專利名稱：：用于制造超聲診斷造影劑的制備液及用其制備造影劑方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于制造超聲診斷造影劑的制備液，特別是一種用于制造由包裹有不溶性氣體的蛋白質(zhì)微球構(gòu)成造影劑的制備液及用該種制備液制備造影劑的方法。超聲診斷學(xué)在心血管、肝、腎等方面疾病診斷占有重要地位，理想的超聲造影應(yīng)能受動脈壓力達(dá)數(shù)分鐘，以隨血流分布到全身，充分反映器的血流灌注情況而又不干擾血流動力學(xué)。目前，以蛋白質(zhì)包裹碳氟類不溶性氣體形成蛋白質(zhì)微球的造影劑是國際上較先進的一種造影劑，由于碳氟類氣體分子量較大且為惰性氣體，在微球中不易穿過球壁而擴散，能耐受250mmHg以上的動脈壓力，它在血管內(nèi)停留的時間足以滿足實際應(yīng)用所需要的最大值，因此該種造影劑在超聲診斷的應(yīng)用中顯示出極佳的開發(fā)前景，成為發(fā)達(dá)國家研究開發(fā)的熱點。中國發(fā)明專利公開說明書CN1129910A(申請?zhí)枮?4193227.3)公開了一種上述類型的造影劑，該造影劑是以蛋白質(zhì)包裹全氟丙烷氣體形成直徑為2～4μm的微球混懸液，該造影劑除具有上述同類型造影劑的特點外，同時對血流動力學(xué)無明顯干涉，但該造影劑仍具有以下不足一是其配方使微球產(chǎn)率偏低，要經(jīng)過濃縮等處理后方能使用，生產(chǎn)成本加大；二是有效微球比例較低，粒徑較大，微球均一性不是在最佳范圍內(nèi)，其中有5～10％的微球直徑大于10μm，導(dǎo)致成品品質(zhì)降低，用安全性較低；三是劑型為微球混懸液，運輸、儲存均須冷藏保存，而且保存期較短僅為一處。本發(fā)明的目的在于提供一種微球產(chǎn)率高、粒徑減小、有效微球比例較高、微球均一性好的用于制造超聲診斷造影劑的制備液及用該制備液制備造影劑的方法。本發(fā)明的制備液各組分及含量(重量百分比)如下蛋白質(zhì)1～10％、糖類5～20％或甘油0.1～5％，余量為溶劑。上述蛋白質(zhì)最好是選用人體白蛋白，含量以3～7％為較佳范圍值，其中以5％為最佳；上述糖類包括果糖(左旋糖)、葡萄糖(右旋糖)，制備液中加入糖類物質(zhì)，可提高溶液的粘度，有助于合成微球，有效提高微球的產(chǎn)率，微球平均粒徑明顯減小，且可提高有效微球比例，顯著提高微球的有效性和安全性。經(jīng)實驗對比，果糖(左旋糖)比葡萄糖(右旋糖)效果更好。糖類加入的較佳范圍為5％～15％，最佳效果值為10％。上述甘油較佳加入量為0.8～2％，最佳值為1％；制備液中加入一定量的甘油可顯著減少大于10μm微球的比例，將大于10μm的微球控制在1～2％之間，使微球均一性增加，有效提高造影劑的使用安全性。上述溶劑可有多種選擇，一般情況下選用符合注射標(biāo)準(zhǔn)的水溶劑，同時，上述蛋白質(zhì)、糖類、甘油等原料也應(yīng)采用適合人體注射用的蛋白質(zhì)注射液、果糖注射液、葡萄糖注射液及甘油注射液。上述配方中糖類和甘油可只加入其中一種，如兩者同時加入，則綜合效果更好，微球產(chǎn)率、平均粒徑、粒徑分布、有效微球比例等各項指標(biāo)改善更顯著。本發(fā)明用上述制備液生產(chǎn)制造造影劑的方法如下1、原料準(zhǔn)備按上述配方將各組成按比例投料，混合后攪勻成為制備液，將其過濾后加熱至50℃～100℃；2、聲振合成微球?qū)⑸鲜鲆鸭訜嶂苽湟阂砸欢魉倭魅肼曊駜x的聲振室內(nèi)，不溶性氣體以一定流速從聲振室底部進氣口通入溶液內(nèi)，聲振儀的發(fā)射頭置于溶液面下0.3～1.5cm處，溶液中蛋白質(zhì)受超聲振動產(chǎn)生空化作用，包裹不溶性氣體形成大量粒徑不一的微球，將經(jīng)過聲振合成處理的溶液引入分液罐內(nèi)；3、去除大微球?qū)⒎忠汗拗械娜芤夯靹蚝箪o置分層，將中、下層溶液引入分裝罐內(nèi)，最上層的泡沫和過大微球則留在分液罐內(nèi)被除去；4、半成品檢測控制及分裝將分裝罐內(nèi)溶液充分混勻，測定溶液中微球各項指標(biāo)如微球濃度、平均粒徑、粒徑分布等并按現(xiàn)有方法調(diào)整至要求值，然后將符合要求的溶液再次充分混勻，之后分裝入小支包裝瓶內(nèi)；5、制成成品將上述瓶裝藥液移入冰冷干燥機內(nèi)進行真空低溫干燥，制成凍干粉針劑，向瓶內(nèi)注入與被包裹不溶性氣體相同的氣體，封蓋即成。上述步驟1中，如蛋白質(zhì)選用的是人體白蛋白時，加熱溫度應(yīng)控制在65～72℃，最好是68～70℃。本發(fā)明方法中微球所包裹的不溶性氣體一般為碳氟類不溶性氣體，其中以全氟丙烷氣體為最佳。本發(fā)明由于在用于制備造影劑的制備液中加入糖類或甘油等成份，使微球產(chǎn)率大大提高，微球平均直徑減小，有效微球比例上升，微球均一性好，大大減少大于10μm微球的比例，從而有效提高造影劑品質(zhì)，降低生產(chǎn)成本。且采用聲振儀實現(xiàn)聲振合成微球，合成效果好，設(shè)備投入少，操作簡易，生產(chǎn)成本低。造影劑制成干粉針劑，在常溫下可保存數(shù)年，便于運輸、儲存，保存期長。下面結(jié)合實例詳細(xì)說明本發(fā)明的內(nèi)容下面各實例中，蛋白質(zhì)皆采用人體白蛋白，在制備液中含量為5％，不溶性氣體皆采用全氟丙烷氣體。實施例1糖類對微球產(chǎn)率和粒徑的影響表1列出制備液中無糖、加入10％果糖(左旋糖)和加入10％葡萄糖(右旋糖)三種情況下微球產(chǎn)率、粒徑及粒徑分布的數(shù)字。表1</tables>從表1中可以看出，制備液中有糖比無糖情況微球濃度有顯著提高，微球平均粒徑明顯減小，而且果糖(左旋糖)比葡萄糖(右旋糖)作用效果更顯著，可明顯提高2～6μm范圍內(nèi)的有效微球百分比。表2列出了制備液中加入果糖(左旋糖)及果糖含量不同時，微球產(chǎn)率和粒徑變化情況表2</tables>表2顯示隨著制備液中果糖(左旋糖)含量增加，微球產(chǎn)率也隨即提高，且粒徑變小，尤其以果糖含量在5～20％范圍內(nèi)較為顯著，特別是含量為10％左右時，產(chǎn)率提高最明顯；果糖含量超過20％后，微球產(chǎn)率也有所提高，粒徑也有下降，但變化不明顯，由此可見，果糖含量范圍在5％～15％范圍內(nèi)較佳，其中又以10％為最佳。實施例2甘油對微球均一性的影響表3列出了制備液中加入甘油及甘油含量變化時，微球粒徑和大于10μm微球比例的變化情況表3</tables>表3中顯示在制備液中設(shè)有加入甘油時，溶液中大于10μm的微球比例較高；加入甘油后則明顯降低，而且甘油在0.8～2％范圍內(nèi)作用比較明顯，特別是含量在1％左右時效果最顯著，當(dāng)甘油含量超過2％以后，大于10μm微球的比例仍會降低，但不明顯，因此，加入甘油能有效地減少大于10μm微球比例，較好地將大于10μm微球含量控制在1～2％之間，增加微球的均一性。從實例可以得出甘油含量以0.8～2％為較佳，含量1％為最佳。實施例3用上述制備液制造生產(chǎn)造影劑的方法詳細(xì)說明首先，取市售人體血清白蛋白注射液、果糖注射液、甘油注射液、水為原料按一定比例投料混勻，制成1000ml含5％人體白蛋白、10％果糖、1％甘油的制備液，經(jīng)0.3～0.6μm(最好是0.4μm)的微孔濾膜過濾后引入原料罐內(nèi)，精確加熱至68～70℃；然后將加熱的溶液以1ml/s的速度引入聲振儀的聲振室內(nèi)，將不溶性氣體全氟丙炳過濾后以0.5ml/s的速度從聲振室底部進氣口通入溶液中，聲振儀選用美國熱系統(tǒng)公司生產(chǎn)的XL2020型聲振儀，其超聲發(fā)射頭置于溶液液面下，一般以低于液面0.5～1cm為佳，發(fā)射頭功率有10檔，表4為選用不同功率檔和聲振時間時，微球粒徑、微球濃度的數(shù)值。表4不同制備條件組合下微球濃度(×108/ml)、微球直徑(μm)從表4中可以看出輸出功率選擇在8、9擋位置(輸出功率約為200w左右)、聲振時間60秒時效果較好。將經(jīng)過聲振合成處理的溶液引入分液罐中，分液罐呈圓錐形，微球混懸液放于其中后充分混勻(約10分鐘)，放置10～20分鐘后分層，此時過小的微球因浮力最小在最下層，大的微球因浮力大分布在上層，而過大的微球和泡沫則分部在最上層，將微球混懸液從分液罐下部出口放入至分裝罐內(nèi)，而最上層的泡沫和過大微球則留在分液罐內(nèi)被除去。將分裝罐內(nèi)液體充分混勻(約30分鐘)，用庫爾特儀測定微球的濃度和粒徑分布，將其平均濃度控制在1-2×10/ml之間，平均粒徑在2-4μm之間，微球粒徑分布控制在小于2μm的微球百分比占20-25％，2-6μm的微球百分比占70-75％，大于6μm的微球百分比占5％，大于7μm的微球百分比1％，大于10μm的微球百分比0.5％。如濃度太稀，濃縮的方法為液體分層后，按需濃縮的量，將下層澄清的液體移去；如需稀釋則加入5％人體白蛋白溶液。微球濃度調(diào)試完畢后，將分裝罐充分混勻(約15分鐘)，開始分裝，以每瓶5ml裝量。之后，將上述瓶裝藥液移入冰冷干燥機內(nèi)進行真空低溫干燥15-24小時，干燥完畢后瓶內(nèi)注入全氟丙烷氣體，自動壓膠塞和鋁蓋，即制得成品。權(quán)利要求1.一種用于制造超聲診斷造影劑的制備液，其特征在于組分及含量(重量百分比)如下蛋白質(zhì)1～10％、糖類5～20％、余量為溶劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于制造超聲診斷造影劑的制備液，其特征在于組分還包括有甘油，其含量為0.1～5％。3.一種用于制造超聲診斷造影劑的制備液，其特征在于組分及含量(重量百分比)如下蛋白質(zhì)1～10％、甘油0.1～5％，余量為溶劑。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述用于制造超聲診斷造影劑的制備液，其特征在于組分還包括有糖類，其含量為5～20％。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4所述用于制造超聲診斷造影劑的制備液，其特征在于上述蛋白質(zhì)為人體白蛋白，含量以3～7％為較佳范圍值，其中以5％為最佳。6.根據(jù)權(quán)利要求1或3所述用于制造超聲診斷造影劑的制備液，其特征在于上述糖類包括果糖(左旋糖)、葡萄糖(右旋糖)。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述用于制造超聲診斷造影劑的制備液，其特征在于上述糖類較佳范圍值為5％～15％，最佳效果值為10％。8.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述用于制造超聲診斷造影劑的制備液，其特征在于上述甘油較佳加入量為0.8～2％，最佳值為1％。9.用上述制備液生產(chǎn)制造造影劑的方法，其特征在于工藝過程如下(1)、原料準(zhǔn)備按上述配方將各組成按比例投料，混合后攪勻成為制備液，將其過濾后加熱至50℃～100℃；(2)、聲振合成微球?qū)⑸鲜鲆鸭訜嶂苽湟阂砸欢魉倭魅肼曊駜x的聲振室內(nèi)，不溶性氣體以一定流速從聲振室底部進氣口通入溶液內(nèi)，聲振儀的發(fā)射頭置于溶液面下0.3～1.5cm處，溶液中蛋白質(zhì)受超聲振動產(chǎn)生空化作用，包裹不溶性氣體形成大量粒徑不一的微球，將經(jīng)過聲振合成處理的溶液引入分液罐內(nèi)；(3)、去除大微球?qū)⒎忠汗拗械娜芤夯靹蚝箪o置分層，將中、下層溶液引入分裝罐內(nèi)，最上層的泡沫和過大微球則留在分液罐內(nèi)被除去；(4)、半成品檢測控制及分裝將分裝罐內(nèi)溶液充分混勻，測定溶液中微球各項指標(biāo)如微球濃度、平均粒徑、粒徑分布等并按現(xiàn)有方法調(diào)整至要求值，然后將符合要求的溶液再次充分混勻，之后分裝入小支包裝瓶內(nèi)；(5)、制成成品將上述瓶裝藥液移入冰冷干燥機內(nèi)進行真空低溫干燥，制成凍干粉針劑，向瓶內(nèi)注入與被包裹不溶性氣體相同的氣體，封蓋即成。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述制備造影劑的方法，其特征在于上述步驟1中蛋白質(zhì)采用人體白蛋白，加熱溫度控制在65～72℃，最好是68～70℃。11.根據(jù)權(quán)利要求9所述制備造影劑的方法，其特征在于上述步驟1中制備液經(jīng)0.3～0.6μm、最好是0.4μm的微孔濾膜過濾。12.根據(jù)權(quán)利要求9所述制備造影劑的方法，其特征在于上述步驟3中所用的的不溶性氣體為碳氟類不溶性氣體，其中以全氟丙烷氣體為最佳。13.根據(jù)權(quán)利要求9所述制備造影劑的方法，其特征在于上述步驟3中所述聲振儀的超聲發(fā)射頭置于溶液液面下0.5～1cm為佳。14.根據(jù)權(quán)利要求9或13所述制備造影劑的方法，其特征在于上述聲振儀選用美國熱系統(tǒng)公司生產(chǎn)的XL2020型聲振儀，工作輸出功率為200w，聲振時間為60秒。全文摘要一種用于制造超聲診斷造影劑的制備液及用其制備造影劑方法。本發(fā)明的制備液各組分及含量(重量百分比)如下:蛋白質(zhì)1～10%、糖類5～20%或甘油0.1～5%,余量為溶劑。用上述制備液制造造影劑方法包括原料準(zhǔn)備、聲振合成微球、去除大微球、半成品檢測控制及分裝、真空低溫干燥制成干粉針劑。本發(fā)明微球產(chǎn)率提高,微球平均直徑減小,有效微球比例上升,微球均一性好,從而有效提高造影劑品質(zhì),降低生產(chǎn)成本。文檔編號A61K49/22GK1194161SQ98105120公開日1998年9月30日申請日期1998年3月6日優(yōu)先權(quán)日1998年3月6日發(fā)明者陳志良,劉伊麗,陳樹抗,查道剛,侯連兵,金偉軍申請人:南方醫(yī)院藥學(xué)部