專利名稱：腦水腫抑制劑的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療或防止腦水腫的組合物，其含有內皮素拮抗劑作為活性成分。
背景技術：
腦水腫指腦的一種病癥，活體中的水已經在腦實質內蓄集，增大了腦組織的體積。引起腦水腫的因素是，例如，可以例舉的是腦血管疾病，例如中風，頭傷，腦瘤，高血壓，呼吸不暢，CO中毒，低鈉血，急性腎病，血液透析引起的失衡綜合癥，高血糖，低血糖，腎上腺機能不全，膠原性疾病，和錫，鉛，砷中毒。特別是，治療急性狀態(tài)中風或由頭傷引起的腦水腫是一個要解決的非常重要的問題。而且，腦水腫可能引起大腦的大腦疝，頭痛，惡心，嘔吐，不安，痙攣，意識模糊等等。特別是大腦疝的惡化有時會引起患者死亡。
根據(jù)發(fā)生機理，腦水腫可以分類為細胞毒性水腫，血管因素(Vasogenic)水腫等，但是這些類型的水腫經常一同表現(xiàn)出來，所以腦水腫的病因學還不十分清楚。人們希望弄清病因并找到治療方法。
目前，高滲藥物或腎上腺皮質甾類藥物等被用來治療腦水腫。
作為高滲藥物，可以舉例的是10％甘油，5％加了果糖的生理鹽水，15％或20％甘露糖醇等。靜脈中給與這些高滲藥物提高血滲透壓，在腦實質組織和血液之間產生不同的壓力；結果使腦組織中蓄集的水進入血流以減輕腦水腫。而且這些藥物的特征在于它們很少通過血腦屏障達到腦實質組織，所以有極小副作用。但是使用這些藥物，當大量使用時血濃度達到很高，不能完全避免某些程度上在腦中有蓄集。血腦屏障損傷的情況下，藥物容易進入腦；如果停止給藥后藥物血濃度減小，并且腦組織中的滲透壓變得比血中的滲透壓高，則血中的水分可能移回到腦實質組織中，可能又出現(xiàn)腦水腫。這些藥物還有例如電解像差，腎病等副作用。
作為腎上腺皮質甾類藥物，可以例舉的有地塞米松，氫化可的松，等等。這些腎上腺皮質甾類藥物對腦瘤相關的腦水腫有改善作用，但是這些藥物對局部缺血和外傷腦水腫幾乎沒有效果，且有副作用，如消化道出血，感染的疾病加重，糖尿病加重等。
近來，鈣拮抗劑如硝苯吡酯，硝吡胺甲酯，NC 1100等作為治療腦水腫的替代藥物已引起了人們的注意。據(jù)報道，使用這些鈣拮抗劑的前期治療延緩了細胞腦水腫的發(fā)展。MK-801，一種谷氨酸酯拮抗劑，也已知對腦水腫有抑制效果。但是，這些對腦水腫有抑制效果的鈣拮抗劑和谷氨酸酯拮抗劑還沒有用于臨床。
本發(fā)明的公開內容在上述情況下，本發(fā)明人深入研究并發(fā)現(xiàn)了對腦水腫有優(yōu)越抑制效果的藥物。并發(fā)現(xiàn)內皮素拮抗劑抑制腦水腫。
因此，本發(fā)明提供一種治療或預防腦水腫的組合物，其含有內皮素拮抗劑作為活性成分。本發(fā)明提供了一種治療或預防腦水腫的方法，該方法包括施用有效量的一種內皮素拮抗劑。本發(fā)明涉及內皮素拮抗劑在制備治療或預防腦水腫藥物的用途。
目前，已有報道說內皮素拮抗劑只有作為治療或預防內皮素引起的疾病的藥物的可能性，例如蛛網膜下出血后大腦血管收縮，高血壓，局部缺血性疾病，大腦循環(huán)失調，腎機能不全，哮喘等。
在本說明書中，術語“內皮素拮抗劑”包括具有內皮素拮抗活性的所有化合物，具有內皮素拮抗活性的任何化合物優(yōu)選用于本發(fā)明。這些化合物之典型的例子包括下面式(I)化合物
其中R1是氫或一個可代謝的酯殘基；R2是氫或-R3-R4，其中R3是-SO3-，-CH2COO-，-COCOO-，或-COR5COO-，其中R5是有1至6個碳原子的亞烷基，或有2至6個碳原子的亞鏈烯基，和R4是氫或有1至6個碳原子的烷基，(下文指化合物(I))，可藥用鹽(WO92/12991，JP-A7-53484)或其水合物，bosentan(對-叔丁基-N-[6-(2-羥基乙氧基)-5-(鄰-甲氧基苯氧基)-2-(2-嘧啶基)-4-嘧啶基]-苯磺酰胺；英國藥學期刊(British Journalof Pharmacology，1994.11月，113(3)845-852)，環(huán)[D-天冬氨酰基-L-[3-(4-苯基哌嗪-1-基羰基)]-丙氨?；?L-天冬氨酰基-D-[2-(2-噻吩基)]甘氨?；?L-亮氨?；?D-色氨酰基]二鈉(下文稱作TAK-044；生活科學(Life Science)1994，55(4)，301-31O)，環(huán)[D-Asp-L-Pro-D-Val-L-Leu-D-Trp](下文稱作BQ-123；《生活科學》(Life Science)，1992，50，247-255)，2(R)-[2(R)-[2(S)[[1-(六氫-1H-吖庚因基)]羰基]氨基-4-甲基戊?；鵠氨基-3-[3-(1-甲基-1H-吲哚基)丙酰基]氨基-3-(2-吡啶基)丙酸(FR 139317；藥物學(Pharmacology)1994，49(5)，319-324)，(1S，2R，3S)-3-(2-羧基甲氧基-4-甲氧基苯基)-1-(3，4-亞甲二氧基苯基)-5-(丙-1-基氧基)-1，2-二氫化茚-2-羧酸(SB-209670；生物化學(Biochemistry)，1994，12月，33(48)，14543-14549)，3-苯并-[1，3]-間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-5-羥基-5-(4-甲氧基苯基)-4-(2，3，4-三甲氧基芐基)-5H-呋喃-2-酮(PD-156125；國際公開No.WO 95/05376)，和(-)-N-(4-異丙基苯磺?；?-α-(4-羧基-2-正丙基苯氧基)-3，4-亞甲二氧基苯基乙酰胺(L-754142；藥物學和實驗治療學期刊(The Journalof Pharmacology and Experimental Therapeutics)1995，275(3)，1518-1526)等等。
附圖簡要說明

圖1顯示化合物(I-Na)對腦水腫的效果?？v軸表示腦中水含量(％)，橫軸代表腦的部分?！癆CA”，“MCA”和“尾狀殼”分別指前大腦動脈供給的大腦皮層和中大腦動脈供給的大腦皮層和紋狀體。從左邊起條框分別代表假操作組(N＝5)，給與賦形劑組(N＝13)，局部缺血前給藥組(N＝6)，和局部缺血后給藥組(N＝7)。數(shù)據(jù)以有標準誤差的平均值表示。與星號代表與賦形劑組比較有顯著性差異，P＜0.05。
圖2顯示化合物(I-Na)對腦水腫的劑量依賴性效果?？v軸代表腦中水含量(％)，橫軸代表腦的部分?！癆CA”，“MCA”和“尾狀殼”代表上述相同含義。從左側起的條框分別代表假操作組(N＝5)，給與賦形劑組(N＝13)，以0.03mg/kg/小時劑量給與化合物(I-Na)的組(N＝6)，以0.1mg/kg/小時劑量給與化合物(I-Na)的組(N＝7)，以0.3mg/kg/小時劑量給與化合物(I-Na)的組(N＝6)，和以1.0mg/kg/小時劑量給與化合物(I-Na)的組(N＝6)。數(shù)據(jù)以有標準誤差的平均值表示。星號和雙星號表示與賦形劑組比較有顯著性差異，P＜0.05和0.01。
圖3顯示bosentan對腦水腫的效果?？v軸代表腦中水含量(％)，橫軸代表腦的部分?！癆CA”，“MCA”和“尾狀殼”指上述相同意義。從左側起條框分別代表給與賦形劑組(N＝13)和局部缺血后給藥組(N＝5)。數(shù)據(jù)以有標準誤差的平均值表示。星號代表與賦形劑組比較有顯著性差異，P值＜0.05。
圖4顯示TAK-044對腦水腫的效果?？v軸代表腦中水含量(％)，橫軸代表腦的部分?！癆CA”，“MCA”和“尾狀殼”指上述相同含義。從左側起條框分別代表給與賦形劑組(N＝7)，局部缺血后給藥組(N＝7)。數(shù)據(jù)以有標準誤差的平均值表示。星號表示與賦形劑組比較有顯著性差異，P值＜0.05。
圖5顯示BQ-123對腦水腫的效果?？v軸代表腦中水含量(％)，橫軸代表腦的部分?！癆CA”，“MCA”和“尾狀殼”指上述相同含義。從左側起條框分別代表給與賦形劑組(N＝8)，局部缺血后給藥組(N＝7)。數(shù)據(jù)以有標準誤差的平均值表示。星號表示與賦形劑組比較有顯著性差異，P值＜0.05。
發(fā)明的優(yōu)選實施方案在本發(fā)明中，具有內皮素拮抗活性的任何化合物優(yōu)選用作內皮素拮抗劑。具體例舉的是化合物(I)，其可藥用鹽和水合物，bosentan可藥用TAK-044，和BQ-123等等。優(yōu)選化合物(I)和其可藥用鹽和水合物并且特別優(yōu)選其中R1是氫且R2是-COCH＝CHCOOH的化合物(I)及其可藥用鹽和水合物。
在本發(fā)明說明書中，“可代謝的酯殘基”指在活體中水解產生生物活性羧酸基團的酯殘基。
上述可代謝酯殘基的例子包括具有1至6個碳原子的烷基，如甲基，乙基，叔丁基等；芳基，如苯基等；(1-酰氧基)烷基，如新戊酰氧基甲基，乙酰氧基甲基，1-乙酰氧基乙基等；1-(烷氧羰氧基)烷基，如1-(乙氧基羰氧基)乙基，1-(異丙氧基羰氧基)乙基等；和(5-甲基-1，3-間二氧雜環(huán)戊烯-4-基)甲基等。
術語“有1至6個碳原子的烷基”指直鏈或支鏈烷基，例如甲基，乙基，丙基，叔丁基等。術語“烷基”指上述相同含義。
“具有2至6個碳原子的亞烷基”指，例如，亞甲基，亞乙基，三亞甲基等。優(yōu)選的實施方案是式-(CH＝CH)m-(m代表1-3的整數(shù))所示的基團。
化合物(I)可以生成其可藥用鹽，例如與無機酸成鹽，這樣的無機酸例如鹽酸，硫酸；硝酸，磷酸，氫氟酸，氫溴酸等；與有機酸成鹽，這樣的有機酸例如甲酸，乙酸，酒石酸，乳酸，檸檬酸，富馬酸，馬來酸，琥珀酸，甲磺酸，乙磺酸，苯磺酸，甲苯磺酸，萘磺酸，樟腦磺酸等；與有機堿成鹽，有機堿例如是氨，三甲胺，三乙胺，等；與堿金屬如鈉，鉀等成鹽，或與堿土金屬例如鈣，鎂等成鹽。
化合物(I)可以形成其水合物，每分子化合物(I)可以與一個或多個水分子配位。
本發(fā)明治療或預防腦水腫的組合物是有降低顱壓的作用，并且對所有類型腦水腫具有抑制效果，不用考慮發(fā)病機理。并且其對治療局部缺血性和外傷性腦水腫特別有效。而且其對梗塞有改善效果。
本發(fā)明用于腦水腫的組合物在已經引起或可能引起腦水腫的情況下，例如腦血管疾病如中風，頭傷，腦瘤等，在這些情況下給藥時對治療或預防腦水腫是有效的。而且本發(fā)明用于腦水腫的組合物對于治療或預防腦水腫引發(fā)的大腦疝，意識模糊等也是有效的。其對治療急性狀態(tài)下中風和由頭傷引起的腦水腫也是有效的。
當本發(fā)明用于腦水腫的組合物以藥物組合物施用時，其口服或腸胃外給藥都是安全的。在口服情況下，其可以任何常規(guī)形式給藥，如片劑，粒劑，粉劑，膠囊劑，丸劑，溶液，懸浮液，糖漿，口腔含片，舌下含片等。當該組合物腸胃外給藥時，優(yōu)選任何常規(guī)形式，例如注射劑，如靜脈內注射或肌內注射，栓劑，經皮給藥，吸入劑等，并且特別優(yōu)選靜脈內注射。
本發(fā)明藥物組合物可以通過(如果需要)混合有效量的活性成分和適于最后給藥形式的各種藥學成分而制備，所述各種藥學成分例如賦形劑，粘合劑，濕潤劑，崩解劑，潤滑劑，和稀釋劑。當組合物是注射劑時，活性成分可以用合適的載體滅菌，得到藥物組合物。
具體地說，賦形劑的例子包括乳糖，蔗糖，葡萄糖，淀粉，碳酸鈣，結晶纖維素等，粘合劑的例子包括甲基纖維素，羧甲基纖維素，羥丙基纖維素，明膠，聚乙烯吡咯烷酮等，崩解劑的例子包括羧甲基纖維素，羧甲基纖維素鈉，淀粉，藻酸鈉，瓊脂，月桂硫酸鈉，等，潤滑劑的例子包括滑石，硬脂酸鎂，聚乙二醇等。可可油，聚乙二醇，甲基纖維素等可以用作栓劑的基質材料。當組合物制備成溶液，乳化的注射液或懸浮的注射液時，可以加入促溶劑，懸浮劑，乳化劑，穩(wěn)定劑，防腐劑，等滲劑等，當其制備成口服藥物時，可以加入甜味劑，調味劑等。
雖然該化合物作為腦水腫抑制劑和劑量要考慮患者年齡，體重，給藥途徑，疾病的類型和程度而確定，但對于成人來說該化合物一般以1μg-200mg/kg/天單劑或分開劑量口服給藥。在腸胃外給藥的情況下，盡管劑量在很大程度上取決于給藥途徑，但化合物可以以0.1μg-20mg/kg/天單劑或分開劑量給藥。
實施例本發(fā)明通過下面的實施例及實驗進一步解釋，但不是要限制本發(fā)明范圍。實驗方法(1)實驗用動物讓12周齡的雄性Wistar大鼠(270g至320g，Japan SLC，Inc.)先進食至少一周，并用于實驗。
(2)制備病灶大腦局部缺血-再灌注模型通過改進Longa等的方法(中風(Stroke)，1989，Vol.20，pp.84-91)制備病灶大腦局部缺血一再灌注模型。大鼠用2％氟烷麻醉，暴露出右大頸動脈，右外側頸動脈(ECA)被小心切除，結扎，并切割。右外頸動脈翻轉，將用硅涂覆的4-0尼龍線(18mm)從右外頸動脈插入到右內頸動脈，堵塞右中大腦動脈的源頭。線的末端連接到外頸動脈，防止血液倒流，停止麻醉。麻醉停止后，大鼠體溫保持37℃，在15分鐘內左側前腿出現(xiàn)輕度偏癱的大鼠在下面的實驗中用作有局部缺血癥狀的模型。中大腦動脈堵塞60分鐘后，再次麻醉大鼠，取出線，使通過右大頸動脈對局部缺血區(qū)再灌注。
(3)腦水腫(腦中水含量)的測定方法局部缺血再灌注24小時后，大鼠在戊巴比妥(Pentbarbital)麻醉下實施斷頭術，并取出腦。腦在增濕器中用鑷子分成三部分(a)前大腦動脈供給的大腦皮層(局部缺血鄰近的皮層；ACA)，(b)中大腦動脈供給的大腦皮層(局部缺血皮層；MCA)，和尾狀殼(局部缺血核心)。測定每個樣品的濕重后，樣品在105℃干燥24小時，測定干重。根據(jù)下式計算水含量，并用作腦水腫指數(shù)。
腦中水含量(％)＝(濕重-干重)/濕重×100實驗1局部缺血前給藥和局部缺血后給藥時化合物(I-Na)對腦水腫的抑制效果其中R1是Na，R2是-COCH＝CHCOONa的式(I)代表的化合物(下文稱作化合物(I-Na))溶解于生理鹽水中，并用作內皮素拮抗劑。
在局部缺血前給藥組中，裝有化合物(I-Na)的滲透壓泵在中大腦動脈閉塞(局部缺血嚴重區(qū))之前24小時皮下包埋于大鼠的背部。從局部缺血發(fā)生前24小時至再灌注后24小時通過連續(xù)皮下組織給藥(12mg/kg/天)給與化合物(I-Na)。在局部缺血后給藥組中，再灌注后立即從尾靜脈(團塊給藥)靜脈內注射(12mg/kg)給藥化合物(I-Na)，并從再灌注后10分鐘至24小時通過連續(xù)皮下組織給藥(12mg/kg/天)進一步給藥。
再灌注24小時后，與假操作組相比，給與賦形劑組中局部缺血區(qū)腦中水含量明顯增加，這說明前一組中發(fā)生腦水腫。
局部缺血前給藥化合物(I-Na)在ACA和MCA區(qū)明顯抑制腦水腫的形成，但在尾狀殼區(qū)不抑制其形成(圖1)。
局部缺血后給藥化合物(I-Na)不只在ACA和MCA區(qū)，而且也在尾狀殼區(qū)明顯抑制腦水腫的形成(圖1)。該結果表明，即使在局部缺血后給藥化合物(I-Na)也明顯抑制腦水腫的形成。實驗2化合物(1-Na)的劑量對腦水腫抑制效果的影響溶解于生理鹽水中的化合物(1-Na)加入到埋在大鼠后背的滲透壓泵中，然后在局部缺血再灌注后10分鐘至24小時通過聚乙烯管從股靜脈給藥(0.03-1.0mg/kg/小時)。作為結果，化合物(I-Na)劑量依賴性地而且明顯地在0.1-1.0mg/kg/小時劑量時抑制腦水腫的形成(圖2)。在所有ACA區(qū)，MCA區(qū)，和尾狀殼發(fā)現(xiàn)了該效果。該效果在0.3mg/kg/小時時最大，最小有效量認為是0.1mg/kg/小時。實驗3其它內皮素拮抗劑對腦水腫的抑制效果Bosentan，TAK-044和BQ-123各溶解于生理鹽水中，加入到埋在大鼠后背的滲透泵中，在局部缺血再灌注后10分鐘至24小時通過聚乙烯管自兩腿分叉處靜脈給藥(0.3/mg/kg/小時)。作為結果，腦水腫形成在ACA和MCA區(qū)被明顯抑制，在尾狀殼中度抑制(圖3，4和5)。制劑1化合物(I-Na)50mg乳糖46mg玉米淀粉20mg低取代的羥丙基纖維素8mg羥丙基甲基纖維素5mg硬脂酸鎂1mg總計130mg均勻混合除羥丙基甲基纖維素和硬脂酸鎂外的所有上述成分，向該混合物中加入作為粘合劑的8％(w/w)羥丙基甲基纖維素水溶液，用常規(guī)濕造粒方法，得到用于制造片劑的顆粒。這些顆粒與硬脂酸鎂混合后通過壓片形成口服片劑(7mm直徑，130mg/片)。制劑2TAK-044 50mg生理鹽水200mlTAK-044溶解于生理鹽水，得到滴注液。
本發(fā)明效果本發(fā)明用于腦水腫的組合物可以被給藥，以治療或預防已經或可能引起腦水腫情況下的腦水腫。
權利要求
1.治療或預防腦水腫的組合物，其包括含有一種內皮素拮抗劑作為活性成分。
2.權利要求1所述的組合物，其中內皮素拮抗劑是下面式(I)化合物
其中R1是氫或可代謝的酯殘基；R2是氫或-R3-R4，其中R3是-SO3--CH2COO-，-COCOO-，或-COR5COO-，其中R5是有1至6個碳原子的亞烷基或有2至6個碳原子的亞鏈烯基，R4是氫或有1至6個碳原子的烷基，其可藥用鹽或水合物，bosentan，環(huán)[D-天冬氨酰基-L-[3-(4-苯基哌嗪-1-基羰基)]-丙氨?；?L-天冬氨?；?D-[2-(2-噻吩基)]甘氨酰基-L-亮氨?；?D-色氨酰基]二鈉或環(huán)[D-Asp-L-Pro-D-Val-L-Leu-D-Trp]。
3.權利要求2所述的組合物，其中內皮素拮抗劑是其中R1是氫，R2是-COCH＝CHCOOH的式(I)代表的化合物，或其可藥用鹽或水合物。
4.一種治療或預防腦水腫的方法，其包括施用有效量的內皮素拮抗劑。
5.內皮素拮抗劑在制備治療或預防腦水腫藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療或預防腦水腫的組合物,其包括含有一種內皮素拮抗劑為活性成分,內皮素拮抗劑例如是下面式(Ⅰ)化合物,式其可藥用鹽或水合物,bosentan,環(huán)[D－天冬氨?；璍－[3－(4－苯基哌嗪－1－基羰基)]－丙氨?；璍－天冬氨?；璂－[2－(2－噻吩基)]甘氨?；璍－亮氨?；璂－色氨?；鵠二鈉或環(huán)[D－Asp－L－Pro－D－Val－L－Leu－D－Trp]。而且,本發(fā)明提供一種治療或預防腦水腫的方法,其包括施用有效量的內皮素拮抗劑,以及內皮素拮抗劑在制備治療或預防腦水腫藥物的用途。內皮素拮抗劑對所有腦水腫有抑制效果,不用考慮其發(fā)生機理,因此在治療或預防腦水腫方面是非常有用的。
文檔編號A61K31/225GK1186441SQ96194363
公開日1998年7月1日 申請日期1996年5月29日 優(yōu)先權日1995年6月2日
發(fā)明者二宮光義, 松尾嘉之 申請人:鹽野義制藥株式會社