專利名稱：葛根有效成分提取物及制備方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中草藥提取物，特別是一種從中草藥葛根中提取可作為防癌藥物的有效成分提取物及其制備方法。
自從七十年代后期至今，人們根據(jù)腫癌流行病學(xué)與腫癌發(fā)生發(fā)展的生物學(xué)特性，世界各國(guó)耗資數(shù)十億美元進(jìn)行了上萬種防癌藥物篩選與試驗(yàn)，但往往體外試驗(yàn)(試管試驗(yàn))有效，體內(nèi)試驗(yàn)(動(dòng)物試驗(yàn))就無效或抑癌率在30%以下，超過30%就認(rèn)為有可能作為防癌藥。而維生素類、激素類與少數(shù)微量或常量金屬元素(如鋅、硒、鈣等)又無顯著的防癌效果，且有的毒副作用大，成本高。有的流行病學(xué)家認(rèn)為，未來十年人類癌癥預(yù)防最有希望取得突破的領(lǐng)域是癌癥的藥物預(yù)防(化學(xué)預(yù)防)，改善膳食與營(yíng)養(yǎng)，控制職業(yè)致癌，停止吸煙。其中，癌癥的藥物預(yù)防是癌癥防治藥物的嶄新領(lǐng)域。目前，治療癌癥的藥物不少，但至今國(guó)內(nèi)外尚無一個(gè)獲得公認(rèn)的防癌藥物。
本發(fā)明的目的在于為人們提供一種可作為防癌藥物，且效果好、無毒副作用、成本低的中草藥防癌有效成分提取物及其制備方法。
本發(fā)明的目的是通過以下措施來達(dá)到的。
一種葛根有效成分提取物(簡(jiǎn)稱901R，以下同)，為一種液體或棕黃色粉末狀固體，其主要有效成分是異黃酮(即3-苯基苯并-γ-吡喃酮)，其結(jié)構(gòu)式為
異黃酮由以下單體化合物組成(1)、R1＝R2＝R3＝H時(shí)的大豆甙元，(2)、R1＝H，R2＝吡喃葡萄糖，R3＝CH3時(shí)的芒柄花甙，(3)、R1＝R3＝H，R2＝吡喃葡萄糖時(shí)的大豆甙，(4)、＝R2＝R3＝H，R1＝吡喃葡萄糖時(shí)的葛根素，(5)、R1＝H，R2＝R3＝吡喃葡萄糖時(shí)的大豆甙元-4′，7-二葡萄糖甙。
本發(fā)明葛根有效成分提取物為液體(1ml提取液含0.5～1.5g葛根)時(shí)異黃酮含量為1-20%，提取物為粉末狀固體時(shí)異黃酮含量為30-80%。
本發(fā)明制備葛根有效成分提取物的方法，是首先將葛根原料加水煎煮至有效成分被提出，過濾以濾去原料殘?jiān)瑸V液濃縮至易于進(jìn)行酒沉操作的程度，如果不濃縮，則酒沉?xí)r耗乙醇量太大。濃縮后濃縮液加入乙醇溶液進(jìn)行酒沉，以除去濃縮液中的淀粉、樹脂、多糖、蛋白等雜質(zhì)。酒沉?xí)r以加入濃度為80-95%的乙醇溶液，控制每次濾液中乙醇含量在70-80%為宜，因含量高于80%，乙醇用量大，成本提高，低于70%，酒沉效果又不好。酒沉后的溶液在0-10℃低溫下放置一定時(shí)間至沉淀完全(超過10℃乙醇易揮發(fā)酒沉淀效果差，低于0℃又易結(jié)冰而將造成無法過濾)。酒沉后再次過濾，濾液回收乙醇至無醇味制得原漿。原漿經(jīng)稀釋或噴霧干燥制得葛根有效成分提取物(提取液或提取粉)。
本發(fā)明制備方法還可以通過以下措施來實(shí)現(xiàn)。
原料最好采用干燥葛根，先切成小塊，去雜后加水煎煮不少于2次，過濾后濾液濃縮至原體積的1/3至1/5，加入乙醇溶液酒沉至少2次，酒沉?xí)r同樣控制濾液中乙醇含量在70-80%，然后在0-10℃低溫放置48-72小時(shí)。濾液回收乙醇至無醇味后按1ml提取液含葛根0.5-1.5g加水稀釋，再在0-10℃低溫放置至沉淀完全，過濾后即制得葛根有效成分提取液，簡(jiǎn)稱901R(液)(以下同)。
本發(fā)明亦可將上述制備方法所制得之原漿或有效成分提取液經(jīng)噴霧干燥制成粉末狀固體-葛根有效成分提取粉，簡(jiǎn)稱901R(粉)(以下同)。其噴霧干燥條件為噴入的空氣予熱至280℃±20℃，噴入的空氣壓力為3-6kg/cm2，干燥室內(nèi)溫度保持在120℃±20℃，高于以上溫度，破壞提取物中的有效成分，低于以上溫度則干燥效果差。
本發(fā)明所述葛根有效成分提取物，可作為防癌藥物的用途。可將提取物制成各種劑型，按每人每天0.5-1.5克提取粉量服用，提取液用量可按提取粉用量折算。
本發(fā)明提取物經(jīng)藥理藥化、流行病學(xué)與腫瘤病理等研究室多年的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床前實(shí)驗(yàn)證明，不僅有十分顯著的防癌效果，而且無毒副作用，現(xiàn)例舉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及結(jié)果如下。
實(shí)驗(yàn)1901R對(duì)抗磷酰胺(CPA)所致的小鼠骨髓細(xì)胞微核增高實(shí)驗(yàn)以昆明小鼠(雄性，體重200g±2g)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)共設(shè)陰性對(duì)照(生理鹽水)、陽性對(duì)照(CPA)、CPA與25g901R(液)/kg合用、CPA與10g901R(液)/kg合用四個(gè)組。均灌胃給藥。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明陽性對(duì)照組小鼠骨髓細(xì)胞的微核率為19.9%，比陰性對(duì)照組微核率為2.8%有明顯差異(P＜0.001)，而CPA與25g901R(液)/kg合用和CPA與10g901R(液)/kg合用的微核率分別為2.5%和7.0%，其微核率明顯下降(P＜0.05-0.01)。證明901R有很強(qiáng)的對(duì)抗CPA所致的骨髓細(xì)胞微核的增高作用。
實(shí)驗(yàn)2901R對(duì)化學(xué)致癌劑誘發(fā)小鼠前胃鱗狀細(xì)胞癌的抑制作用實(shí)驗(yàn)用肌氨酸乙脂鹽酸鹽與亞硝酸鈉誘發(fā)NIH純系小鼠的前胃鱗癌。于89-90年先后進(jìn)行二次實(shí)驗(yàn)，并以不同劑量901R(粉)給藥以觀察劑量效應(yīng)，其第二次實(shí)驗(yàn)結(jié)果列表如下
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，901R(粉)對(duì)亞硝胺致癌具有48.7-66.6%的抑制率，并呈現(xiàn)劑量效應(yīng)關(guān)系，從而初步確定了有效的劑量濃度。
實(shí)驗(yàn)3Ame′s法測(cè)定901R的抗致突變法該實(shí)驗(yàn)將901R(粉)配制成每ml水溶液含2μg、5μg901R(粉)的水溶液加入細(xì)菌培養(yǎng)基中，實(shí)驗(yàn)證明2μg901R(粉)/ml和5μg901R(粉)/ml均有明顯的對(duì)抗由苯胼芘所致的細(xì)胞突變作用。
將含葛根有效成分提取物的藥物用于食管癌高發(fā)區(qū)癌前病變?nèi)巳褐凶?1個(gè)月的連續(xù)用藥，在用藥前后分別進(jìn)行的二次食管內(nèi)鏡活檢病理檢查中，發(fā)現(xiàn)其自身對(duì)照有45%的觀察對(duì)象有明顯改善(病變性質(zhì)減輕或消失)。
將含葛根有效成分提取物的藥物用于毒性實(shí)驗(yàn)和亞急性毒性實(shí)驗(yàn)，其結(jié)果也證明，本提取物可作為藥物應(yīng)用于臨床，其大劑量長(zhǎng)期使用也無積蓄毒性作用，無任何病理改變發(fā)生。
中草藥葛根在我國(guó)山區(qū)廣泛生長(zhǎng)，目前還是一種滯銷中草藥，此種原生藥價(jià)格低廉，資源充足，充分利用這一資源，無疑也為山區(qū)群眾開辟致富途徑，而且降低防癌藥物成本。
下面結(jié)合實(shí)施例詳細(xì)說明本發(fā)明。
實(shí)施例一。取切成小塊的干燥葛根，撿去雜質(zhì)和發(fā)霉物，加水煎煮2次，每次1小時(shí)，過濾，濾液減壓濃縮至原體積的1/5，加入濃度為80%的乙醇溶液酒沉2次，使每次濾液中含乙醇量在70%，在1℃低溫放置72小時(shí)，待靜置沉淀完全后過濾，濾液回收乙醇至無醇味，再加入蒸餾水，使1ml提取液中含0.5克葛根，10℃低溫放置一天(水沉)，經(jīng)過濾即得異黃酮含量為1-20%的葛根有效成分提取液。
實(shí)施例二。將葛根原料切小塊，經(jīng)去雜、煎煮、過濾后，濾液濃縮至原體積的1/3，加入濃度為95%的乙醇溶液酒沉，使濾液中含乙醇量為80%。然后10℃低溫放置48小時(shí)，其余操作條件同于實(shí)施例一。所得提取液經(jīng)噴霧干燥即得極細(xì)的棕黃色粉末狀固體-葛根有效成分提取粉，其總異黃酮含量為40-80%。噴霧干燥時(shí)，干燥室內(nèi)溫度120℃±10℃，噴入的熱空氣予熱至280℃±7℃，噴入壓力為3-6kg/cm2。
權(quán)利要求
1.一種葛根有效成分提取物，其特征在于為液體或棕黃色粉末狀固體，主要有效成分是異黃酮(即3-苯基苯并-γ-吡喃酮)，其結(jié)構(gòu)式為
異黃酮由以下單體化合物組成(1)、R1=R2=R3=H時(shí)的大豆甙元，(2)、R1=H，R2=吡喃葡萄糖，R3=CH3時(shí)的芒柄花甙，(3)、R1=R3=H，R2=吡喃葡萄糖時(shí)的大豆甙，(4)、R2=R3=H，R1=吡喃葡萄糖時(shí)的葛根素，(5)、R1=H，R2=R3=吡喃葡萄糖時(shí)的大豆甙元-4′，7-二葡萄糖甙。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于為液體(1ml提取液含0.5～1.5g葛根)時(shí)黃酮含量為1-20%，為粉末狀固體時(shí)異黃酮含量為30-80%。
3.一種葛根有效成分提取物的制備方法，其特征在于將葛根原料加水煎煮至有效成分被提出，過濾，濾液濃縮至易于進(jìn)行酒沉操作的程度，加入乙醇溶液酒沉，控制濾液中乙醇含量在70-80%，然后在0-10℃低溫下放置至沉淀完全，再次過濾，濾液回收乙醇至無醇味得原漿，原漿經(jīng)稀釋或噴霧干燥制得葛根有效成分提取物(液或粉)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于將干燥葛根原料切塊、去雜后加水煎煮不少于2次，過濾后濾液濃縮至原體積的1/3至1/5，加入乙醇溶液酒沉至少2次，在0-10℃低溫放置48-72小時(shí)，過濾，濾液回收乙醇至無醇味后按1ml提取液含葛根0.5-1.5g加水稀釋，再在0-10℃低溫放置至沉淀完全，過濾后制得葛根有效成分提取液。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于將原漿或葛根有效成分提取液經(jīng)噴霧干燥制成粉末狀固體(提取粉)，其噴霧干燥條件為噴入的空氣予熱至280℃±20℃，噴入的空氣壓力為3-6kg/cm2，干燥室內(nèi)溫度保持在120℃±20℃。
6.一種如權(quán)利要求1所述的葛根有效成分提取物，其特征在于可作為防癌藥物的用途。
全文摘要
本發(fā)明為一種中草藥葛根有效成分提取物及其制備方法和用途。該種提取物主要有效成分為異黃酮。將葛根原料經(jīng)煎煮、過濾、濾液濃縮、酒沉、再次過濾、濾液回收乙醇得原漿，原漿經(jīng)稀釋或噴霧干燥制得葛根有效成分提取液(或粉)。該種提取物可用于防癌藥物，其防癌效果顯著，無毒副作用，成本低廉。
文檔編號(hào)A61K31/335GK1080287SQ9111060
公開日1994年1月5日 申請(qǐng)日期1991年11月6日 優(yōu)先權(quán)日1991年11月6日
發(fā)明者買凱 申請(qǐng)人:河南省醫(yī)學(xué)科學(xué)研究所