一種江南卷柏提取物在制備治療血栓性疾病藥物中的應用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種江南卷柏水或醇水提取物及該提取物用 于治療血栓性疾病的新醫(yī)藥用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 血栓性疾病是由血栓引起的血管腔狹窄與閉塞，使主要臟器發(fā)生缺血和梗塞而引 發(fā)機能障礙的各種疾病，屬于心腦血管疾病。機體的正常止凝血，主要依賴于完整的血管壁 結(jié)構(gòu)和功能、有效的血小板質(zhì)量和數(shù)量、正常的血漿凝血因子活性。血栓形成的原因，簡單 地說是隨著人年齡的增長，體內(nèi)纖溶系統(tǒng)功能逐漸降低，血液中凝血與抗凝血功能失去平 衡而出現(xiàn)凝血，即血栓。
[0003] 血栓性疾病的發(fā)病率、致死率和致殘率非常高。它是嚴重危害人類健康的疾病之 一，也是世界各國醫(yī)藥學家研究的熱點。目前臨床上用于血栓預防和治療的藥物主要分為3 類，抗血小板的藥物、抗凝血的藥物和溶解血栓的藥物。從天然產(chǎn)物中尋找新的活性成分， 并進而研制新的藥物也是當今攻克臨床頑疾的重要途徑，本發(fā)明通過對江南卷柏乙醇提取 物進行活性研究以期為尋找新的抗血栓病的藥物提供科學依據(jù)。
[0004] 江南卷柏（Selaginella moellendorfii Hieron.)，是一種多年生常綠草本植物， 為我國常用的中草藥。其性平，味微甘，能清熱利尿，活血消腫。現(xiàn)代藥理研究表明其有廣 泛的藥理活性，例如抗腫瘤活性，抗菌活性，抗病毒及免疫調(diào)節(jié)活性，被用于治療急性傳染 性肝炎、胸脅腰部挫傷、全身浮腫等疾病。
[0005] 江南卷柏提取物是一種從江南卷柏的整體植物中經(jīng)水或醇水提取得到的混合物。 目前國內(nèi)、外對江南卷柏研究較多，但未有江南卷柏提取物在制備抗血栓性疾病藥物方面 的研究報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 為了滿足臨床需要，解決上述問題，本發(fā)明的目的是提供一種江南卷柏提取物及 其在治療血栓性疾病藥物中的應用；江南卷柏提取物可作為活性成份用于制備治療血栓 性疾病的藥物中，即可用于預防和/或治療冠心病、心絞痛、腦血栓或肺栓塞等疾病的藥物 中。
[0007] 為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：
[0008] 江南卷柏提取物，其為整株江南卷柏的水或醇水提取物。
[0009] 所述江南卷柏的水或醇水提取物具體制備過程為：
[0010] 1)將整株江南卷柏剪碎成長約3mm的碎片，加70%乙醇溶液浸泡9h，然后回流提 取3h，提取溫度40-45°C，稍冷，用紗布過濾，得濾液，保留濾渣。再向濾渣中加入70%乙醇 溶液進行二次加熱回流提取。
[0011] 所述每次回流提取時70%乙醇的用量為江南卷柏質(zhì)量的4倍（V/W)。
[0012] 2)合并上述兩次提取所得濾液，在50°C以下減壓濃縮，得到具有抗血小板聚集和 抗血栓活性的江南卷柏提取物。
[0013] 3)所述濾液經(jīng)減壓濃縮后可采用濃縮干燥、冷凍干燥或噴霧干燥方法干燥為固 體，得到具有治療血栓性疾病的提取物。
[0014] 所述提取物用于制備預防和/或治療血栓性疾病藥物、血栓性疾病的預防性保健 食品或食品添加劑。
[0015] 所述制備預防和/或治療血栓性疾病的藥物是指權(quán)利要求1其所制成的藥物劑型 可為丸劑、散劑、片劑、膏劑、粉劑、針劑、水劑、顆粒劑或注射劑。
[0016] 所述預防和/或治療血栓性疾病的藥物是將所述植物提取物作為活性成分與藥 物學上可接受的載體作為賦形劑相結(jié)合，按照常規(guī)方法制成口服給藥的內(nèi)服劑型或非口服 給藥的注射劑；即可制備成為治療冠心病、心絞痛、腦血栓或肺栓塞等疾病的丸劑、散劑、片 齊IJ、膏劑、粉劑、針劑、水劑、顆粒劑、注射劑等各種劑型的藥物；保健食品形態(tài)可以是液體的 比如像清涼飲料等。
[0017] 本發(fā)明所述應用中，所述血栓性疾病是由血小板聚集引起的動脈血栓性疾病。
[0018] 藥理藥效實驗證實，本發(fā)明所述江南卷柏提取物能有效的、劑量依賴性的抑制體 外血小板聚集，降低小鼠急性肺血栓死亡率，能制備為抗血栓藥物，特別是抗血小板聚集引 起的動脈血栓藥物。
[0019] 本發(fā)明具有如下優(yōu)點：
[0020] 江南卷柏提取物作為天然中藥材提取物的主要成分，其來源豐富、價格低廉，具有 高抗血栓活性等優(yōu)點，可廣泛用于動脈粥樣硬化、心肌梗死等動脈心血管性疾病。
【附圖說明】
[0021] 圖1是本發(fā)明所述江南卷柏提取物體外抗血小板聚集實驗結(jié)果的分析圖。
【具體實施方式】
[0022] 以下通過實施例說明本發(fā)明的具體步驟，但不受實施例限制。
[0023] 在本發(fā)明中所使用的術(shù)語，除非另有說明，一般具有本領(lǐng)域普通技術(shù)人員通常理 解的含義。
[0024] 下面結(jié)合具體實施例并參照數(shù)據(jù)進一步詳細描述本發(fā)明。應理解，這些實施例只 是為了舉例說明本發(fā)明，而非以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
[0025] 在以下實施例中，未詳細描述的各種過程和方法是本領(lǐng)域中公知的常規(guī)方法。
[0026] 實施例1江南卷柏提取物的制備 將整株江南卷柏（500g)剪碎成長約3mm的碎片，加8L的70 %乙醇溶液浸泡9h，然后 回流提取3h，提取溫度40-45°C，稍冷，用紗布過濾，得濾液，保留濾渣。再向濾渣中加入8L 的70%乙醇溶液進行二次加熱回流提取。合并上述兩次提取所得濾液，在50°C以下減壓濃 縮，冷凍干燥，得到江南卷柏提取物。
[0027] 實施例2體外活性實驗：江南卷柏提取物（簡稱Psl)對血小板聚集的影響
[0028] 兔頸動脈取血，置于含有Iml的3. 8%枸櫞酸鈉的15ml離心管中（每管最終的體 積約為10ml，保證兔血和抗凝劑體積比為9 : I) ;1000r/min離心5min，取上層液即富血小 板血楽（platelet rich plasma，PRP)，余下血樣以3000r/min離心10_15min，得到貧血小 板血楽（platelet poor plasma，PPP)。用 PPP 調(diào)整血小板濃度至（250 ?300) X IO9個/L ; 每次測試吸取300 μ I PPP置于血小板聚集儀測試區(qū)調(diào)零，再吸取270 μ I PRP置于預熱槽 中，分別加入不同濃度梯度的受試樣品和測試珠；37°C條件下，預熱5min后置于測試區(qū)；最 后加入10 μ 1相關(guān)誘導劑如ADP (法國Hyphen Biomed公司，終濃度10 μ M)、凝血酶（法國 Hyphen Biomed 公司，終濃度 2U/ml)或 U46619(美國 Sigma-Aldrich 公司，終濃度 6μΜ); 在LBY-NJ4血小板凝集儀（北京普利生）上測定5min內(nèi)血小板的最大聚集率（RPA);其中， 空白對照為生理鹽水；實驗重復三次，同時通過以下公式計算血小板聚集抑制率：
[0029] 血小板聚集抑制率=[(X-Y) /X] X 100%。X代表生理鹽水組血小板最大聚集率； Y代表受試樣品血小板最大聚集率。
[0030] 結(jié)果顯示，隨濃度增加，最大血小板聚集率逐漸減小，其抑制作用呈現(xiàn)濃度依賴性 的升高（如圖1所示）。
[0031] 實施例3動物體內(nèi)活性實驗：江南卷柏提取物對小鼠急性肺血栓的影響
[0032] 1)實驗動物：ICR小鼠（18_22g)60只，雌雄各半，購自江蘇省南京市青龍山動物中 心。
[0033] 2)實驗過程：將小鼠分為5組，每組10只，分別為陰性對照組（生理鹽水代替樣 品及誘導劑）；模型對照組（生理鹽水代替樣品）；陽性對照組（給予等體積的阿司匹林）； 低、中、高劑量樣品組（18、55、165mg/kg)。給藥體積為5ml/kg。給藥30min后，尾靜脈注 射ADP(450mg/kg)，使小鼠形成急性肺血栓栓塞，記錄注射混合誘導劑后15min內(nèi)各組死亡 小鼠的數(shù)量。計算出每組的死亡率并通過以下公式計算抗栓活性物急性肺血栓栓塞的保護 率。
[0034] 抗栓活性物質(zhì)急性肺血栓栓塞的保護率=[1-(X/Y)] X100%。X代表各組死亡小 鼠的數(shù)量；Y代表各組的小鼠總數(shù)量。
[0035] 表1所示江南卷柏提取物對小鼠急性肺血栓的影響
[0036]
【主權(quán)項】
1. 江南卷柏提取物，其特征在于：其為整株江南卷柏的水或醇水提取物。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述江南卷柏提取物，其特征在于：將整株江南卷柏剪碎成長約3mm 的碎片，加70%乙醇溶液浸泡9h，然后回流提取3h，回流溫度40-45°C，稍冷，用紗布過濾， 得濾液，保留江南卷柏渣。再向江南卷柏渣中加入70%乙醇溶液進行二次加熱回流提取。 合并上述兩次提取所得濾液，在50°C以下減壓濃縮，冷凍干燥，得到具有治療血栓性疾病的 江南卷柏提取物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述江南卷柏提取物的制備方法，其特征在于：每次回流提取時 70%乙醇的用量為江南卷柏質(zhì)量的4倍（V/W)。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述江南卷柏提取物的制備方法，其特征在于：所述濾液經(jīng)減壓濃 縮回收溶劑后可采用濃縮干燥、冷凍干燥或噴霧干燥方法干燥為固體，得到具有治療血栓 性疾病的植物提取物。
5. 江南卷柏提取物在制備治療血栓性疾病藥物中的應用，其特征在于：所述江南卷柏 提取物用于制備預防和/或治療為目的的治療血栓性疾病的藥物、治療血栓性疾病的預防 性保健食品或食品添加劑；所述江南卷柏提取物為權(quán)利要求1所述江南卷柏的水或醇水提 取物。
6. 根據(jù)權(quán)利要求5所述江南卷柏提取物在制備治療血栓性疾病藥物中的應用，其特征 在于：所述制備預防和/或治療為目的的治療血栓性疾病的藥物是指權(quán)利要求1所述江南 卷柏提取物作為活性成分與藥物學上可接受的載體作為賦形劑相結(jié)合，其所制成的藥物劑 型可為丸劑、散劑、片劑、膏劑、粉劑、針劑、水劑、顆粒劑或注射劑。
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥，具體地說是江南卷柏提取物及其在制備治療血栓性疾病藥物中的應用，所述的江南卷柏提取物為整株江南卷柏的乙醇提取物，制備方法為：將整株江南卷柏剪碎成約3mm長加70％乙醇溶液浸泡9h，然后回流提取3h，提取溫度40-45℃，稍冷，用紗布過濾，得濾液，保留卷柏渣。再向卷柏渣中加入70％乙醇溶液進行二次加熱回流提取。合并上述兩次提取所得濾液，在50℃以下減壓濃縮并回收乙醇至無醇味，冷凍干燥，得江南卷柏提取物。該提取物具有抗血栓和抗血小板聚集活性，可作為治療血栓性疾病的候選藥物進行開發(fā)。
【IPC分類】A23L1-30, A61P9-10, A23L1-29, A61K36-11, A61P7-02
【公開號】CN104546953
【申請?zhí)枴緾N201510016292
【發(fā)明人】孔毅, 蘇杏麗, 蘇雯
【申請人】中國藥科大學
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2015年1月8日