專利名稱：雙鏈rna糾正循環(huán)免疫復(fù)合物及單核細(xì)胞功能異常的制作方法
人類的各種主要炎性疾病都是以形成循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)為特征的，其基本上是于血清中存在抗原-抗體復(fù)合物。病原學(xué)上，持續(xù)存在CIC與包括系統(tǒng)性紅瘢狼瘡(SLE)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)、各種惡性腫瘤以及由HIV和其他病毒、細(xì)菌和寄生蟲引起的傳染性疾病有關(guān)。在上述疾病及其他相關(guān)紊亂中，清除CIC，即除去單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞然后將它們輸送到肝臟的正常過程也被擾亂了。因此在這些病人群中常常觀察到外周血單核細(xì)胞功能及吞噬能力的相關(guān)紊亂;一般說來，這些缺陷常?？蓪?dǎo)致各種身體組織的大量炎性破壞，并降低必然要接觸到細(xì)菌、病毒和真菌等病原體者對這些病原體的抵抗能力。
本文介紹了一種能夠控制上述大部分功能缺陷同時又能改善臨床狀況的新方法。特別是描述了一種利用雙鏈RNA的降低異常CIC免疫產(chǎn)物沉積同時改善單核細(xì)胞功能、消除所有對人體的不利影響的方法。另外還描述了保護(hù)胸腺和骨髓衍生的細(xì)胞免受病毒感染及阻止病毒在接受了有效量配對或失配dsRNA的病人體內(nèi)擴(kuò)散，該dsRNA可賦予病人以抗病毒抗性但沒有有害的細(xì)胞毒性。
通常作為良性過程開始的正常功能性免疫系統(tǒng)、免疫復(fù)合物形成可能造成對各種器官和組織的損傷。由CIC激活補(bǔ)體(一種正常血液產(chǎn)物)可導(dǎo)致一系列破壞性變化，包括細(xì)胞溶解及CIC在各種血管壁、細(xì)胞膜上沉積等。在特殊的臨床實(shí)踐中，發(fā)動這種致病性免疫反應(yīng)的抗原常常是未知的，但它們可以是微生物、腫瘤甚或機(jī)體本身的組織。某些傳染性疾病如乙型肝炎亦可伴有免疫復(fù)合物疾病。迄今已了解了CIC在診斷和檢測各種臨床狀態(tài)之治療效果上的作用，進(jìn)而近十年來已建立了40多種檢測和定量分析病理體液中這類免疫復(fù)合物的方法。由生產(chǎn)部門推出的產(chǎn)品小冊子，如標(biāo)有4/87的Maryland醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的小冊子和1977年推出的RocheBiomedical實(shí)驗(yàn)室的小冊子都指出了與CIC有關(guān)的疾病范圍并證明僅次于增加了人體內(nèi)CIC產(chǎn)生問題之化學(xué)問題的重要性。
實(shí)際上CIC可以包含有病毒顆粒，如在愛滋病病人的CIC中即有HIV本身的病毒包含物(Morrow等，Clin.ImmunologyandImmunoPathology.Vol.40，P。515，1986)。CIC，特別是如果以高濃度存在時，可引起免疫抑制作用，甚至能造成對機(jī)體極為重要的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的阻障(參見Morrow等的文章)?？梢?，循環(huán)免疫復(fù)合物(IC)可能是許多人和動物疾病中導(dǎo)致單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞功能異常的原因之一。因此可以認(rèn)為，雖然形成“小”量IC可能是對疾病的正常病理生理反應(yīng)的一部分，但I(xiàn)C的不適當(dāng)合成將會引起和/或加劇各種疾病。
特別是在估計(jì)風(fēng)濕性疾病，如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和紅斑狼瘡中，免疫復(fù)合物形成是一個有用的參數(shù)。許多病人在若干時間內(nèi)體內(nèi)免疫復(fù)合物水平提高，可認(rèn)為與病情活動有關(guān)。
用于估計(jì)人體內(nèi)CIC的方法包括檢測CR1受體，〔一種與補(bǔ)體系統(tǒng)的某些片段(特別是C3G和C4G)結(jié)合的糖蛋白〕。紅血細(xì)胞(RBC)在其表面上攜帶體循環(huán)中的大部分CR1受體。CR1似乎是通過RBC將CIC輸送到肝臟然后被局部的單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞除掉而賦予RBC以消除CIC的能力(見Tausk等，J.Clin.Investigation，Vol.78，p.977，1986及本文提到的文章)。有自身抗體和CIC形成的各種疾病，如關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡和愛滋病，均與紅細(xì)胞CR1的水平低有關(guān)。
本發(fā)明使用了dsRNA，特別是失配dsRNA治療炎癥性疾病。炎癥性疾病的一個根本原因是可利用的CR1受體缺乏及循環(huán)C3增加，對此將在下面詳細(xì)述及。用dsRNA治療可使這些指標(biāo)回復(fù)正常。
我檢查了一組已有HIV感染之證據(jù)的病人，以確定CIC水平、CR1水平與疾病嚴(yán)重性(臨床狀態(tài))之間的關(guān)系。此外我還通過其他試驗(yàn)(直接Coombs試驗(yàn))以檢測是否免疫復(fù)合物能結(jié)合到受試者的RBC上，以及如根據(jù)單核細(xì)胞功能和數(shù)目所探查的他們的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的功能狀態(tài)，而這要在完成這些基礎(chǔ)測定后才有意義。我發(fā)現(xiàn)我確實(shí)能夠在給予某些dsRNA分子后使免疫學(xué)紊亂及惡化的臨床狀況以一種協(xié)調(diào)方式逆轉(zhuǎn)。
我首先選擇了有以前接觸HIV史的個體即有原型免疫學(xué)功能紊亂者，因?yàn)?a)他們已出現(xiàn)了明顯的高水平免疫復(fù)合物(見Mc-Dougal等，J.Clin.Immun.，Vol.5，p130，1985及本文所列參考文獻(xiàn))，(b)病原微生物是已知的，(3)該疾病在危害公眾健康的慢性病中有著空前的重要性。最后，先前所使用了各種治療方法，包括使用藥物和生物制品(干擾素、白細(xì)胞介素、胸腺提取物、isoprinosine、胸腺衍生的多肽等)，但均沒有證明它們可改變嚴(yán)重的免疫紊亂或日益惡化的臨床過程。再者，有許多令人信服的理由表明一種新的治療方法，即抑制免疫復(fù)合物的形成或增加其清除率的方法，在許多其他人體疾病的治療中將會產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。確實(shí)已有新的證據(jù)表明逐漸丟失CR1活性(由于進(jìn)行性CIC形成)與還原病毒/炎性疾病從無癥狀“帶病毒”狀態(tài)到最后瀕死期的整個進(jìn)程有關(guān)(見Inada等，AIDSResearch，Vol，2，p235，1986及本文所列文獻(xiàn))。
“匹配的dsRNA”是指其中對應(yīng)鏈之間的氫鍵鍵合(堿基堆積)為相對完整的dsRNA，即每29個連續(xù)的堿基殘基中平均不到1個堿基對被斷開。據(jù)此，術(shù)語“失配dsRNA”的意義也應(yīng)是明確的。
dsRNA可以是一種多聚次黃苷酸和多聚胞苷酸的復(fù)合物，且多聚胞苷酸中所含尿嘧啶堿基或鳥嘌呤堿基的比例，可由每5個有1個至每30個中有1個(poly I.poly(C4-29X＞U或G)。
dsRNA可具有結(jié)構(gòu)通式rIn·r(C12，U)n。下面討論dsRNA的其他適當(dāng)例子。
用于本發(fā)明的優(yōu)選的失配dsRNA是以選自poly(Cn，U)和poly(Cn，G)(其中n是4到29的正整數(shù))的共聚核苷酸為基礎(chǔ)的，其為通過修飾rIn·rCn以沿著多聚胞核苷酸(rCn)鏈摻入未配對堿基(尿嘧啶或鳥嘌呤)所形成的多聚次黃核苷酸和多聚胞核苷酸之復(fù)合物的失配類似物。此外，dsRNA可以是經(jīng)修飾多聚次黃核苷酸(rIn)的核糖基骨架，如摻入2′-鄰位-甲基核糖基殘基而由poly(I)·poly(C)dsRNA衍生的dsRNA類似物。失配復(fù)合物可與某種RNA穩(wěn)定的聚合物如賴氨酸或纖維素相復(fù)合。這些rIn·rCn的失配類似物中，優(yōu)選的是如Carter和Ts′o在美國專利4130641和4024222號(均列為本文參考文獻(xiàn))中所述的結(jié)構(gòu)通式為rIn·r(C11-14，U)n或rIn·1r(C29，G)n者。本文所述的dsRNA一般均可適用于本發(fā)明。
可用于本發(fā)明的其他失配dsRNA包括poly(I)·poly(C4，U)poly(I)·poly(C7，U)poly(I)·poly(C13，U)poly(I)·poly(C22，U)poly(I)·poly(C20，G)poly(I)·poly(C29，G)和poly(I)·poly(Cp，)23G＞P用于本申請中的淋巴激活素包括干擾素特別是α-干擾素、白細(xì)胞介素特別是向細(xì)胞介素-2(IL-2)和重組的白細(xì)胞介素-2(rIL-2)，以及腫瘤壞死因子(TNF)。另外還包括在動物對所接觸的淋巴激活素的反應(yīng)中所形成之淋巴激活素激活的殺傷細(xì)胞(LAK)。
所用淋巴激活素為干擾素(α)時，其使用量為每毫升病人體液0.01到100，000IRU。所用淋巴激活素為IL-2(最好是rIL-2)時，給藥量的范圍為每公斤病人體重約102IL-2單位至上限達(dá)到病人體內(nèi)不可接受的毒性水平，即高達(dá)106IL-2單位。但最有效的、易于控制毒性反應(yīng)的給藥劑量為每公斤體重約103到104IL-2單位。
dsRNA的常用給藥量為每毫升病人體液約0.1到1，000微克dsRNA。所說的體液是指血清、鹽、維生素等的溶液，其在機(jī)體內(nèi)循環(huán)并浸透組織。如給予上述的兩種制劑時，可作為混合物給予兩種活性制劑，亦可分別但同時給藥或相繼給藥。
dsRNA和淋巴激活素“聯(lián)合”給藥的方式包括將兩種制劑作為治療混合物一起給藥;兩種制劑分別但同時給藥，如通過分開的靜脈內(nèi)輸入管注入同一病人體內(nèi)?！奥?lián)合”給藥還包括將兩種藥物分開給，其中先給一種并在短時間內(nèi)給予第二種。
用dsRNA恢復(fù)已改變了的免疫復(fù)合物形成

圖1顯示了對一60Kg體重病人給予一種dsRNA即rIn·Ir(C11-14，U)n(50-200mg，每周兩次)之前、給藥期間和給藥后所作臨床檢驗(yàn)的結(jié)果。作免疫復(fù)合物試驗(yàn)(Inada，1986，上述文獻(xiàn))旨在尋找能參與整個補(bǔ)體激活過程的免疫復(fù)合物。簡單地說，首先加熱失活病人血清并結(jié)合豚鼠補(bǔ)體，然后還原(使用dTT，即硫蘇糖醇)，最后加入正常RBC作為帶有已知的、預(yù)定含量之游離CR1受體的指示細(xì)胞。如果病人血清中有免疫復(fù)合物，指示細(xì)胞將會凝集，即產(chǎn)生免疫粘附凝集作用(IAHA)。我們用“游離”CR1受體試驗(yàn)測定了病人RBC上的“游離”CR1受體活性，并將我的表1中的結(jié)果與Inada對各種未處理之病人所作檢測的結(jié)果(見他的圖1所示，AIDS Research，Vol.2，No.3，p238，1986)進(jìn)行比較。我首先使用Inada所描述的及本領(lǐng)域內(nèi)已知的技術(shù)使免疫復(fù)合物、補(bǔ)體及病人RBC“影細(xì)胞”(空胞)混合。如果病人的RBC上有可利用的CR1受體，即結(jié)合CIC，這樣當(dāng)加入指示RBC(得自正常人)時，溶液中便沒有CIC且指示RBC不會凝集。如果達(dá)到凝集的程度，即表明病人的RBC空胞因沒有可利用的CR1受體而不能結(jié)合CIC。在這種情況下，沒有CR1受體可能是由于存在高(異常)水平的循環(huán)免疫復(fù)合物而使這些受體被飽和之故。“游離”CR1受體的水平低是一個預(yù)后不良的征象，并常常與CIC水平高有關(guān)。
表1CIC水平、“游離”CP1受體含量之間的關(guān)系直接Coomb′s試驗(yàn)以及給予dsRNA對糾正這些些異常(致病性)免疫學(xué)參數(shù)的效果血細(xì)胞免疫復(fù)合物 “游離”CR1直接Coombs′病人比容(μg/ml)受體試驗(yàn)1.Rejo，予處理 40 32 - IgG、IgM、C32周 40 16 + IgG、IgM、C34周 36 4 ++ IgG、IgM、C38周400+++IgG，IgM16周400+++痕量IgG2.Clin，予處理 45 40 - IgM，C32周4620+04周450++08周450++016周450+++03.Tuja，予處理 36 36 + IgG，IgM，C34周 34 28 + IgG， C38周 35 16 +++ IgG、痕量C320周354+++040周350++++0
4.Poca，予處理 34 32 - IgG、IgM、C38周364+IgG20周 36 4 ++ 痕量IgM、痕量C340周360+++0檢查正常被檢者(10)免疫復(fù)合物陰性，CR1++++，Coombs′試驗(yàn)陰性。
人們可以很容易地看出，我通過給予dsRNA能夠使患炎性疾病病人的這些參數(shù)恢復(fù)到基本正常。將表1所示數(shù)據(jù)與Inada等人的圖1和表1中所示數(shù)據(jù)作比較，可以很清楚地看出，我對有關(guān)病人使用dsRNA治療后所測的結(jié)果，就同樣廣泛的實(shí)驗(yàn)室參數(shù)來說，與Inada等人報(bào)導(dǎo)的37個健康人的正常值十分接近。
我在上面已就用于本發(fā)明之檢測“游離”CR1受體的方法作了概述。我還利用Inada等人的技術(shù)檢測了在給予dsRNA之前、給藥期間及給藥后結(jié)合到病人RBC上的免疫分子的實(shí)際類型(直接Coombs′試驗(yàn))。特別是當(dāng)IgG和IgM這兩類免疫球蛋白結(jié)合到RBC上時，即表明存在一種活性異常免疫過程。例如，Inada發(fā)現(xiàn)正常受檢者都沒有出現(xiàn)直接Coombs′試驗(yàn)陽性，而攜帶活性還原病毒感染的病人中64-84%很容易檢出陽性結(jié)果，而且陽性的程度與臨床狀態(tài)有關(guān)。我還檢驗(yàn)了是否由補(bǔ)體系統(tǒng)之特異成分C3包被RBC也是異常免疫或炎性反應(yīng)的一個附加的可靠標(biāo)志。特別是，RBC上存在C3即表明補(bǔ)體系統(tǒng)或其中C1、C4、C2及最后的C3相繼結(jié)合到RBC上的級聯(lián)反應(yīng)被激活。再者，我還證明了這樣一個完全未曾預(yù)略到的發(fā)現(xiàn)，即dsRNA能夠糾正附著于病人循環(huán)RBC上之炎性系統(tǒng)成分(如IgG、IgM和C3分子)的異常濃度。
特別重要的是，在我的恢復(fù)免疫反應(yīng)之不同方面的動力學(xué)的工作中，還表明dsRNA與基本疾病過程的可見根源有一定關(guān)聯(lián)。例如，與臨床狀態(tài)迅速改善相關(guān)聯(lián)的免疫復(fù)合物水平很快下降(表1)，而直接Coombs′試驗(yàn)則改善較慢。我的觀察結(jié)果支持這樣的論點(diǎn)(a)Coombs′試驗(yàn)的異常很難于轉(zhuǎn)為正常，常常需要2-3個月才能去除;而(b)CIC水平下降更為迅速，因?yàn)檎缬弥苯覥oombs′試驗(yàn)所檢測的，它們通常只在RBC被異常免疫復(fù)合物飽和之后才開始出現(xiàn)。將我的表1(最后一欄，直接Coombs′試驗(yàn)數(shù)據(jù))與Inada的圖2和3相比較，有力地證明了我確實(shí)能夠使我的被檢病人的嚴(yán)重免疫功能紊亂按照Inada等人獨(dú)立檢測一組完全健康和正常人群而建立的免疫學(xué)標(biāo)準(zhǔn)恢復(fù)到基本正常狀態(tài)(例如Inada檢測的一組健康被檢者中，其RBC上均沒有可檢出水平的免疫球蛋白決定子(determinants)或補(bǔ)體C3片段)。
恢復(fù)已改變了的血液單核細(xì)胞功能雖然單核細(xì)胞-巨噬細(xì)胞在(1)發(fā)起和調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)以及(2)抗微生物的防御機(jī)制中起著關(guān)鍵性作用，但對這些細(xì)胞研究的課題卻很少(見Roux-Lombard等，EuropeanJ。ofClin.Investigation，Vol.16，p262，1986和本文列出的文獻(xiàn))。例如，單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞能吞噬各種微生物并產(chǎn)生具有高度殺菌能力的活性氧中間體。它們還能分泌已知可改變T細(xì)胞功能的前列腺素。因此，考慮到我在表1所示的其他參數(shù)，相對于它們在免疫調(diào)節(jié)中的互補(bǔ)性和關(guān)鍵性作用，我進(jìn)一步研究了在對同一組病人給予dsRNA之前、給藥期間和給藥之后的單核細(xì)胞吞噬和殺菌能力(一種重要功能)及外周血單核細(xì)胞數(shù)。
我用Ficoll-Hypaque密度梯度離心法由肝素化血中分離出單核細(xì)胞。用錐蟲蘭染料排斥試驗(yàn)確定其存活率大于95%。然后用MO2(用于單核細(xì)胞)、OKT3、OKT4、OKT8等標(biāo)準(zhǔn)單克隆抗體檢測單核細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞亞群，繼后又使用了得自O(shè)rtho Diagnostics公司(Raritan，New Jersey，U.S。A.)的螢光素結(jié)合的羊抗小鼠免疫球蛋白，以便于進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
表2給帶有免疫復(fù)合物的病人使用dsRNA以恢復(fù)其降低了的血單核細(xì)胞功能/數(shù)目病人%單核細(xì)胞單核細(xì)胞數(shù)%殺傷細(xì)胞(MO2標(biāo)志) (每毫升) (正常范圍＝10-62%)1，Rajo，預(yù)處理15502周633044周12660108周189901816周179352，Clin，預(yù)處理212632周8504104周13819358周159454016周19119740
3，Tuja，預(yù)處理29804周1153948周104901520周125882040周18882354，Poca，預(yù)處理14028周93151620周124202440周2070040我還以標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)在自體或合并的AB型血清存在下使用金黃色釀膿葡萄球菌檢測了殺菌能力(Cruchard等，DiagnosticImmunol.，Vol.2，P203，1984;該部分內(nèi)容列入本文參考文獻(xiàn))。表2中我給出了以保溫1小時后被殺死之細(xì)菌的百分?jǐn)?shù)表示的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
從表2可以看出，在免疫協(xié)合者接受定期給予的失配dsRNA(rIn·r(C11-14，U)n，亦稱Ampligen ，此為HEM Research有限公司(Rockville，Maryland，USA)注冊的商品名)后，其單核細(xì)胞數(shù)目和功能得以迅速而出乎預(yù)略的恢復(fù)。遺憾的是，以前一些研究者使用其他淋巴激活素來恢復(fù)這種功能的嘗試均告失敗。比較表1和2可以明顯看出，就同時恢復(fù)多種免疫學(xué)功能來說，我已獲得了多方面的成果，而且獲得了具有有利的反應(yīng)動力學(xué)并顯然沒有宿主毒性的效果。
表3所示數(shù)據(jù)表明dsRNA的保護(hù)性作用可擴(kuò)展到免疫系統(tǒng)之各種T細(xì)胞成分以外。這些數(shù)據(jù)顯示了dsRNA在保護(hù)骨髓細(xì)胞系例如但不僅限于單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞中的效果?？紤]到T細(xì)胞屬于胸腺衍生的細(xì)胞系，所以我還證明了某些劑量的dsRNA特異性保護(hù)骨髓及胸腺來源之人類細(xì)胞的其他能力;即能夠使細(xì)胞免受動物病毒感染，而對包括其復(fù)制周期在內(nèi)的正常細(xì)胞功能則沒有可測出的有害影響。其中使用了HIV(病毒)作為原型，因?yàn)樵摬《驹诩毙匀馨芰?、亞急性溶胞能力甚或基因檎夏芰Γㄇ痹?或激發(fā)癌癥的能力)等方面均可模擬其他病毒。
表3所示結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了對各種病毒分離物(如HTLV-ⅢB和HTLV-ⅢRF)及各種靶細(xì)胞(如U937或H9細(xì)胞)的抗病毒作用。
阻止和/或控制骨髓衍生之細(xì)胞的感染而又沒有毒性，這在治療上是很有意義的，因?yàn)槭聦?shí)上許多動物病毒都以這類細(xì)胞作為初級或二級病毒儲庫。例如，HIV用巨噬細(xì)胞、巨核細(xì)胞及各種能對集落刺激因子起反應(yīng)的細(xì)胞作為宿主，而這些集落刺激因子恰在其致病機(jī)理及使之得以逃避宿主免疫監(jiān)視能力等方面起到重要作用。
權(quán)利要求
1.一種治療以病人血液中循環(huán)免疫復(fù)合物增加為特征之炎性疾病的方法，該方法包括對患有這種炎性疾病者給予有效量的雙鏈RNA，直至循環(huán)免疫復(fù)合物恢復(fù)到正常水平以表明該炎性疾病被去除為止。
2.一種診斷和治療由病人血液中循環(huán)免疫復(fù)合物誘導(dǎo)之炎性疾病的方法，其包括(1)通過(a)檢測病人血液樣品之紅血細(xì)胞上可利用的CR1受體水平，(b)作直接Coombs′試驗(yàn)以檢測已結(jié)合到病人紅血細(xì)胞上之免疫分子的類型，或(c)作為病人補(bǔ)體系統(tǒng)被激活的一種指征估計(jì)被C3包被之病人紅血細(xì)胞的水平，以估計(jì)病人血液血清樣品中的循環(huán)免疫復(fù)合物，以及必要時(2)給病人使用有效量的雙鏈RNA。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其中炎性疾病是由微生物如病毒、細(xì)菌或原蟲引起的，為一自身免疫過程、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝炎或系統(tǒng)性紅斑狼瘡。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的方法，其中炎性疾病是按照A型、B型或非A/B型肝炎病毒病原因子分類的。
5.一種診斷和恢復(fù)病人免疫功能的方法，其包括(1)通過(a)自病人體內(nèi)分離單核細(xì)胞，檢測單核細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞亞群、將檢測的結(jié)果與已知的、標(biāo)準(zhǔn)化的無癥狀人群的檢測結(jié)果相比較;(b)檢測病人血液樣品的殺傷細(xì)胞的能力并與對已知的、標(biāo)準(zhǔn)化的無癥狀正常人群所作檢測的結(jié)果相比較;或(c)進(jìn)行(a)或(b)兩種檢測以估計(jì)病人的免疫功能，而且如果一項(xiàng)或兩項(xiàng)檢測所得的數(shù)據(jù)與標(biāo)準(zhǔn)值有明顯差異，則(2)對病人給予足以恢復(fù)其免疫功能量的dsRNA。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的方法，其中失配dsRNA是與poly C復(fù)合的poly I，又最好其中與poly C復(fù)合的poly I是另外還與一種RNA穩(wěn)定化的聚合物如賴氨酸或纖維素相復(fù)合的。
7.根據(jù)權(quán)利要求2或5的方法，其中dsRNA是與多聚尿苷酸復(fù)合的多聚腺苷酸，且最好是失配的(mismatched)。
8.根據(jù)權(quán)利要求2或5的方法，其中dsRNA是失配的并且是一種多聚次黃苷酸和多聚胞苷酸的復(fù)合物，多聚胞苷酸的5個至30個堿基中含有1個尿嘧啶或尿嘌呤堿基，且該失配dsRNA最好是rIn′r(C11-14，U)n。
9.根據(jù)權(quán)利要求2或5的方法，其中在用dsRNA治療前或治療同時給用一種淋巴激活素如干擾素或白細(xì)胞介素。
10.一種使胸腺或骨髓分化的細(xì)胞免受病毒感染或阻止病毒擴(kuò)散的方法，其包括對被試者投予一種能使之產(chǎn)生抗病毒抗性而又無不良之細(xì)胞毒性的有效量的配對或失配的dsRNA。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中失配dsRNA是與poly C復(fù)合的poly I。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中與poly C復(fù)合的poly I還另外與一種RNA穩(wěn)定化的聚合物相復(fù)合。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其中穩(wěn)定化的聚合物是賴氨酸或纖維素。
14.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中dsRNA是與多聚尿苷酸復(fù)合的多聚腺苷酸。
15.根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其中給予了一種失配dsRNA。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中失配dsRNA是多聚次黃苷酸和多聚胞苷酸的復(fù)合物，且包聚胞苷酸的每1至30個堿基中有1個尿嘧啶或鳥嘌呤堿基。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中失配dsRNA是rIn·r(C11-14，U)n。
18.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中dsRNA包含鍵斷裂區(qū)且dsRNA表現(xiàn)有rIn·r(C11-14，U)的有利的治療比例特性。
19.根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其中所給予的失配dsRNA的量可達(dá)到每毫升病人體液1至1，000微克的水平。
全文摘要
給予匹配的或失匹配的dsRNA可使見于患有炎性疾病，病毒感染或單純免疫功能失調(diào)之病人血清中的，循環(huán)免疫復(fù)合物異常恢復(fù)到正常水平或賦予病人以抗病毒免疫力。
文檔編號A61K31/70GK1035050SQ8810637
公開日1989年8月30日 申請日期1988年7月16日 優(yōu)先權(quán)日1987年7月17日
發(fā)明者威廉A·卡特 申請人:Hem研究公司