專利名稱：用人臍動(dòng)脈作為血管移植物的制備工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于血管移植手術(shù)中的血管移植物制備工藝。
常見冠心病的有效治療方法是冠狀動(dòng)脈傍路移植術(shù)，選擇優(yōu)質(zhì)的血管移植物至關(guān)重要。目前，一般采用自身的大隱靜脈或各種動(dòng)脈(如乳房?jī)?nèi)動(dòng)脈、橈動(dòng)脈或右胃網(wǎng)膜動(dòng)脈、腹壁下動(dòng)脈等)。但是，這些血管也存在一些缺點(diǎn)，如1、采用大隱靜脈，有時(shí)靜脈本身就有病變，如靜脈炎癥、靜脈曲張、靜脈栓塞、先天畸形或小腿有頑固性潰瘍等，均不易采用，取材較困難，而且靜脈容易堵塞，冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)后10年通暢率只有68％，若再次冠狀動(dòng)脈搭橋手術(shù)，人體自身就再?zèng)]有靜脈可以應(yīng)用。
2、采用其他各種動(dòng)脈，如果再次用于冠狀動(dòng)脈搭橋手術(shù)，亦沒有其他動(dòng)脈可以利用。由于上述兩種方法均采用自身血管，故取材困難，無法商品化。
3、采用滌綸(Dacron)或聚四氟乙烯(PTFE)人造血管，雖可商品化，但目前尚處于實(shí)驗(yàn)階段，需要在管腔內(nèi)種植內(nèi)皮細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)室條件要求高，操作技術(shù)相當(dāng)復(fù)雜，但效果并不理想，在臨床上的應(yīng)用還有相當(dāng)大的差距，目前還無法應(yīng)用推廣。
本發(fā)明的目的就是為了解決上述問題，提出一種移植后無任何排斥反應(yīng)且存活期長(zhǎng)、血管抗原性低且取材容易，可商品化而效果好的用人臍動(dòng)脈作為血管移植物的制備工藝。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案一種用人臍動(dòng)脈作為血管移植物的制備工藝，先在無菌條件下，取新鮮人胎兒的臍血管，并從臍動(dòng)脈開口處用肝素生理鹽水反復(fù)沖洗，其特征在于(1)取細(xì)直玻璃棒消毒后插入人臍動(dòng)脈，使其血管伸直，剝離其周圍組織，制成血管段；(2)將血管段連同玻璃棒懸空設(shè)置在容器中，并將該容器放置在冷阱內(nèi)，不斷向冷阱內(nèi)加入低溫液氮，快速降溫到-60～-80℃；(3)將冷阱內(nèi)的容器通過高真空機(jī)使容器內(nèi)的人臍動(dòng)脈血管段逐漸復(fù)溫干燥，得到人臍動(dòng)脈的凍干血管段；(4)從容器內(nèi)取出凍干血管段真空封裝于消毒試管內(nèi)，得到本發(fā)明血管移植物的半成品；(5)將上述半成品用放射性同位素輻照，在輻射源強(qiáng)為1.2-1.4條件下，輻照時(shí)間控制在6～8秒，輻照劑量控制在2-11GY，輻照后的試管內(nèi)的血管段即為本發(fā)明所要的血管移植物。
本發(fā)明制備的血管移植物符合血管(同種或異種)移植物三大基本條件1、血管的抗原性低通過凍干和輻照方法，基本上無細(xì)胞成份的存在(包括內(nèi)皮細(xì)胞)，所以血管的抗原性減低到最低限度，使在移植之后不發(fā)生任何排斥反應(yīng)，血管移植物可以長(zhǎng)期存活，保持通暢。這是任何器官或組織移植的關(guān)鍵問題之一。
2、血管的生物物理性能良好a、血管彈性好新鮮人臍動(dòng)脈的粘彈性性質(zhì)，經(jīng)過處理之后，改造成線性的應(yīng)力——應(yīng)變關(guān)系，屬于良好彈性體的表現(xiàn)，在人體血壓變化的范圍內(nèi)能夠維持正常功能；b、血管順應(yīng)性好經(jīng)特殊處理后，其順應(yīng)性在較高壓強(qiáng)下，得到提高；c、血管交聯(lián)性好輻照后，不但不損害血管的膠原纖維，適合做為血管移植物的材料框架，而且高分子材料經(jīng)高能射線輻照后，分子間形成一定的交聯(lián)密度，從而提高材料的機(jī)械強(qiáng)度和彈性性能。
3、血管的組織相容性優(yōu)越通過狗頸動(dòng)脈間置吻合，采用顯微鏡及電鏡的病理觀察，術(shù)后4周，血管腔內(nèi)的內(nèi)皮細(xì)胞再生良好無內(nèi)膜增厚現(xiàn)象。
此外，本發(fā)明的取材是人臍動(dòng)脈，由于是非自體取材，故取材方便，便于保存，價(jià)格適當(dāng)，既符合國情，又達(dá)到安全、可靠的目的，并且可以制備成為商業(yè)成品，隨時(shí)可以采用，非常方便，常溫下可以保存，可普及推廣，具有十分重大的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。
下面對(duì)本發(fā)明制備工藝詳細(xì)描述如下1、在無菌條件下，取新鮮人胎兒的臍血管(最好在分娩之后立即采集封裝)。
2、從臍動(dòng)脈開口處，針頭插入之后，用肝素生理鹽水反復(fù)沖洗(每500毫升生理鹽水加肝素100毫克)。
3、取直徑2-3mm、15cm長(zhǎng)消毒的細(xì)直玻璃棒插入臍動(dòng)脈，使血管伸直，仔細(xì)剝離其周圍組織但勿損傷血管外膜，游離到需要血管的長(zhǎng)度(一般10-12cm)，剪斷臍動(dòng)脈，形成一根血管段，每次約可取8-10根血管段。若所需血管段長(zhǎng)度要求更長(zhǎng)，可采用更長(zhǎng)的細(xì)直玻璃棒。
4、把血管段(連同玻璃棒)豎立固定在容器內(nèi)，如在容器內(nèi)底部設(shè)有多孔板架，將各血管段插置在多孔板架的各孔內(nèi)，即可使它們懸空豎置在容器內(nèi)。再將容器放到冷阱內(nèi)，并向冷阱內(nèi)不斷加入低溫液氮，快速降溫到-70℃，溫度由銅——鐮銅熱電偶監(jiān)測(cè)。
5、連接高真空機(jī)，利用高真空的組合抽氣設(shè)備達(dá)到逐步復(fù)溫干燥的目的。使用高真空機(jī)具體步驟如下(1)機(jī)組的開動(dòng)首先接通機(jī)械泵電源，將前級(jí)閥和擴(kuò)散泵閥全部打開，進(jìn)行全系統(tǒng)預(yù)抽空。
(2)當(dāng)系統(tǒng)達(dá)到5×10-2乇時(shí)，即可接通擴(kuò)散泵電源，同時(shí)打開水門對(duì)泵進(jìn)行冷卻，水流量不低于100升/時(shí)。
(3)復(fù)溫干燥結(jié)束要停機(jī)，應(yīng)先切斷擴(kuò)散泵電源，等幾分鐘后，再將擴(kuò)散泵閥門關(guān)閉，同時(shí)關(guān)閉前級(jí)閥門，切斷機(jī)械泵電源，最后將機(jī)械泵放入大氣，再等十幾分鐘后可將冷卻水關(guān)閉。
6、當(dāng)容器真空度達(dá)到1×10-3mmHg后維持2小時(shí)，取出凍干的血管段進(jìn)行玻璃試管封裝。
7、將試管封裝的人臍動(dòng)脈血管段送原子能研究單位用60Co-γ輻射，輻射源強(qiáng)為1.37，時(shí)間為6.5秒，劑量6～8GY。輻照后即為本發(fā)明所要的血管移植物成品，它可在常溫下保存，可以商品化。輻照的目的，一是消毒，二是將臍動(dòng)脈的內(nèi)皮細(xì)胞破壞，達(dá)到降低臍動(dòng)脈抗原性的目的。經(jīng)過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及病理檢查證實(shí)，臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞再生于2-4周內(nèi)完成，內(nèi)膜無增殖現(xiàn)象。
本發(fā)明制備的血管移植物在手術(shù)中使用時(shí)，其操作必須在無菌條件下進(jìn)行，首先消毒封裝血管移植物的試管，然后取出血管段，浸泡在37-42℃生理鹽水內(nèi)15-30分鐘，再將血管段中的細(xì)直玻璃棒抽出，這樣就達(dá)到復(fù)水的目的，其組織立即恢復(fù)成類似新鮮的人臍動(dòng)脈，此時(shí)即可用于手術(shù)中的血管移植。
本發(fā)明通過冷凍、干燥和輻照三大步驟制成血管移植物。由于經(jīng)過輻照處理，使得人臍動(dòng)脈血管段的細(xì)胞成份均消失(不僅內(nèi)皮細(xì)胞)，所以抗原性降低，剩下的是是纖維框架，主要成份是膠原纖維、彈性纖維和平滑肌纖維，它們均屬于高分子物質(zhì)，用60Co-γ射線的照射，將使其纖維分子間形成一定的“交聯(lián)反應(yīng)”，阻擋炎性細(xì)胞侵入，從而避免內(nèi)膜增殖，不會(huì)出現(xiàn)血管移植物“再狹窄”，徹底解決了血管移植物的“堵塞”難題，為血管移植物的獲取提供了一條全新途徑。
權(quán)利要求
1.一種用人臍動(dòng)脈作為血管移植物的制備工藝，先在無菌條件下，取新鮮人胎兒的臍血管，并從臍動(dòng)脈開口處用肝素生理鹽水反復(fù)沖洗，其特征在于(1)取細(xì)直玻璃棒消毒后插入人臍動(dòng)脈，使其血管伸直，剝離其周圍組織，制成血管段；(2)將血管段連同玻璃棒懸空設(shè)置在容器中，并將該容器放置在冷阱內(nèi)，不斷向冷阱內(nèi)加入低溫液氮，快速降溫到-60～-80℃；(3)將冷阱內(nèi)的容器通過高真空機(jī)使容器內(nèi)的人臍動(dòng)脈血管段逐漸復(fù)溫干燥，得到人臍動(dòng)脈的凍干血管段；(4)從容器內(nèi)取出凍干血管段真空封裝于消毒試管內(nèi)，得到本發(fā)明血管移植物的半成品；(5)將上述半成品用放射性同位素輻照，在輻射源強(qiáng)為1.2-1.4條件下，輻照時(shí)間控制在6～8秒，輻照劑量控制在2-11GY，輻照后的試管內(nèi)的血管段即為本發(fā)明所要的血管移植物。
2.按權(quán)利要求1所述的用人臍動(dòng)脈作為血管移植物的制備工藝，其特征在于冷阱內(nèi)的容器由高真空機(jī)真空處理時(shí)，在真空度達(dá)到1×10-3mmHg后維持2小時(shí)，再取出凍干的血管段進(jìn)行玻璃試管封裝。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于血管移植手術(shù)中的血管移植物制備工藝,先在無菌條件下,取新鮮人胎兒的臍血管沖洗干凈,取細(xì)直玻璃棒消毒后插入人臍動(dòng)脈,剝離其周圍組織,制成血管段;將血管段懸置在容器中,并將該容器放置在冷阱內(nèi),不斷向冷阱內(nèi)加入低溫液氮,快速降溫;將冷阱內(nèi)的容器通過高真空機(jī)復(fù)溫干燥;從容器內(nèi)取出凍干血管段真空封裝于消毒試管內(nèi);將上述半成品用放射性同位素輻照,輻照后的試管內(nèi)的血管段即為本發(fā)明所要的血管移植物。
文檔編號(hào)A61L27/00GK1199644SQ9811132
公開日1998年11月25日 申請(qǐng)日期1998年5月28日 優(yōu)先權(quán)日1998年5月28日
發(fā)明者翁品光 申請(qǐng)人:南京市鼓樓醫(yī)院