專利名稱:用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松或肥胖的含有苯基四唑衍生物的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥、肥胖癥、糖尿病或高脂血癥的藥物組合物，其包括作為活性成分的苯基四唑衍生物或其藥用鹽。
背景技術(shù)
隨著老齡人口數(shù)量的增加，老年性疾病諸如骨質(zhì)疏松癥變得越來越普遍。骨質(zhì)疏松癥是ー種能引起骨質(zhì)密度(BMD)降低、破壞骨微結(jié)構(gòu)以及改變骨中各種蛋白質(zhì)含量的骨疾病，可導(dǎo)致骨折的風(fēng)險增加。骨質(zhì)疏松癥是由于骨吸收與骨形成之間的不平衡導(dǎo)致的，當(dāng)骨吸收的速度超過骨形成時，骨質(zhì)疏松癥便開始發(fā)展。骨質(zhì)疏松癥中，鈣化的骨組織密度降低，導(dǎo)致骨髄腔擴(kuò)張。上述癥狀進(jìn)展吋，即使很輕的壓力沖擊，也很容易發(fā)生骨折。
對骨質(zhì)疏松癥的早期研究主要集中在鈣和磷代謝紊亂，但卻沒有明確其發(fā)病機(jī)理?，F(xiàn)有的治療骨質(zhì)疏松癥的治療制劑以ニ磷酸鹽產(chǎn)品(例如，阿侖膦酸鈉和依替膦酸鈉)、激素產(chǎn)品(例如，雷洛昔芬)、維生素D產(chǎn)品、降鈣素產(chǎn)品和鈣產(chǎn)品為代表。然而，ニ磷酸鹽產(chǎn)品的問題是吸收率低、服用方法繁瑣及容易誘導(dǎo)食管炎。激素產(chǎn)品需要終身給藥，這可能導(dǎo)致副作用，諸如乳腺癌、子宮癌、膽結(jié)石和血栓形成。維生素D產(chǎn)品價格昂貴，也沒有太大效果。降鈣素產(chǎn)品也存在價格較高且服用不便的問題。鈣產(chǎn)品副作用較少，但僅限于預(yù)防而非治療。短期服藥不能非常有效地治療骨質(zhì)疏松癥，需要長期服藥。因此，人們需要一種能長期服用、副作用極大地減少并且具有增強(qiáng)藥效的新型藥物。
骨髄源性成人干細(xì)胞，特別是間質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)，屬于多潛能細(xì)胞類型，其分化成幾個不同的細(xì)胞譜系，諸如骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞。成人干細(xì)胞的分化趨于減少與年齡有關(guān)的疾病，以預(yù)防骨、軟骨和肌肉組織再生的減少、免疫功能下降及環(huán)境引起的疾病。因此，激活成人干細(xì)胞分化的方法可以有效治療與代謝疾病、骨疾病和老齡化相關(guān)的疾病。
成人干細(xì)胞分化成特定的細(xì)胞類型是由重要的轉(zhuǎn)錄因子控制的，該轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)通過與外部信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的相互作用來調(diào)節(jié)。特別地，已知脂肪細(xì)胞的分化由轉(zhuǎn)錄因子PPARy (過氧化物酶體増殖物激活受體)調(diào)節(jié)。轉(zhuǎn)錄因子通過與不同的配體結(jié)合可以促進(jìn)或抑制脂肪細(xì)胞分化，已知轉(zhuǎn)錄因子活性的増加有助于脂肪細(xì)胞分化，導(dǎo)致肥胖增加[MacDougald 等，Annu. Rev. Biochem. , 1995 ；64 :345-73 ；Adams 等，J. Clin. Invest. , 1997 ；100 :3149-53 ；Fajas 等，Curr. Opin. CellBiol.，1998 ；10 :165-73]。
最近，已經(jīng)鑒定出ー種調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子PPAR Y的轉(zhuǎn)錄共激活因子，蛋白TAZ(具有PDZ-結(jié)合基序的轉(zhuǎn)錄共激活因子)[Kanai等，Embo. J.，2000 ；19 :6778-91]。TAZ蛋白被克隆為與14-3-3蛋白結(jié)合的伴侶蛋白，其第89位絲氨酸被磷酸化，在胞液中與14-3-3蛋白相互作用[Kanai 等，Embo. J.，2000 ；19 :6778-91 ; Park 等，J. Biol. Chem. ,2004 ；279 17384-90]。TAZ蛋白含有Wff結(jié)構(gòu)域、螺旋-螺旋結(jié)構(gòu)域和I3DZ-結(jié)合基序，這表明與其他蛋白各種結(jié)合的可能性。特別地，Wff結(jié)構(gòu)域顯示出與肽序列PPXY有很強(qiáng)的親和力，這表明TAZ蛋白與多個含有 PPXY基序的蛋白結(jié)合的可能性。2003年，人們發(fā)現(xiàn)，蛋白TAZ中的Wff結(jié)構(gòu)域與決定性調(diào)節(jié)因子RUNX2 (Runt-相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2)結(jié)合，能促進(jìn)破骨細(xì)胞分化。據(jù)報道，通過結(jié)合，RUNX2靶基因的表達(dá)調(diào)節(jié)活性被放大以及骨-特異性基因的表達(dá)增加，從而導(dǎo)致成骨的易化作用[Hong等，Science，2005 ;309 :1074-8]。進(jìn)ー步地，多瘤病毒T抗原，已知為ー種結(jié)合到蛋白TAZ的Wff結(jié)構(gòu)域的蛋白，但其在細(xì)胞中具體的功能尚不明確。更進(jìn)一歩地，PPAR Y，ー種具有PPXY基序的轉(zhuǎn)錄因子，被鑒定為ー種新型TAZ結(jié)合蛋白，且這種通過PPARy的結(jié)合抑制脂肪細(xì)胞分化[Hong等，Science，2005 ；309 :1074-8]。蛋白TAZ抑制脂肪細(xì)胞分化的機(jī)制可以通過如下事實來解釋蛋白TAZ與PPAR Y結(jié)合，不僅抑制PPAR Y的DNA結(jié)合活性，而且還抑制基因轉(zhuǎn)錄易化活性，從而抑制脂肪細(xì)胞-特異性PPAR y靶基因的表達(dá)。蛋白TAZ與RUNX2和PPARy的結(jié)合在調(diào)節(jié)MSCs的分化中起到非常重要的作用。具體而言，人們發(fā)現(xiàn)在MSCs的分化過程中，破骨細(xì)胞很容易分化，而通過蛋白TAZ與RUNX2和PPAR Y的結(jié)合，脂肪細(xì)胞的分化退步了 [Hong等,Science, 2005 ；309 :1074-8 ;Deng等,Front Biosci.，2008 ；13 :2001-21 ;Hong 等，Cell Cycle 2006 ；5 :176-179]。也就是說，蛋白TAZ的分化決定了 MSCs的分化。
已知TBX5(T-box轉(zhuǎn)錄因子5)是另ー種TAZ結(jié)合蛋白，人們認(rèn)為其結(jié)合在上肢和心臟形成過程中具有重要的作用[Murakami等，Proc. Natl. Acad. Sci.，USA. , 2005 ；102 :18034-9]。進(jìn)ー步地，TBX5可能與在早期胚胎階段很重要的蛋白PAX3結(jié)合，調(diào)節(jié)其功倉E [Murakami 等，Biochemical & Biophysical Researcn Communications,2006 ；339 533-9]。此外，蛋白TAZ通過TOZ-結(jié)合基序與含不同PDZ結(jié)構(gòu)域的蛋白結(jié)合顯示出其活性。TTF-I (甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1)是ー種在肺發(fā)育中起激活作用的基因，能調(diào)節(jié)表面活性蛋白-C基因表達(dá)。蛋白TAZ被認(rèn)為是一種轉(zhuǎn)錄共激活因子，通過與TTF-I結(jié)合來促進(jìn)表面活性蛋白-C基因表達(dá)。[Park等，J. Biol. Chem.，2004 ;279 :17384-90]。進(jìn)ー步地，有人提出蛋白TAZ通過與TEF-I (轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子-I)結(jié)合，能在肌肉組織中調(diào)控TEF-I調(diào)節(jié)性基因的表達(dá)[Mahoney 等，Biochem. J. , 2005 ；388 :217-25]。
除了具有調(diào)整間質(zhì)干細(xì)胞分化的功能外，已知TAZ在乳腺癌細(xì)胞MCF7的遷移、侵襲和腫瘤生成中還有其它功能[Chan等，CancerRes.，2008 ；68 :2592-8]。據(jù)報道，在TAZ-不足的動物模型中發(fā)現(xiàn)了形成多個腎囊的多囊腎疾病，且人們已嘗試用各種辦法來研究蛋白 TAZ 的功能[Makita 等，Am. J. Physiol. Renal. Physiol. , 2008 ；294 :F542_53 ；Tian 等，Molecular & Cellular Biology, 2007 ;27 :6383-95]。同時，有些報道稱在成骨分化中 FGF-2 導(dǎo)致了 TAZ 蛋白減少[Deng ZL 等，F(xiàn)ront Biosci.，2008 ; 13 :2001-21 ;Eda 等，Biochemical & Biophysical Research Communications,2008 ;366 :471-5],盡管TAZ蛋白的功能很重要，但是對于TAZ蛋白的調(diào)節(jié)性機(jī)制的研究卻很少。
TAZ蛋白在作為調(diào)節(jié)具有DNA結(jié)合活性的轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄共激活因子時，其從細(xì)胞液到細(xì)胞質(zhì)的遷移是先決條件。迄今為止，已知TAZ蛋白能通過絲氨酸去磷酸化作用遷移到細(xì)胞核中，有人提出抑制蛋白TAZ與14-3-3之間結(jié)合的方法可以增加TAZ蛋白到細(xì)胞核的遷移。因此，人們認(rèn)為有助于TAZ遷移到細(xì)胞核的化合物對脂肪細(xì)胞分化具有抑制作用，且該化合物也有助于成骨細(xì)胞分化。
本發(fā)明人一直在努力尋找ー種能有效預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥、糖尿病或高脂血癥的化合物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)苯基四唑衍生物通過調(diào)節(jié)TAZ蛋白能有效治療或預(yù)防骨質(zhì)疏松癥的，同時通過抑制脂肪細(xì)胞分化能有效治療肥胖。

發(fā)明內(nèi)容
因此，本發(fā)明的目的是提供一種用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥、肥胖癥、糖尿病或高脂血癥的藥物組合物，其包括作為活性成分的苯基四唑衍生物或其藥用鹽。
本發(fā)明的ー個方面是提供一種用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥、肥胖癥、糖尿病或高脂血癥的藥物組合物，包括作為活性成分的式(I)的化合物或其藥用鹽
權(quán)利要求
1.式(I)所示的化合物或其藥用鹽在制備用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥的藥物中的應(yīng)用
2.根據(jù)權(quán)利要求
I所述的應(yīng)用，其中式(I)所述的化合物選自下組 {2-乙基-7-甲基-3-[2' -(IH-四唑-5-基)聯(lián)苯-4-基甲基]-3H-咪唑并[4，5_b]吡啶-5-基}甲醇； 2-丁基-5-甲基-6-卩比啶-3-基-3-[2' -(IH-四唑-5-基)聯(lián)苯-4-基甲基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶； 2- 丁基-6-吡啶-2-基-3- [2 '3.式(I)所示的化合物或其藥用鹽在制備用于預(yù)防或治療肥胖癥的藥物中的應(yīng)用
4.根據(jù)權(quán)利要求
3所述的應(yīng)用，其中式(I)所述的化合物選自下組 {2-乙基-7-甲基-3-[2' -(IH-四唑-5-基)聯(lián)苯-4-基甲基]-3H-咪唑并[4，5_b]吡啶-5-基}甲醇； 2-丁基-5-甲基-6-卩比啶-3-基-3-[2' -(IH-四唑-5-基)聯(lián)苯-4-基甲基]-3H-咪唑并[4，5-b]吡啶； 2- 丁基-6-吡啶-2-基-3- [2 '專利摘要
一種包括式(Ⅰ)所示的苯基四唑衍生物或其藥用鹽的藥物組合物，其通過調(diào)節(jié)蛋白TAZ可有效用于預(yù)防或治療骨質(zhì)疏松癥、肥胖癥、糖尿病或高脂血癥。其中，A為乙基或正丁基；R1為甲基、-CH2OH、-CO2CH3、-CH2F、-CH(OCH3)2、-CH2OC(＝O)CH3、苯乙烯基或-CH2OCH2SCH3；R2為H、Br、-CO2CH3、苯基、吡啶-2-基、吡啶-3-基、苯乙烯基；R3為H或甲基；X為CH或N；以及P為H或-CH(CH3)OCH2CH3。
文檔編號A61K31/4184GKCN101904844 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請?zhí)朇N 201010190815
公開日2012年9月5日 申請日期2010年6月2日
發(fā)明者姜男淑, 張誠延, 徐知希, 李圭亮, 柳圣殷, 洪廷浩, 裴明愛, 許政寧, 金洛貞, 黃銀淑 申請人:韓國化學(xué)研究院導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan非專利引用 (1),