專利名稱：逆轉(zhuǎn)錄病毒抑制劑組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的栗精胺酯與短肽類似物的組合物，該組合物在其組合中可以有效地治療逆轉(zhuǎn)錄病毒的感染，尤其是用于治療獲得性免疫缺陷癥候群(AIDS)和相關(guān)的人免疫缺陷病毒(HIV)的感染。
為了開發(fā)用于治療和治愈逆轉(zhuǎn)錄病毒對人和動物的感染，尤其是獲得性免疫缺陷癥候群(AIDS)以及艾滋病相關(guān)綜合癥(ARC)的方法，近幾年已進(jìn)行了深入的研究?，F(xiàn)在公眾認(rèn)識到艾滋病逆轉(zhuǎn)錄病毒對于健康的嚴(yán)重危脅，并且ARC與AIDS在人中的發(fā)病率正以驚人的速度增加。而且，感染艾滋病病毒后能夠存活五年以上的人很少。此外，艾滋病患者的免疫系統(tǒng)由于此感染已嚴(yán)重受到損傷，他們有極多的機(jī)會感染和患有增生性疾病，包括卡氏肺囊蟲肺炎和卡波濟(jì)肉瘤。皆知艾滋病是不能治愈的，現(xiàn)行的治療方法沒有足夠的證據(jù)證明其有效性且有很多不適當(dāng)?shù)母弊饔谩Ｓ捎谠摷膊〉膰?yán)重性和死亡的結(jié)局，人們對艾滋病的恐懼致使社會對患有或懷疑患有該病的人采取排斥和歧視的態(tài)度。
艾滋病病毒屬于一類逆轉(zhuǎn)錄病毒。作為一類的很多已知的逆轉(zhuǎn)錄病毒也可致癌或引起腫瘤。實(shí)際上隨著頭兩種人逆轉(zhuǎn)錄病毒的發(fā)現(xiàn)，即I型和II型人T細(xì)胞白血病病毒(HTLV—I和II)證明在T淋巴細(xì)胞被感染后可引起人罕見的白血病。發(fā)現(xiàn)的第三種這樣的人病毒是HTLV—III，即現(xiàn)稱HIV，這種病毒被證明在T淋巴細(xì)胞被感染后可引起細(xì)胞死亡并已被認(rèn)定為獲得性免疫缺陷癥侯群(AIDS)和艾滋病相關(guān)綜合癥(ARC)的病原體。
逆轉(zhuǎn)錄病毒是一類含核糖核酸(RNA)的病毒，這類病毒通過利用逆轉(zhuǎn)錄酶的活性進(jìn)行復(fù)制，形成一條互補(bǔ)DNA(cDNA)，由此產(chǎn)生雙鏈的前病毒DNA。這個前病毒DNA然后摻入到宿主細(xì)胞的染色體DNA中，通過此整合DNA的轉(zhuǎn)錄并將病毒的信使RNA翻譯成蛋白質(zhì)使病毒復(fù)制成為可能。病毒的復(fù)制是通過病毒基因組RNA的合成以及與糖基化或非糖基化的病毒蛋白裝配成新的病毒顆粒而發(fā)生的。在細(xì)胞表面的病毒粒子的成熟導(dǎo)致釋放出傳染性病毒子代。
逆轉(zhuǎn)錄病毒的蛋白質(zhì)一般被合成為多聚蛋白，并且需要病毒編碼的蛋白酶將前體多聚蛋白裂解為病毒的酶和結(jié)構(gòu)蛋白。例如，逆轉(zhuǎn)錄病毒的前體多聚蛋白gag和gag—pol被合成為病毒編碼的酶和非糖基化結(jié)構(gòu)蛋白的前體。同樣，HIV的被膜蛋白是一種160KDa高度糖基化的前體蛋白。該被膜蛋白被宿主細(xì)胞的蛋白酶裂解成120KDa的外部糖蛋白(gp120)和跨膜糖蛋白(gp41)。gp120蛋白含有一個高親和力的結(jié)合位點(diǎn)，可以識別位于CD4—陽性人T—輔助細(xì)胞上的CD4配體，即該病毒的已知受體。
逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶還可以通過被天冬氨酰蛋白酶特異性抑制劑抑制，而顯示出某種共性。(Iyoko，et al.Nature 329,654—67)。同樣，逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶的氨基酸序列分析表明它們具有序列同源性。由于它們相互間在結(jié)構(gòu)和功能上的特點(diǎn)以及它們特有的功能，天冬氨酰蛋白酶有可能成為重要治療靶點(diǎn)。
正確加工的逆轉(zhuǎn)錄病毒的被膜糖蛋白在病毒的生活周期中起重要的作用，所以也有可能成為臨床干預(yù)的靶點(diǎn)。在病毒粒子與靶宿主細(xì)胞起始的相互作用和后來病毒穿入宿主細(xì)胞膜過程中，病毒的被膜與宿主細(xì)胞膜相融合的作用中被膜糖蛋白起一定的作用。一些栗精胺酯可用于干擾病毒被膜糖蛋白的加工過程，因而可用于阻止開始的病毒—宿主細(xì)胞的相互作用及后來的融合。
本申請人發(fā)現(xiàn)天冬氨酰蛋白酶特異性抑制劑(式II)與糖蛋白加工抑制劑如栗精胺衍生物(式I)的組合物，對于HIV病毒的抑制作用有明顯的提高，這是未預(yù)料到的。
本藥物組合物由葡糖苷酶抑制劑(式I)和病毒天冬氨酰蛋白酶抑制劑(式II)所組成。
本藥物組合物是式I和式II及其藥用加成鹽，是新型的組合物，并具有有價值的藥理特性。這些組合物常?？梢詤f(xié)同地有效抑制HIV的活性，所以可以用于預(yù)防或治療病毒性感染，尤其是HIV的感染。
本發(fā)明的目的是提供用作治療上的有效物質(zhì)的式I和式II的組合物及其上述鹽類、含有這些化合物及其鹽的藥物、其制備方法，以及這些組合物和鹽類用于控制或預(yù)防某些疾病，尤其是用于治療或預(yù)防HIV感染的用途。
式I化合物或它們的藥用鹽具有下式的結(jié)構(gòu) 其中，R，R1和R2各自獨(dú)立地為氫，C1-14烷酰基，C1-14烯?；h(huán)己基羰基，C1-6烷氧乙酰基， 萘羰基，可任選被甲基或鹵素取代；苯基(C2-6烷?；?，其中苯基可任選地被甲基或鹵素取代；肉桂?；?；吡啶羰基，可任選地被甲基或鹵素取代；二氫吡啶羰基，可任選地被C1-10烷基取代；噻吩羰基，可任選地被甲基或鹵素取代；呋喃羰基，可任選地被甲基或鹵素取代；Y為氫，C1-4烷基，C1-4烷氧基，鹵素、三氟甲基、C1-4烷磺?；?、C1-4烷基巰基、氰基或二甲氨基；Y’為氫、C1-4烷基、C1-4—烷氧基、鹵素或與Y共同為3，4—亞甲二氧基；Y”為氫，C1-4烷基，C1-4烷氧基或鹵素；選定R、R1和R2時應(yīng)至少一個是氫但不能多于兩個。
上面所提的C1-14烷?；蔀橹辨溁蛑ф溁颦h(huán)狀，有代表性的可為甲酰基，乙酰基，丙酰基，丁酰基，異丁酰基，環(huán)丙羰基，己酰基，辛?；凸秕；?。上面所提的C1-14烯酰基可為直鏈或支鏈或環(huán)狀，但至少應(yīng)有一個碳—碳雙鏈，有代表性的可為丙烯?；∠；?，異丁烯?；?，己烯酰基，辛烯酰基和癸烯?；?。上面所提的C1-6烷氧乙?；蔀榧籽跻阴；?，乙氧乙?；投⊙跻阴；?。上面所提的鹵素有代表性的可為氟，氯，溴和碘。上面所提的C2-6烷?；写硇缘目蔀橐阴；?，丙?；?，丁?；惗□；图乎；?。上面所提的C1-4烷基，無論是它本身或作為烷氧基，烷磺酰基或烷基巰基的一部分，可為直鏈或支鏈的含有1至4個碳原子的烷基。這類各種基團(tuán)的實(shí)例有甲基、乙基、丙基、丁基、甲氧基、乙氧基、丁氧基、甲磺?；⒁一酋；⒓谆鶐€基和乙基巰基。上面所提的苯基(C2-6烷?；?有代表性的可為苯乙酰基和苯丙?；Ｉ厦嫠岬母鞣N萘羰基，吡啶羰基，噻吩羰基和呋喃羰基包括它們的各種位置異構(gòu)體，有代表性的可為萘—1—羰基，萘—2—羰基，煙?；?，異煙酰基，N—甲基—二氫吡啶—3—羰基，噻吩—2—羰基，噻吩—3—羰基，呋喃—2—羰基和呋喃—3—羰基。萘，吡啶，噻吩和呋喃基團(tuán)可任選地被上述基團(tuán)進(jìn)一步取代。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物是，其中R，R1和R2為1或2個烷?；；虮籝，Y’和Y”(Y，Y’和Y”定義如前所述)任選取代的苯甲?；?，尤其可為C1-4烷酰基或被烷基或鹵素任選取代的苯甲?；?。
更優(yōu)選的式I化合物是，其中R，R1和R2之一為烷酰基或苯甲?；?，尤其可為C1-8烷酰基，C1-8烯?；虮煌榛螓u素任選取代的苯甲酰基，另外兩個基團(tuán)為氫。更加優(yōu)選的式I化合物為，其中R，R1和R2之一為C1-8烷?；?，C1-8烯?；虮煌榛螓u素，尤其是甲基、溴、氯或氟基團(tuán)任選取代的苯甲?；?，R，R1和R2中的另兩個為氫。
最優(yōu)選的式I化合物為，其中R1是C1-8烷?；1-8烯?；虮煌榛螓u素，特別是甲基，溴，氯或氟基團(tuán)任選取代的苯甲?；谆?、溴、氯或氟基團(tuán)最好在對位上R和R2各自為氫。
以取代基分類命名的特別優(yōu)選的化合物如下1.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—苯甲酸酯；2.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇7—苯甲酸酯；3.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—(4—甲基苯甲酸酯)；4.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇7—(4—溴苯甲酸酯)；5.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6，8—二丁酸酯；6. 權(quán)利要求1的栗精胺酯是〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—丁酸酯；7.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—(2—呋喃甲酸酯)；8.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇7—(2，4—二氯苯甲酸酯)；9.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—(3—己烯酸酯)；10.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8 αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—辛酸酯；11.〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—戊酸酯；
某些化合物是優(yōu)選的。式I優(yōu)選的化合物是〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—丁酸酯；式I化合物的制備方法和優(yōu)選的化合物組載于美國專利5,017,563上，于1991年4月21日授權(quán)，在此引述作為參考文獻(xiàn)。栗精胺的制備方法也載于美國專利5066807上，于1991年11月19日授權(quán)在此引述作為參考文獻(xiàn)。
式II化合物其水合物，異構(gòu)體，藥用鹽具有下式的結(jié)構(gòu) 其中X為零或1P1為Q，或B，B是 前提是B不能為對羥芐基或?qū)ν檠跗S基，a為零，1，2或3，b為零或1，c為零或1，2，3，4或5，d為1或2e為零，1或2Q為 P2為C1-6烷基，環(huán)戊基，環(huán)己基，羥基—C1-6亞烷基， T為H或C(O)R4，CH2CONHR4或CH2CONHR4；R為氫，—CH2CHO，羥基—C1-6亞烷基，C1-6烷氧—C1-6亞烷基，C1-6烷基，苯基， 或Q，R1為芐氧基，C1-6烷氧基，C1-6烷基，苯基，芐基，苯乙基，芴基亞甲氧基，2—異喹啉基，PDL， NHSO2R4，N(R4)(芐基)和N(R4)(PDL)，PDL為—(H2)a-2-，3—或4—吡啶基或?qū)Α猈取代的芐氧基，W是硝基，OH，氨基，C1-6烷氧基或羥基—C1-6亞烷基，或鹵代，R3為C1-6丙二烯基，C1-6烷氧基，C1-6烷氧基—C1-6亞烷基，羥基—C1-6亞烷基，C1-6烷基，氫或羥基R4為氫，C1-6烷基，苯基或芐基，R5為氫，C1-6烷基，羥基，C1-6烷氧基， V為OR4或羥基—C1-6亞烷基，CH2Si(CH3)2 (Z)，Y為羥基—C1-6亞烷基，C1-6烷基，或(CH2)e—C6H4—(V)e’，Z為CHO，CO2R4，CO2NHR4或(CH2)eOR4，R6的定義同R5，前提為，當(dāng)R5為氫時，并且當(dāng)R5和R6與其所連接的氮原子一起形成下式的雜環(huán)部分時，R6不能為氫。 或 或R7為CH2OR4或(CO)NHR4，R6為(H，OH)或＝O。
如同在制藥工業(yè)中證明許多化合物是有用的那樣，一些亞組和特定化合物是更為優(yōu)選的。在本發(fā)明的范圍內(nèi)，優(yōu)選的化合物是其中R5為氫，而R1為芐基、芐氧基、4—烷氧芐氧基、嗎啡酚基， SO2HN，(3—吡啶基)乙基、異喹啉基；R2為甲基酰氨基，異丙基，環(huán)戊基，2—(4，4—二氟)—吡咯烷烷2—羥基—2—丙基，叔丁基；
P1是胡椒基，4—(芐氧基)芐基，3—(芐氧基)芐基，(4—芐氧基—3—甲氧基)芐基；R6是芐基，胡椒基，CH2—吡啶基，4(芐氧基)芐基，嗎啉代，四氫異喹啉基，4—(3—羥基丙基)芐基，2—(3—羥基丙基)芐基，和 ，或—CH(Y)(Z)，Y和Z為一般定義的基團(tuán)，但特別當(dāng)Y是異丙基時，它優(yōu)選為D—構(gòu)型，或當(dāng)Z為芐氧亞甲基，CHO，COOH，烷氧基或COOR4時，Y優(yōu)選為苯基。
當(dāng)R5不是氫時，R5優(yōu)選為甲基，4—羥基丁基或3—羥基丙基，R6優(yōu)選為芐氧基或芐基，當(dāng)R5和R6與其所連的N原子形成雜環(huán)部分時，雜環(huán)部分優(yōu)選為全氫異喹啉(f)， 和嗎啉代(c)。優(yōu)選的式II的具體化合物見下表，在此舉例說明這些產(chǎn)品。
以取代基分類命名的特別優(yōu)選的化合物如下1.N—叔丁基—十氫—2〔R(R)—羥基—4—苯基—3(S)—〔〔N(2—喹啉羰基)—L—天冬氨酰〕氨基〕—丁基〕—(4as，8as)—異喹啉—3(s)—甲酰胺；2.〔1(s)—〔〔3，3—二氟—2，4—二氧—1—〔〔4—(苯基甲基)氨基〕丁基〕氨基羰基〕—2—甲基丙基〕氨基甲酸的苯基甲基酯；或3.N—〔4—(N—芐氧羰基—l—纈氨?！嘲被?，2—二氟—1，3—二氧—5—(e—芐氧)苯基—戊基〕—(O—芐基)—D—纈氨醇。
式II化合物及其具體制法在按照專利合作條約公開的國際申請(國際公開號為WO 92112123)中有進(jìn)一步的論述，在此引述作為參考文獻(xiàn)。
在本發(fā)明中，組合物中式I和式II的每個化合物都可有不對稱中心，或作為外消旋物、外消旋混合物和作為各個非對映異構(gòu)體存在，本發(fā)明包括化合物的所有異構(gòu)形式。
式I和式II優(yōu)選的化合物，可以從式I化合物組式II化合物組中選擇，進(jìn)行任意的組合。這樣的組合例如應(yīng)包括含有式I化合物或其藥用鹽的藥用組合物 式I其中R1為C1-8烷?；?，C1-10烯酰基，C1-8烷氧乙酰基，或苯甲?；?可被烷基或鹵素任選取代)；和含有式II化合物及其水合物，電子等排物和藥用鹽的藥物組合物式II其中R1為芐氧基， (3—吡啶基)乙基，異喹啉基，4—烷氧基芐氧基，或嗎啡酚基，P2是異丙基，環(huán)戊基，2—(4，4—二氟)—吡咯烷基，2—羥基—2—丙基，叔丁基，P1是胡椒基，4—(芐氧)芐基，3—(芐氧)芐基，(4—芐氧基—3—甲氧基)芐基，當(dāng)R5為氫時，R6是芐基，胡椒基，CH2—吡啶基，4—(芐氧基)芐基，嗎啉代，四氫異喹啉基，4—(3—羥基丙基)芐基，2—(3—羥基丙基)芐基，和 ，或—CH(Y)(Z)，Y和Z均為一般定義的基團(tuán)，但特別是當(dāng)Y是異丙基時優(yōu)選為D構(gòu)型，或當(dāng)Z是芐氧亞甲基，CHO，COOH，烷氧基或COOR4時，Y是苯基，當(dāng)R5不是氫時，R5優(yōu)選為甲基，4—羥基丁基或3—羥基丙基，R6優(yōu)選為芐氧基或芐基，當(dāng)R5和R6與其所連的N原子形成雜環(huán)部分時，該雜環(huán)部分優(yōu)選為 和嗎啉代。以上組合的亞組可由在此定義的式I和式II的化合物組構(gòu)成。
本發(fā)明的藥物組合物可以作為病毒(特別是HIV—1和HIV—2)復(fù)制過程中所需的逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶和細(xì)胞內(nèi)γ—葡糖苷酶I的抑制劑使用，還可以用于預(yù)防或治療人免疫缺陷病毒(HIV)的感染，用于治療感染后的病理狀況，例如哺乳動物在HIV病毒感染后所患的獲得性免疫缺陷癥候群(AIDS)。這里所說的治療艾滋病(預(yù)防或治療HIV的感染)是指包括而不限于治療HIV感染的廣泛狀態(tài)AIDS和ARC(艾滋病相關(guān)綜合癥)，包括有癥狀的和無癥狀的，現(xiàn)實(shí)的和潛伏的HIV感染。例如，本發(fā)明的藥物組合物可用于預(yù)防懷疑已被HIV感染，這種感染可能由于輸血，事故性的針刺或手術(shù)中的病人血液感染。
為了這些目的，本發(fā)明的化合物可以通過口服，非腸胃道給藥(包括皮下注射，靜脈給藥，肌肉注射，透皮給藥，胸骨內(nèi)注射或灌注方法)，可以通過吸入劑噴霧或直腸給藥，每個劑量單位劑型含有常規(guī)無毒的藥用載體，助劑和賦形物。
因而，本發(fā)明還提供了一種治療方法和治療HIV感染和艾滋病的藥物組合物。該治療是給需要治療的患者服用這樣的藥物組合物，該組合物包括藥用載體和有效治療量的本發(fā)明的式I和式II化合物及其藥用鹽。
這些藥物組合物可以為以下形式口服用懸浮液或片劑；鼻腔噴霧劑；無菌注射制劑，例如，無菌注射性水溶液或油水懸浮液或栓劑，也可以透皮給藥。
當(dāng)作為懸浮液口服給藥時，這些組合物根據(jù)藥物制劑領(lǐng)域中公知的技術(shù)加以制備，可含有本領(lǐng)域中已知的微晶纖維素以增大體積，藻酸或藻酸鈉作為懸浮劑，甲基纖維素作為粘度增強(qiáng)劑，增甜劑/矯味劑。作為即刻釋放片劑，這些組合物可以含有本領(lǐng)域中已知的微晶纖維素，磷酸二鈣，淀粉，硬脂酸鎂和乳糖和/或其它賦形劑，粘合劑，增容劑，崩解劑，稀釋劑和潤滑劑。
為便于口服給藥，式I組合物可制成固體或液體劑型，例如膠囊劑，丸劑，片劑，包衣劑，糖衣劑，熔化劑，粉劑，溶液劑，懸浮劑或乳劑。固體單位劑型可以為膠囊形式，可以是通常的硬殼或軟殼明膠型，含有例如表面活性劑，潤滑劑和惰性填充劑例乳糖、蔗糖、磷酸鈣和玉米淀粉。在另一個實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可與常規(guī)的片劑基質(zhì)制成片劑，基質(zhì)例如有乳糖，蔗糖和玉米淀粉，片劑的基質(zhì)與以下物質(zhì)合用粘合劑(例如阿拉伯膠，玉米淀粉或明膠)，崩解劑，其作用是在服用后有助于片劑的崩解和溶解(例如馬鈴薯淀粉、藻酸、玉米淀粉和瓜耳樹膠)，潤滑劑，其目的是提高片劑顆粒的流動性和防止片劑材料粘附在打片機(jī)沖模和沖頭的表面(例如滑石，硬脂酸或硬脂酸的鎂鹽、鈣鹽或鋅鹽)，染料、著色劑和矯味劑，其目的是增加片劑的美觀效果并使其更易被患者接受。適用于口服液體劑型的賦形劑包括稀釋劑，例如水和醇類，例如乙醇、芐醇和聚乙二醇，其中加入或不加藥用表面活性劑，懸浮劑或乳化劑。
當(dāng)通過鼻腔氣霧或吸入給藥時，這些組合物可根據(jù)藥物制劑領(lǐng)域中公知的方法進(jìn)行制備，可以制成鹽水溶液，應(yīng)用芐醇或其它適當(dāng)?shù)姆栏瘎?，用于增加生物利用度的吸收促進(jìn)劑，碳氟化合物，和/或該領(lǐng)域中已知的其它加溶劑和分散劑。
含有式1和2化合物的組合物也可經(jīng)胃腸道外給藥，即皮下、靜脈、肌肉或腹腔注射，該化合物與藥用載體于生理上可接受的稀釋劑中成為可注射用劑型，可為無菌液體或液體混合物，如水、鹽水、右旋糖水液和類似的糖溶液，醇類如乙醇、異丙醇、或十六烷醇、二醇類如丙二醇或聚乙二醇，甘油縮酮類如2，2—二甲基—1，3—二氧戊環(huán)—4—甲醇，醚類如聚(乙二醇)400，油，脂肪酸，脂肪酸酯或甘油酯，或乙酰化的脂肪酸甘油酯，其中或加或不加藥用表面活性劑如肥皂或洗滌劑，懸浮劑如果膠、Carbomer類、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素或羧甲基纖維素，或加入乳化劑或其它助劑。本發(fā)明中用于腸胃道外劑型的有代表性的油類是石油、動、植物或合成來源的油類，例如花生油、豆油、麻油、棉籽油、玉米油、橄欖油、礦脂和礦物油。適宜的脂肪酸包括有油酸、硬脂酸、和異硬脂酸。適宜的脂肪酸酯例如有油酸乙酯和肉豆蔻酸異丙酯。適宜的肥皂包括有脂肪酸堿金屬鹽，銨鹽和三乙醇胺鹽，適宜的洗滌劑包括有陽離子型洗劑如鹵化二甲基二烷銨，鹵化烷基吡啶翁和烷胺乙酸鹽；陰離子型洗滌劑例如有烷基、芳基和烯基磺酸酯，烷基、烯基、醚基和單甘油硫酸酯，和硫代琥珀酸酯；非離子型洗滌劑如脂肪胺氧化物，脂肪酸烷醇酰胺，和聚氧乙烯聚丙烯共聚物；和兩性洗滌劑，例如烷基—β—氨基丙酸酯和2—烷基咪唑啉季銨鹽，以及它們的混合物。
當(dāng)以栓劑形式直腸給藥時，這些組合物可通過將藥物與適宜的無刺激性賦形劑，例如可可脂、合成的甘油酯或聚乙二醇混合后制成，它們在常溫下是固體，但在直腸腔中液化和/或溶解而將藥物釋放出來。
藥用加成鹽或?yàn)殛栯x子或?yàn)殛庪x子鹽，是在達(dá)到所需效果的給藥劑量下基本上無毒并且其本身沒有明顯的藥理活性的鹽類。式I和II組合物可單獨(dú)或共同轉(zhuǎn)變成加成鹽制成制劑。有代表性的陽離子型加成鹽有堿金屬鹽，如鈉鹽和鉀鹽，堿土金屬鹽如鈣鹽和鎂鹽，第III主族輕金屬鹽包括鋁鹽；有機(jī)伯、仲、叔胺的鹽，例如三烷胺類，如三乙胺、普魯卡因、二芐胺、1—乙烯胺、N，N’—二芐基乙二胺，二氫冷杉胺，N—(低級烷基)哌啶和任何其它的適宜胺的鹽。優(yōu)選為鈉鹽。藥用酸加成鹽可按常規(guī)方式用無機(jī)酸，例如氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，或用有機(jī)酸，如乙酸、檸檬酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、甲磺酸、對甲苯磺酸處理這類化合物進(jìn)行制備。
用于治療或預(yù)防上述病癥的組合物用藥劑量水平為每日0.02g—5.0或10.0g，口服次數(shù)可高達(dá)2到5次，例如HIV感染的患者以化合物劑量為每公斤體重10—50mg，每日1—3次用藥可得到有效的治療。然而應(yīng)該明確的是對于任何特殊患者所用的具體劑量和頻度是可變的，這取決于多種因素，包括所用特定化合物的活性，組合物中化合物相互間代謝穩(wěn)定性和作用持續(xù)時間，患者的年齡、體重、健康狀態(tài)、性別、飲食、給藥方式和時間，排泄速率，藥物組合，特定癥候的嚴(yán)重程度和宿主經(jīng)受的治療。
本發(fā)明也涉及該HIV—蛋白酶抑制劑與治療艾滋病有效的一種或多種藥物合用，例如與適于治療HIV1和HIV2型病毒感染的已知抗病毒藥合用，例如式I的栗精胺酯與式II的病毒蛋白酶抑制劑合用。例如，本發(fā)明包括使用式I的糖蛋白加工抑制劑和式II的天冬氨酰蛋白酶特異性抑制劑制備藥用劑型，以同時給藥、分別給藥或順序給藥方式用于治療HIV感染，其中所說的式I化合物或其藥用鹽為式I式中R1為C1—C8烷?；鵆1-10烯酰基，C1-8—烷氧乙?；?，或任選被烷基或鹵素取代的苯甲?；凰f的式II化合物及其水合物、電子等排物和藥用鹽為 式II式中R1為芐氧基、 (3—吡啶基)乙基，異喹啉基，4—烷氧芐氧基，或嗎啡酚基；P2為異丙基，環(huán)戊基，2—(4，4—二氟)吡咯烷基，2—羥基—4—丙基，叔丁基，P1為胡椒基，4—(芐氧)芐基，3—(芐氧)芐基，(4—芐氧—3—甲氧)芐基；當(dāng)R5是H時，R6是芐基、胡椒基、CH2吡啶基，4—(芐氧)芐基，嗎啉代，四氫異喹啉基，4—(3—羥丙基)芐基，2—(3—羥丙基)芐基，和 或—CH(Y)(Z)，Y和Z兩者如一般所定義，但尤其是當(dāng)Y為異丙基時，優(yōu)選為D—構(gòu)型，當(dāng)Z是芐氧亞甲基、CHO、COOH、烷氧基或COOR4時Y是苯基，當(dāng)R5不是H時，R5優(yōu)選為甲基、4—羥基丁基或3—羥基丙基，以及R6為芐氧基或芐基，當(dāng)R5和R6與其所連的氮原子形成雜環(huán)部分時，雜環(huán)部分優(yōu)選為 和嗎啉代。還應(yīng)理解到上述式I和式II化合物的其它IV組也可以制成組合物。
含有式I和II的化合物的優(yōu)選組合物是式I化合物含量至少為10％的組合物或式II化合物含量至少為10％的組合物。
本發(fā)明化合物對HIV復(fù)制的抑制作用用下列公開的方法加以測定。
下列實(shí)施例對本發(fā)明的各個方面加以說明。下面有關(guān)試劑、細(xì)胞系、病毒株和測定法等信息闡明了上述組合物的有效性。關(guān)于測定活性的其它方法和操作是本領(lǐng)域中已知的。
為了研究所述組合物的效應(yīng)，用HIV—I型病毒的生長作為HIV的有用模型來研究艾滋病的治療。藥物組合的測定為了研究藥物組合物的活性，使用了MTT細(xì)胞活力測定法(Pauwels等人J.Virol.Methods，1988，20，309—321)。用多通道移液管在96孔微量滴定板上橫向滴定一種化合物，縱向滴定另一種化合物，通過建立這樣的棋盤獲得各種不同的藥物組合。每項(xiàng)測定需用6塊微量滴定板(只用里面的60個孔)，每種藥物組合用四重孔。通常用二倍稀釋法或半對數(shù)稀釋法測定，最后幾列不加藥物。
MT—4細(xì)胞用HIV—IRF的100TCID50感染，每個孔內(nèi)加入5×104個細(xì)胞，于37℃溫育6天后，加入10μl酸化的異丙醇，用多掃描MCC/340分光光度計(Flow Laboratories)于540nm測定各板的讀數(shù)。用Ultroterm(LKB)將各測定板的原始數(shù)據(jù)采集到軟盤上，然后用Excel(軟件)將數(shù)據(jù)還原。這可使每種藥物組合的平均光密度值能夠計算，并得到19條劑量效應(yīng)曲線系列，即在另一種藥物濃度固定下每種藥物的劑量效應(yīng)，同時操作者的干預(yù)降到最低程度。在上角的頭四個孔的每種藥物濃度最高，用作為陽性對照(即活細(xì)胞全被保護(hù))，右下角的后四個孔無任何藥物，用作為陰性對照(即細(xì)胞全部死亡)。用均等作用法分析藥物組合由劑量效應(yīng)曲線，可計算出各個藥物的IC50(或單個藥的IC50，或組合物中另一種藥物濃度固定時的IC50)并繪制等作用圖(Suhnel，Antiviral Research 13，23—40(1990))。由等作用圖的形狀可以確定藥物是具有協(xié)同關(guān)系(凹形)，加和效應(yīng)(線形)還是拮抗作用(凸形)。此外還可計算組合指數(shù)(CI)(Suhnel，1990)。
在另一化合物濃度固定的情況下，由每個化合物的劑量效應(yīng)曲線計算出的ED50值列于表內(nèi)。
由這些數(shù)據(jù)按如下公式計算出組合指數(shù)(CI)CI=(D)1(DX)1+(D)2(DX)2+α(D)1(D)2(DX)1(DX)2]]>式中α＝1(相互間非排斥性藥物)(DX)1＝上述藥物1的IC50(DX)2＝上述藥物2的IC50(D)和(D)2＝在合用時藥物1和2產(chǎn)生50％抑制作用時的濃度；若CI＜1，為協(xié)同作用；CI＝1，相互作用為零；CI＞1，為拮抗作用。(參考文獻(xiàn)J.Suhnel，Antiviral Research 13(1990)，23—40)。實(shí)施例1RO—31—8959和MDL73669與布卡斯特的抗病毒活性三種蛋白酶抑制劑MDL73669(表1A和1B)、RO—31—8959(表2A和2B)和MDL74538(表3A和3B)與糖蛋白加工抑制劑MDL28574(布卡斯特)合用加以研究。用于測試該組合的有效性的方法通過觀察組合中化合物的不同濃度對于用前述的細(xì)胞活力測定法測得的抗病毒活性的影響來評價。這些化合物的研究方法通過對組合指數(shù)(C.I)數(shù)值的分析來鑒定協(xié)同相互作用。
下列縮寫適用于下列化合物MDL 73669＝〔1(S)—〔〔3，3—二氟—2，4—二氧代—1—〔〔4—(苯基甲氧基)苯基〕甲基〕—4—〔(苯基甲基)氨基〕丁基〕氨基羰基〕—2—甲基丙基〕氨基甲酸苯基甲基酯。
MDL 74538＝N—〔4—(N—芐氧羰基—L—纈氨酰)氨基—2，2—二氟—1，3—二氧代—5—(4—芐氧)苯基—戊基〕—(O—芐基)—D—纈氨醇。
MDL 28574＝(布卡斯特)〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—丁酸酯RO—31—8959＝N—叔丁基—十氫—2—〔2(R)—羥基—4—苯基—3(S)—〔〔N(2—喹咻羰基)—L—天冬氨?！嘲被场』场?4aS，8As)—異喹啉—3(S)—甲酰胺。
表1A和表1BMT-4細(xì)胞被HIV-1RF感染后使其得到50％保護(hù)作用的MDL-73669和MDL28574在組合和單用時的濃度，以及由這些數(shù)據(jù)計算的組合指數(shù)
*組合指數(shù)(CI)表明有協(xié)同作用
*組合指數(shù)(CI)表明有協(xié)同作用表2A和2BMT-4細(xì)胞被HIV-1RF感染后使其得到50％保護(hù)作用的Ro-31-8959和MDL28574在組合和單用時的濃度，以及由這些數(shù)據(jù)計算的組合指數(shù)
組合指數(shù)(CI)表明有協(xié)同作用
組合指數(shù)(CI)表明有協(xié)同作用表3A和3BMT-4細(xì)胞被HIV-1RF感染后使其得到50％保護(hù)作用的MDL74538和MDL28574在組合和單用時的濃度，以及由這些數(shù)據(jù)計算的組合指數(shù)
*組合指數(shù)(CI)表明有協(xié)同作用
*組合指數(shù)(CI)表明有協(xié)同作用
權(quán)利要求
1.一種藥物組合物，該組合物包括式I化合物或其藥用鹽 式I式中R1是C1-8烷?；珻1-10烯?；珻1-8烷氧乙?；蛉芜x被烷基或鹵素取代的苯甲?；?；式II化合物和其水合物，電子等排物和其藥用鹽 式II式中R1是芐氧基， (3—吡啶基)乙基，異喹啉基，4—烷氧基—芐氧基或嗎啡酚基，P2是異丙基，環(huán)戊基，2—(4，4—二氟)—吡咯烷基，2—羥基—2—丙基，叔丁基，P1是胡椒基，4—(芐氧基)芐基，3—(芐氧基)芐基，4—(芐氧基—3—甲氧基)芐基，當(dāng)R5是氫時，R6是芐基，胡椒基，CH2—呲啶基，4—(芐氧基)芐基，嗎啉代，四氫異喹啉基，4—(3—羥基丙基)芐基，2—(3—羥基丙基)芐基，和 ，或—CH(Y)(Z)，Y和Z均為一般定義，但特別是當(dāng)Y是異丙基時優(yōu)選為D構(gòu)型，或當(dāng)Z是芐氧亞甲基、CHO、COOH，烷氧基或COOR4時，Y為苯基，當(dāng)R5不是氫時，R5優(yōu)選為甲基，4—羥基丁基或3—羥基丙基，R6優(yōu)選為芐氧基或芐基，當(dāng)R5和R6與其所連的氮原子組成雜環(huán)部分時，雜環(huán)部分優(yōu)選為 和嗎啉代。
2.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說的式II化合物為N—叔丁基—十氫—2〔R(R)—羥基—4—苯基—3(S)—〔〔N(2—喹啉羰基)—L—天冬氨?！嘲被场』场?4aS，8As)—異喹啉—3(S)—甲酰胺；〔1(S)—〔〔3，3—二氟—2，4—二氧—1—〔〔4—(苯基甲基)氨基〕丁基〕氨基羰基〕—2—甲基丙基〕氨基甲酸的苯基甲基酯；或N—〔4—(N—芐氧羰基—L—纈氨?！嘲被?，2—二氟—1，3—二氧—5—(e—芐氧)苯基—戊基〕—(O—芐基)—D—纈氨醇。
3.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說的權(quán)利要求2的化合物量至少為10％。
4.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中所說的式I化合物是〔1S—(1α，6β，7α，8β，8αβ)〕—八氫—1，6，7，8—吲嗪四醇6—丁酸酯。
5.權(quán)利要求4的藥物組合物，該組合物包括至少10％的式I化合物。
6.上述任何一項(xiàng)權(quán)利要求的組合物，采用胃腸道給藥。
7.上述任何一項(xiàng)權(quán)利要求組合物，包括以其藥用鹽或其它衍生物形式存在于藥用賦形劑中的式I化合物和式II化合物。
8.一種患者需要的治療HIV感染的方法，包括給患者服用有效抗病毒量的權(quán)利要求1的組合物。
9.一種含有權(quán)利要求1或2所定義的式II化合物產(chǎn)品，它作為一種組合制劑，可同時、分別或順序用于HIV感染的治療。
全文摘要
式I和式II化合物的組合物可用于治療逆轉(zhuǎn)錄病毒的感染。該組合物可用于治療由逆轉(zhuǎn)錄病毒HIV或其它相關(guān)病毒引起的艾滋病、ARC和其它疾病。
文檔編號A61K38/00GK1118142SQ94191250
公開日1996年3月6日 申請日期1994年1月18日 優(yōu)先權(quán)日1993年2月22日
發(fā)明者A·S·逖姆斯, D·L·塔羅爾 申請人:默里爾多藥物公司