本發(fā)明涉及生物技術(shù)與皮膚健康，具體涉及一種山茶花肽在美白產(chǎn)品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、山茶花(camellia?japonica?l.)為常綠闊葉樹種山茶科(theaceae)山茶屬(camellia?l.)的一種灌木或小喬木植物，屬熱帶及亞熱帶氣候樹種。我國是山茶花種植大國，絕大多數(shù)分布在浙江、江西、廣西、云南、貴州、湖南及廣東等長(zhǎng)江以南地區(qū)。

2、酪氨酸酶是一種含銅酶，廣泛存在于動(dòng)植物和微生物中，是黑色素生成過程中的關(guān)鍵酶。它通過催化酪氨酸氧化成多巴，再進(jìn)一步氧化成多巴醌，最終生成黑色素。黑色素是皮膚、頭發(fā)和眼睛顏色的主要決定因素，其在皮膚中的積累會(huì)導(dǎo)致色斑、雀斑和膚色不均等問題。換言之，抑制酪氨酸酶的活性是美白的主要機(jī)制。

3、因此，開發(fā)一種能夠抑制酪氨酸酶活性、減少黑色素生成以及抑制黑色素細(xì)胞增殖的山茶花肽在美白產(chǎn)品中的應(yīng)用，具有重要意義。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處而提供一種山茶花肽在美白產(chǎn)品中的應(yīng)用。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采取的技術(shù)方案為：

3、第一方面，本發(fā)明提供了一種山茶花肽在美白產(chǎn)品中的應(yīng)用，所述山茶花肽的氨基酸序列為leu-pro-phe(lpf，亮氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸)、leu-leu-leu-leu-gly-his(llllgh，亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸-甘氨酸-組氨酸)、ala-pro(ap，丙氨酸-脯氨酸)中的至少一種。

4、本發(fā)明的山茶花肽通過抑制酪氨酸酶的活性、減少黑色素的生成以及抑制黑色素細(xì)胞的增殖來實(shí)現(xiàn)美白。具體地，本發(fā)明的山茶花肽通過與酪氨酸酶競(jìng)爭(zhēng)來抑制酪氨酸酶的活性，酪氨酸酶對(duì)底物的氧化，進(jìn)而減少黑色素的生成，達(dá)到美白的目的；同時(shí)，本發(fā)明的山茶花肽通過干擾黑色素細(xì)胞的生長(zhǎng)周期來減少黑色素細(xì)胞在皮膚中的活性以及抑制黑色素細(xì)胞的增殖，進(jìn)而減少黑色素的生成，達(dá)到美白的目的。

5、在本發(fā)明中，所述美白的定義是指能夠提亮膚色、均勻膚色、減少色素沉著、淡化色斑、改善暗沉、增加光澤感、提升細(xì)膩感。

6、本發(fā)明的山茶花肽是山茶花蛋白通過酶解釋放的活性氨基酸序列，具有美白功效；相對(duì)于大分子的蛋白，所述山茶花肽為短鏈氨基酸，不僅結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，而且其分子量小，易于經(jīng)皮吸收；另外，相對(duì)于動(dòng)物肽，山茶花肽由于是植物來源的活性肽，所以其具有極低的免疫原性；最為重要的是，山茶花肽的氨基酸結(jié)構(gòu)與皮膚組織具有較好的適應(yīng)性，所以其安全無毒，可長(zhǎng)期使用。

7、優(yōu)選地，所述產(chǎn)品為日化用品、藥品、保健用品、生物制品中的至少一種。

8、在本發(fā)明中，所述日化用品的形式或載體包括但不限于爽膚水、保濕乳、面膜、面霜、粉餅、沐浴露、香皂、粉底液、粉底霜、精華液、護(hù)手霜、身體乳、洗手液、洗發(fā)水、護(hù)發(fā)素、潔面膏、洗面奶、防曬霜、潤(rùn)膚膏、雪花膏、營(yíng)養(yǎng)液、香水等。

9、優(yōu)選地，所述產(chǎn)品的劑型為液體劑型、固體劑型、半固體劑型、氣體劑型中的至少一種。

10、優(yōu)選地，所述美白產(chǎn)品中山茶花肽的質(zhì)量含量為0.001-100％。

11、在本發(fā)明中，所述山茶花肽應(yīng)用于美白產(chǎn)品中時(shí)，山茶花肽還可以與其他同樣具有美白功效的成分一起以組合物的形式去開發(fā)美白產(chǎn)品；所述具有美白功效的成分包括但不限于：熊果苷、維生素c、曲酸、煙酰胺、甘草提取物、維生素e、谷胱甘肽、阿魏酸、神經(jīng)酰胺、熊果酸、鞣花酸、果酸、水楊酸中的至少一種。

12、第二方面，本發(fā)明提供了一種山茶花肽在抑制酪氨酸酶活性和/或減少黑色素生成和/或抑制黑色素細(xì)胞增殖中的應(yīng)用，所述山茶花肽的氨基酸序列為leu-pro-phe(lpf，亮氨酸-脯氨酸-苯丙氨酸)、leu-leu-leu-leu-gly-his(llllgh，亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸-亮氨酸-甘氨酸-組氨酸)、ala-pro(ap，丙氨酸-脯氨酸)中的至少一種。

13、優(yōu)選地，所述山茶花肽含有質(zhì)量比為(93.5-94):(0.4-0.5):(5.4-6)的leu-pro-phe、leu-leu-leu-leu-gly-his、ala-pro。

14、優(yōu)選地，所述山茶花肽中各成分的分子量均≤3kda。

15、優(yōu)選地，所述山茶花肽的制備方法包括如下步驟：

16、s1.先用堿浸提山茶花，再加入酸進(jìn)行沉淀，得到山茶花粗蛋白；

17、s2.用蛋白酶對(duì)山茶花粗蛋白進(jìn)行酶解，得到蛋白酶解液；

18、s3.對(duì)蛋白酶解液進(jìn)行超濾，截留分子量≤3kda的超濾組分，即得山茶花肽。

19、本發(fā)明在山茶花肽的制備過程中，之所以截留分子量≤3kda的超濾組分，是因?yàn)?，相比于蛋白酶解液中的山茶花酶解物、以及分子量?kda的組分，山茶花肽中分子量≤3kda的組分更容易被成纖維細(xì)胞攝取利用，能夠更好地改善真皮成纖維細(xì)胞功能穩(wěn)態(tài)。

20、更為優(yōu)選地，步驟s1中，所述山茶花的原料包括山茶花全花、山茶花用于香精、精油或提取物制備產(chǎn)生的殘?jiān)?/p>

21、更為優(yōu)選地，步驟s1中，所述山茶花在浸提前先進(jìn)行自然風(fēng)干或殺青烘干處理，再進(jìn)行粉碎處理。

22、更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述殺青烘干為先在80-100℃下殺青，再在50-60℃下烘干。

23、更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述粉碎處理后，過40-60目篩。

24、更為優(yōu)選地，步驟s1中，所述堿為氫氧化鈉溶液、氫氧化鉀溶液、氫氧化鈣溶液、碳酸鈉溶液、碳酸氫鈉溶液中的至少一種。

25、更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述氫氧化鈉溶液的濃度為0.2-2mol/l。

26、更為優(yōu)選地，步驟s1中，所述山茶花和堿的固液比為1g:(15-20)ml。

27、更為優(yōu)選地，步驟s1中，所述浸提的次數(shù)至少為1次。

28、更為優(yōu)選地，步驟s1中，所述浸提的溫度為50-60℃。

29、更為優(yōu)選地，步驟s1中，所述加入酸進(jìn)行沉淀的ph為3.0-4.0。

30、更為優(yōu)選地，步驟s1中，所述酸為鹽酸、硫酸、硝酸中的至少一種。

31、更為優(yōu)選地，步驟s2中，所述蛋白酶為木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、菠蘿蛋白酶中的至少一種。

32、更為優(yōu)選地，步驟s2中，所述酶解的ph為6.0-8.0。

33、更為優(yōu)選地，步驟s2中，所述酶解的ph調(diào)節(jié)劑為氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣、鹽酸、硫酸、醋酸、檸檬酸、磷酸中的至少一種。

34、更為優(yōu)選地，步驟s3中，所述超濾組分的分子量為0-3kda。

35、更為優(yōu)選地，所述步驟s1具體為：在堿中加入山茶花進(jìn)行浸提，取上清液，再加入酸進(jìn)行沉淀，收集沉淀，得到山茶花粗蛋白。

36、更為優(yōu)選地，所述步驟s2具體為：在水中加入山茶花粗蛋白，調(diào)節(jié)ph，進(jìn)行酶解，然后通過加熱水浴使酶滅活，離心，取上清液，得到蛋白酶解液。

37、更進(jìn)一步優(yōu)選地，所述山茶花粗蛋白和水的固液比為(1-2)g:(10-20)ml。

38、更為優(yōu)選地，所述步驟s3具體為：用分子量≤3kda的超濾膜分離蛋白酶解液，截留分子量≤3kda的超濾組分，干燥，即得山茶花肽。

39、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果為：

40、本發(fā)明的山茶花肽通過抑制酪氨酸酶的活性、減少黑色素的生成以及抑制黑色素細(xì)胞的增殖來實(shí)現(xiàn)美白。具體地，本發(fā)明的山茶花肽通過與酪氨酸酶競(jìng)爭(zhēng)來抑制酪氨酸酶的活性，酪氨酸酶對(duì)底物的氧化，進(jìn)而減少黑色素的生成，達(dá)到美白的目的；同時(shí)，本發(fā)明的山茶花肽通過干擾黑色素細(xì)胞的生長(zhǎng)周期來減少黑色素細(xì)胞在皮膚中的活性以及抑制黑色素細(xì)胞的增殖，進(jìn)而減少黑色素的生成，達(dá)到美白的目的。

41、本發(fā)明的山茶花肽是山茶花蛋白通過酶解釋放的活性氨基酸序列，具有美白功效；相對(duì)于大分子的蛋白，所述山茶花肽為短鏈氨基酸，不僅結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，而且其分子量小，易于經(jīng)皮吸收；另外，相對(duì)于動(dòng)物肽，山茶花肽由于是植物來源的活性肽，所以其具有極低的免疫原性；最為重要的是，山茶花肽的氨基酸結(jié)構(gòu)與皮膚組織具有較好的適應(yīng)性，所以其安全無毒，可長(zhǎng)期使用。