉動60— 180min,控干廢液;
(12)水洗:加溫度為35—40°C的熱水,調節(jié)液比2.0—6.0,悶水洗15 — 30min,棄去廢液;然后加溫度為35— 40°C的熱水,調節(jié)液比2.0—6.0,悶水洗10 — 20min,棄去廢液;再加溫度為35— 40°C的熱水,調節(jié)液比2.0—6.0,悶水洗10 — 20min ;棄去廢液;最后,加水調節(jié)液比2.0一6.0,流水洗30min ;
(13)過氧化氫脫毛:加入30—50重量份的水,再加入純度為30%的H2O2 2.0—6.0重量份,再將3.0—8.0重量份的NaOH溶解于10 — 30重量份的水中冷卻后加入,轉動20—40min,再將皮放進轉鼓中,轉動30— 120min。檢查脫毛情況,毛脫凈后,擴大液比至2.0—5.0,轉動120min,停鼓過夜;次日轉動30— 60min,控干廢液;
(14)水洗:加水調節(jié)液比2.0—6.0,悶水洗10—30min,控干廢液;然后,加水調節(jié)液比2.0一6.0,流水洗10—30min,控干廢液;
(15)第一次脫堿:加溫度為38—42°C的熱水調節(jié)液比1.0—4.0,浴溫30— 35°C,加入乳酸1.0—5.0重量份,烷基多苷0.3—1.5重量份,轉動30— 90min ;
(16)水洗:加水調節(jié)液比2.0—6.0,流水洗30— 90min,控干廢液。再加水調節(jié)液比2.0一6.0,流水洗30—90min,控干廢液;
(17)第二次脫堿:加溫度為38—42°C的熱水調節(jié)液比1.0—4.0,浴溫30— 35°C,加入乳酸1.0—5.0重量份,烷基多苷0.3—1.5重量份,轉動30— 90min ;
(18)水洗:加常溫水調節(jié)液比2.0—6.0,流水洗30— 90min,控干廢液;再加常溫水調節(jié)液比2.0—6.0,流水洗30— 90min,控干廢液;
(19)酶消化:加入溫度為40—44°C的熱水,預熱,調節(jié)液比至1.0—3.0,浴溫為30—36°C,然后,加入復合酶C 0.10—2.00重量份,烷基多苷0.3—3.0重量份,轉動60— 180min后,停鼓過夜;次日轉動15—4511^11,控干廢液;
(20)清洗:加常溫純水調節(jié)液比2.0—5.0,加入氯化鈉2.0—5.0重量份,轉動90—180min,控干廢液。加常溫純水調節(jié)液比2.0—5.0,加入氯化鈉2.0—5.0重量份,轉動90—180min,控干廢液。加常溫純水調節(jié)液比2.0—5.0,加入氯化鈉2.0—5.0重量份,轉動90—180min,控干廢液,即得到醫(yī)用純化豬真皮;
(21)滾鹽:加入氯化鈉5.0—20.0重量份,轉動20—60min,出鼓;
(22)分割:根據(jù)皮張大小將純化豬皮裁成矩形,然后再分割成10.0—80.0cmX 10.0—80.0cm的小塊矩形;
(23)裝袋、冷凍保存:將裝袋的純化豬皮放入凍庫,在溫度一5--15°C的條件下冷凍保存。
[0017]3.根據(jù)權利要求2所述的醫(yī)用純化豬真皮的制作方法,其特征在于轉鼓為不銹鋼轉鼓。
[0018]4.根據(jù)權利要求2所述的復合酶C,其配方及制備方法為:
稱取ASl.398中性蛋白酶(5萬單位)100重量份,加入胰酶(1:25) 1—100重量份,混合均勻。
[0019]5.根據(jù)權利要求2所述的烷基多苷、氫氧化鈉、乳酸、氯化鈉等,以及權利要求4中的ASl.398中性蛋白酶和胰酶均為市售產(chǎn)品。
[0020]本發(fā)明具有以下優(yōu)點:
1.以同源性好、價廉易得、來源廣泛的豬皮為原料制備純化豬皮,既降低了材料成本,又避免了使用牛膜、鼠尾膜所存在的種種不足;
2.采用新一代表面活性劑烷基多苷為脫脂材料,效率高,安全性好;
3.采用雙氧水一堿法脫毛,完全徹底地除去了毛被,克服了使用Na2S脫毛對生物材料產(chǎn)生的毒副作用,減少了環(huán)境污染;
4.采用復合酶C消化,與前面的方法一起,能徹底清除豬皮中的非膠原成分,有效降低抗原性。
[0021]5.實現(xiàn)了豬皮的高效純化,純化豬皮不僅可以作為提取制備醫(yī)用膠原的原料,而且還適合其他多種醫(yī)學用途;
6.本方法也能用于其他動物皮的本體高效純化;
7.生產(chǎn)過程無污染,具有顯著的環(huán)境效益和經(jīng)濟效益。
[0022]四、
【具體實施方式】
下面通過實施例對本發(fā)明進行具體的描述,有必要在此指出的是,本實施例只用于對本發(fā)明進行進一步說明,而不能理解為對發(fā)明的保護范圍的限制,該領域的技術熟練人員可以根據(jù)本發(fā)明的內容作出一些非本質的改進和調整。
[0023]實施例1
(I)原料皮準備:從可溯源性、健康的豬上剝取的新鮮豬皮。采用去肉機去肉,清除動物皮的皮下組織層。
[0024](2)稱重:稱取100重量份的冷凍豬皮;
(3)第一次清洗:加水調節(jié)液比2.0,浸泡30min,至完全解凍后,再轉動30min,控干廢液,加水調節(jié)液比2.0,純堿0.5%,轉動30min,控干廢液;
(4)第二次清洗:加水調節(jié)液比2.0,轉動30min,控干廢液,加水調節(jié)液比2.0,轉動30min,控干廢液;
(5)第三次清洗:加溫度為35°C的熱水,調節(jié)液比2.0,浴溫30°C,加入烷基多苷0.2重量份,轉動30min,控干廢液;
(6)水洗:加水調節(jié)液比2.0,流水洗1min ;
(7)浸水:加水調節(jié)液比2.0,加入月桂基葡糖苷0.2重量份、食鹽1.0重量份,轉動30min,停鼓過夜;次晨轉動30min,控干廢液;
(8)水洗:加水調節(jié)液比2.0—6.0,流水洗10—30min ;
(9)第一次脫脂:加入40°C的熱水調節(jié)液比1.0,浴溫為30°C,加入月桂基葡糖苷0.8重量份,轉動60min,控干廢液;
(10)第二次脫脂:加入40°C的熱水調節(jié)液比1.0,浴溫為30°C,加入月桂基葡糖苷1.0重量份,轉動60min,控干廢液;
(II)第三次脫脂:加入40°C的熱水調節(jié)液比1.0,浴溫為30°〇,加入月桂基葡糖苷1.0重量份,轉動60min,控干廢液;
(12)水洗:加溫度為35°C的熱水,調節(jié)液比2.0,悶水洗15min,棄去廢液;然后加溫度為35°C的熱水,調節(jié)液比2.0,悶水洗lOmin,棄去廢液;再加溫度為35°C的熱水,調節(jié)液比
2.0,悶水洗1min ;棄去廢液;最后,加水調節(jié)液比2.0,流水洗30min ;
(13)過氧化氫脫毛:加入30重量份的水,再加入純度為30%的H2O24.0重量份,再將6.0重量份的NaOH溶解于30重量份的水中冷卻后加入,轉動30min,再將皮放進轉鼓中,轉動90min。檢查脫毛情況,毛脫凈后,擴大液比至2.0,轉動120min,停鼓過夜;次日晨,轉動30min,控干廢液;
(14)水洗:加水調節(jié)液比2.0,悶水洗lOmin,控干廢液;然后,加水調節(jié)液比2.0,流水洗lOmin,控干廢液;
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