本發(fā)明涉及一種面膜及其制備方法，特別涉及一種具有祛斑、美白及滋養(yǎng)作用的中藥面膜及其制備方法。本發(fā)明屬于化妝品
技術(shù)領(lǐng)域：
。
背景技術(shù)：
：面膜是一種敷在臉上的美容護(hù)膚品，利用覆蓋在臉部的短暫時(shí)間，能夠暫時(shí)隔離外界的空氣與污染，提高肌膚溫度，皮膚的毛孔擴(kuò)張，促進(jìn)汗腺分泌與新陳代謝，使肌膚的含氧量上升，有利于肌膚排除表皮細(xì)胞新陳代謝的產(chǎn)物和累積的油脂類物質(zhì)，面膜中的水分滲入肌膚表皮的角質(zhì)層，皮膚變得柔軟，增加彈性。肌膚自然光亮有彈性，呈現(xiàn)好氣色。斑點(diǎn)、暗沉、皮膚松弛等是困擾很多愛美人士的最大問題。隨著年齡的增長(zhǎng)，皮膚的膠原蛋白逐漸流失，而皮膚細(xì)胞的再生能力也在慢慢下降，隨之而來的是皺紋的增長(zhǎng)，色素的沉積。而對(duì)于年輕人來說，肌膚問題也廣泛存在，長(zhǎng)期的日曬導(dǎo)致的日曬斑，由于毛囊及皮脂腺阻塞，發(fā)炎所引發(fā)的一種慢性炎癥性皮膚病困擾著各個(gè)年齡階段的人們。目前市場(chǎng)上的祛斑、抗皺及消炎的美容護(hù)膚品很多，也有一些通過先進(jìn)設(shè)備的治療手段應(yīng)運(yùn)而生，但是其仍然難以達(dá)到令人滿意的效果。一些美容護(hù)膚品含有大量的化學(xué)合成物質(zhì)，長(zhǎng)期使用不但不能解決肌膚的問題，還會(huì)增加肌膚的負(fù)擔(dān)引發(fā)一些過敏反應(yīng)。激光祛斑、光子嫩膚等是近年來運(yùn)用比較多的技術(shù)，該手段雖然在短時(shí)期內(nèi)能夠有立竿見影的效果，但是效果難以維持，而且治療費(fèi)用高昂，不適宜推廣使用。某些中藥具有調(diào)理臟腑、平衡陰陽，舒肝氣、通血脈、化血淤、暢循環(huán)、排毒素、溶色斑、增容顏、徹底消除色斑形成根源，平衡體內(nèi)激素水平，提高機(jī)體免疫能力的能力，能夠從內(nèi)到外進(jìn)行調(diào)節(jié)機(jī)體，從內(nèi)到外加速黑色素溶解，使肌膚光澤有彈性，白皙而又細(xì)膩，以達(dá)到治療的目的。還能夠排出由于長(zhǎng)期使用化妝品，皮膚中超標(biāo)的鉛、汞等重金屬離子，解決皮膚粗糙、松弛、暗沉等問題，排除毒素。本發(fā)明人在多年研究中藥的基礎(chǔ)上，提出了本發(fā)明的一種祛斑、美白及滋養(yǎng)面膜，其在祛斑的同時(shí)還能夠達(dá)到美白及滋養(yǎng)的作用，而且實(shí)踐證明本發(fā)明的面膜能夠起到很好的治療效果，而且安全無反復(fù)。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種具有祛斑、美白及滋養(yǎng)作用的中藥面膜及其制備方法。本發(fā)明的一種具有祛斑、美白及滋養(yǎng)作用的中藥面膜，其由以下重量份的各原料制成：黃芩提取物1-2份、梔子提取物1-2份、當(dāng)歸提取物1-2份、丹參提取物1-2份、紫薇花提取物1-2份、小分子靈芝多肽1-2份，冰片粉0.01-0.5份、聚乙烯醇(pva)0.1-0.5份、甘油10-20份、尿囊素2-5份、角鯊?fù)?-10以及透明質(zhì)酸鈉10-30份，加入純凈水在20℃條件下調(diào)節(jié)面膜的相對(duì)密度為1.05-1.10，調(diào)節(jié)ph值為5.0-7.5。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的中藥面膜由以下重量份的各原料制成：黃芩提取物1.5份、梔子提取物1.5份、當(dāng)歸提取物1.5份、丹參提取物1.5份、紫薇花提取物1.5份、小分子靈芝多肽2份，冰片粉0.05份、聚乙烯醇(pva)0.3份、甘油15份、尿囊素3.5份、角鯊?fù)?.5以及透明質(zhì)酸鈉20份，加入純凈水在20℃條件下調(diào)節(jié)面膜的相對(duì)密度為1.05-1.10，調(diào)節(jié)ph值為5.5-6.5。在本發(fā)明中，優(yōu)選的，所述的黃芩提取物、梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物以及小分子靈芝多肽分別按照以下方法制備得到：(1)黃芩提取物的制備：取干燥的黃芩根粉碎成粗粉，用丙酮∶水為7∶3的溶液浸泡兩次，每次3-7天，回收丙酮進(jìn)行濃縮，合并兩次濃縮液，用乙酸乙酯萃取，常壓蒸餾除去乙酸乙酯，干燥，得到黃芩提取物；(2)梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物的制備將梔子、當(dāng)歸、丹參、紫薇花干燥后分別粉碎成粗粉，按照料液比為1∶50-100加入50-95％v/v的乙醇溶液，進(jìn)行提取，提取溫度為60-85℃，提取時(shí)間為2-5h，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾后，干燥，分別得到梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物以及紫薇花提取物；(3)小分子靈芝多肽的制備a靈芝種子的培養(yǎng)取250ml三角瓶，裝液量75ml，接種2～3塊黃豆粒大小的靈芝斜面菌塊，于旋轉(zhuǎn)式搖床培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：30℃，150r/min，培養(yǎng)6～8d；種子培養(yǎng)基中含有：玉米粉20g/l，葡萄糖20g/l，豆餅粉10g/l，麩皮10g/l以及kh2po41.5g/l；b靈芝的發(fā)酵培養(yǎng)500ml三角瓶，裝液量150ml，按照接種量10％(v/v)接入靈芝種子培養(yǎng)液，于旋轉(zhuǎn)式搖床培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為：30℃150r/min，培養(yǎng)4～6d，得到靈芝發(fā)酵液；發(fā)酵培養(yǎng)基中含有：黃芩6.3g/l，麩皮12.0g/l，蛋白胨6.0g/l，玉米粉15.6g/l，葡萄糖6.86g/l，豆餅粉11.3g/l；c靈芝粗肽的提取靈芝發(fā)酵液過濾濃縮后，用乙醇沉淀，上清液流經(jīng)陽離子交換樹脂柱，以蒸餾水洗脫后，用3w/w％的氨水洗脫，收集洗脫液中茚三酮顯色部分，凍干得靈芝粗肽；d靈芝粗肽的酶解將得到的靈芝粗肽用其重量5-10倍的蒸餾水溶解后，加入中性蛋白酶、木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解，中性蛋白酶與木瓜蛋白酶的重量比為1∶1，酶加入總量為靈芝粗肽水溶液重量的0.05-1.0％，酶解溫度為25-37℃，酶解時(shí)間為0.5-2小時(shí)，得到靈芝粗肽酶解液；加熱煮沸，維持10-30分鐘，使酶滅活，得到滅活液；滅活液離心去除雜質(zhì)，得到小分子靈芝多肽。進(jìn)一步的，本發(fā)明還提出了一種制備所述的具有祛斑、美白及滋養(yǎng)作用的中藥面膜的方法，包括以下步驟：(1)按照以上所述的重量份稱取各原料；(2)面膜的配制：取聚乙烯醇(pva)加入5倍重量份的純凈水浸泡過夜，加熱溶解，然后加入黃芩提取物、梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物、甘油以及透明質(zhì)酸鈉，混合均勻后加入尿囊素、冰片粉、角鯊?fù)橐约靶》肿屿`芝多肽，攪拌均勻成稠膏，加入純凈水在20℃條件下調(diào)節(jié)稠膏的相對(duì)密度為1.05-1.10；(3)將步驟(2)所得的稠膏滅菌、分裝，即得。更進(jìn)一步，本發(fā)明還提出了所述的中藥面膜在制備具有祛斑、美白及滋養(yǎng)功效的化妝品中的用途。本發(fā)明的所述的各種原料藥可在普通中藥材商店購買得到，其規(guī)格符合國家中藥材標(biāo)準(zhǔn)即可。黃芩(scutellariabaicalensisgeorgi)，本名“芩”，是為芩草，“芩”字本義為“止血草”。別名山茶根、土金茶根，因草色黃而有俗名“黃芩”。為唇形科植物，以根入藥，味苦、性寒，能清熱燥濕、瀉火解毒、止血、安胎有清熱燥濕，涼血安胎，解毒功效。梔子(gardeniajasminoidesellis)別名：黃梔子、山梔、白蟾，是茜草科植物梔子的果實(shí)。梔子的果實(shí)是傳統(tǒng)中藥，屬衛(wèi)生部頒布的第1批藥食兩用資源，具有護(hù)肝、利膽、降壓、鎮(zhèn)靜、止血、消腫等作用。當(dāng)歸(angelicasinensis)，屬傘形科的一種植物，多年生草本植物，具有補(bǔ)血活血作用以及抑菌的作用。丹參(salviamiltiorrhizabge.)，為唇形科植物丹參的干燥根和根莖。具有活血祛瘀，通經(jīng)止痛，清心除煩，涼血消癰之功效。紫薇(lagerstroemiaindical.)，又稱癢癢花、癢癢樹、紫金花、紫蘭花、蚊子花、西洋水楊梅、百日紅、無皮樹，具有活血，止血，解毒，消腫等功效。靈芝(ganodermalucidumkarst)又稱林中靈、瓊珍，是多孔菌科真菌靈芝的子實(shí)體。具有補(bǔ)氣安神、止咳平喘、延年益壽的功效。本發(fā)明的中藥面膜以黃芩提取物、梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物、小分子靈芝多肽為中藥成分，并輔以冰片粉、聚乙烯醇(pva)、甘油、尿囊素、角鯊?fù)橐约巴该髻|(zhì)酸鈉混合制得了本發(fā)明所述的中藥面膜。實(shí)驗(yàn)證明，使用本發(fā)明的面膜可達(dá)到祛斑、美白及滋養(yǎng)的目的，能夠增加皮膚彈性，使皮膚細(xì)膩、光滑、有光澤，且使用天然植物提取物，安全，無任何副作用，可作為面膜類護(hù)膚產(chǎn)品長(zhǎng)期使用。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，不應(yīng)理解為是對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例1黃芩提取物、梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物的制備(1)黃芩提取物的制備：取干燥的黃芩根粉碎成粗粉，用丙酮∶水為7∶3的溶液浸泡兩次，第一次3天，第二次7天，回收丙酮進(jìn)行濃縮，合并兩次濃縮液，用乙酸乙酯萃取，常壓蒸餾除去乙酸乙酯，干燥，得到黃芩提取物；(2)梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物的制備將梔子干燥后粉碎成粗粉，按照料液比為1∶60加入50％v/v的乙醇溶液，進(jìn)行提取，提取溫度為60℃，提取時(shí)間為2.5h，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾后，干燥，得到梔子提取物；將當(dāng)歸干燥后粉碎成粗粉，按照料液比為1∶50加入60％v/v的乙醇溶液，進(jìn)行提取，提取溫度為75℃，提取時(shí)間為5h，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾后，干燥，得到當(dāng)歸提取物；將丹參干燥后粉碎成粗粉，按照料液比為1∶80加入90％v/v的乙醇溶液，進(jìn)行提取，提取溫度為85℃，提取時(shí)間為4h，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾后，干燥，得到丹參提取物；將紫薇花干燥后粉碎成粗粉，按照料液比為1∶60加入70％v/v的乙醇溶液，進(jìn)行提取，提取溫度為80℃，提取時(shí)間為3h，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾后，干燥，得到紫薇花提取物；實(shí)施例2小分子靈芝多肽的制備1、方法a靈芝種子的培養(yǎng)取250ml三角瓶，裝液量75ml，接種2～3塊黃豆粒大小的靈芝斜面菌塊，于旋轉(zhuǎn)式搖床培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：30℃，150r/min，培養(yǎng)7d；種子培養(yǎng)基中含有：玉米粉20g/l，葡萄糖20g/l，豆餅粉10g/l，麩皮10g/l以及kh2po41.5g/l；b靈芝的發(fā)酵培養(yǎng)500ml三角瓶，裝液量150ml，按照接種量10％(v/v)接入靈芝種子培養(yǎng)液，于旋轉(zhuǎn)式搖床培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為：30℃，150r/min，培養(yǎng)5d，得到靈芝發(fā)酵液；發(fā)酵培養(yǎng)基中含有：黃芩6.3g/l，麩皮12.0g/l，蛋白胨6.0g/l，玉米粉15.6g/l，葡萄糖6.86g/l，豆餅粉11.3g/l；研究表明，向靈芝的發(fā)酵培養(yǎng)中加入黃芩能夠顯著提高靈芝發(fā)酵液的抑制酪氨酸酶的活性。c靈芝粗肽的提取靈芝發(fā)酵液過濾濃縮后，用乙醇沉淀，上清液流經(jīng)陽離子交換樹脂柱，以蒸餾水洗脫后，用3w/w％的氨水洗脫，收集洗脫液中茚三酮顯色部分，凍干得靈芝粗肽；d靈芝粗肽的酶解將得到的靈芝粗肽用其重量8倍的蒸餾水溶解后，加入中性蛋白酶、木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解，中性蛋白酶與木瓜蛋白酶的重量比為1∶1，酶加入總量為靈芝粗肽水溶液重量的0.1％，酶解溫度為28℃，酶解時(shí)間為2小時(shí)，得到靈芝粗肽酶解液；加熱煮沸，維持30分鐘，使酶滅活，得到滅活液；滅活液離心去除雜質(zhì)，凍干后得到小分子靈芝多肽。2、肽段分布測(cè)試2.1高效凝膠色譜測(cè)試液相系統(tǒng)：agilent1100；高效凝膠色譜柱：tsk-g2000skwl(300mm*7.8mm，平均孔徑)。測(cè)試步驟：取將凍干后的小分子靈芝多肽或靈芝粗肽溶于蒸餾水中，使其濃度達(dá)到0.1w/w％，取1ml小分子靈芝多肽溶液或靈芝粗肽溶液，10,000g離心2分鐘，取上清通過0.45μm一次性過濾器過濾，濾液加入進(jìn)樣瓶中。柱溫為27℃，流動(dòng)相為0.05mol/l磷酸鹽緩沖液(ph7.2)，流速為0.5ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，進(jìn)樣體積20μl。2.2游離氨基酸含量測(cè)試質(zhì)譜儀：3200qtrap；液相系統(tǒng)：島津uflc系統(tǒng)；分析柱：氨基酸專用柱，absceix；保護(hù)柱：c18(4.0×3.0mm，5μm)phenomenex公司。測(cè)試步驟：取20μl小分子靈芝多肽溶液或靈芝粗肽溶液，加入5μl沉淀劑，混勻，10,000g離心2分鐘，吸取上清液5μl加入20μl標(biāo)記緩沖液，混勻，取上清夜5μl加入2.5μl標(biāo)記試劑，混勻，室溫反應(yīng)30min，反應(yīng)30min后加入2.5μl羥胺，混勻，40℃氮?dú)獯蹈?，加?6μl內(nèi)標(biāo)液重組，混勻，吸取16μl至進(jìn)樣瓶中，進(jìn)樣5μl測(cè)氨基酸濃度。2.3測(cè)試結(jié)果從實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看，酶解后靈芝多肽分子量介于200-1000da的小肽含量很高，達(dá)到75％，游離氨基酸含量很低，相較于酶解前的靈芝多肽分子量大大降低。實(shí)施例3本發(fā)明的面膜的制備(1)按照以下重量份稱取各原料：實(shí)施例1制備得到的黃芩提取物1.5重量份、梔子提取物1.5份、當(dāng)歸提取物1.5份、丹參提取物1.5份、紫薇花提取物1.5份、實(shí)施例2制備得到的小分子靈芝多肽2份，冰片粉0.05份、聚乙烯醇(pva)0.3份、甘油15份、尿囊素3.5份、角鯊?fù)?.5以及透明質(zhì)酸鈉20份；(2)面膜的配制：取聚乙烯醇(pva)加入5倍重量份的純凈水浸泡過夜，加熱溶解，然后加入黃芩提取物、梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物、甘油以及透明質(zhì)酸鈉，混合均勻后加入尿囊素、冰片粉、角鯊?fù)橐约靶》肿屿`芝多肽，攪拌均勻成稠膏加入純凈水在20℃條件下調(diào)節(jié)稠膏的相對(duì)密度為1.08，調(diào)節(jié)ph值為6.5；(3)將步驟(2)所得的稠膏滅菌、分裝，即得。實(shí)施例4本發(fā)明的面膜的制備(1)按照以下重量份稱取各原料：實(shí)施例1制備得到的黃芩提取物2重量份、梔子提取物1份、當(dāng)歸提取物1份、丹參提取物2份、紫薇花提取物2份、實(shí)施例2制備得到的小分子靈芝多肽1份，冰片粉0.01份、聚乙烯醇(pva)0.5份、甘油12份、尿囊素2.5份、角鯊?fù)?0份以及透明質(zhì)酸鈉25份；(2)面膜的配制：取聚乙烯醇(pva)加入5倍重量份的純凈水浸泡過夜，加熱溶解，然后加入黃芩提取物、梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物、甘油以及透明質(zhì)酸鈉，混合均勻后加入尿囊素、冰片粉、角鯊?fù)橐约靶》肿屿`芝多肽，攪拌均勻成稠膏加入純凈水在20℃條件下調(diào)節(jié)稠膏的相對(duì)密度為1.05調(diào)節(jié)ph值為7.0；(3)將步驟(2)所得的稠膏滅菌、分裝，即得。實(shí)驗(yàn)例1小分子靈芝多肽的抗酪氨酸酶活性實(shí)驗(yàn)1材料：酪氨酸酶、l-酪氨酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉恒溫儀、紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)。實(shí)驗(yàn)組i：實(shí)施例2制備得到的酶解后的小分子靈芝多肽實(shí)驗(yàn)組ii：實(shí)施例2制備得到的靈芝粗肽2試劑配制：1)磷酸鈉緩沖液(1/15mol/l，ph＝6.8)：精確稱取1.000g磷酸二氫鈉，1.186g磷酸氫二鈉，加入少量去離子水溶解后，定容至500ml，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?)l-酪氨酸溶液(7.5mmol/l)：精確稱取l-酪氨酸0.272g，先加入數(shù)滴濃鹽酸，加去離子水約50ml，微熱完全溶解后，用氫氧化鈉溶液調(diào)ph至7左右，加去離子水定容至200ml。3、檢測(cè)方法總反應(yīng)體系為5ml。實(shí)驗(yàn)時(shí)，向試管中依次加入磷酸鈉緩沖液、靈芝多肽10mg/ml、酶液，于30℃水浴10min。然后加入底物l-酪氨酸，立即開始計(jì)時(shí)。測(cè)定反應(yīng)20min時(shí)475nm波長(zhǎng)下的吸光值。測(cè)定時(shí)，以相應(yīng)的陰性對(duì)照為參比，用下列公式計(jì)算受試液對(duì)酪氨酸酶的抑制率，并依據(jù)濃度-酶抑制率曲線估計(jì)半數(shù)抑制濃度(ic50)的近似值。抑制率＝[(a-b)/a]×100％其中，″a″為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照的吸光值，″b″為受試液的吸光值。每個(gè)實(shí)驗(yàn)做3個(gè)平行。抑制率高表明其對(duì)酪氨酸酶活性的抑制強(qiáng)度高。4、結(jié)果實(shí)驗(yàn)組i以及實(shí)驗(yàn)組ii的靈芝多肽對(duì)酪氨酸酶均具有一定的抑制作用，但實(shí)驗(yàn)組i的酪氨酸酶抑制率(67％)顯著高于實(shí)驗(yàn)組ii(42％)，說明了酶解后的小分子靈芝多肽相較于靈芝粗肽具有更強(qiáng)的抑制酪氨酸酶的功效。實(shí)驗(yàn)例2面膜中中藥成份對(duì)細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性以及黑色素合成抑制實(shí)驗(yàn)本發(fā)明發(fā)明人前期工作中從大量的中藥材中篩選出了有利于膚質(zhì)改善的中藥材，并通過對(duì)其提取方法進(jìn)行研究，得到了適合每一種藥物的提取方法，進(jìn)一步的，為了得到具有祛斑、美白及滋養(yǎng)作用的中藥面膜，本發(fā)明發(fā)明人進(jìn)行二次篩選，并通過不同組合驗(yàn)證其美容效果，最終確定了本發(fā)明的中藥成分組合，對(duì)于這些中藥對(duì)細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性以及黑色素合成抑制進(jìn)行了以下研究。1、實(shí)驗(yàn)分組實(shí)驗(yàn)組i：黃芩提取物實(shí)驗(yàn)組ii：梔子提取物實(shí)驗(yàn)組iii：當(dāng)歸提取物實(shí)驗(yàn)組vi：丹參提取物實(shí)驗(yàn)組v：紫薇花提取物實(shí)驗(yàn)組vi：小分子靈芝多肽實(shí)驗(yàn)組vii：黃芩提取物、梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物以及小分子靈芝多肽按照重量比1.5∶1.5∶1.5∶1.5∶1.5∶2混合得到的組合物。分別取上述物質(zhì)加蒸餾水制成3w/w％的溶液，用于以下實(shí)驗(yàn)。2、方法2.1酪氨酸酶活性抑制試驗(yàn)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的小鼠黑色素瘤b16細(xì)胞，接種于6孔細(xì)胞培養(yǎng)板，培養(yǎng)過夜。分別加入終體積分?jǐn)?shù)為1％的上述溶液，以未處理組作細(xì)胞對(duì)照組，每組2個(gè)復(fù)孔。培養(yǎng)48h后用pbs洗滌1次，每孔加入100μl裂解液，刮取收集細(xì)胞，離心取上清液。取50μl細(xì)胞上清液至96孔板，再加入50μl1％l-多巴溶液，于37℃孵育1h。m3讀板儀于475nm處讀取吸光度值。相對(duì)酪氨酸酶活性＝(測(cè)定孔吸光度值-空白對(duì)照組吸光度值)/(細(xì)胞對(duì)照組吸光度值-空白對(duì)照組吸光度值)×100％。2.2黑色素合成抑制實(shí)驗(yàn)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的小鼠黑色素瘤b16細(xì)胞，接種于t25細(xì)胞培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)過夜。分別加入終體積分?jǐn)?shù)為1％的上述溶液，以未處理組作為細(xì)胞對(duì)照組。培養(yǎng)48h后用pbs洗滌1次，加入1ml1mol/lnaoh溶液，刮取收集細(xì)胞，放入80℃水浴中30min，取上清液加入96孔板，m3讀板儀于475nm處讀取吸光度值。相對(duì)黑色素含量＝(測(cè)定孔吸光度值-空白對(duì)照組吸光度值)/(細(xì)胞對(duì)照組吸光度值-空白對(duì)照組吸光度值)×100％。3、結(jié)果面膜中中藥成份對(duì)細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性以及黑色素合成抑制情況如下表1所示：表1面膜中中藥成份對(duì)細(xì)胞內(nèi)酪氨酸酶活性以及黑色素合成的抑制從表1結(jié)果可以看出，再用量相同的情況下，黃芩提取物、梔子提取物、當(dāng)歸提取物、丹參提取物、紫薇花提取物以及小分子靈芝多肽按照重量比1.5∶1.5∶1.5∶1.5∶1.5∶2混合得到的組合物相較于單味組分能夠顯著提高對(duì)小鼠黑色素瘤b16細(xì)胞內(nèi)的酪氨酸酶活性以及黑色素合成的抑制，說明上述組分具有協(xié)同促進(jìn)作用。實(shí)驗(yàn)例3臨床試驗(yàn)例為了驗(yàn)證本發(fā)明的面膜的效用，對(duì)100名志愿者在自愿的情況下試用本發(fā)明實(shí)施例3制備得到的面膜，每周使用三次，間隔使用，連續(xù)使用3個(gè)月，進(jìn)行效果觀察。100名志愿者，年齡25-55歲，平均年齡35歲，其中皮膚有斑者54例，包括各種原因形成的色斑，如日曬斑、黃褐斑、黑斑等。皮膚有皺紋者25例，包括不同程度的前額、上下眼瞼、眼外眥、頰、頸部、下頦、口周的皺紋。皮膚有不同程度的青春痘、痤瘡等患者21例，其中有部分患者同時(shí)兼具2-3種癥狀，分開統(tǒng)計(jì)。面膜使用前，對(duì)每名患者的具體情況進(jìn)行詳細(xì)記錄，三個(gè)月后，觀察使用效果，按照以下所述的療效標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果如表2所示：療效標(biāo)準(zhǔn)：顯效：斑點(diǎn)基本或完全消失，皺紋不明顯，痤瘡粉刺等明顯得到抑制，紅腫等情況消失；有效：斑點(diǎn)顏色變淺，變小，皺紋變短變淺，痤瘡粉刺等不再發(fā)生，變小，顏色接近正常膚色；無效：面部病癥無變化。表2三個(gè)月后觀察結(jié)果統(tǒng)計(jì)組別總?cè)藬?shù)顯效基本有效無效總有效率祛斑效果543020492.6％抗皺效果25157388％消炎效果21109290.5％三個(gè)月內(nèi)，受試的100明志愿者中無一出現(xiàn)不良反應(yīng)，停用后一個(gè)月進(jìn)行跟蹤觀察，患者沒有出現(xiàn)病情反復(fù)的情況，說明本發(fā)明的面膜在祛斑、美白、抗皺、消炎方面效果顯著，且安全無反復(fù)。下面就其中一些典型病例做詳細(xì)說明：病例1：王某某，女，34歲已婚，北京人。王女士32歲懷孕，懷孕的初期一切都很正常，沒有異常反應(yīng)。從第五個(gè)月開始，臉部開始出現(xiàn)黃褐斑，開始色斑少而淺，后來色斑逐漸增多并且顏色加深。產(chǎn)后，臉上也留下了很多黃褐斑，整張臉給人感覺就是花花的，總好像沒洗干凈，年齡也顯得老了許多。曾經(jīng)嘗試過各種祛斑產(chǎn)品，但是都無功而返，使用本發(fā)明的面膜一個(gè)月后，色斑開始變淡了，膚色亮度也提高了不少，三個(gè)月療程結(jié)束，其臉上的色斑就基本上全都消除了，皮膚變得白皙，也更有彈性和光澤。病例2：李某某，女，25歲未婚，河北石家莊人。李小姐因工作壓力，不知不覺中在兩頰上出現(xiàn)了黃褐斑，嘗試過多種方法，包括內(nèi)服外敷的藥物多達(dá)十幾種，但是效果不理想，停藥后斑點(diǎn)就會(huì)又長(zhǎng)出來，皮膚也因此越來越糟，粉刺和痤瘡也開始出現(xiàn)了。臉頰，額頭處都出現(xiàn)了又紅又腫的粉刺黑頭，為此李小姐十分痛苦，使用本發(fā)明的面膜三個(gè)月后，李小姐臉上的黃褐斑明顯消失了，整張臉都明亮了起來，臉頰以及額頭的粉刺也平了，顏色也逐漸接近正常膚色，皮膚變得細(xì)嫩光滑。病例3：白某，女，45歲已婚，四川人。由于年齡的原因，白女士的額頭及眼部、嘴角周圍都出現(xiàn)了深深淺淺的皺紋，白女士的工作性質(zhì)決定了她經(jīng)常需要加班熬夜，睡眠質(zhì)量也不是很好，因此皮膚松弛，整個(gè)人看上去比同齡人要老許多。眼周還有大大小小的色斑，為此，白女士痛苦不已。白女士試用了本發(fā)明的面膜三個(gè)月后，眼角，嘴角的皺紋都明顯變淺，一些小的細(xì)紋已經(jīng)消失不見了，皮膚光澤緊致且富有彈性，臉部的輪廓更加明顯，眼周的色斑也消失了，整個(gè)人看上去年輕了很多。盡管已用具體實(shí)施例來說明和描述了本發(fā)明，然而應(yīng)意識(shí)到，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的情況下可以作出許多其它的更改和修改。因此，這意味著在所附權(quán)利要求中包括屬于本發(fā)明范圍內(nèi)的所有這些變化和修改。當(dāng)前第1頁12