本發(fā)明屬于植物提取，涉及一種淡竹葉提取物的制備方法及其產(chǎn)品和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、淡竹葉（lophatherum?gracile?brongn.）是禾本科（poaceae?barnhart）淡竹葉屬（lophatherum）的多年生草本植物。別名又叫山雞米、金雞米、迷身草、竹葉卷心，主要分布在中國云南、江蘇、安徽、浙江、湖南、廣東、廣西、四川等地區(qū)，印度、緬甸、馬來西亞、新幾內(nèi)亞島及日本均有分布。主要生于海拔1200m以下的山坡、林地或林緣、道旁庇蔭處。淡竹葉的干燥莖葉為我國傳統(tǒng)中藥草，《神農(nóng)本草經(jīng)》與《本草綱目》中均有記載，隰草類。李時珍云：“淡竹葉，處處原野有之。春生苗高數(shù)寸，細(xì)莖綠葉，儼如竹米落地所生細(xì)竹之莖葉，其根一窠數(shù)十須，須上結(jié)子，與麥門冬一樣，但堅硬爾。去煩熱、利小便、清心”。1977年以來的歷版《中華人民共和國藥典》對淡竹葉均有收載，其味甘、淡，性寒，具有清熱瀉火、除煩、利尿的功效，多用于熱病利渴，口舌生瘡，小便赤澀淋痛等癥。

2、目前，淡竹葉中有效成分的提取純化工藝主要為水提取和醇提法，例如cn103262943a公開了一種淡竹葉提取物的制備方法，取淡竹葉莖葉，粉碎，加入乙醇溶液，回流提取，過濾，濃縮，噴霧干燥，得淡竹葉醇溶性提取物；取濾渣，加蒸餾水，浸泡提取，過濾或離心后，濃縮，噴霧干燥，得淡竹葉水溶性提取物，將所得淡竹葉醇溶性提取物和淡竹葉水溶性提取物以質(zhì)量比1:1－3的比例混合配制，即成；cn102302685a公開了一種淡竹葉提取物的制備方法，將淡竹葉的干燥藥材粉碎后用乙醇水溶液提取得到粗提物，再經(jīng)過大孔吸附樹脂柱純化得到淡竹葉提取物；cn102940597a公開了一種淡竹葉提取物的制備方法，將淡竹葉原料加入水中，加熱回流提取，過濾，得到母液，將母液進(jìn)行真空濃縮，離心分離去除不溶物，收集分離液，將分離液進(jìn)行醇沉萃取，過濾濃縮，噴霧干燥，得到淡竹葉提取物。上述淡竹葉提取物成分復(fù)雜，無法做到準(zhǔn)確的質(zhì)量控制，從而難以確保其安全性和功效性。

3、因此，開發(fā)出一種有效成分明確，具有抗氧化、抗炎舒緩的作用，可以用于化妝品、醫(yī)藥輔助用品的淡竹葉提取物意義重大。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種淡竹葉提取物的制備方法及其產(chǎn)品和應(yīng)用，尤其提供一種功效成分明確的且具有抗氧化和抗炎舒緩功效的淡竹葉提取物的制備方法及其產(chǎn)品和應(yīng)用。

2、為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

3、第一方面，本發(fā)明提供一種淡竹葉提取物的制備方法，所述制備方法包括如下步驟：

4、（1）將淡竹葉原料與乙醇水溶液混合后進(jìn)行微波-超聲波聯(lián)合處理；

5、（2）將處理后的溶液進(jìn)行回流提取，得到提取液；

6、（3）將提取液減壓濃縮得到濃縮液；

7、（4）將濃縮液采用大孔樹脂進(jìn)行純化洗脫，收集洗脫液；

8、（5）將洗脫液進(jìn)行絮凝處理，然后干燥，得到淡竹葉提取物。

9、本發(fā)明所涉及的淡竹葉提取物的制備方法創(chuàng)造性地采用微波-超聲波聯(lián)合處理、大孔樹脂純化富集，并結(jié)合絮凝處理的方式，可以有效的去除其中的大極性雜質(zhì)，制得的提取物有效成分明確，具有優(yōu)異的dpph自由基清除能力以及前列腺素、辣椒素受體抑制能力，且無農(nóng)藥殘留，可以作為護(hù)膚品及醫(yī)藥輔助用品的活性成分，起到抗氧化、抗炎舒緩的作用。

10、優(yōu)選地，步驟（1）中所述淡竹葉原料為經(jīng)過粉碎后過70-90目（例如70目、72目、74目、77目、80目、83目、86目、88目、90目等）篩得到的淡竹葉粉，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

11、步驟（1）中所述乙醇水溶液的體積分?jǐn)?shù)為20%-60%，例如20%、21%、23%、26%、30%、35%、40%、45%、50%、60%等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

12、本發(fā)明創(chuàng)造性地發(fā)現(xiàn)采用體積分?jǐn)?shù)為20%-60%的乙醇水溶液進(jìn)行回流提取，能有效提高淡竹葉提取物的抗氧化和抗炎舒緩能力。

13、所述乙醇水溶液與淡竹葉原料的質(zhì)量比為(3-15):1，其中(3-15)中的具體點(diǎn)值可以獨(dú)立地選擇3、5、5.2、5.4、5.7、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10、15等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

14、優(yōu)選地，步驟（1）所述聯(lián)合處理的溫度為30-70℃，例如30℃、40℃、41℃、42℃、45℃、48℃、50℃、52℃、54℃、56℃、60℃、70℃等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

15、所述聯(lián)合處理中微波處理的功率為40-400?w，例如40w、50?w、55?w、60?w、65?w、70w、75?w、80?w、85?w、90?w、95?w、100?w、150?w、200?w、250?w、300?w、400w等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

16、所述聯(lián)合處理中微波處理的時間為10-30?min，例如10?min、15?min、16?min、17min、18?min、19?min、20?min、21?min、22?min、23?min、24?min、25?min、30?min等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

17、所述聯(lián)合處理中超聲波處理的功率為50-600?w，例如50?w、100?w、110?w、120?w、130?w、140?w、150?w、200?w、250?w、300?w、350?w、400?w、450?w、500?w、600?w等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

18、所述聯(lián)合處理中超聲波處理的時間為3-15?min，例如3?min、5?min、6?min、7?min、8?min、9?min、10?min、15?min等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

19、本發(fā)明創(chuàng)造性地發(fā)現(xiàn)在進(jìn)行微波-超聲波聯(lián)合處理時，采用40-400?w的微波功率和50-600?w的超聲功率相比于其他功率，能有效提高淡竹葉提取物的抗氧化和抗炎舒緩能力，微波功率增加可以提高植物細(xì)胞內(nèi)部的溫度，加速細(xì)胞壁的破裂，然而過高的微波功率會導(dǎo)致加熱速度過快，進(jìn)而導(dǎo)致熱損傷或副反應(yīng)的發(fā)生，從而影響提取效果；超聲波功率增加空化泡崩潰所需的時間越短，單位時間內(nèi)超聲產(chǎn)生的空化效應(yīng)增強(qiáng)，有利于淡竹葉提取，然而超聲波功率過高會產(chǎn)生緩沖效應(yīng)，降低能量傳遞的速率而導(dǎo)致空化作用減弱，也可能會造成有效成分的降解或異構(gòu)化。本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)，微波處理10-30?min，超聲波處理3-15min，聯(lián)合處理的溫度為30-70℃，能進(jìn)一步提高淡竹葉提取物的抗氧化和抗炎舒緩能力。

20、優(yōu)選地，步驟（2）所述回流提取的次數(shù)為1-3次，例如1次、2次、3次，每次提取的時間獨(dú)立地為1-3?h，例如1?h、1.2?h、1.4?h、1.7?h、2.0?h、2.4?h、2.8?h、3?h等，上述數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

21、優(yōu)選地，步驟（3）所述減壓濃縮的在溫度為40-70℃（例如40℃、45℃、46℃、48℃、50℃、55℃、60℃、65℃、70℃等）下進(jìn)行，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

22、所述減壓濃縮至提取液的1/5-1/15，例如1/5、1/7、1/8、1/9、1/10、1/12、1/14、1/15等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

23、優(yōu)選地，步驟（4）所述大孔樹脂包括ab-8或d101型大孔樹脂。

24、所述大孔樹脂與淡竹葉粉原料的質(zhì)量比為(2-7):1，其中(2-7)中具體點(diǎn)值可以獨(dú)立地選擇2、3、3.1、3.3、3.6、4、4.2、4.4、4.6、5、7等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

25、所述純化洗脫的步驟包括：吸附完畢后，靜置1-15?h，先用水洗脫1-6?bv，然后用3%-25%乙醇水溶液洗脫3-10?bv，再用60%-95%乙醇水溶液洗脫4-12?bv。

26、采用上述特定的洗脫程序，即先用水洗脫再用乙醇水溶液洗脫，并結(jié)合特定濃度的乙醇水溶液配合方式能有效提高淡竹葉提取物的抗氧化和抗炎舒緩能力。

27、所述1-15?h，可以是1?h、2?h、2.5?h、3?h、3.5?h、4?h、5?h、6?h、7?h、8?h、9?h、10h、11?h、12?h、15?h等，所述1-6?bv可以是1?bv、2?bv、3?bv、4?bv、5?bv、6?bv等，所述3-10bv可以是3?bv、4?bv、5?bv、6?bv、7?bv、8?bv、10?bv等，所述4-12?bv可以是4?bv、5?bv、6bv、7?bv、8?bv、9?bv、10?bv、12?bv等，上述數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

28、所述3%-25%乙醇水溶液可以選擇濃度為3%、5%、6%、7%、8%、9%、10%、11%、12%、13%、14%、15%、20%、25%等的乙醇水溶液，所述60%-95%乙醇水溶液可以選擇濃度為60%、70%、75%、80%、85%、90%、95%等的乙醇水溶液，上述數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

29、優(yōu)選地，步驟（5）所述絮凝處理使用絮凝劑，所述絮凝劑的用量為洗脫液的0.05-1.3%，例如0.05%、0.1%、0.15%、0.2%、0.3%、0.4%、0.5%、0.7%、0.8%、0.9%、1%、1.3%等，該數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

30、所述絮凝劑為明膠、ztc1+1和檸檬酸的組合。

31、所述明膠、ztc1+1和檸檬酸的質(zhì)量比為1:(1-5):(1-12)，其中(1-5)中具體點(diǎn)值可以獨(dú)立地選擇1、1.1、1.3、1.5、1.7、2、2.3、2.6、3、5等，其中(1-12)中具體點(diǎn)值可以獨(dú)立地選擇1、2、2.2、2.4、2.7、3、3.5、4、4.5、5、5.5、6、6.5、7、7.5、8、8.5、9、9.5、10、12等，上述數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

32、本發(fā)明還意外地發(fā)現(xiàn)，優(yōu)選采用質(zhì)量比為1:(1-5):(1-12)的明膠、ztc1+1和檸檬酸復(fù)配組成的絮凝劑，絮凝處理后淡竹葉提取物的抗氧化和抗炎舒緩能力明顯提高。

33、優(yōu)選地，步驟（5）所述干燥包括冷凍干燥。

34、所述冷凍干燥的溫度為-90~-40℃，例如-90℃、-80℃、-75℃、-70℃、-65℃、-60℃、-55℃、-50℃、-40℃等，冷凍干燥的時間為42-78?h，例如42?h、48?h、50?h、52?h、56?h、60?h、64?h、68?h、72?h、78?h等，上述數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

35、上述數(shù)值范圍內(nèi)的其他具體點(diǎn)值均可選擇，在此便不再一一贅述。

36、第二方面，本發(fā)明提供一種根據(jù)第一方面所述的淡竹葉提取物的制備方法制得的淡竹葉提取物，所述淡竹葉提取物具有dpph自由基清除功效和前列腺素、辣椒素受體抑制功效。

37、第三方面，本發(fā)明提供根據(jù)第二方面所述的淡竹葉提取物在制備抗氧化和/或抗炎舒緩產(chǎn)品中的應(yīng)用、在制備前列腺素抑制劑中的應(yīng)用、在制備辣椒素受體抑制劑中的應(yīng)用；

38、所述產(chǎn)品包括化妝品、醫(yī)藥輔助用品。

39、所述化妝品包括精華、化妝水、乳液、面霜、面膜或洗面奶。

40、根據(jù)本發(fā)明的研究結(jié)果，上述方式獲得的地膚子提取物具有顯著地抑制前列腺素的作用，因此，該地膚子提取物可以作為一種體外制劑，用于科學(xué)基礎(chǔ)研究，例如探究前列腺素相關(guān)生理活動的作用機(jī)制，而并非最終用于抗氧化和/或抗炎舒緩。

41、同樣地，根據(jù)本發(fā)明的研究結(jié)果，上述方式獲得的地膚子提取物具有顯著地抑制辣椒素受體的作用，因此，該地膚子提取物可以作為一種體外制劑，用于科學(xué)基礎(chǔ)研究，例如探究辣椒素受體相關(guān)生理活動的作用機(jī)制，而并非最終用于抗氧化和/或抗炎舒緩。

42、相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有以下有益效果：

43、本發(fā)明所涉及的淡竹葉提取物的制備方法創(chuàng)造性地采用微波-超聲波聯(lián)合處理、大孔樹脂純化富集，并結(jié)合絮凝處理的方式，可以有效的去除其中的大極性雜質(zhì)，制得的提取物有效成分明確，其中的葡萄糖異麥芽酚和單體化合物1的總含量大于20%，具有優(yōu)異的dpph自由基清除能力以及前列腺素、辣椒素受體抑制能力，從而可以在敏感性皮膚、濕疹類皮膚上得到應(yīng)用，且無農(nóng)藥殘留，可以作為護(hù)膚品及醫(yī)藥輔助用品的活性成分，起到抗氧化、抗炎舒緩的作用。