本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領域，尤其涉及一種含有多肽和sod的組合物及其在治療腫瘤中的用途。

背景技術：

1、超氧化物歧化酶(superoxide?dismutase,sod)是一種重要的抗氧化酶，主要作用是催化超氧化物陰離子(o2-)轉化為氧氣和過氧化氫，從而保護細胞免受氧化應激的損傷。sod在生物體內(nèi)的抗氧化防御系統(tǒng)中扮演著關鍵角色。

2、超氧化物陰離子是代謝過程中產(chǎn)生的有害副產(chǎn)物，可以引起氧化應激，損傷細胞膜、dna和蛋白質。sod通過兩步反應將超氧化物陰離子(o2-)轉化為氧氣(o2)和過氧化氫(h2o2)，后者隨后可以通過過氧化氫酶或谷胱甘肽過氧化物酶進一步分解成水。sod通過清除這些超氧化物陰離子，有效地防止了氧化損傷，維持細胞健康。

3、sod在許多組織中廣泛存在，并在保護細胞免受氧化應激和維持細胞穩(wěn)態(tài)方面起著重要作用。研究表明，sod活性與多種疾病(如神經(jīng)退行性疾病、炎癥性疾病、癌癥和心血管疾病)的發(fā)生和發(fā)展密切相關。增強體內(nèi)sod活性或通過外源性補充sod可能有助于預防和治療這些疾病。sod及其類似物已被研究用于藥物開發(fā)和治療多種與氧化應激相關的疾病。

4、超氧化物歧化酶(sod)是一種關鍵的抗氧化酶，通過催化超氧化物陰離子轉化為氧氣和過氧化氫，保護細胞免受氧化應激的損傷。sod在抗衰老、疾病防治和維持細胞健康方面具有重要的生物學意義。

5、多肽(peptides)是由氨基酸通過肽鍵連接而成的鏈狀分子，介于氨基酸和蛋白質之間。根據(jù)氨基酸殘基的數(shù)量，多肽通常分為寡肽(少于10個氨基酸)、多肽(10-50個氨基酸)和蛋白質(超過50個氨基酸)。

6、多肽激素如胰島素、促甲狀腺激素等，通過血液傳遞信號，調節(jié)體內(nèi)各種生理過程。多肽如腦啡肽和內(nèi)啡肽在神經(jīng)系統(tǒng)中發(fā)揮重要的信號傳導作用。天然存在于生物體內(nèi)，具有抗菌、抗病毒和抗真菌活性，如defensins和cathelicidins。許多酶是由多肽鏈組成，催化各種生化反應。多肽構成了一些結構蛋白，如角蛋白和膠原蛋白，提供細胞和組織的結構支持。

7、通過逐步添加保護氨基酸來合成多肽鏈，是實驗室中常用的多肽合成方法。在液相中進行多肽的逐步合成，適用于短肽的制備。通過基因工程技術，在細胞中表達和提取目標多肽。對多肽進行化學修飾，如脂化、糖基化、磷酸化等，以增強其穩(wěn)定性、活性或靶向性。

8、多肽藥物在癌癥、糖尿病、心血管疾病等治療中顯示出廣泛應用前景。多肽疫苗通過引導免疫系統(tǒng)識別和攻擊病原體或腫瘤細胞，具有較高的特異性和安全性。多肽在生物標志物檢測和疾病診斷中具有重要應用，如多肽抗體檢測。多肽作為膳食補充劑，用于增強免疫力、抗氧化和抗疲勞等。多肽用于制備生物材料、納米材料和智能材料，具有良好的生物相容性和可調控性。

9、多肽因其獨特的結構和功能，在生物學、醫(yī)學和材料科學等領域具有廣泛的應用前景。通過不斷的研究和技術進步，多肽的潛力將被進一步挖掘和應用，推動科學和技術的進步。

10、結直腸癌(colorectal?cancer,crc)是一種常見的消化道惡性腫瘤，發(fā)生于結腸或直腸的內(nèi)壁。結直腸癌是全球第三大常見癌癥和第四大癌癥相關死亡原因。其發(fā)病率和死亡率在發(fā)達國家較高，但隨著生活方式的改變，發(fā)展中國家的發(fā)病率也在上升。通常在50歲以上人群中較為常見，男性發(fā)病率稍高于女性。

11、家族性腺瘤性息肉病(fap)和遺傳性非息肉病性結直腸癌(hnpcc，lynch綜合征)是主要的遺傳性風險因素。有結直腸癌家族史者風險較高。高脂肪、低纖維飲食增加風險。紅肉和加工肉類的攝入也與發(fā)病率相關。肥胖和缺乏體力活動增加風險。長期吸煙和大量飲酒是結直腸癌的危險因素?？肆_恩病和潰瘍性結腸炎等慢性炎癥性腸病增加結直腸癌的風險。

12、早期常無明顯癥狀，或僅有輕微的消化不良、腹脹等不適。晚期直腸或結腸癌常導致便血或大便顏色變暗。排便習慣改變，包括腹瀉、便秘或大便形狀改變。持續(xù)性腹痛或不適。癌癥進展可能導致體重減輕和持續(xù)疲勞。

13、早期結直腸癌常通過手術切除治療，包括局部切除和根治性切除。用于術后輔助治療或晚期癌癥的全身治療。常用藥物包括氟尿嘧啶、奧沙利鉑和伊立替康。術前或術后放療可減少復發(fā)風險。采用靶向藥物如貝伐單抗、賽諾菲和西妥昔單抗治療特定類型的結直腸癌。近年來，免疫檢查點抑制劑如帕博利珠單抗(keytruda)和納武單抗(opdivo)在治療晚期或轉移性結直腸癌中顯示出潛力。

14、結直腸癌是一種常見且具有潛在致命性的惡性腫瘤，但通過早期篩查、生活方式的改變和適當?shù)闹委?，許多病例可以得到有效控制甚至治愈。了解其風險因素、癥狀、診斷和治療方法，對于預防和治療結直腸癌至關重要。

技術實現(xiàn)思路

0、發(fā)明概述

1、為了解現(xiàn)有技術中存在的問題，本發(fā)明提供了一種含有多肽和sod的組合物及其制備方法，以及它們在治療結直腸癌方面的應用。

2、對此，本發(fā)明采用以下技術方案：

3、在一方面，本發(fā)明涉及一種抗腫瘤組合物，其特征在于，所述抗腫瘤組合物由抗腫瘤多肽和sod組成。

4、進一步地，本發(fā)明所述抗腫瘤組合物由10-200μg/ml的抗腫瘤多肽和100-1000u/ml的sod組成。

5、更進一步地，本發(fā)明所述抗腫瘤組合物由10μg/ml的抗腫瘤多肽和500u/ml的sod組成。

6、另一方面，本發(fā)明所述抗腫瘤多肽選自：

7、(1)具有ktwfylqaghvdspmnrelc(seq?id?no.1)所示的氨基酸序列的多肽；和/或

8、(2)與seq?id?no.1所示的氨基酸序列的同源性至少為70％，且具有相同或相似功能的多肽。

9、進一步地，本發(fā)明所述抗腫瘤多肽為與seq?id?no.1所示的氨基酸序列的同源性至少為80％、85％、90％、95％、97％、98％或99％，且具有相同或相似功能的多肽。

10、進一步地，所述抗腫瘤多肽的氨基酸序列為ktwfylqaghvdspmnrelc(seq?idno.1)。

11、第三方面，本發(fā)明所述抗腫瘤多肽的制備方法，包括采用固相合成法合成該抗腫瘤多肽的步驟。

12、進一步地，本發(fā)明所述的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

13、(1)樹脂溶脹

14、rinkamide?am樹脂(200-400目)，加dmf或dcm溶脹10-30分鐘，用dmf洗滌；

15、(2)脫保護

16、用哌啶/dmf溶液處理樹脂上的fmoc保護基，用dmf或dcm多次洗滌樹脂；

17、(3)加載第一個氨基酸

18、將第一個氨基酸與活化試劑和綴合試劑混合，加入到溶脹的樹脂中，攪拌反應1-2小時，哌啶/dmf溶液洗滌20-30分鐘除去fmoc基團，然后用dmf/dcm多次洗滌樹脂，以除去未反應的試劑和副產(chǎn)物；

19、(4)氨基酸的逐步延伸

20、將下一個氨基酸與活化試劑和綴合試劑混合，加入到樹脂上進行耦合反應，反應時間1-2小時，每個氨基酸耦合后，重復脫保護步驟和洗滌步驟；依次加入seq?id?no.1中的每個氨基酸，重復上述步驟，直到合成完所有的氨基酸；

21、(5)最終脫保護和裂解

22、合成完最后一個氨基酸后，用哌啶/dmf溶液進行最后一次脫保護，用dmf/dcm多次洗滌樹脂，使用裂解液處理樹脂，裂解多肽并去除側鏈保護基，反應時間1-3小時，收集裂解液，真空除去溶劑并凍干；

23、(6)層析并純化

24、使用儀器純化合成的多肽，通過相關儀器確認多肽的純度和分子量。

25、第四方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明所述的抗腫瘤組合物在制備治療腫瘤藥物中的應用。

26、第五方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明所述的抗腫瘤組合物在誘導癌細胞發(fā)生程序性壞死中的用途。

27、第六方面，本發(fā)明涉及本發(fā)明所述的抗腫瘤組合物在制備癌癥細胞程序性壞死誘導劑中的用途。

28、進一步地，本發(fā)明所述腫瘤為結直腸癌。

29、本發(fā)明相對于現(xiàn)有技術，具有如下的優(yōu)點及有益效果：

30、本發(fā)明提供的新型多肽，以特定比例與sod混合，能夠誘導結直腸細胞癌死亡，同時對正常細胞的基本無毒，且可以明顯抑制腫瘤細胞的的生長，為制備治療腫瘤藥物提供了新的策略。