專利名稱：肝衰代謝支持劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于一種治療急性重癥肝炎和暴發(fā)性肝功能衰竭的藥劑，特別涉及一種對(duì)暴發(fā)性肝衰病人的肝衰代謝支持劑及其制備方法。
暴發(fā)性肝衰由各種原因?qū)е麓竺娣e肝細(xì)胞壞死或肝細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器嚴(yán)重功能障礙而引起機(jī)體嚴(yán)重代謝障礙的病癥，可迅速發(fā)展至肝性腦病，其死亡率極高。當(dāng)前的治療手段主要是依靠?jī)?nèi)科護(hù)理和借助人工肝輔助系統(tǒng)，對(duì)患者血液中的毒性物質(zhì)進(jìn)行吸附和透析。肝功能衰竭后，大量肝細(xì)胞壞死，肝細(xì)胞喪失其生理解毒功能，并且壞死的肝細(xì)胞在患者體內(nèi)又成為新的毒素。而人工肝輔助系統(tǒng)只能替代壞死的肝細(xì)胞的功能，卻不能消除壞死的肝細(xì)胞產(chǎn)生的毒素。本發(fā)明針對(duì)復(fù)合酶對(duì)于肝衰所產(chǎn)生的毒素具有解毒作用，但又不能直接與體液進(jìn)行反應(yīng)的特性，為復(fù)合酶發(fā)揮解毒作用制造相對(duì)穩(wěn)定的環(huán)境，對(duì)蛋白酶分子、低分子物質(zhì)和穩(wěn)定及保護(hù)劑進(jìn)行包埋，制成肝衰代謝支持劑，有效地消除了肝細(xì)胞壞死組織的毒素。
本發(fā)明的目的是利用合成或天然膜材料，將部分參與肝細(xì)胞解毒功能的酶系進(jìn)行包埋或微囊化，制成微球或微囊，其顆粒直徑為1-200微米，其重要的酶系和低分子物質(zhì)參與肝臟活動(dòng)具有解毒功能，并消除肝細(xì)胞壞死組織產(chǎn)生的毒素。
本發(fā)明的技術(shù)方案是通過如下制劑配方和制備方法來實(shí)現(xiàn)的。
肝衰代謝支持劑，其制劑由酶分子和輔酶等蛋白酶的酶復(fù)合物、低分子物質(zhì)和作為酶穩(wěn)定劑的白蛋白、血清蛋白緩沖液組成暴發(fā)性肝衰代謝支持劑的母液，利用合成或天然生物膜材料分步對(duì)所制母液進(jìn)行包埋或微囊化處理，制成直徑為1-200微米的微囊狀肝衰代謝支持劑。
暴發(fā)性肝衰代謝支持劑其具體制劑配方如下(以100g劑量為例)(1)谷胱甘肽過氧化酶 1.0g(2)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶 2.0g(3)葡萄糖-6-磷酸脫氧酶 1.0g(4)谷胱甘肽(氧化型) 5.0g(5)谷胱甘肽(還原型) 2.5g(6)谷胱甘肽還原酶1.0g(7)葡萄糖-6-磷酸 3.0g(8)輔酶II(氧化型)0.2g(9)輔酶II(還原型)2.0g(10)UDP-葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶 1.0g(11)白蛋白(或血清蛋白) 10.0g(12)緩沖劑 71.3g以上制劑的制備包括如下四個(gè)步驟一、制造含酶復(fù)合物海藻酸納母液，即A液以谷胱甘肽過氧化酶、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶、葡萄糖-6-磷酸脫氧酶、谷胱甘肽(氧化型)、谷胱甘肽(還原型)、谷胱甘肽還原酶、葡萄糖-6-磷酸、輔酶II(氧化型)、輔酶II(還原型)、UDP-葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶等含酶復(fù)合物，制備含酶復(fù)合物海藻酸納母液，供作以后分步進(jìn)行包埋的基礎(chǔ)母液；二、制備脂質(zhì)薄膜，即B液將磷脂溶于氯仿中，放入圓形玻璃器皿中，加熱揮發(fā)，形成脂質(zhì)薄膜。制成B液；三、配制含酶復(fù)合物脂質(zhì)體微球和微囊(1)制含酶復(fù)合物脂質(zhì)體微球，即C液取A液、B液放入超聲器中，進(jìn)行超聲處理，或在G4-G6玻璃濾器進(jìn)行反復(fù)抽濾，形成直徑1-200微米、以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球。制成C液；(2)制含酶復(fù)合物的海藻酸納微球，即D液將C液放入含10％(W/V)氯化鈣溶液中，在4C溫度下保存12小時(shí)然后離心棄除掉上層清液，其沉淀物即為以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物海藻酸納微球，制成D液；(3)制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸微球，即E液將D液置于0.1％CHES的1.0％氯化鈣溶液中放置3-10分鐘后，再將其置于含0.1％-0.5％的聚賴氨酸溶液中10-30分鐘，形成以以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物的海藻酸納聚賴氨酸微球，制成E液；(4)制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微球，即F液將制成的E液放入0.5-1.5％(W/V)海藻酸納溶液中5-10分鐘，形成以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微球，制成F液；(5)制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微囊，即G液將F液放入10-80MM檸檬酸納液中5-10分鐘(或者用20-100MM的EDTA液體)液化海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微球，制成以脂質(zhì)薄膜包埋液體的微囊，制成G液，即肝衰代謝支持劑；四、成品及保存將制成的G液，即肝衰代謝支持劑放在含有白蛋白或血清蛋白緩沖劑的酶穩(wěn)定劑中進(jìn)行保存。
現(xiàn)以制備100g肝衰代謝支持劑為例說明
具體實(shí)施例方式

圖1 肝衰代謝支持劑的制備流程圖一種肝衰代謝支持劑其制劑配方是(1)谷胱甘肽過氧化酶 1.0g(2)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶 2.0g(3)葡萄糖-6-磷酸脫氧酶1.0g(4)谷胱甘肽(氧化型) 5.0g(5)谷胱甘肽(還原型) 2.5g(6)谷胱甘肽還原酶 1.0g(7)葡萄糖-6-磷酸 3.0g(8)輔酶II(氧化型) 0.2g(9)輔酶II(還原型) 2.0g(10)UDP-葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1.0g(11)白蛋白(或血清蛋白)10.0g(12)緩沖劑71.3g肝衰代謝支持劑的制備過程是一、制造含酶復(fù)合物海藻酸納母液，即A液以谷胱甘肽過氧化酶1g、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶2g、葡萄糖-6-磷酸脫氧酶1g、谷胱甘肽(氧化型)5g、谷胱甘肽(還原型)2.5g、谷胱甘肽還原酶1g、葡萄糖-6-磷酸3g、輔酶II(氧化型)0.2g、輔酶II(還原型)2g、UDP-葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1g等含酶復(fù)合物和作為保護(hù)劑的白蛋白(或血清蛋白)10g、緩沖劑71.3g制成含酶復(fù)合物海藻酸納母液(即A液)，供作以后分步進(jìn)行包埋的基礎(chǔ)母液；
二、制備脂質(zhì)薄膜，即B液將磷脂溶于氯仿中，放入圓形玻璃器皿中，加熱揮發(fā)，形成脂質(zhì)薄膜。取A液放在脂質(zhì)薄膜中進(jìn)行水化形成多寶微囊制成B液；三、配制含酶復(fù)合物脂質(zhì)體微球，即C液取A液放在脂質(zhì)薄膜中進(jìn)行水化形成多室微囊，將A液、B液方入超聲器中，進(jìn)行超聲處理，或在G4-G6玻璃濾器進(jìn)行反復(fù)抽濾，形成直徑1-200微米、以脂質(zhì)薄膜包埋液體的微囊制成C液；四、制含酶復(fù)合物的海藻酸納微球，即D液將C液放入含10％(W/V)氯化鈣溶液中，在4C溫度下保存12小時(shí)然后離心棄除掉上層清液，其沉淀物為以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物海藻酸納微球，制成D液；五、制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸微球，即E液將D液置于0.1％ CHES的1.0％氯化鈣溶液中放置3-10分鐘后，再將其置于0.1％-0.5％的聚賴氨酸溶液中10-30分鐘，形成以以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物的海藻酸納聚賴氨酸微球，制成E液；六、制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微球，即F液將制成的E液放入0.5-1.5％(W/V)海藻酸納溶液中5-10分鐘，形成以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微球，制成F液；七、制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微囊，即G液將F液放入10-80MM檸檬酸納液中5-10分鐘，或者用20-100MM的EDTA液體液化海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微囊，制成以脂質(zhì)薄膜包埋液體的微囊，制成G液，即肝衰代謝支持劑；八、成品及保存將制成的G液，即肝衰代謝支持劑放在含有白蛋白或血清蛋白緩沖劑的酶穩(wěn)定劑中進(jìn)行保存。
權(quán)利要求
1.暴發(fā)性肝衰病人的肝衰代謝支持劑及其制備方法，其特征在于肝衰代謝支持劑配方如下(以制備100g為例)(1)谷胱甘肽過氧化酶 1.0g(2)谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶2.0g(3)葡萄糖-6-磷酸脫氧酶 1.0g(4)谷胱甘肽(氧化型) 5.0g(5)谷胱甘肽(還原型) 2.5g(6)谷胱甘肽還原酶 1.0g(7)葡萄糖-6-磷酸3.0g(8)輔酶II(氧化型) 0.2g(9)輔酶II(還原型) 2.0g(10)UDP-葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶 1.0g(11)白蛋白(或血清蛋白) 10.0g(12)緩沖劑 71.3g
2.如權(quán)利要求1所述的暴發(fā)性肝衰病人的肝衰代謝支持劑及其制備方法，其特征在于肝衰代謝支持劑的制備方法是(一)制造含酶復(fù)合物海藻酸納母液，即A液以谷胱甘肽過氧化酶1g、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶2g、葡萄糖-6-磷酸脫氧酶1g、谷胱甘肽(氧化型)5g、谷胱甘肽(還原型)2.5g、谷胱甘肽還原酶1g、葡萄糖-6-磷酸3g、輔酶II(氧化型)0.2g、輔酶II(還原型)2g、UDP-葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1g等含酶復(fù)合物和作為保護(hù)劑的白蛋白(或血清蛋白)10g、緩沖劑71.3g制成含酶復(fù)合物海藻酸納母液(即A液)，供作以后分步進(jìn)行包埋的基礎(chǔ)母液；(二)、制備脂質(zhì)薄膜，即B液將磷脂溶于氯仿中，放入圓形玻璃器皿中，加熱揮發(fā)，形成脂質(zhì)薄膜。取A液方在脂質(zhì)薄膜中進(jìn)行水化形成多寶微囊制成B液；(三)、配制含酶復(fù)合物脂質(zhì)體微球，即C液取A液放在脂質(zhì)薄膜中進(jìn)行水化形成多室微囊，將A液、B液方入超聲器中，進(jìn)行超聲處理，或在G4-G6玻璃濾器進(jìn)行反復(fù)抽濾，形成直徑1-200微米、以脂質(zhì)薄膜包埋液體的微囊制成C液；(四)、制含酶復(fù)合物的海藻酸納微球，即D液將C液放入含10％(W/V)L氯化鈣溶液中，在4C溫度下保存12小時(shí)然后離心棄除掉上層清液，其沉淀物為以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物海藻酸納微球，制成D液；(五)、制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸微球，即E液將D液置于含0.1％CHES的1.0％氯化鈣溶液中放置3-10分鐘后，再將其置于0.1％-0.5％的聚賴氨酸溶液中10-30分鐘，形成以以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物的海藻酸納聚賴氨酸微球，制成E液；(六)、制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微球，即F液將制成的E液放入0.5-1.5％(W/V)海藻酸納溶液中5-10分鐘，形成以脂質(zhì)薄膜包埋固體的微球，即含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微球，制成F液；(七)、制含酶復(fù)合物的海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微囊，即G液將F液放入10-80MM檸檬酸納液中5-10分鐘，或者用20-100MM的EDTA液體液化海藻酸納—聚賴氨酸—海藻酸納微囊，制成以脂質(zhì)薄膜包埋液體的微囊，制成G液，即肝衰代謝支持劑；(八)、成品及保存將制成的G液，即肝衰代謝支持劑放在含有白蛋白或血清蛋白緩沖劑的酶穩(wěn)定劑中進(jìn)行保存。
全文摘要
本發(fā)明屬于一種治療急性重癥肝炎和暴發(fā)性肝功能衰竭的藥劑,特別涉及一種對(duì)暴發(fā)性肝衰病人的肝衰代謝支持劑及其制備方法。它利用合成或天然膜材料,將部分參與肝細(xì)胞解毒功能的酶系進(jìn)行包埋或微囊化,制成微球或微囊,其顆粒直徑為1—200微米,其重要的酶系和低分子物質(zhì)具有肝細(xì)胞的解毒功能,將其注射至患者體液內(nèi)或進(jìn)行體外透析,參與肝臟活動(dòng)具有解毒功能,并消除肝細(xì)胞壞死組織產(chǎn)生的毒素。
文檔編號(hào)A61P1/00GK1253832SQ9912526
公開日2000年5月24日 申請(qǐng)日期1999年12月2日 優(yōu)先權(quán)日1999年12月2日
發(fā)明者石強(qiáng), 米約翰 申請(qǐng)人:石強(qiáng), 米約翰