專利名稱：吡啶-2，4-和2，5-二羥酸二-(硝?；榛?酰胺，其制備方法和應(yīng)用的制作方法
能抑制酵素脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶的化合物能通過影響膠原特有的羥化反應(yīng)對膠原的生物合成產(chǎn)生非常有選擇性的抑制。在此過程中，與蛋白質(zhì)結(jié)合的脯氨酸或賴氨酸被酵素脯氨酸羥基酶或者賴氨酸羥基酶羥化。如果對此反應(yīng)通過抑制劑進(jìn)行抑制，則生成無功能的次羥基化膠原分子，這種分子只有少量能被細(xì)胞排到細(xì)胞外間隙中。此外，這種次羥基化了的膠原不能被結(jié)合在膠原母體中，而很容易解骯分解。這個效應(yīng)的結(jié)果是，使在細(xì)胞外貯存的膠原總量減少了。
眾所周知，通過已知的抑制劑如α，α′-聯(lián)二吡啶對脯氨酸羥基酶的抑制會導(dǎo)致巨噬細(xì)胞的Clq-生物合成的抑制〔W.Muller等，歐洲生物化學(xué)學(xué)會聯(lián)合會通訊(FHBS Lett.)90(1978)，218;免疫生物學(xué)155(1978)，47〕。通過這種方式導(dǎo)致補(bǔ)體活化(Komplementaktivierung)不能按常規(guī)的途徑進(jìn)行。因此脯氨酸羥基酶抑制劑也起免疫抑制藥的作用，例如是免疫綜合癥時。
眾所周知，吡啶-2，4-和-2，5-二羧酸可有效抑制酵素脯氨酸羥基酶(K.Majamaa等;歐洲生物化學(xué)雜志(Eur.J.Biochem.)138(1984)239-245〕。在細(xì)胞培養(yǎng)中，這些化合物的濃度當(dāng)然只在很高時才起抑制劑作用〔Tschank，G.等;生物化學(xué)雜志(Biochem.J.)238(1987)625-633〕。
DE-A3432094說明了在酯烷基部分有1-6個C-原子的吡啶-2，4-和-2，5-二羧酸二酯可作為抑制脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶的藥劑。
可是此低烷基化的二酯有缺點，即它們在有機(jī)體中會過快地分解成酸，并且在細(xì)胞中在其作用位置，達(dá)不到足夠高的濃度。所以，較少作為藥劑使用。
DE-A3703959和DE-A3703962一般地說明了能有效抑制動物型膠原生物合成的吡啶-2，4-和-2，5-二羧酸的混合酯/酰胺、較高烷基化的二酯和二酰胺。
其中DE-A3703959還說明了N，N′-雙(2-甲氧基乙基)-吡啶-2，4-二羧酸二酰胺和N，N′-雙(3-異丙氧基丙基)-吡啶-2，4-二羧酸二酰胺的合成。
在德國專利申請P3826471.4和P3828140.6中提出了制備N，N′-雙(2-甲氧基乙基)-吡啶-2，4-二羧酸二酰胺的改進(jìn)方法。德國專利登記P3924093.2提出了一種新的N，N′-雙(烷氧基烷基)-吡啶-2，4-二羧酸二酰胺。
眾所周知，不但吡啶-2，4-和-2，5-二羧酸二酰胺〔Hirakata等;J.Pharm.soc.Japan(日本醫(yī)藥協(xié)會雜志)77(1957)219和Haring等Helv.37(1954)147，153〕，而且吡啶-2，4和-2，5-二羧酸二酰胺(Itai等;Bl。nation.hyg.Labor.Tokyo(東京國家衛(wèi)生實驗室通報)74(1956)115，117和Shinohara等;Chem.High Polymers Japan(日本高聚物化學(xué))，15(1958)839〕均可作為結(jié)核病用藥。
在日本專利JP53/28175(78/28175)中，說明了N，N′-雙(2-硝酰基乙基)吡啶-2，4-和-2，5-二羧酸二酰胺是有擴(kuò)張血管作用的物質(zhì)。
意外地發(fā)現(xiàn)了，化學(xué)式Ⅰ所示的吡啶-2，4-和-2，5-二羧酸二(硝?；榛?酰胺和生理上可接受的一些鹽，有效地抑制動物型脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶。
式中R表示C1-C4-烷撐本發(fā)明相應(yīng)涉及到a)化學(xué)式Ⅰ所示的化合物和生理上可接受的鹽在制備抑制脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶的藥物方面的應(yīng)用。
式中R表示C1-C4-烷撐本發(fā)明還涉及b)式Ⅰ所示的化合物以及作藥物用的、生理上可接受的鹽。式中R代表甲撐、丙撐或丁撐。
此外發(fā)明還涉及c)式Ⅰ所示的化合物及其生理上可消化的鹽，式中R表示甲撐、丙撐或丁撐。
本發(fā)明尤其涉及按照a)，b)，和c)用作纖維抑制藥和免疫抑制藥以及抑制脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶和影響膠原及似膠原物質(zhì)新陳代謝或者Clq生物合成的式Ⅰ所示化合物。
所有前面提到的具有多于2個碳原子的烷基，既可以是直鏈的，也可以是分枝的。
此外，本發(fā)明還涉及Ⅰ所示的化合物的制備方法。此方法的特征在于使式Ⅱ所示的化合物
與式Ⅲ所示的化合物進(jìn)行反應(yīng)。
式中R的意義和化學(xué)式Ⅰ中的相同，Y代表鹵素、羥基或C1-C4烷氧基或者與羰基一起生成一個活性酯，或者生成一個混合酸酐。
或者將式Ⅳ所示的化合物進(jìn)行硝化，必要時緊接著將此反應(yīng)產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成生理上可接受的鹽。
式中R的意義如上所述。
下面進(jìn)一步說明式Ⅰ所示化合物的制備以及此化合物所需原料的制備(如果買不到原料的話)。
制備本發(fā)明化合物，最簡單的方法是將式(Ⅱ)所示的吡啶衍生物和式(Ⅲ)所示的胺這二個組分以等摩爾數(shù)，或以化合物Ⅲ最多約過量5倍進(jìn)行混合，并在溫度為-30到150℃之間，最好在20至100℃之間使反應(yīng)進(jìn)行直到結(jié)束為止。反應(yīng)終點例如可通過薄層色譜法測定。此方法的一種方案是使反應(yīng)在一種合適的溶劑中進(jìn)行，如在乙醚或二甲氧基乙烷或四氫呋喃，氯化碳?xì)浠衔锶缍燃淄?、氯仿、三氯乙烯或四氯化乙烯，苯、甲苯或極性溶劑如二甲基酰胺，丙酮、醇類例如甲醇或乙醇或二甲基亞砜中進(jìn)行。在這里使用式(Ⅲ)所示的胺可以最多約過量5倍。反應(yīng)溫度在室溫和溶劑的沸點之間，溫度范圍最好在室溫和130℃之間。
此反應(yīng)同樣可以經(jīng)過一種混合酸酐如氯甲酸乙酯或經(jīng)過一個活性酯如硝基酚酯(Y＝ClCH2-COO或NO2-C6H4-O)來實現(xiàn)。有關(guān)方法在文獻(xiàn)中有說明。
必要時可使反應(yīng)在堿存在下進(jìn)行。可考慮加入的堿例如有碳酸鹽或碳酸氫鹽如碳酸鈉或碳酸鉀或碳酸氫鈉或碳酸氫鉀;或者叔胺如三乙基胺、三丁基胺、乙基二異丙基胺;或雜環(huán)胺如N-烷基嗎啉、吡啶、喹啉;或二烷基苯胺。
制備式Ⅰ所示的化合物的另一種方法是將相應(yīng)的吡啶-2，4-和-2，5-二羧酸(Ⅳ)的羥烷基二酰胺進(jìn)行硝化。硝化時使相應(yīng)的羥烷基二酰胺在-20℃至+10℃最好在-10℃至-5℃與濃硝酸混合。反應(yīng)時間為10-240分鐘，最好為20-90分鐘。必要時接著將反應(yīng)產(chǎn)物中和。
在這種情況下產(chǎn)品的分離可通過萃取或色層分離法例如通過硅膠色層分離法來實現(xiàn)?？蓪⒎蛛x出的產(chǎn)品進(jìn)行重結(jié)晶，如果需要可使其和合適的酸反應(yīng)生成生理上可接受的鹽，合適的酸例如無機(jī)酸，如氫氯酸和氫溴酸以及硫酸、磷酸、硝酸和高氯酸，或者有機(jī)酸如蟻酸、醋酸、丙酸、丁二酸、羥基醋酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、馬來酸、富馬酸、苯乙酸、苯甲酸、甲磺酸、甲苯磺酸、草酸、4-氨基苯甲酸、萘-1，5-二磺酸或抗壞血酸。
式(Ⅲ)所示的原料化合物如果買不到，則可按文獻(xiàn)中已知的方法合成。
為了得到式(Ⅱ)所示的原料化合物，例如可以通過使吡啶-2，4-或-2，5-二羧酸轉(zhuǎn)化或相應(yīng)的吡啶-2，4-或2，5-二羧酸鹵化物最好為氯化物(根據(jù)文獻(xiàn)中已知的方法)，轉(zhuǎn)化最好在催化劑如二甲基甲酰胺的存在下進(jìn)行。然后使此酰(基)鹵或者與一種合適的醇例如對硝基苯甲醇反應(yīng)成相應(yīng)的活性酯，或者與低級醇如甲醇或乙醇反應(yīng)成相應(yīng)的酯。同樣也可首先使吡啶-2，4-或2，5-二羧酸與一種合適的羧酸或羧酸酯如氯蟻酸乙酯反應(yīng)轉(zhuǎn)化成混合酸酐，然后使此酸酐與胺(Ⅲ)反應(yīng)成本發(fā)明的產(chǎn)品。相應(yīng)的方法同樣在文獻(xiàn)中有說明。
式Ⅳ所示的原料化合物，例如可按文獻(xiàn)中已知的方法，通過相應(yīng)的N，N′-雙(烷氧基烷基)吡啶-2，4-或者-2，5-二羧酸二酰胺最好點雙(甲氧基烷基)二酰胺反應(yīng)，例如與三溴化硼反應(yīng)而得到。雙-(烷氧基烷基)二酰胺的制備方法是已知的，例如在DE-A3703959中就有說明。在此處是使一個有反應(yīng)能力的吡啶二羧酸酰鹵如吡啶-二羧酸酰氯和一種烷氧基烷基胺進(jìn)行反應(yīng)。
式Ⅰ所示的本發(fā)明化合物具有很有價值的藥理性能，并且顯示出了作為脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶的阻化劑和作為纖維抑制劑及免疫抑制劑的特別有效性。
根據(jù)這種藥理性能，本發(fā)明化合物適用于治療膠原和似膠原物質(zhì)的新陳代謝障礙以及治療Clq的生物合成障礙。
因此本發(fā)明還涉及式Ⅰ所示的本發(fā)明化合物及其在生理上可接受的鹽在治療上述新陳代謝障礙方面的應(yīng)用。
這些化合物可以單獨或者與生理上可接受的助劑或載體物質(zhì)混合作為藥物使用。在這方面，這些藥物的使用量為口服劑量是0.01-25.0毫克/公斤/天，最好是0.01-5.0毫克/公斤/天;或者不經(jīng)腸胃的劑量是0.001-5毫克/公斤/天，較好是0.001-2.5毫克/公斤/天，最好是0.005-1.0毫克/公斤/天。對重病人可提高劑量。然而在許多情況下小劑量便可。上述數(shù)據(jù)適用于體重約為75公斤的成年人。
本發(fā)明還包括將本發(fā)明化合物用于制備治療或預(yù)防上述新陳代謝障礙的藥物。
本發(fā)明的另一個對象是含有式Ⅰ所示的一種或幾種本發(fā)明的化合物和/或其在生理上可接受的鹽的藥劑。
專業(yè)人員用自己熟悉的方法制備這種藥劑?？蓪⒈景l(fā)明的藥理學(xué)上有效的化合物(＝有效物質(zhì))或者本身，或者最好與合適的制藥助劑或載體物質(zhì)混合加工成藥片、糖衣藥丸、膠囊、栓劑、乳液、懸浮液或者溶液作為藥劑使用，藥劑中有效物質(zhì)含量約達(dá)95%，合適的含量在10%和75%之間。
適合于所要求的藥物配方的助劑和載體物質(zhì)例如除了溶劑、凝膠生成劑、栓劑基礎(chǔ)、藥片助劑和其它有效物質(zhì)載體以外還有抗氧劑、分散劑、乳化劑、去泡劑、矯味劑、防腐劑、有機(jī)溶劑和著色劑。
這些有效物質(zhì)可以口服，可在腸胃以外使用或在直腸中使用。
使這些有效物質(zhì)與合適的添加劑如載體物質(zhì)、穩(wěn)定劑、或惰性稀釋劑相混合，并采用一般方法制成合適的提供形式，如藥片、糖衣藥丸、棒狀膠囊、水的懸浮液、醇的懸浮液和油的懸浮液，或水的溶液或油的溶液。
可用作惰性載體物質(zhì)的例如有阿拉伯樹膠、氧化鎂、碳酸鎂、磷酸鉀、乳糖、葡萄糖、或淀粉，特別是玉米淀粉。在此既可配成干顆粒也可配成濕顆粒。作為油狀載體物質(zhì)或溶劑。例如可考慮采用植物油或動物油，如葵花子油或魚肝油。
為了皮下或靜脈內(nèi)使用，可按希望用合適的物質(zhì)如有機(jī)溶劑、乳化劑或別的助劑將這些有效物質(zhì)制成溶液、懸浮液或乳液?？梢宰鳛槿軇┑睦缬猩硎雏}水或醇，例如乙醇、丙醇、甘油，此外還有糖溶液如葡萄糖溶液或甘露醇溶液、或者還有由上面提到的不同溶劑制成的混合物。
下面用一些實施例對本發(fā)明進(jìn)行更詳細(xì)的說明。
預(yù)備步驟1吡啶-2，4-二羧酸-雙-N，N′-(甲氧基乙基)酰胺
溶點42-44℃1H-NMR(CDCl3)δ＝1.2(3H，tr);33-3.8(12H，qu和m);7，9(1H，m);8，4-8，5(1H，m);8，7-8，8(1H，m);
預(yù)備步驟2吡啶-2，4-二羧酸-雙-N，N′-(2-羥乙基)酰胺
1H-NMR(CDCl3)δ＝1，5-2，2(4H，m);
3，4(4H，m);3，6(4H，m);7，9-8，0(1H，m);8，4-8，5(1H，m);8，7-8，8(1H，m)實施例1吡啶-2，4-二羧酸-N，N′-二〔2-(硝?；?-乙基〕酰胺
<p>將1克吡啶-2，4-二羧酸-二(2-羥乙基)-酰胺(預(yù)備步驟2)于-10℃至-5℃加到5毫升濃硝酸中。加熱到2℃再攪拌40分鐘。倒入冰水中并用碳酸鈉中和。用二氯甲烷萃取此溶液3次，有機(jī)相用硫酸鎂干燥并進(jìn)行蒸濃。殘留物從乙醚中結(jié)晶析出。
產(chǎn)量750毫克熔點85-88℃
權(quán)利要求
1.應(yīng)用式I所示的吡啶-2，4-和-2，5-二羧酸二(硝?；榛?酰胺以及生理上可接受的鹽來制備抑制脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶的藥劑。
式中R代表直鏈的或有支鏈的C1-C4烷撐。
2.按權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于R代表乙撐或丙撐。
3.式Ⅰ所示的化合物及其在生理上可接受的鹽的制備方法
式中R代表甲撐、丙撐或丁撐。此制備方法的特征在于使式Ⅱ所示的化合物
與式Ⅲ所示的化合物進(jìn)行反應(yīng)，式中R具有上述指定的意義，Y為鹵素、羥基或C1-C4-烷氧基，或者與羰基一起形成一個活性脂或一個混合酸酐，或者將-式Ⅳ所示的一種化合物
式中R和上述的意義相同進(jìn)行硝化，如果需要，接著將此反應(yīng)產(chǎn)品轉(zhuǎn)化成它的在生理上可接受的鹽。
4.按權(quán)利要求3所述的方法其特征在于R代表甲撐、或正-丙撐。
5.含有權(quán)利要求1至4所述的式Ⅰ所示的一種化合物和可接受的藥物載體的藥劑。
6.按權(quán)利要求5所述的藥劑用于抑制脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶。
7.按權(quán)利要求5或6所述的藥劑用作纖維抑制藥和免疫抑制藥。
8.按權(quán)利要求1至4中的一項或多項所述的式Ⅰ所示的化合物或其鹽用于影響膠原和似膠原物質(zhì)的新陳代謝和影響Clq的生物合成。
9.按權(quán)利要求1至4中的一項或多項所述式Ⅰ所示的化合物或其鹽用于治療膠原和似膠原物質(zhì)的新陳代謝障礙或治療Clq的生物合成障礙。
10.影響膠原和似膠原物質(zhì)的新陳代謝或影響Clq生物合成的藥劑的制備方法，其特征在于在藥劑中加按權(quán)利1至4的一項或多項所述的式Ⅰ所示的一種化合物或其鹽。
全文摘要
本發(fā)明涉及式I所示的吡啶-2，4-和-2，5-二羥酸二(硝?；榛?酰胺。式中R具有已指定的意義。本發(fā)明的化合物可抑制酵素脯氨酸羥基酶和賴氨酸羥基酶并可相應(yīng)地用作纖維抑制劑藥和免疫抑制藥。
文檔編號A61P37/06GK1053606SQ9110022
公開日1991年8月7日 申請日期1991年1月15日 優(yōu)先權(quán)日1990年1月16日
發(fā)明者艾克哈德·巴德 申請人:赫徹斯特股份公司