本發(fā)明涉及一種治療膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征的食品、保健品或藥物組合物及其制備方法和用途。
背景技術：
：膿毒癥(sepsis)是由感染引起的全身性炎癥反應綜合征，是危重病患者常見的臨床表現(xiàn)，也是危重病患者常見的死亡原因之一。急性呼吸窘迫綜合征(theacuterespirarorydistresssyndrome，ards)是一種肺毛細血管內(nèi)皮細胞和肺泡上皮細胞通透性增加引起的非心源性肺水腫，臨床表現(xiàn)為嚴重的急性低氧血癥綜合癥狀。ards的致病原因包括肺炎、膿毒癥及敗血癥等，由膿毒癥導致的ards較其他因素導致的ards具有更高的病死率。針對膿毒癥致ards目前尚無特殊治療方法，臨床傳統(tǒng)治療手段為常規(guī)ards的治療方法，如，保護性的肺通氣策略、俯臥位通氣、神經(jīng)肌肉阻滯劑的應用、體外膜式氧合，然而病死率仍居高不下。膿毒癥致ards屬于傳統(tǒng)中醫(yī)學“厥脫癥”的范疇，近年來隨著臨床研究及動物實驗的不斷深入，中藥治療ards得了較大的成果。王慧琦等，“川芎嗪對膿毒癥急性肺損傷的保護作用”，同濟大學學報2014年05期公開了川芎嗪可以減輕膿毒癥急性肺損傷中炎癥反應，減輕肺組織損傷；趙敏等，“黃芪對急性肺損傷大鼠模型肺組織中角質(zhì)細胞生長因子表達的影響”，中醫(yī)臨床研究2013年05期公開了黃芪具有減輕肺組織病理損傷的作用?，F(xiàn)未見將制附子、生牡蠣、干姜、麻黃和炙甘草5味藥物配伍用于治療膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征的報道。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明提供了一種食品、保健品或藥物組合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料制備而成的制劑：制附子24～36份、生牡蠣24～36份、干姜12～18份、麻黃12～18份、炙甘草8～12份。其中，所述原料的重量配比為：制附子30份、生牡蠣30份、干姜15份、麻黃15份、炙甘草10份。其中，所述的制附子為毛茛科植物烏頭aconitumcarmichaelidebx.的子根經(jīng)過鹽漬、水漂、煮、炒等法炮制后的加工品；所述生牡蠣為牡蠣科動物長牡蠣(ostreaglgasthunberg)、近江牡蠣(ostrearivularisgould)或大連灣牡蠣(ostrcatalienwhanensiscrosse)的貝殼生用品。其中，所述的食品、保健品或藥物組合物，其特征在于：所述組合物是以制附子、生牡蠣、干姜、麻黃和炙甘草的原藥材、水提物或者有機溶劑提取物為有效成分，加上藥學上可接受的輔料制備而成的制劑。其中，所述的食品、保健品或藥物組合物，其特征在于：所述制劑為口服制劑。其中，所述的食品、保健品或藥物組合物，其特征在于：所述制劑為散劑、膏劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、口服液或者滴丸。本發(fā)明還提供了一種制備前述食品、保健品或藥物組合物的方法，其特征在于：它包含如下步驟：(1)稱取原料藥；(2)原料藥直接打粉，或?qū)⒃纤幖铀逯蠡蛴袡C溶劑提取，提取液濃縮，再加入藥學上可接受的輔料或輔助性成分制備成藥學上常用的制劑。本發(fā)明最后提供了前述組合物在制備治療膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征的食品、保健品或藥物中的用途。本發(fā)明藥物組合物以附子，辛熱，補坎中真陽，真陽為君火之種，補真火即是壯君火也；生牡蠣，有通陰陽之共，共溫腎潛陽；干姜溫中，助附子以溫腎陽，肺為水之上源，以麻黃開宣肺氣，通調(diào)水道，以助水液歸于常道，炙甘草調(diào)和諸藥，全方共奏溫腎潛陽、通調(diào)水道之功。本發(fā)明提供的藥物組合物配方精當，能顯著提高膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征患者的存活率，有效治療膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征，組方中各藥材配伍，具有較強的實際應用價值。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內(nèi)容，按照本領域的普通技術知識和慣用手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術思想前提下，還可以做出其它多種形式的修改、替換或變更。以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容再作進一步的詳細說明。但不應將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術均屬于本發(fā)明的范圍。附圖說明：圖1為中藥干預后24小時肺組織病理切片，從左到右依次為空白組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組。圖2為中藥干預后48小時肺組織病理切片，從左到右依次為空白組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組病理切片。圖3為中藥干預后24小時肺血管內(nèi)皮細胞形態(tài)切片，從左到右依次為空白組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組病理切片。圖4為中藥干預后48小時肺血管內(nèi)皮細胞形態(tài)切片，從左到右依次為空白組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組病理切片。具體實施方式實施例1本發(fā)明食品、保健品或藥物組合物的制備稱取制附子30g、生牡蠣30g、干姜15g、麻黃15g、炙甘草10g。先將制附子放入砂鍋內(nèi)，加入2500ml的水，浸泡半個小時。以武火(大火)煮沸1.5小時后，加入生牡蠣，繼續(xù)武火煮沸0.5小時，加入干姜、麻黃，再繼續(xù)煮到剩200ml，將煮好的藥液倒出于碗中。再加水1500ml至上述所剩藥渣中，先武火煮沸0.5小時，文火(小火)煮到剩200ml，前后兩次混合服用。實施例2本發(fā)明食品、保健品或藥物組合物的制備稱取制附子24g、生牡蠣24g、干姜12g、麻黃12g、炙甘草8g。先將制附子放入砂鍋內(nèi)，加入2500ml的水，浸泡半個小時。以武火(大火)煮沸1.5小時后，加入生牡蠣，繼續(xù)武火煮沸0.5小時，加入干姜、麻黃，再繼續(xù)武火煮沸0.5小時，再以文火(小火)煮到剩200ml，將煮好的藥液倒出于碗中。再加水1500ml至第二步上述所剩藥渣中，先武火煮沸0.5小時，文火(小火)煮到剩200ml，前后兩次混合服用。實施例3本發(fā)明食品、保健品或藥物組合物的制備稱取制附子36g、生牡蠣36g、干姜18g、麻黃18g、炙甘草12g。先將制附子放入砂鍋內(nèi)，加入2500ml的水，浸泡半個小時。以武火(大火)煮沸1.5小時后，加入生牡蠣，繼續(xù)武火煮沸0.5小時，加入干姜、麻黃，再繼續(xù)煮到剩200ml，將煮好的藥液倒出于碗中。再加水1500ml至上述所剩藥渣中，先武火煮沸0.5小時，文火(小火)煮到剩200ml，前后兩次混合服用。以下通過具體藥效學實驗證明本發(fā)明的有益效果：試驗例1本發(fā)明食品、保健品或藥物組合物治療膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征的驗證1實驗材料1.1受試品與試劑本發(fā)明組合物按照實施例1方法制備的藥物。anti‐cd31antibody：免疫組化elivisiontmplus試劑盒(鼠/兔)(貨號：kit‐9901)，dab染色液(放大聚合物法)(貨號：kit‐0016)(免疫組化相關試劑盒購自福州邁新生物技術開發(fā)有限公司)。定量反轉(zhuǎn)錄試劑(revertraaceqpcrkit,toyobo)；pcr試劑(abipowersybrgreenpcrmastermix，abi，usa)。1.2實驗動物健康wistar雄性大鼠80只，體重220‐250g，spf級別，購自成都達碩實驗動物有限公司，許可證號：scxk(川)2015‐0301.3儀器leicaeg1150c分體式石蠟包埋機、石蠟切片機，leicarm2235、脫水機：leicaasp300s、自動染色機：leicaautostainerxl、顯微鏡：奧林巴斯olympusbx53.2實驗方法2.1分組及造模采用隨機、對照動物實驗研究，80只健康wistar雄性大鼠適應性飼養(yǎng)5‐7天，采用隨機數(shù)字表法將大鼠隨機分為空白組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組，每組16只。模型組、高劑量組、空白組、中劑量組、低劑量組大鼠均給與內(nèi)皮素(3mg/kg，注射時間5min)尾靜脈注射，空白組注射等體積的生理鹽水注射。lps作用2h后，確定造模成功(已進行相關預實驗證明：lps作用2h后，進行肺組織病理切片確定造模成功，且中藥干預后的肺損傷程度以48時以后最為明顯)。2.2給藥方法據(jù)徐叔云教授《藥理實驗方法學》公式計算，計算出大鼠與人等效劑量。空白組、模型組立即給予灌服等體積生理鹽水，高劑量組中藥復蘇合劑灌胃劑量為10.5g/kg，中劑量組劑量為7.875g/kg，低劑量組劑量為2.625g/kg。中藥灌胃后的24h和48h，每個時間點每個實驗組取8只老鼠進行后續(xù)的樣品采集和相關檢測試驗。3實驗結(jié)果3.1大鼠存活情況實驗結(jié)果如表1所示：表1各種大鼠存活情況組別存活只數(shù)(只)存活率空白組18100％模型組316.7％低劑量組844.4％中劑量組1266.7％高劑量組1583.3％由表1可知，48小時后大鼠存活情況空白組存活率高達100％，低劑量組、中劑量組、高劑量組存活率分別為44.4％、66.7％、83.3％，模型組存活率僅16.7％，見表1。空白組與高劑量組比較χ2＝25.714，p＝0.000，差異具有顯著性差異；模型組與低劑量組比較χ2＝3.273，p＝0.070，差異不具有顯著性差異；模型組與中劑量組比較χ2＝9.257，p＝0.002，差異具有顯著性差異；模型組與高劑量組比較χ2＝16，p＝0.000，差異具有顯著性差異。3.2肺組織病理切片實驗結(jié)果如表2所示：表2肺損傷評定組別24h肺損傷評分(分)48h肺損傷評分(分)空白組2.89±4.233.00±0.28模型組7.83±0.607.33±0.88低劑量組6.00±0.445.25±0.25中劑量組4.63±0.503.5±0.50高劑量組3.37±0.323.25±0.25由表2可知，根據(jù)肺組織病理表現(xiàn)出的滲出、炎癥、出血、肺間隔斷裂情況，進行了肺損傷評定，各組肺損傷評定情況見表2。24小時空白組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組病理切片表現(xiàn)分別如圖1所示。48小時空白組、模型組、高劑量組、中劑量組、低劑量組病理切片表現(xiàn)分別如圖2所示。24小時：模型組與空白組比較p<0.01；模型組與高劑量組比較p<0.01；模型組與中劑量組比較p<0.01；模型組與低劑量組比較p<0.05；高劑量組與中劑量組比較p>0.05；高劑量與低劑量組比較p<0.01；中劑量組與低劑量組比較p>0.05；48小時：模型組與空白組比較p<0.01；模型組與高劑量組比較p<0.01；模型組與中劑量組比較p<0.05；模型組與低劑量組比較p<0.05；高劑量組與中劑量組比較p>0.05；高劑量與低劑量組比較p<0.01；中劑量組與低劑量組比較p<0.05。3.3肺血管內(nèi)皮細胞形態(tài)實驗結(jié)果如表3所示：表3平均微血管組別24h平均微血管(條)48h平均微血管(條)空白組8.1±0.37.9±0.3模型組3.0±0.30.0±0.0低劑量組7.2±0.55.8±0.4中劑量組5.9±0.35.0±0.4高劑量組7.5±0.49.0±0.4由表3可知，空白組24小時及48小時平均微血管7‐9條/視野；模型組24h平均微血管2‐4條/視野，48h血管破壞較重，抗原漏出較多，著色較雜，未查見微血管；高劑量組24h平均微血管6‐9條/視野，48h平均微血管8‐10條/視野；中劑量組24h平均微血管5‐7條/視野，48h平均微血管4‐6條/視野；低劑量組24h平均微血管6‐9條/視野，48h平均微血管5‐7條/視野。如圖3、圖4所示。24小時：模型組與空白組比較p<0.01；模型組與高劑量組比較p<0.01；模型組與中劑量組比較p<0.01；模型組與低劑量組比較p<0.01；高劑量組與中劑量組比較p<0.01；高劑量與低劑量組比較p>0.05；中劑量組與低劑量組比較p>0.05；48小時：模型組與空白組比較p<0.01；模型組與高劑量組比較p<0.05；模型組與中劑量組比較p<0.01；模型組與低劑量組比較p<0.01；高劑量組與中劑量組比較p<0.01；高劑量與低劑量組比較p<0.01；中劑量組與低劑量組比較p>0.05。3.4乙酰肝素酶mrna變化實驗結(jié)果如表4所示：表4乙酰肝素酶mrna組別24h乙酰肝素酶mrna48h乙酰肝素酶mrna空白組0.00600.0062模型組0.00460.0049低劑量組0.00550.0071中劑量組0.00410.0046高劑量組0.00450.0061由表4可知，24小時：模型組與空白組比較p<0.05；模型組與高劑量組比較p>0.05；模型組與中劑量組比較p>0.05；模型組與低劑量組比較p<0.05；高劑量組與中劑量組比較p>0.05；高劑量與低劑量組比較p>0.05；中劑量組與低劑量組比較p<0.05；48小時：模型組與空白組比較p<0.05；模型組與高劑量組比較p<0.05；模型組與中劑量組比較p>0.05；模型組與低劑量組比較p<0.05；高劑量組與中劑量組比較p<0.05；高劑量與低劑量組比較p>0.05；中劑量組與低劑量組比較p<0.05。3.5乙酰肝素酶蛋白水平變化實驗結(jié)果如表5所示：表5乙酰肝素酶蛋白水平變化組別24h乙酰肝素酶蛋白48h乙酰肝素酶蛋白空白組124.58±5.3114.00±10.95模型組167.89±14.1160.03±13.5低劑量組147.40±20.6148.0±11.4中劑量組150.41±28.1150.88±17.61高劑量組156.91±30.8150.88±17.6724小時：模型組與空白組比較p<0.05；模型組與高劑量組比較p<0.05；模型組與中劑量組比較p<0.05；模型組與低劑量組比較p<0.05；高劑量組與中劑量組比較p>0.05；高劑量與低劑量組比較p<0.05；中劑量組與低劑量組比較p>0.05；48小時：模型組與空白組比較p<0.05；模型組與高劑量組比較p<0.05；模型組與中劑量組比較p<0.05；模型組與低劑量組比較p<0.05；高劑量組與中劑量組比較p>0.05；高劑量與低劑量組比較p>0.05；中劑量組與低劑量組比較p>0.05。綜上，本發(fā)明食品、保健品或藥物組合物可以通過降低乙酰肝素酶的表達，從而抑制乙酰肝素酶活性可以調(diào)控血管內(nèi)皮表面多糖蛋白復合物的降解，降低大鼠血管通透性，改善肺損傷，促進肺內(nèi)皮細胞恢復，從而能提高膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征大鼠的存活率，有效治療膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征。本發(fā)明提供的組合物配方精當，能顯著提高膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征患者的存活率，有效治療膿毒癥致急性呼吸窘迫綜合征，具有良好的市場應用前景。當前第1頁12