專利名稱：新肽化合物和其制備方法及含有它們的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及為胰高血糖樣肽-1(7-37)類似物的新肽化合物、其制備方法及含有它們的藥物組合物。
胰高血糖樣肽-1(7-37)和(7-36)NH2(tGLP-1)是來源于腸的肽并大量參與糖自身穩(wěn)定的控制。這些肽是“腸-島軸線”的基本介質(zhì)并通過與特異受體結(jié)合起作用。
tGLP-1主要在胰腺中有活性，在胰腺中它以葡萄糖依賴型方式對β細胞分泌胰島素施加有效地促進影響(S.Mojsov等，J.Clin.Invest.,1987,79,619；和J.J.Holst,F.E.B.S.Letters,1987,211,169)。這種促進伴隨著生長激素釋放抑制因子釋放的促進和胰高血糖素釋放的抑制。
與上述對胰腺的影響平行，tGLP-1阻滯胃排空，減少酸分泌并促進葡萄糖在肌肉、肝和脂肪細胞中的外周利用。(M.L.Villanueva等.，Diabetologia,1994,37,1163；D.J.Drucker，糖尿病，1998,47,159)。
最近的研究已證明，tGLP-1可以通過作用于飽感中心而抑制食物和飲料的攝入來影響飲食行為(M.D.Turton等，自然，1996,379,69)。
因此，tGLP-1具有許多潛在的治療應(yīng)用，尤其在非胰島素依賴的Ⅱ-型糖尿病、肥胖和Ⅰ型糖尿病的治療中有用。
然而，象許多激素肽一樣，它具有相當(dāng)短的胞質(zhì)半衰期(少于2分鐘)(T.J.Kieffer等，內(nèi)分泌學(xué)，1995,136,3585)，這影響了它的應(yīng)用。
已廣泛報道天然肽GLP1(7-37)作為天然肽GLP-1(7-37)或GLP1(7-36)NH2本身，或以鹽、酯或酰胺的形式(US5,616,492,WO8706941,WO9011296)，或與磷脂(WO9318785)結(jié)合，或與其它低血糖物質(zhì)(WO9318786)結(jié)合時的促胰島特性。在天然序列的某些位置上得到修飾的類似物也已得到研究(EP733644,EP708179,EP658568,WO9111457)，其目的是發(fā)明與GLP1(7-37)一樣有效但更好吸收的化合物。
本發(fā)明的化合物通過對幾個殘基的修飾和/或通過抑制36位精氨酸而具有源于tGLP-1的新結(jié)構(gòu)。除了它們是新化合物以外，由于它們與tGLP-1受體有關(guān)的興奮劑特征，所以這些化合物具有有價值的藥學(xué)特性。這些修飾的優(yōu)點是能較大提高本發(fā)明化合物的代謝穩(wěn)定性，因而使化合物的作用持續(xù)時間優(yōu)于天然肽。這些特性使這些化合物在治療涉及tGLP-1的病理狀態(tài)時，尤其在治療非胰島素依賴的Ⅱ型糖尿病、肥胖和Ⅰ型糖尿病時有用。
本發(fā)明涉及基本化學(xué)式(Ⅰ)如下的化合物Z1-X1-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-X4-X5-Ser-X6-X7-X8-Glu-Gly-Gln-Ala-X9-Lys-X10-X11-X12-Ala-X13-X14-Val-Lys-(Ⅰ)Gly-X15-Gly-Z2其中Z1，具有化學(xué)式(Ⅰ)的肽的末端氨基的取代基，代表氫原子、烷基、直鏈或支鏈的(C1-C6)-?；?、或選擇性地取代的芳羰基、選擇性地取代的雜芳羰基、選擇性地取代的芳烷羰基、選擇性地取代的雜芳烷羰基、選擇性地取代的芳氧羰基、選擇性地取代的芳烷氧羰基、選擇性地取代的烷氧羰基；Z2，具有化學(xué)式(Ⅰ)的肽的末端羰基的取代基，代表羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基，或氨基(選擇性地由選自直鏈或支鏈(C1-C6)-烷基的一個或兩個相同或不同的基因取代，由選擇性取代的芳基、選擇性取代的雜芳基、選擇性取代的芳羰基、選擇性取代的雜芳羰基、選擇性取代的芳烷羰基和選擇性取代的雜芳烷羰基取代，或選擇性地由與氮原子一起形成具5-7個環(huán)原子數(shù)的飽和環(huán)的兩個基團取代〕；X1至X14每個代表，獨立于其它的·具有D或L構(gòu)型，化學(xué)式如下的天然或非天然氨基酸殘基
其中-R1代表氫原子，R2代表氫原子或烷基，氨烷基(選擇性地，在氮原子上由一個或兩個烷基，苯基、芐基、環(huán)烷基、選擇性取代的芳氧羰基、選擇性取代的芳烷氧羰基和/或選擇性取代的烷氧羰基取代)，硫代烷基(選擇性地，在硫原子上由烷基、苯基、芐基或環(huán)烷基取代)，羥烷基(選擇性地，在氧原子上由烷基、苯基、芐基或環(huán)烷基取代)，羧烷基，氨甲酰烷基，胍烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷烷基，選擇性取代的稠環(huán)烷基，選擇性取代的芳基，選擇性取代的芳烷基，選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基，-或者R1和R2，與攜帶它們的碳原子一起形成環(huán)烷基或稠環(huán)烷基，·或具有D或L構(gòu)型，化學(xué)式如下的天然或非天然環(huán)狀氨基酸殘基
其中A與它所連接的氮和碳原子一起形成含有5至11個環(huán)原子數(shù)的飽和的、部分不飽和的或不飽和的單環(huán)或雙環(huán)基團，并且可被選擇性取代，·或3-氨基-3-(2-呋喃基)丙酸殘基，并且X15代表鍵或精氨酸殘基(Arg)，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
具有如下前提條件時，X15代表鍵當(dāng)X1是具有L或D構(gòu)型并選自酪氨酸(Tyr)、精氨酸(Arg)、苯丙氨酸(Phe)、鳥氨酸(Orn)、蛋氨酸(Met)、脯氨酸(Pro)，亮氨酸(Leu)、纈氨酸(Val)、異亮氨酸(Ile)、丙氨酸(Ala)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)和組氨酸(His)的氨基酸殘基時，和/或當(dāng)X2代表具有L或D構(gòu)型并選自絲氨酸(Ser)、甘氨酸(Gly)、半胱氨酸(Cys)、肌氨酸(Sar)、丙氨酸(Ala)、脯氨酸(Pro)、纈氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、異亮氨酸(Ile)和蘇氨酸(Thr)的氨基酸殘基時，和/或當(dāng)X3代表具有L或D構(gòu)型并選自谷氨酰胺(Gln)、天冬氨酸(Asp)、蘇氨酸(Thr)、天冬酰胺(Asn)和谷氨酸(Glu)的氨基酸殘基時，和/或當(dāng)X5代表酪氨酸殘基(Tyr)時，和/或當(dāng)X6代表賴氨酸殘基(Lys)時，和/或當(dāng)X10代表選自谷氨酰胺(Glu)、丙氨酸(Ala)、蘇氨酸(Thr)、絲氨酸(Ser)和甘氨酸(Gly)的氨基酸殘基時，和/或當(dāng)X13代表選自苯丙氨酸(Phe)、纈氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、異亮氨酸(Ile)、丙氨酸(Ala)和酪氨酸(Tyr)的氨基酸殘基時，應(yīng)當(dāng)理解-殘基X1-X14不可以選擇使所得肽與天然肽相同的殘基，-術(shù)語“烷基”代表有1-6個碳原子的直鏈或支鏈，-術(shù)語“環(huán)烷基”代表含3至8個環(huán)原子數(shù)的飽和環(huán)烴基團，-術(shù)語“稠環(huán)烷基”表示含8至11個環(huán)原子數(shù)的雙環(huán)基，由飽和的含碳環(huán)與選擇性地含有一個或兩個選自氮、氧和硫的雜原子的飽和或不飽和環(huán)例如1,2-二氫化茚、四氫化萘或四氫喹啉相稠合而形成，-術(shù)語“芳香基”表示苯基、萘基或聯(lián)苯基，-術(shù)語“雜芳基”表示含5至11個環(huán)原子數(shù)，并含有1至4個選自氮、氧和硫的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)基團，例如呋喃基、吡啶基、噻吩基或吲哚基，-術(shù)語“芳羰基”表示Ra-CO-基，術(shù)語“芳烷羰基”代表Ra-Rb-CO-基，術(shù)語“雜芳羰基”代表Rc-CO-基，術(shù)語“雜芳烷羰基”代表Rc-Rb-CO-基，術(shù)語“芳氧羰基”代表Ra-O-CO-基，術(shù)語“芳烷氧羰基”代表Ra-Rb-O-CO-基而術(shù)語“烷氧羰基”代表Rb-O-CO-基，其中Ra基代表如上所述芳香基，Rb代表如上所述的烷基和Rc代表如上所述的雜芳基，-術(shù)語“取代的”用于上文定義的術(shù)語，表示所指的基團被一個或多個鹵素原子、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷基、羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基、氨基、氰基、硝基或直鏈或支鏈(C1-C6)-全鹵化烷基取代，-每個肽鍵-CO-NH-可選擇性地被選自-CH2-NH-,-NH-CO-,-CO-N(CH3)-,-CH2-CH2-,-CH2-CO-,-CH2-S-,-CH2-SO-,-CH2-SO2-,-CH=CH-和-CO-CH2-NH-的假肽鍵取代。
在藥物上可接受的酸之中可提及的有鹽酸，氫溴酸、硫酸、膦酸、乙酸、三氟乙酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、富馬酸、酒石酸、順丁烯二酸、檸檬酸、抗壞血酸、甲磺酸和樟腦酸等。
在藥物上可接受的堿之中可提及的有氫氧化鈉，氫氧化鉀，三乙胺和叔丁胺等。
本發(fā)明特別涉及具化學(xué)式(Ⅰ)的肽類化合物，其中X1至X14殘基按其側(cè)鏈性質(zhì)的功能加以選擇，該側(cè)鏈可能具有芳香族或脂肪族特性，或能建立氫鍵相互作用，或能建立離子相互作用，或具有環(huán)的性質(zhì)。
以下化學(xué)式(a)代表含有芳香族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中R1a代表氫原子，R2a代表如上文所定義的與不飽和環(huán)相稠合并選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基、選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基；在具有芳香族特性側(cè)鏈的殘基之中，可具體提及的有苯丙氨酸(Phe)，組氨酸(His)，酪氨酸(Tyr)，色氨酸(Try)，高苯丙氨酸(Hof)、鹵化苯丙氨酸〔例如4-氯苯丙氨酸(4-Cl-Phe)〕，二鹵代苯丙氨酸〔例如3,4-二氯苯丙氨酸(3,4-di-Cl-Phe)〕，烷苯丙氨酸〔例如4-甲基苯丙氨酸(4-Me-Phe)〕，硝基苯丙氨酸〔例如4-硝基苯丙氨酸(4-NO2-Phe)〕,3-吡啶丙氨酸(3-Pya),2-噻吩丙氨酸(Tha),1-萘丙氨酸(2-Nal)、2-萘丙氨酸(2-Nal)、苯甘氨酸(Phg)和3-硝基酪氨酸(3-NO2-Tyr)殘基。
·以下化學(xué)式(b)代表含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基；在這些殘基之中，可具體提及的有甘氨酸(Gly)，丙氨酸(Ala)，纈氨酸(Val)，亮氨酸(Leu)，異亮氨酸(Ile),2-氨基丁酸(Abu),2-氨基異丁酸(Aib),β-環(huán)己基丙氨酸(Cha)，高亮氨酸(Hol)，正亮氨酸(Nle)，正纈氨酸(Nva)和叔亮氨酸(Tle)殘基。
·以下化學(xué)式(c)代表含有能建立氫鍵相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中R1c代表氫原子，R2c代表氨烷基(在氮原子上由烷基、苯基、芐基或環(huán)烷基選擇性取代)、硫代烷基(在硫原子上由烷基、苯基、芐基或環(huán)烷基選擇性取代)、羥烷基(在氧原子上由烷基，苯基，芐基或環(huán)烷基選擇性取代)、羧烷基、氨基甲酰烷基或胍烷基；在這些殘基之中可更具體提及的有蛋氨酸(Met)，天冬氨酸(Asp)，谷氨酸(Glu)，賴氨酸(Lys)，精氨酸(Arg)，絲氨酸(Ser)，蘇氨酸(Thr)，半胱氨酸(Cys)，酪氨酸(Tyr)，天冬氨酸(Asp)，谷氨酰胺(Gln)，色氨酸(Trp)，二氨基丁酸(Dab)，二氨基丙酸(Dapa)，鳥氨酸(Orn)和芐基半胱氨酸(Bcy)殘基。
·以下化學(xué)式(d)代表含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨基烷基，硫代烷基，羥烷基，羧烷基、胍烷基，咪唑基或咪唑烷基；在這些殘基之中，可更具體提及的有天冬氨酸(Asp)，谷氨酸(Glu)，賴氨酸(Lys)，精氨酸(Arg)，組氨酸(His)，絲氨酸(Ser)，蘇氨酸(Thr)，半胱氨酸(Cys)，酪氨酸(Tyr)，二氨基乙酸(NH-Gly)，二氨基丁酸(Dab)，二氨基丙酸(Dapa)，鳥氨酸(Orn)和蛋氨酸(Met)殘基。
·以下化學(xué)式(e)代表含有環(huán)狀性質(zhì)側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的非天然氨基酸殘基
其中R1e和R2e一起形成環(huán)烷基或稠環(huán)烷基；在這些殘基之中，可更具體提及的有1-氨基-1-環(huán)己烷羧酸(Acy),2-氨基-1,2-二氫化茚-2-羧酸(Aic)和2-氨基-1,2,3,4-四氫化萘-2-羧酸(Atc)殘基。
X1優(yōu)選地代表由化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X2優(yōu)選地代表由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X3優(yōu)選地代表由化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X4優(yōu)選地代表由化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，或由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X5優(yōu)選地代表由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X6優(yōu)選地代表由化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X7優(yōu)選地代表由化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，或由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X8優(yōu)選地代表由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X9優(yōu)選地代表由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X10優(yōu)選地代表由化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，或由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X11優(yōu)選地代表由化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X12優(yōu)選地代表由化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，或由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X13優(yōu)選地代表由化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X14優(yōu)選地代表由化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基。
X15優(yōu)選地代表一個鍵。
在具有化學(xué)式(Ⅰ)的化合物中，Z1優(yōu)選地代表氫原子。
在具有化學(xué)式(Ⅰ)的化合物中，Z2優(yōu)選地代表選自羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團。更具體地，Z2代表氨基。
本發(fā)明的優(yōu)點涉及具有化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中Z1代表氫原子；Z2代表選自羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團；X1和X11代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1a代表氫原子，R2a代表如上文所定義的與不飽和環(huán)相稠合并可選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基、選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基，在具有芳香族特性側(cè)鏈的殘基之中，應(yīng)具體提及的有苯丙氨酸(Phe)、組氨酸(His)，酪氨酸(Tyr)，色氨酸(Trp)，高苯丙氨酸(Hof)，鹵代苯丙氨酸〔例如4-氯苯丙氨酸(4-Cl-Phe)〕，二鹵代苯丙氨酸〔例如3,4-二氯苯丙氨酸(3,4-di-Cl-Phe)〕，烷苯丙氨酸〔例如4-甲基苯丙氨酸(4-Me-Phe)〕，硝基苯丙氨酸〔例如4-硝基苯丙氨酸(4-Phe)〕，3-吡啶丙氨酸(3-Pya),2-噻吩丙氨酸(Tha),1-萘丙氨酸(1-Nal)，2-萘丙氨酸(2-Nal)，苯甘氨酸(Phg)和3-硝苯酪氨酸(3-NO2-Tyr)殘基；X2和X9代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中
R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基，在這些殘基之中，可更具體提及的有甘氨酸(Gly)，丙氨酸(Ala)，纈氨酸(Val)，亮氨酸(Leu)，異亮氨酸(Ile),2-氨基丁酸(Abu),2-氨基異丁酸(Aib),β-環(huán)己丙氨酸(Cha)，高亮氨酸(Hol)，正亮氨酸(Nle)，正纈氨酸(Nva)和叔亮氨酸(Tle)殘基；X3和X6代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基，在這些殘基之中，可更具體提及的有天冬氨酸(Asp)，谷氨酸(Glu)、賴氨酸(Lys)，精氨酸(Arg)，組氨酸(His)，絲氨酸(Ser)，蘇氨酸(Thr)，半胱氨酸(Cys)，酪氨酸(Tyr)，二氨基乙酸(NH-Gly)，二氨基丁酸(Dab)，二氨基丙酸(Dapa)、鳥氨酸(Orn)和蛋氨酸(Met)殘基；X4、X7、X10和X12代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，并且獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基，在這些殘基之中，可更具體提到的有天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、賴氨酸(Lys)、精氨酸(Arg)、組氨酸(His)、絲氨酸(Ser)、蘇氨酸(Thr)、半胱氨酸(Cys)、酪氨酸(Tyr)、二氨基乙酸(NH-Gly)、二氨基丁酸(Dab)、二氨基丙酸(Dapa)、鳥氨酸(Orn)和蛋氨酸(Met)殘基；或獨立選自由以下化學(xué)式(b)表示的含脂肪族特性側(cè)鏈的天然或非天然的氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基，在這些殘基之中，可更具體提及的有甘氨酸(Gly)、丙氨酸(Ala)、纈氨酸(Val)、亮氨酸(Leu)、異亮氨基酸(Ile)、2-氨基丁酸(Abu)、2-氨基異丁酸(Aib)、β-環(huán)己丙酸(Cha)、高亮氨酸(Hol)、正亮氨酸、正纈氨酸(Nva)、叔亮氨基(Tle)殘基；X5代表纈氨酸殘基(Val)；X8和X14獨立代表具D或L構(gòu)型的亮氨酸殘基(Leu)；X13代表色氨酸殘基(Trp)；并且X15代表鍵或精氨酸殘基(Arg)，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
本發(fā)明的另一個優(yōu)點涉及具有化學(xué)式(Ⅰ)的化合物。
其中Z1代表氫原子；Z2代表可選自羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團；X1和X11代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中
R1a代表氫原子，R2a代表如上文所定義的與不飽和環(huán)相稠合并可選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基‘選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基，在含有芳香族特性側(cè)鏈的殘基之中，可更具體提及的有苯丙氨酸(Phe)，組氨酸(His)，酪氨酸(Tyr)，色氨酸(Trp)，高苯丙氨酸(Hof)，鹵代苯丙氨酸〔例如-4-氯苯丙氨酸(4-Cl-Phe)〕，二鹵代苯丙氨酸〔例如3,4-二氯苯丙氨酸(3,4-di-Cl-Phe)〕，烷苯丙氨酸〔例如4-甲基苯丙氨酸(4-Me-Phe)〕，硝基苯丙氨酸〔例如4-硝基苯丙氨酸(4-NO2-Phe)〕,3-吡啶丙氨酸(3-Pya),2-噻吩丙氨酸(Tha)，2-呋喃丙氨酸(Fua)、1-萘丙氨酸(1-Nal),2-萘丙氨酸(2-Nal)，苯甘氨酸(Phg)和3-硝基酪氨酸(3-NO2-Tyr)殘基；X2和X9代表具D或L構(gòu)型天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基，在這些殘基之中，可更具體提及的有甘氨酸(Gly)，丙氨酸(Ala)，纈氨酸(Val)，亮氨酸(Leu)，異亮氨酸(Ile),2-氨基丁酸(Abu),2-氨基異丁酸(Aib),β-環(huán)己丙酸(Cha)，高亮氨酸(Hol)，正亮氨酸(Nle)，正纈氨酸(Nva)和叔亮氨酸(The)殘基；X3和X6代表具D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基，在這些殘基之中，可更具體提及的有天冬氨酸(Asp)，谷氨酸(Glu)，賴氨酸(Lys)，精氨酸(Arg)，組氨酸(His)，絲氨酸(Ser)，蘇氨酸(Thr)，半胱氨酸(Cys)，酪氨酸(Tyr)，二氨基乙酸(NH-Gly)，二氨基丁酸(Dab)，二氨基丙酸(Dapa)，鳥氨酸(Orn)和蛋氨酸(Met)殘基；X4,X7和X10代表具D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基，在這些殘基之中，可更具體提及的有天冬氨酸(Asp)，谷氨酸(Glu)，賴氨酸(Lys)，精氨酸(Arg)，組氨酸(His)，絲氨酸(Ser)，蘇氨酸(Thr)，半胱氨酸(Cys)，酪氨酸(Tyr)，二氨基乙酸(NH-Gly)，二氨基丁酸(Dab)，二氨基丙酸(Dapa)，鳥氨酸(Orn)和蛋氨酸(Met)殘基；X5代表纈氨酸(Val)；X8和X14獨立代表具有D或L構(gòu)型的亮氨酸殘基(Leu)；X12代表具有D或L構(gòu)型天然或非天然氨基酸殘基，選自由以下化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基，在這些殘基之中，可更具體提及的有甘氨酸(Gly)，丙氨酸(Ala)，纈氨酸(Val)，亮氨酸(Leu)，異亮氨酸(Ile),2-氨基丁酸(Abu),2-氨基異丁酸(Aib),β-環(huán)己丙氨酸(Cha)，高亮氨酸(Hol)，正亮氨酸(Nle)，正纈氨酸(Nva)和叔亮氨酸(Tle)殘基；X13代表色氨酸(Trp)；X15代表鍵或精氨酸(Arg)；及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
本發(fā)明另一個優(yōu)點涉及具有化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中Z1代表氫原子；Z2代表選自羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團，X1和X11代表具D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1a代表氫原子，R2a代表如上文所定義的與不飽和環(huán)相稠合并可選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基、選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基、或咪唑基或咪唑烷基，在含有芳香族特性側(cè)鏈的殘基之中，可更具體提及的有苯丙氨酸(Phe)，組氨酸(His)，酪氨酸(Tyr)，色氨酸(Trp)，高苯丙氨酸(Hof)，鹵代苯丙氨酸〔例如4-氯苯丙氨酸(4-Cl-Phe)〕，二鹵代苯丙氨酸〔例如3,4-二氯苯丙氨酸(3,4-di-Cl-Phe)〕，烷苯丙氨酸〔例如4-甲基苯丙氨酸(4-Me-Phe)〕，硝基苯丙氨酸〔例如4-硝基苯丙氨酸(4-NO2-Phe)〕,3-吡啶丙氨酸(3-Pya),2-噻吩丙氨酸(Tha),2-呋喃丙氨酸(Fua),1-萘丙氨酸(1-Nal),2-萘丙氨酸(2-Nal)，苯甘氨酸(Phg)和3-硝基酪氨酸(3-NO2-Tyr)殘基；X2和X9獨立代表具有D或L構(gòu)型的丙氨酸殘基(Ala)，X3和X6代表具D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基，在這些殘基之中，應(yīng)更具體提及的有天冬氨酸(Asp)，谷氨酸(Glu)，賴氨酸(Lys)，精氨酸(Arg)，組氨酸(His)，絲氨酸(Ser)，蘇氨酸(Thr)，半胱氨酸(Cys)，酪氨酸(Tyr)，二氨基乙酸(NH-Gly)，二氨基丁酸(Dab)，二氨基丙酸(Dapa)，鳥氨酸(Orn)和蛋氨酸(Met)殘基；X4代表天冬氨酸(Asp)；X5代表纈氨酸(Val)；X7代表酪氨酸(Tyr)；X8和X14獨立代表具D或L構(gòu)型的亮氨酸殘基(Leu)；X10代表谷氨酸(Glu)；X15代表鍵或精氨酸(Arg)；及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類，本發(fā)明更具體地涉及具有化學(xué)式(Ⅱ)的肽化合物。Z1-X1-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys- (Ⅱ)Gly-X15-Gly-Z2其中Z1代表氫原子；Z2代表選自羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團；X1代表由以下化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中R1a代表氫原子，R2a代表如上文所定義的與不飽和環(huán)相稠合并選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基、選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基，在含有芳香族特性側(cè)鏈的殘基之中，可更具體提及的有苯丙氨酸(Phe)，組氨酸(His)，酪氨酸(Tyr)，色氨酸(Trp)，高苯丙氨酸(Hof)，鹵代苯丙氨酸〔例如4-氯苯丙氨酸(4-Cl-Phe)〕，二鹵代苯丙氨酸〔例如3,4-二氯苯丙氨酸(3,4-di-Cl-Phe)〕，烷苯丙氨酸〔例如4-甲基苯丙氨酸(4-Me-Phe)〕，硝基苯丙氨酸〔例如4-硝基苯丙氨酸(4-NO2-Phe)〕,3-吡啶丙氨酸(3-Pya),2-噻吩丙氨酸(Tha),2-呋喃丙氨酸(Fua),1-萘丙氨酸(1-Nal),2-萘丙氨酸(2-Nal)，苯甘氨酸(Phg)和3-硝基酪氨酸(3-NO2-Tyr)殘基；X2代表由以下化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基，在這些殘基之中可更具體提及的有甘氨酸(Gly)，丙氨酸(Ala)，纈氨酸(Val)，亮氨酸(Leu)，異亮氨酸(Ile),2-氨基丁酸(Abu),2-氨基異丁酸(Aib),β-環(huán)己丙氨酸(Cha)，高亮氨酸(Hol)，正亮氨酸(Nle)，正纈氨酸(Nva)和叔亮氨酸(Tle)殘基；X3代表由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中
R1d代表氫原子，R2d代表氨烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基，在這些殘基之中，可更具體提及的有天冬氨酸(Asp)，谷氨酸(Glu)，賴氨酸(Lys)，精氨酸(Arg)，組氨酸(His)，絲氨酸(Ser)，蘇氨酸(Thr)，半胱氨酸(Cys)，酪氨酸(Tyr)，二氨基乙酸(NH-Gly))，二氨基丁酸(Dab)，二氨基丙酸(Dapa)，鳥氨酸(Orn)和蛋氨酸(Met)殘基；X15代表鍵或精氨酸(Arg)殘基。
應(yīng)當(dāng)理解對于化學(xué)式(Ⅰ)中所定義的化合物的限制適用于具化學(xué)式(Ⅱ)的化合物。
更具體地，在具化學(xué)式(Ⅱ)的化合物中，X15代表鍵。
在具化學(xué)式(Ⅱ)的化合物中，優(yōu)選其中X2代表具有D或L構(gòu)型的丙氨酸殘基(Ala),X15代表鍵。
在本發(fā)明優(yōu)選的化合物之中，可更具體地提及以下一些肽·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-(D)-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·Trp-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-(D)-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·Trp-Sla-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-His-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-(D)-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-(D)-Ala -Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Leu-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Val-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·Afp-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Ser-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Lys-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·Phe-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Val-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·Phe-(D)-Ala-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-(D)-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Leu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Trp-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Ile-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Val-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-His-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Asp-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Leu-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Tyr-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Arg-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Glu-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·Phe-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Lys-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Leu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Ser-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-(D)-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2
本發(fā)明也擴大到具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物的制備方法，此化合物可通過各種方法如固相順序合成、溶液中片段的合成和偶聯(lián)、酶法合成得到或通過分子生物學(xué)技術(shù)得到。
B.W.Erickson和R.B.Merrifield已描述了固相肽合成的一般方法(“蛋白質(zhì)”，固相肽合成，第三版，1976,257)。
固相合成使用自動裝置以重復(fù)和程序化方式進行去保護、偶聯(lián)和洗脫的循環(huán)，以使將氨基酸順序地導(dǎo)入肽鏈。
將C-末端氨基酸固定在常規(guī)用于制備多肽的樹脂上，優(yōu)選與0.5-3.0％二乙烯基苯交聯(lián)的聚苯乙烯樹脂，其活化基團能使第一個氨基酸共價固定在樹脂上。適當(dāng)選擇在合成之后可形成C-末端羧酸、酰胺，醇或酯類官能團的樹脂。
然后按操作者確定的順序逐一導(dǎo)入氨基酸。對應(yīng)氨基酸導(dǎo)入的每一個合成循環(huán)都包括肽鏈N-末端的去保護、連續(xù)沖洗去除試劑或使樹脂膨脹、與活化氨基酸偶聯(lián)和進一步?jīng)_洗。由于進行合成的反應(yīng)器中裝有燒結(jié)玻璃濾器，因此在每次上述操作之后接著進行過濾。
本發(fā)明中所使用的偶聯(lián)試劑都是用于肽合成的常規(guī)試劑，比如二環(huán)己基碳二亞胺(DCD)和羥基苯并三唑(HOBT)，或苯并三唑-1-基-氧-三(二甲氨基)六氟磷酸(BOP)，或二苯基-磷酰疊氮化物(DPPA)。
也可能通過形成混合或?qū)ΨQ的酐類來活化。
加入反應(yīng)器的每種氨基酸的用量大約比樹脂的取代度大6倍并大約相當(dāng)于偶聯(lián)劑的用量。用E.KALSER等人的茚三酮反應(yīng)試驗(生物化學(xué)年鑒，34,595,1970)可證實合成中每一步的偶聯(lián)反應(yīng)。
肽鏈在樹脂上形成之后，可使用適當(dāng)處理例如在苯甲醚、乙硫醇或2-甲基吲哚存在時用諸如三氟乙酸或氫氟酸的強酸使肽與樹脂分離并除去肽上的保護基團。然后用常規(guī)純化技術(shù)，特別是層析技術(shù)，進行肽化合物的純化。
本發(fā)明肽也可通過在溶液中偶聯(lián)選擇性保護的肽碎片得到，而肽碎片本身的制備既可在固相中也可在溶液中進行。除了將肽鏈附著在樹脂上之外，溶液合成法與固相合成法在使用保護基團和利用它們穩(wěn)定性差異方面相似。例如通過甲酯或酰胺官能團保護C-末端羧基，在偶聯(lián)時的活化方法也與固相合成相似。
利用分子生物學(xué)技術(shù)，采用編碼這些肽的核酸序列也可合成本發(fā)明的肽。這些序列可以是RNA或DNA，并可以與調(diào)控序列結(jié)合和/或插入載體。然后將該載體轉(zhuǎn)染到宿主細胞如細菌中。載體的制備和在宿主內(nèi)的生產(chǎn)和表達用常規(guī)分子生物學(xué)和遺傳工程技術(shù)進行。
含假肽鍵的肽類合成通過溶液合成法或與固相合成法相結(jié)合，用常規(guī)有機化學(xué)方法進行。例如按照FEHRENTZ和CASTRO(合成，676-678,1983)所述的技術(shù)，通過在溶液中制備Fmoc-NH-CHR-CHO醛來實施-CH2-NH鍵的導(dǎo)入，并且按SASAKI和COY(肽，8,119-121,1988)所述的技術(shù)在固相上或在溶液中將它與不斷生長的肽鏈的縮合。
本發(fā)明也涉及藥物組合物，它包含至少一種具基本化學(xué)式(Ⅰ)的化合物或其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類本身作為活性成份，或與一種或多種惰性、無毒的賦形劑或載體相結(jié)合。
根據(jù)本發(fā)明所述的藥物組合物之中，可更具體提及的有那些適于口服、腸外或鼻喂給藥、片劑或糖衣丸、舌下片劑、小香囊、paquets、軟膠囊、栓劑、乳劑、軟膏、皮膚膠、皮用器械、霧劑、可飲用和注射的安瓿的組合物。
使用劑量根據(jù)病人的年齡和體重、病情的性質(zhì)和嚴重性及給藥途徑變化。
給藥途徑可以是口服(包括吸入、齒齦和舌下途徑)、鼻喂、直腸、腸外或經(jīng)皮膚的途徑。通常，依賴于給藥途徑和使用劑型，每24小時一種或多種給藥處理的劑量在10μg-500mg范圍之內(nèi)。
以下實施例舉例說明本發(fā)明，不意味著限制本發(fā)明。
按慣例，在以下實施例中，縮寫僅以大寫字母開頭而無任何其它指示的氨基酸屬于L構(gòu)型。而具D構(gòu)型的氨基酸的縮寫字母前帶有符號(D)。
實施例1His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-(D)-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2實施例1的化合物按下列重復(fù)的方案，使用連續(xù)流動裝置以0.1mmole規(guī)模從Fmoc-PAL-PEG-PS樹脂上開始合成。操作序號操作溶劑/試劑 時間1 洗滌二甲基甲酰胺(DMF) 5分鐘2 去保護 20％派啶/DMF15分鐘3 洗滌DMF 15分鐘4 偶聯(lián)氨基酸/DIPCDI/HOBt 60分鐘5 洗滌20％哌啶/DMF5分鐘6 洗滌DMF 5分鐘7 洗滌二氯甲烷5分鐘每一次操作都在室溫下進行，接著通過裝在進行合成的玻璃小室(反應(yīng)器)中的燒結(jié)玻璃過濾器進行過濾。過濾器保留了固定正在增長的肽鏈的樹脂。
在存在1-羥基苯并三唑(HOBt)時用二異丙基碳化二亞胺(DIPCDI)作為偶聯(lián)劑組裝每個氨基酸(6個當(dāng)量)。在摻入了最后一個氨基酸之后，得到固定在樹脂上含保護側(cè)鏈的肽。然后將載體放在高真空中干燥3小時。接著用50ml試劑K(82.5％三氟乙酸，5％苯酚，5％水，5％苯硫基甲烷，2.5％乙硫醇)處理。然后將該混合物在室溫下放置12小時，并不時攪拌，接著過濾到盛有約200ml乙醚的愛倫美氏燒瓶中。肽沉淀下來通過過濾或離心進行分離。然后在氫氧化鉀顆粒存在的情況下于高真空中干燥12小時，通過制備型HPLC在反相柱(C18)上用水/乙腈梯度進行純化。
質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3356按實施例1中所述的方法使用所需的氨基酸進行下列實施例中的制備。實施例2Trp-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-(D)-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3404實施例3Trp-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3404實施例4His-Ala-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3290實施例5His-Ala-His-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3299實施例6
His-Ala-(D)-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3184實施例7His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3188實施例8His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3186實施例9His-Leu-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3241實施例10His-Val-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3227實施例11Afp-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2Afp代表
對應(yīng)于3-氨基-3-(2-呋喃)丙酸的殘基。
質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3196實施例12His-Ala-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3180實施例13His-Ala-Ser-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3152實施例14His-Ala-Lys-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3194實施例15Phe-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Val-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3274實施例16Phe-(D)-Ala-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-(D)-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3138實施例17His-Ala-Leu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3178實施例18His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3201實施例19His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Trp-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3234實施例20His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Ile-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3162實施例21His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Val-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3146實施例22His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-His-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3184實施例23His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Asp-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3162實施例24His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Leu-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3194實施例25His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3180實施例26His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Tyr-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3245實施例27His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-rrg-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3238實施例28His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Glu-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3210實施例29Phe-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3206實施例30His-Ala-Lys-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3255實施例31His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3354實施例32His-Ala-Leu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3334實施例33His-Ala-Ser-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3312實施例34His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-(D)-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3351實施例35His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Aib-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3316實施例36His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Nva-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3165實施例37His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Nle-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3180實施例38His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Aib-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3152實施例39His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-(1)-Nal-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3230實施例40His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-(2)-Nal-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3231實施例41His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phg-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3183實施例42His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Nva-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3180實施例43His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Nle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3115實施例44His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Aib-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Aib-(1)-Nal-Nle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3158使用實施例1所述的方法得到實施例45-49的化合物，但是用Fmoc-Gly-PAL-PEG-PS樹脂代替Fmoc-PAL-PEG-PS樹脂并用三乙胺/甲醇代替試劑K。實施例45His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OH質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3192實施例46His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OH質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3194實施例47His-Ala-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OH質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3180實施例48Phe-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Val-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OH質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3206實施例49His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OH質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3198
使用實施例1所述的方法得到實施例50-54的化合物，但是用Fmoc-Gly-PAL-PEG-PS樹脂代替Fmoc-PAL-PEG-PS樹脂并用三乙胺/甲醇代替試劑K。實施例50His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Trp-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OH質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3210實施例51His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OCH3質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3212實施例52His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OCH3質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3209實施例53His-Ala-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OCH3質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3197實施例54Phe-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Val-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OCH3質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3220使用實施例1所述的方法得到實施例55-57的化合物，但是用Fmoc-Gly-PAL-PEG-PS樹脂代替Fmoc-PAL-PEG-PS樹脂并用三乙胺/異丙醇代替試劑K。實施例55His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OCH(CH3)2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3240實施例56His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OCH(CH3)2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3238實施例57His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-OCH(CH3)2質(zhì)譜ESI-MS:m/z=3237藥理學(xué)的研究實施例AGLP-1受體結(jié)合研究利用RIN T3膜在含有4％BSA和750μg/ml桿菌肽的60mMTris-HCl緩沖液(pH7.5)中進行GLP-1受體結(jié)合研究。膜(20-30μg)與大約15fmol的〔125I〕-GLP-1(50,000cpm)和冷競爭劑(非放射性GLP-1)一起以500μl終體積在37℃下溫育45分鐘。通過加入750μl含3％BSA的冷KRP緩沖液(pH7.5)停止反應(yīng)。混合物在12,000xg下離心(4℃,5分鐘)。將殘渣懸浮于1ml冷KRP緩沖液中，并通過進一步離心沉淀，然后測量其放射活性。結(jié)果用IC50表示。結(jié)果所得結(jié)果表明，本發(fā)明的化合物對GLP-1受體有很高的親和力。
對于實施例7的化合物尤為突出，其親和力為3.3×10-10M。實施例B激動劑或拮抗劑特性的測定。
通過測量受體由不同受試產(chǎn)物活化受體后環(huán)AMP的生成來可測定本發(fā)明化合物的激動劑特性。
將RIN T3細胞培養(yǎng)6天，并在試驗前一天更換培養(yǎng)基。細胞(3×105個/孔)用DMEM緩沖液洗兩次，然后加入0.5ml含有1％BSA、0.2ml IBMXt和受試肽的DMEM。在25℃下溫育20分鐘后提取細胞內(nèi)cAMP，使之琥珀酰化，并用放射免疫定量。
100％參考值相當(dāng)于用10-8M濃度的GLP-1誘導(dǎo)的cAMP產(chǎn)量，而0％參考值相當(dāng)于無GLP-1時的基礎(chǔ)產(chǎn)量。
結(jié)果用表示，EC50是誘導(dǎo)用10-8M濃度的GLP-1誘導(dǎo)的cAMP產(chǎn)量的50％所需要的濃度。結(jié)果本發(fā)明的化合物具有激動劑特征。它們能增加cAMP產(chǎn)量并有納克或亞納克摩爾濃度的EC50值。例如實施例7的化合物的EC50為1.02×10-9M。實施例C培養(yǎng)細胞中胰島素合成刺激作用的研究用Min6細胞(5×105細胞/每孔，0.5ml培養(yǎng)基中)研究本發(fā)明化合物誘導(dǎo)的胰島素合成刺激作用。實驗前18小時，吸出培養(yǎng)基，細胞用含0.1％BSA的DRB(pH7.5)洗滌兩次，然后將細胞在含1mM葡萄糖的DRB-BSA中預(yù)培養(yǎng)1小時，接著在含不同濃度葡萄糖和不同濃度受試化合物的DRB-BSA中培養(yǎng)，培養(yǎng)后收集混合物，離心5分鐘，貯存在-20℃。用碘125標記的豬胰島素和Kervran豚鼠抗胰島素抗體進行通過放射免疫分析測定胰島素分泌。結(jié)果本發(fā)明的化合物刺激胰島素分泌的能力比tGLP-1大得多。實施例D代謝穩(wěn)定性研究將每種化合物溶解于含50mg/ml BSA的1％三氟乙酸水溶液以得到1mg/ml濃度。
將50μg/ml含待測肽溶液的等分試樣在人血漿中于37℃培養(yǎng)，用HPLC線性分析法測定零時TO，和培養(yǎng)5,10,15,30和60分鐘后的肽量。
將50μl上述制備的含1mg/ml肽的溶液樣品加到940μl 0.1MTRIS(pH8.0)中。用HPLC測定溶液中肽含量之后，加入10μl含48毫單位二肽肽酶Ⅳ(DPPⅣ)的水溶液，并用HPLC測定零時T0和于37℃培養(yǎng)10分鐘后的樣品。
測定結(jié)果可以評估肽的剩余量，并表示為T0的百分數(shù)。結(jié)果本發(fā)明的化合物看來表現(xiàn)優(yōu)于天然的穩(wěn)定性。
通過實施例，用tGLP-1和用實施例7的化合物得到的結(jié)果包含于下表中
實施例E抗高血糖活性在3月齡、體重約250g的正常雄性Wistar大鼠中進行本發(fā)明化合物的抗高血糖活性研究。
用葡萄糖耐量測試評估體內(nèi)平衡。靜脈內(nèi)葡萄糖耐量測試(IVGTT)將葡萄糖溶解在0.9％NaCl水溶液中，并由隱靜脈途經(jīng)注射到用戊巴比妥(60mg·kg-1,i.p.)麻醉的大鼠內(nèi)，在注射葡萄糖前和注射葡萄糖2、5、10、15、20和30分鐘時從尾部血管順序收集血漿。然后離心并取出血漿，立即測定10μl樣品中血漿葡萄糖的濃度，并將其余血漿保存在-20℃，直到通過放射免疫分析進行胰島素濃度測定。
按照Hendrick等(代謝，1993,42,1)的方法，在注射葡萄糖之后立即給用戊巴比妥麻醉的禁食鼠進行單次受試產(chǎn)品靜脈注射。分析方法用葡萄糖分析儀(Beckman Inc.,Fullerton,CA)測定血漿葡萄糖濃度。有關(guān)兩個參數(shù)ΔG和K的葡萄糖耐量得到測定。
ΔG代表以1g/kg劑量過量注射葡萄糖達到之后，在30分鐘期間高于基線血糖增量的積分值。
K是供給施用葡萄糖后5-30分鐘之間葡萄糖消失的速率。
本發(fā)明化合物看來具有相當(dāng)于或優(yōu)于tGLP1的胰島素分泌和抗高血糖活性，并且有更長的作用期和更高的體內(nèi)代謝穩(wěn)定性。實施例F藥物組合物注射液實施例7的化合物 10mg注射用蒸餾水 25ml
權(quán)利要求
1．具基本化學(xué)式(Ⅰ)的肽化合物Z1-X1-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-X4-X5-Ser-X6-X7-X8-Glu-Gly-Gln-Ala-X9-Lys-X10-X11-X12-Ala-X13-X14-Val-Lys- (Ⅰ)Gly-X15-Gly-Z2其中Z1，具化學(xué)式(1)的肽的末端氨基取代基，代表氫原子、烷基、直鏈或支鏈(C1-C6)-酰基，或選擇性取代的芳羰基、選擇性取代的雜芳羰基、選擇性取代的芳烷羰基、選擇性取代的雜芳烷羰基、選擇性取代的芳氧羰基，選擇性取代的芳烷氧羰基或選擇性取代的烷氧羰基；Z2，具化學(xué)式(1)的肽的末端羰基取代基，代表羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基、或氨基(選擇性地被選自直鏈或支鏈(C1-C6)-烷基的一個或兩個相同或不同的基團、選擇性取代的芳基、選擇性取代的雜芳基、選擇性取代的芳羰基、選擇性取代的雜芳羰基、選擇性取代的芳烷羰基和選擇性取代的雜芳烷羰基取代，或由與氮原子一起形成含5-7個環(huán)原子數(shù)的飽和環(huán)的兩個基團選擇性取代取代)；X1至X14每個代表，獨立于其他的·具有D或L構(gòu)型、分子式如下的天然或非天然氨基酸殘基
其中-R1代表氫原子，R2代表氫原子或烷基、氨烷基(選擇性地，在氮原子上由一個或兩個烷基、苯基、芐基、環(huán)烷基、選擇性取代的芳氧羰基、選擇性取代的芳烷氧羰基和/或選擇性取代的烷氧羰基取代)，硫代烷基(在硫原子上由烷基、苯基、芐基或環(huán)烷基選擇性取代)，羥烷基(在氧原子上由烷基、芐基或環(huán)烷基選擇性取代)，羧烷基，氨甲酰烷基，胍烷基，環(huán)烷基，環(huán)烷烷基，選擇性取代的稠環(huán)烷基，選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基，選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基，-或R1和R2與攜帶它們的碳原子一起形成環(huán)烷基或稠環(huán)烷基；·具有D或L構(gòu)型、化學(xué)式如下的天然或非天然氨基酸殘基
其中A與它所聯(lián)接的氮和碳原子一起形成含有5至11個環(huán)原子數(shù)的飽和、部分不飽和或不飽和的單或雙環(huán)基，并可被選擇性取代；·或3-氨基-3-(2-呋喃基)丙酸殘基；和X15代表鍵或精氨酸殘基(Arg)；及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類；具備以下附加條件時，X15代表鍵當(dāng)X1是具有L或D構(gòu)型并選自酪氨酸(Tyr)、精氨酸(Arg)、苯丙氨酸(Phe)、鳥氨酸(Orn)、蛋氨酸(Met)、脯氨酸(Pro)、亮氨酸(Leu)、纈氨酸(Val)、異亮氨酸(Ile)、丙氨酸(Ala)、天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、天冬酰胺(Asn)、谷氨酰胺(Gln)和組氨酸的氨基酸殘基時，和/或當(dāng)X2代表具有L或D構(gòu)型并選自絲氨酸(Ser)，甘氨酸(Gly)，半胱氨酸(Cys)，肌氨酸(Sar)，丙氨酸(Ala)，脯氨酸(Pro)，纈氨酸(Val)，亮氨酸(Leu)，異亮氨酸(Ile)和蘇氨酸(Thr)的殘基時，和/或當(dāng)X3代表具有L或D構(gòu)型并選自谷氨酰胺(Gln)，天冬氨酸(Asp)，蘇氨酸(Thr)，天冬酰胺(Asn)和谷氨酸(Alu)的氨基酸殘基時，和/或當(dāng)X5代表酪氨酸(Tyr)時，和/或當(dāng)X6代表賴氨酸(Lys)時，和/或當(dāng)X10代表選自谷氨酰胺(Gln)，丙氨酸(Ala)，蘇氨酸(Thr)，絲氨酸(Ser)和甘氨酸(Gly)的氨基酸殘基時，和/或當(dāng)X13代表選自苯丙氨酸(Phe)，纈氨酸(Val)，亮氨酸(Leu)，異亮氨酸(Ile)，丙氨酸(Ala)和酪氨酸(Tyr)的氨基酸殘基時，應(yīng)該理解-X1至X15不能選取使所得肽與天然肽完全相同的殘基，-術(shù)語“烷基”表示含1至6個碳原子的直鏈或支鏈，-術(shù)語“環(huán)烷基”表示含3至8個環(huán)原子數(shù)的飽和環(huán)狀碳氫基團，-術(shù)語“稠環(huán)烷基”表示含8至11個環(huán)原子數(shù)的雙環(huán)基團，由飽和的含碳環(huán)與選擇性地含有一個或兩個選自氮、氧和硫的雜原子的飽和或不飽和環(huán)例如1,2-二氫化茚、四氫化萘或四氫喹啉相稠合而形成，-術(shù)語“芳基”表示苯基、萘基或聯(lián)苯基，-術(shù)語“雜芳基”表示含有5至11個環(huán)原子數(shù)并含有1至4個選自氮、氧和硫的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)基團，例如呋喃基，吡啶基或吲哚基，-術(shù)語“芳羰基”表示Ra-CO-基，術(shù)語“芳烷羰基”表示Ra-Rb-CO-基，術(shù)語“雜芳羰基”表示Rc-CO-基，術(shù)語“雜芳烷羰基”表示RC-Rb-CO-基，術(shù)語“芳氧羰基”表示Ra-O-CO-基，術(shù)語“芳烷氧羰基”表示Ra-Rb-O-CO-基，而術(shù)語“烷氧羰基”表示Rb-O-CO-基，其中Ra基代表如上所述的芳基，Rb基代表如上所述的烷基，而Rc基代表如上所述的雜芳基，-術(shù)語“取代的”用于上文中所定義的術(shù)語，表示所指的基團被一個或多個鹵原子、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷基、羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基、氨基、氰基、硝基或直鏈或支鏈(C1-C6)-全鹵化烷基取代，-每個肽鍵-CO-NH-可選擇性地被選自-CH2-NH-,-NH-CO-,-CO-N(CH2)-,-CH2-CH2-,-CH2-CO-,-CH2-S-,-CH2-SO-,-CH2-SO2-,-CH=CH-和-CO-CH2-NH-的假肽鍵取代。
2．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具化學(xué)式(1)的化合物，其中Z1代表氫原子，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
3．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中Z2代表選自羥基、直鏈或支鏈(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
4．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中X15代表鍵及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
5．根據(jù)權(quán)利要求所述的具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中Z1代表氫原子；Z2代表選自羥基、直鏈或支鏈的(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團；X1和X11代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(a)表示的含芳香族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1a代表氫原子，R2a代表與不飽和環(huán)相稠合并選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基、選擇性取代的雜芳基、或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基；X2和X9代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(b)表示的含脂肪族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基；X3和X6代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨基烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基；X4、X7、X10和X12代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨基烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基，或獨立選自由以下化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基；X5代表纈氨酸殘基(Val)；X8和X14獨立代表具有D或L構(gòu)型的亮氨酸殘基(Leu)；X13代表色氨酸殘基(Trp)；并且X15代表鍵或精氨酸(Arg)；及其帶藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
6．根據(jù)權(quán)利要求5所述的具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中X15代表鍵，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
7．根據(jù)權(quán)利要求7所述的具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中Z1代表氫原子；Z2代表選自羥基、直鏈或支鏈的(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團；X1和X11代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1a代表氫原子，R2a代表與不飽和環(huán)相稠合并選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基、選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷；X2和X9代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基；X3和X6代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨基烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基；X4,X7和X10代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，由以下化學(xué)式(d)表示的獨立選自含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨基烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基，X5代表纈氨酸殘基(Val)；X4和X14獨立代表具有D或L構(gòu)型的亮氨酸殘基(Leu)；X12代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，由以下化學(xué)式(d)表示的選自含有脂肪族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基；X13代表色氨酸殘基(Arg)；及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
8．根據(jù)權(quán)利要求7所述的具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中X15代表鍵，及其帶藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
9．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中Z1代表氫原子；Z2代表選自羥基、直鏈或支鏈的(C1-C6)-烷氧基和氨基的基團；X1和X11代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈的氨基酸殘基
其中R1a代表氫原子，R2a代表與不飽和環(huán)相稠合并選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基、選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基；X2和X9獨立代表具有D或L構(gòu)型的丙氨酸殘基(Ala)；X3和X6代表具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基，獨立選自由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用側(cè)鏈的氨基酸殘基；
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨基烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基、咪唑基或咪唑烷基；X4代表天冬氨酸殘基(Asp)；X5代表纈氨酸殘基(Val)；X7代表酪氨酸殘基(Tyr)；X8和X14獨立代表具有D或L構(gòu)型的亮氨酸殘基(Leu)；X10代表谷氨酰胺(Glu)；X12代表異亮氨酸(Ile)；X13代表色氨酸(Trp)；X15代表鍵或精氨酸殘基(Arg)；及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
10．根據(jù)權(quán)利要求9所述的具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物，其中X15代表鍵，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
11．根據(jù)權(quán)利要求1所述的肽化合物，以化學(xué)式(Ⅱ)表示Z1-X1-X2-X3-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys- (Ⅱ)Gly-X15-Gly-Z2其中Z1，具化學(xué)式(Ⅰ)的肽的末端氨基的取代基，代表氫原子；Z2，具化學(xué)式(Ⅰ)的肽的末端羧基取代基，代表羥基、直鏈或支鏈的(C1-C6)-烷氧基或氨基；X1代表由以下化學(xué)式(a)表示的含有芳香族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然的氨基酸殘基；
其中R1a代表氫原子，R2a代表與不飽和環(huán)相稠合并選擇性取代的環(huán)烷基，或選擇性取代的芳基、選擇性取代的芳烷基、選擇性取代的雜芳基或選擇性取代的雜芳烷基，或咪唑基或咪唑烷基；X2代表由以下化學(xué)式(b)表示的含有脂肪族特性側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中R1b代表氫原子，R2b代表氫原子或烷基或環(huán)烷基；X3代表由以下化學(xué)式(d)表示的含有能建立離子相互作用的側(cè)鏈并具有D或L構(gòu)型的天然或非天然氨基酸殘基
其中R1d代表氫原子，R2d代表氨基烷基、硫代烷基、羥烷基、羧烷基、胍烷基，咪唑基或咪唑烷基；X15代表鍵或精氨酸殘基；及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
12．權(quán)利要求11所述的具有化學(xué)式(Ⅱ)的化合物，其中X15代表鍵，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
13．權(quán)利要求11所述的具有化學(xué)式(Ⅱ)的化合物，其中X2代表具有D或L構(gòu)型的丙氨酸殘基(Ala)而X15代表鍵，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
14．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下肽類化合物·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-(D)-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·Trp-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-(D)-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·Trp-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-His-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2
15．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下肽類化合物·His-Ala-(D)-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Leu-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Val-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·Afp-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Ser-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gin-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Lys-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·Phe-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Val-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·Phe-(D)-Ala-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Val-(D)-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Leu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Trp-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Ile-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Val-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-His-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Asp-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Leu-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Tyr-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Arg-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Glu-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·Phe-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-lle-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2·His-Ala-Lys-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Leu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Ser-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2·His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-(D)-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2
16．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下化合物His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-(D)-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Gly-NH2，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
17．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下肽化合物His-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
18．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下肽化合物His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
19．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下肽化合物His-Ala-Asp-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
20．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下肽化合物Phe-(D)-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Lys-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Val-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2，及其帶有在藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
21．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下肽化合物His-Ala-Met-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
22．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的以下肽化合His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-Val-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Gly-NH2，及其帶有藥物上可接受的酸或堿的附加鹽類。
23．根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有化學(xué)式(Ⅰ)的化合物的制備方法，其特征在于它們可以通過從受保護的氨基酸起始的固相順序合成法，通過在溶液中從肽片段起始的合成，或選擇性地通過將結(jié)合這兩種技術(shù)得到。并且，如有需要，在肽序列合成過程中的任意一步，按有機化學(xué)常規(guī)技術(shù)，導(dǎo)入一個或多個假肽鍵。如有需要，將具化學(xué)式(Ⅰ)的化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槠鋷в兴幬锷峡山邮艿乃峄驂A的附加鹽類。
24．藥物組合物，包括至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-22的任意一項所述的化合物本身作為活性成份，或與一種或多種藥物上可接受的惰性、無毒的賦形劑或載體相結(jié)合。
25．根據(jù)權(quán)利要求24所述的藥物組合物，包括至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-22的任意一項所述的活性成份，在涉及t(GLP-1)的病理學(xué)治療中用作t(GLP-1)的激動劑。
26．根據(jù)權(quán)利要求24所述的藥物組合物，包括至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-22的任意一項所述的活性成份以用于治療非胰島素依賴的Ⅱ型糖尿病、肥胖癥和Ⅰ型糖尿病。
全文摘要
具有化學(xué)式(Ⅰ)的肽化合物:Z
文檔編號A61K31/00GK1232038SQ9910398
公開日1999年10月20日 申請日期1999年3月15日 優(yōu)先權(quán)日1998年4月10日
發(fā)明者B·卡拉斯, G·格拉希, A·查瓦尼尤, C·薩拉斯特德門希里, P·里納德, B·普費夫, D·馬尼徹茲 申請人:阿迪爾公司