本發(fā)明涉及一種防治慢性心力衰竭的芪參養(yǎng)心微丸制劑及其制備方法，屬于中藥制劑制備技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
慢性心力衰竭，又稱充血性心衰，是常見危重疾病之一，是多種心血管疾病不斷發(fā)展惡化的終末階段。我國慢性心衰的發(fā)病率隨著老齡化人群的增多逐漸增高，老年人發(fā)病率為4.6‰，每年約有10多萬人因本病住院治療，住院率占同期心血管疾病的20％，并以每年2.8％的速度遞增，且5年存活率與惡性腫瘤相仿。
本病目前中西醫(yī)都缺乏特效療法，而在中醫(yī)藥防治慢性心力衰竭研究領(lǐng)域，現(xiàn)今臨床針對(duì)慢性心力衰竭使用的中藥，多以復(fù)方為主。芪參養(yǎng)心湯是由黃芪、紅參、赤芍、附子、白術(shù)、桂枝、茯苓、葶藶子等構(gòu)成，具有益氣溫中，活血涼血之功效，對(duì)充血性心力衰竭具有良好的臨床療效。
但是目前該方一直是以湯劑在應(yīng)用，對(duì)于患者藥用帶來很大的不便；而且藥材的提取工藝也沒有進(jìn)行優(yōu)化，在傳統(tǒng)的提取過程一直以合煎為主，其中的有效成分無法完全提取，含量較低，從而降低藥效?，F(xiàn)代研究表明黃芪、紅參、赤芍中的主要活性成分主要是皂苷成分，如黃芪甲苷、人參皂苷、芍藥苷、齊墩果酸等；附子中起關(guān)鍵作用的化學(xué)成分主要為生物堿，如烏頭堿、新烏頭堿等；白術(shù)、桂枝、茯苓的主要活性成分主要是多糖成分；葶藶子、生姜、大棗中的主要活性成分主要是黃酮類成分，如槲皮素-葡萄糖苷、異鼠李素-葡萄糖苷、姜黃酮、蘆丁、當(dāng)藥黃素等，通過現(xiàn)代提取分離技術(shù)可以將各不同有效成分充分提取，提高其含量，從而提高藥效。
微丸與普通制劑相比，其具有生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)潔、載藥量大、穩(wěn)定性強(qiáng)、易與保存和攜帶、服用劑量少、生物利用度高等優(yōu)點(diǎn)，逐漸成為目前中藥制劑的研究熱點(diǎn)之一?；谏鲜鲈?，將芪參養(yǎng)心湯開發(fā)成一種新的劑型-芪參養(yǎng)心微丸，不僅簡(jiǎn)便可行、成本較低，還能提高藥物的穩(wěn)定性、改善藥效，同時(shí)滿足了廣大患者的要求，具有廣闊的市場(chǎng)前景。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種簡(jiǎn)便可行、成本較低，還能提高藥物的穩(wěn)定性、改善藥效的芪參養(yǎng)心微丸及其制備方法。
技術(shù)方案
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)：
一種芪參養(yǎng)心微丸制劑，由主藥、輔料和潤(rùn)濕劑配制而成，制得的微丸直徑小于2.0mm；其中主藥與輔料的質(zhì)量配比為1∶2～4，潤(rùn)濕劑的用量為以潤(rùn)濕劑的體積與主藥加輔料質(zhì)量之和的比計(jì)為1∶1～2(ml/g)。
所述主藥由如下重量份數(shù)的組分組成：
黃芪、紅參、赤芍提取物，36.8份～28.5份；
附子提取物，13.2份～21.5份；
白術(shù)、桂枝、茯苓提取物，30～45份；
葶藶子、生姜、大棗提取物，15～25份。
其中，所述的芪參養(yǎng)心微丸制劑的直徑小于2.0mm。
其中，黃芪、紅參、赤芍提取物中總皂苷有效部位占提取物總量的質(zhì)量百分含量≥50％；附子提取物中總生物堿有效部位占提取物總量的質(zhì)量百分含量≥50％；白術(shù)、桂枝、茯苓提取物中總多糖有效部位占提取物總量的質(zhì)量百分含量≥50％；葶藶子、生姜、大棗提取物中總黃酮有效部位占提取物總量的質(zhì)量百分含量≥50％。
所述的輔料為微粉硅膠、微晶纖維素101、乙基纖維素、乳糖、淀粉、甘露醇中的其中一種或它的任意質(zhì)量比的混合物；
所述的潤(rùn)濕劑為水、乙醇溶液、羧甲基纖維素鈉溶液、羥丙基纖維素溶液中的其中一種或它們的任意體積比的混合物；其中乙醇溶液質(zhì)量百分比為10％～90％。
所述黃芪、紅參、赤芍提取物按照黃芪、紅參、赤芍的藥材質(zhì)量比為20～30∶2～6∶5～8制備得到；所述白術(shù)、桂枝、茯苓提取物按照白術(shù)、桂枝、茯苓的藥材質(zhì)量比為3～7∶1～5∶4～7制備得到；所述葶藶子、生姜、大棗提取物按照葶藶子、生姜、大棗的藥材質(zhì)量比為2～8∶2～4∶3制備得到。
本發(fā)明的一種芪參養(yǎng)心微丸制劑的制備方法，按照下述步驟進(jìn)行：
(1)黃芪、紅參、赤芍提取物的制備：稱取黃芪、紅參、赤芍藥材粗粉，其各藥材質(zhì)量比為20～30∶2～6∶5～8，加10～14倍質(zhì)量比生藥量乙醇溶液回流提取兩次，乙醇溶液的重量百分比為60～80％，每次60～120min，過濾，取濾液；濾液進(jìn)一步濃縮至無醇味；濃縮液用大孔樹脂進(jìn)行吸附，用質(zhì)量百分比60％～80％乙醇為洗脫溶劑洗脫；洗脫液濃縮，冷凍干燥，得黃芪、紅參、赤芍提取物，備用；
(2)附子提取物的制備：稱取重量份數(shù)的附子藥材粗粉，加5～15倍質(zhì)量比生藥量乙醇溶液回流提取兩次，乙醇溶液的質(zhì)量百分比為60％～80％，每次60～120min，過濾，取濾液進(jìn)一步濃縮至無醇味；濃縮液用大孔樹脂進(jìn)行吸附，用質(zhì)量百分比60％～80％乙醇為洗脫溶劑洗脫，洗脫液濃縮，冷凍干燥，得附子提取物，備用；
(3)白術(shù)、桂枝、茯苓提取物的制備：稱取白術(shù)、桂枝、茯苓藥材粗粉，各藥材質(zhì)量比為3～7∶1～5∶4～7，加10～15倍純化水回流提取兩次，每次60～120min，過濾，取濾液；濾液進(jìn)一步濃縮至相對(duì)密度為1.15～1.25，加95％乙醇醇沉8～12h，過濾，取醇沉物冷凍干燥，得白術(shù)、桂枝、茯苓提取物，備用；
(4)葶藶子、生姜、大棗提取物的制備：稱取葶藶子、生姜、大棗藥材粗粉1份，其中黃葶藶子、生姜、大棗質(zhì)量比為2～8∶2～4∶3，加5～25倍質(zhì)量比的生藥量乙醇溶液回流提取兩次，乙醇溶液的質(zhì)量百分比為40％～70％，每次60～120min，過濾，取濾液；濾液進(jìn)一步濃縮至無醇味；濃縮液用大孔樹脂進(jìn)行吸附，用質(zhì)量百分比50％～80％乙醇為洗脫溶劑洗脫；洗脫液濃縮，冷凍干燥，得葶藶子、生姜、大棗提取物，備用；
(5)混合：將步驟(1)中黃芪、紅參、赤芍提取物，步驟(2)中附子提取物，步驟(3)中白術(shù)、桂枝、茯苓提取物，步驟(4)中葶藶子、生姜、大棗提取物，按照配比混合得主藥，備用；
(6)制丸：取配方量的步驟(5)制得的主藥及輔料，分別過40～100目篩后，按配比混勻；加潤(rùn)濕劑，捏合，制軟材，經(jīng)孔徑0.8mm的擠出機(jī)篩板擠成直徑相同、光滑致密的條狀物；打開滾圓機(jī)，進(jìn)行滾圓，直至顆粒滾制成丸；取出微丸，60℃常壓干燥、篩分，獲得直徑小于2.0mm的微粒，即得芪參養(yǎng)心微丸。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明可提供一種有效成分含量高、性能質(zhì)量穩(wěn)定、療效良好的防治慢性心力衰竭的芪參養(yǎng)心微丸制劑及其制備方法，且該制備方法簡(jiǎn)便易行，成本較低，產(chǎn)品療效好，質(zhì)量可控，攜帶、服用方便。本發(fā)明的特點(diǎn)是在原方的基礎(chǔ)上，根據(jù)處方功能主治和方中各藥物所含主要活性成分的理化性質(zhì)將處方中的藥物分成4類，采用現(xiàn)代分離精制技術(shù)進(jìn)行提取純化，分別獲得總皂苷、總生物堿、總多糖、總黃酮有效部位含量較高的4種提取物，將4種提取物，配以一定比例的輔料和潤(rùn)濕劑，經(jīng)擠出滾圓制丸法制得微丸。
有益效果：本發(fā)明制成的藥品為棕黃色或棕褐色微丸，圓整度較好，外形美觀，既具有芪參養(yǎng)心湯的所有功效，又具有現(xiàn)代藥劑的優(yōu)點(diǎn)，質(zhì)量穩(wěn)定可控，滿足廣大患者的需求。且制備方法簡(jiǎn)便易行，成本較低，質(zhì)量可控，成品收率高。
具體實(shí)施例
以下通過具體的實(shí)施實(shí)例進(jìn)一步說明本發(fā)明的工藝過程，但本發(fā)明并不僅限于這些實(shí)例項(xiàng)。
對(duì)下述實(shí)施例中，測(cè)試方法簡(jiǎn)介如下：
1.總皂苷的含量測(cè)定
1.1黃芪甲苷對(duì)照品溶液的配制
精密稱取干燥至恒重的黃芪甲苷對(duì)照品2.5mg，置25ml的容量瓶中，加無水乙醇適量，水浴微熱使溶，放冷，用無水乙醇稀釋到刻度，搖勻，即得0.1mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
1.2標(biāo)準(zhǔn)曲線
精密吸取黃芪甲苷無水乙醇液(濃度0.1mg/ml)0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，于100℃水浴揮干無水乙醇，加5％香草醛-冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.0ml，60℃水溶15分鐘，冰浴冷卻，加冰醋酸5.0ml搖勻，在541nm處測(cè)定吸光度值a，以黃芪甲苷質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)，吸光度a值為縱坐標(biāo)，作圖，得回歸方程：a＝6.4275c-0.0042，其中r＝0.9995(n＝6)。表明黃芪甲苷質(zhì)量在0.01mg～0.10mg范圍內(nèi)線形關(guān)系良好。
1.3精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗(yàn)
精確吸取樣品液1ml，于100℃水浴揮干無水乙醇加5％香草醛-冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.0ml，60℃水溶15分鐘，冰浴冷卻，加冰醋酸5.0ml搖勻，在541nm處測(cè)定吸光度值a連續(xù)測(cè)定6次，以吸光度值計(jì)算rsd值為0.46％，表明儀器精密度良好。
取同一批的樣品液6份，每份1ml于100℃水浴揮干無水乙醇加5％香草醛-冰醋酸溶液0.4ml，高氯酸1.0ml，60℃水溶15分鐘，冰浴冷卻，加冰醋酸5.0ml搖勻，在541nm處測(cè)定吸光度值a，rsd值為0.77％，表明該法重復(fù)性良好。
取同一份樣品，依法操作，在0，0.5，1.0，2，4，8h，于541nm處測(cè)定吸光度值，rsd值為2.63％，表明供試品溶液在8h內(nèi)測(cè)定基本穩(wěn)定。
1.4樣品的測(cè)定
分別精密稱取總皂苷有效部位10mg于50ml量瓶中，無水乙醇溶解并定容，吸取1ml按照標(biāo)準(zhǔn)曲線中溶液方法制備，以不加樣品液的溶液為空白，在541nm處測(cè)吸光度a值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到有效部位中總皂苷。
2.總生物堿的含量測(cè)定
2.1烏頭堿對(duì)照品溶液的配制
精密稱取干燥至恒重的烏頭堿對(duì)照品10mg，置50ml的容量瓶中，加1mol/l鹽酸溶液數(shù)滴，溶解，再加等量1mol/lnaoh溶液，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，即得0.20mg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線
精密吸取烏頭堿對(duì)照品液(濃度0.20mg/ml)0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml，分別至分液漏斗中，各加蒸餾水2.9ml、2.8ml、2.6ml、2.4ml、2.2ml、2.0ml，加溴麝香草酚藍(lán)指示液2.0ml，領(lǐng)苯二甲酸氫鉀-氫氧化鈉(ph＝6)緩沖液5.0ml，加氯仿10ml，振搖3min，靜置1h，分取氯仿液，并加入0.5g無水硫酸鈉，放置0.5h，以第1份為空白，在410nm處測(cè)定吸光度值a，以烏頭堿質(zhì)量(mg)為橫坐標(biāo)，吸光度a值為縱坐標(biāo)，作圖，得回歸方程：a＝0.0037c-0.0811，其中r＝0.9997(n＝6)。表明烏頭堿質(zhì)量在20μg～200μg范圍內(nèi)線形關(guān)系良好。
2.3精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗(yàn)
精確吸取樣品液1ml，按2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定中的溶液配制操作，在410nm處測(cè)定吸光度值a連續(xù)測(cè)定6次，以吸光度值計(jì)算rsd值為0.55％，表明儀器精密度良好。
取同一批的樣品液6份，每份1ml，按2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定中的溶液配制操作，在410nm處測(cè)定吸光度值a，rsd值為0.68％，表明該法重復(fù)性良好。
取同一份樣品，，按2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定中的溶液配制操作，在0，0.5，1.0，2，3，6h，于410nm處測(cè)定吸光度值，rsd值為3.17％，表明供試品溶液在6h內(nèi)測(cè)定基本穩(wěn)定。
2.4樣品的測(cè)定
分別精密稱取總生物堿有效部位10mg于50ml量瓶中，無水乙醇溶解并定容，吸取1ml按照標(biāo)準(zhǔn)曲線中溶液方法制備，以不加樣品液的溶液為空白，在410nm處測(cè)吸光度a值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到有效部位中總生物堿。
3.總多糖含量測(cè)定
3.1對(duì)照品溶液的制備
稱取葡萄糖對(duì)照品0.5000g，精密稱定，置50ml容量瓶中，用蒸餾水溶解并定容，得對(duì)照品貯備液。
3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
精密量取對(duì)照品貯備液0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6ml于25ml容量瓶中，用蒸餾水定容，搖勻，制成不同濃度的對(duì)照品溶液。分別精密吸取各濃度對(duì)照品溶液0.2ml于試管中，加入5％苯酚溶液0.4ml，濃硫酸2ml，搖勻，室溫下靜置15min，于490nm下測(cè)定吸光度，以吸光度(a)對(duì)濃度(c)線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得葡萄糖在0.04～0.24mg/ml范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程a＝5.8137c+0.1039，r＝0.9995。
3.3精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗(yàn)
精確吸取樣品液0.2ml，按3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定中的溶液配制操作，在490nm處測(cè)定吸光度值a連續(xù)測(cè)定6次，以吸光度值計(jì)算rsd值為0.63％，表明儀器精密度良好。
取同一批的樣品液6份，每份0.2ml，按3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定中的溶液配制操作，在490nm處測(cè)定吸光度值a，rsd值為0.54％，表明該法重復(fù)性良好。
取同一份樣品，按2.2標(biāo)準(zhǔn)曲線測(cè)定中的溶液配制操作，在0，0.5，1.0，2，4，8h，于490nm處測(cè)定吸光度值，rsd值為2.89％，表明供試品溶液在8h內(nèi)測(cè)定基本穩(wěn)定。
3.4樣品的測(cè)定
分別精密稱取總多糖有效部位10mg于50ml量瓶中，用蒸餾水溶解并定容，吸取1ml按照標(biāo)準(zhǔn)曲線中溶液方法制備，以不加樣品液的溶液為空白，在490nm處測(cè)吸光度a值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到有效部位中總多糖含量。
4.總黃酮含量測(cè)定
4.1蘆丁對(duì)照品溶液的配制
精密稱取已烘干至恒重的蘆丁對(duì)照品10mg，加入60％乙醇溶液溶解并定容至50ml容量瓶中，搖勻，作為對(duì)照品溶液備用(質(zhì)量濃度為0.2mg·ml-1)。
4.2蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線
準(zhǔn)確吸取蘆丁對(duì)照品(0.2mg/ml)1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml分別置于10ml容量瓶中，加60％乙醇至7ml，加5％nano2溶液0.3ml，搖勻放置6min，再加10％al(no3)30.3ml，搖勻，再放置6min，加1mol·l-1naoh溶液2ml，搖勻放置10min，在510nm處測(cè)吸光度值。以黃酮量(以蘆丁計(jì)/μg·ml-1)為橫坐標(biāo)，吸光度a為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程為y＝0.0094x-0.042，r2＝0.9995，總黃酮含量以蘆丁計(jì)在20～60μg/ml線性關(guān)系良好。
4.3精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性試驗(yàn)
精確吸取樣品液1ml按4.2蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線下方法配制，在510nm處測(cè)吸光度，重復(fù)6次，rsd值為0.17％，表明儀器精密度良好。
取同一批的樣品液6份，每份1ml按4.2蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線下方法配制，rsd值為0.42％，表明該法重復(fù)性良好。
取同一份樣品，依法操作，在0，5，10，15，20，25，30，60min測(cè)定吸光度，結(jié)果表明顯色后溶液吸光度在不斷變化，但在5～15min時(shí)，變化較小，因此溶液在顯色后放置10min應(yīng)立即測(cè)定。
4.4樣品測(cè)定方法
精確分別精密稱取總黃酮有效部位50mg于50ml量瓶中，按4.2蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線下方法配制，以不加樣品液的溶液為空白，在510nm處測(cè)吸光度a值，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算得到有效部位中總黃酮含量。
實(shí)施例1：
1.黃芪、紅參、赤芍提取物的制備：稱取黃芪100g，紅參16g，赤芍24g，加入60％乙醇1680ml回流提取兩次，每次60min，過濾，濾液濃縮得濃縮液，濃縮液用大孔吸附樹脂分離純化，60％乙醇為洗脫溶劑，洗脫液濃縮，冷凍干燥，得總皂苷有效部位，備用；將測(cè)定，總皂苷含量為517.54mg/g。
2.附子提取物的制備：稱取附子80g，加入60％乙醇800ml回流提取兩次，每次60min，過濾，濾液進(jìn)一步濃縮至無醇味，濃縮液用大孔吸附樹脂分離純化，60％乙醇為洗脫溶劑，洗脫液濃縮，冷凍干燥，得生物堿有效部位，備用；經(jīng)測(cè)定，總生物堿含量為545.72mg/g。
3.白術(shù)、桂枝、茯苓提取物的制備：稱取白術(shù)40g、桂枝24g、茯苓40g，加1040ml純化水回流提取兩次，每次60min，過濾，取濾液；濾液進(jìn)一步濃縮至相對(duì)密度為1.20，加95％乙醇醇沉10h，過濾，取醇沉物冷凍干燥，得白術(shù)、桂枝、茯苓提取物，即總多糖有效部位，備用；經(jīng)測(cè)定，總多糖含量為633.89mg/g。
4.葶藶子、生姜、大棗提取物的制備：稱取葶藶子40g、生姜24g、大棗24g，加入40％乙醇880ml回流提取兩次，每次60min，過濾，濾液濃縮得濃縮液，濃縮液用大孔吸附樹脂分離純化，50％乙醇為洗脫溶劑，洗脫液濃縮，冷凍干燥，得總黃酮有效部位，備用；經(jīng)測(cè)定，總黃酮含量為527.61mg/g。
5.混合：稱取步驟1中黃芪、紅參、赤芍提取物，步驟2中附子提取物，步驟3中白術(shù)、桂枝、茯苓提取物，步驟4中葶藶子、生姜、大棗提取物，按照1.2∶0.8∶0.7∶0.5重量比混合得主藥，備用；
6.制丸：取步驟5制得的主藥及微晶纖維素，分別過40目篩后，按重量比1∶1.2混勻；加50％乙醇36ml，捏合制軟材，經(jīng)擠出機(jī)篩板(孔徑0.8mm)擠成直徑相同、光滑致密的條狀物；打開滾圓機(jī)，進(jìn)行滾圓，直至顆粒滾制成丸；取出微丸，60℃常壓干燥、篩分，獲得直徑小于2.0mm的微粒，即得本發(fā)明的芪參養(yǎng)心微丸。
實(shí)施例2
1.黃芪、紅參、赤芍提取物的制備：稱取黃芪150g，紅參24g，赤芍36g，加入70％乙醇2520ml回流提取兩次，每次90min，過濾，濾液濃縮得濃縮液，濃縮液用大孔吸附樹脂分離純化，70％乙醇為洗脫溶劑，洗脫液濃縮，冷凍干燥，得總皂苷有效部位，備用；經(jīng)測(cè)定，總皂苷含量為515.23mg/g。
2.附子提取物的制備：稱取附子100g，加入70％乙醇1200ml回流提取兩次，每次90min，過濾，濾液進(jìn)一步濃縮至無醇味，濃縮液用大孔吸附樹脂分離純化，70％乙醇為洗脫溶劑，洗脫液濃縮，冷凍干燥，得生物堿有效部位，備用；經(jīng)測(cè)定，總生物堿含量為545.72mg/g。
3.白術(shù)、桂枝、茯苓提取物的制備：稱取白術(shù)50g、桂枝30g、茯苓50g，加1560ml純化水回流提取兩次，每次90min，過濾，取濾液；濾液進(jìn)一步濃縮至相對(duì)密度為1.20，加95％乙醇醇沉12h，過濾，取醇沉物冷凍干燥，得白術(shù)、桂枝、茯苓提取物，即總多糖有效部位，備用；經(jīng)測(cè)定，總多糖有效部位的總多糖含量為633.89mg/g。
4.葶藶子、生姜、大棗提取物的制備：稱取葶藶子50g、生姜30g、大棗30g，加入50％乙醇1650ml回流提取兩次，每次90min，過濾，濾液濃縮得濃縮液，濃縮液用大孔吸附樹脂分離純化，50％乙醇為洗脫溶劑，洗脫液濃縮，冷凍干燥，得總黃酮有效部位，備用；經(jīng)測(cè)定，總黃酮有效部位的總黃酮量為527.61mg/g。
5.混合：稱取步驟1中黃芪、紅參、赤芍提取物，步驟2中附子提取物，步驟3中白術(shù)、桂枝、茯苓提取物，步驟4中葶藶子、生姜、大棗提取物，按照1.3∶0.7∶0.6∶0.6重量比混合得主藥，備用；
6.制丸：取步驟5制得的主藥及微晶纖維素、乳糖，分別過40目篩后，按重量比1.5∶2.1∶0.7混勻；加入0.8％羥丙基纖維素鈉溶液25ml，捏合制軟材，經(jīng)擠出機(jī)篩板(孔徑0.8mm)擠成直徑相同、光滑致密的條狀物；打開滾圓機(jī)，進(jìn)行滾圓，直至顆粒滾制成丸；取出微丸，60℃常壓干燥、篩分，獲得直徑小于2.0mm的微粒，即得本發(fā)明的芪參養(yǎng)心微丸。
實(shí)施例3芪參養(yǎng)心微丸的性能測(cè)定。
對(duì)實(shí)施例1和實(shí)施例2制備的芪參養(yǎng)心微丸的性能進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果如下。
(1)、穩(wěn)定性試驗(yàn)
1.考察項(xiàng)目
1.1外觀
目測(cè)，所制備的芪參養(yǎng)心微丸均為棕黃色或棕褐色微丸劑，圓整，堅(jiān)硬，表面光滑。
1.2含量測(cè)定
制劑中黃芪甲苷含量應(yīng)大于5.90％，烏頭堿含量應(yīng)大于3.70％，蘆丁含量應(yīng)大于4.50％。
2.影響因素試驗(yàn)
2.1高溫試驗(yàn)
取制備芪參養(yǎng)心微丸置表面皿中，于40℃下放置10天，分別于第5天和第10天取樣，按表1考察項(xiàng)目下內(nèi)容檢查，與第0天比較。試驗(yàn)結(jié)果見表1。
表1溫度影響因素試驗(yàn)結(jié)果
tab.1resultoftemperatureinfluence
由試驗(yàn)結(jié)果可知，芪參養(yǎng)心微丸在高溫條件下，黃芪甲苷、烏頭堿、蘆丁含量均無明顯變化；第10天時(shí)微丸表面略顯粗糙，推測(cè)可能是由于微丸表面失去水份所致。
2.2強(qiáng)光照射試驗(yàn)
取芪參養(yǎng)心微丸置表面皿中，在室溫下于光照度4500lx±500lx條件下放置10天，分別于第5天和第10天取樣，按2考察項(xiàng)目下內(nèi)容檢查，與第0天比較。試驗(yàn)結(jié)果見表2。
表2強(qiáng)光照射試驗(yàn)結(jié)果
tab.2resultoflightinfluence
由試驗(yàn)結(jié)果可知，參養(yǎng)心微丸在強(qiáng)光照射條件下，制劑外觀和黃芪甲苷、烏頭堿、蘆丁的含量均無明顯變化。
2.3高濕度試驗(yàn)
取芪參養(yǎng)心微丸精密稱重后，置表面皿中，于室溫下相對(duì)濕度為75％±5％的條件下放置10天，分別于第5天和第10天取樣，準(zhǔn)確稱量試驗(yàn)前后樣品的重量，檢查外觀、含量、重量差異，與第0天比較，考察制劑的吸濕潮解性能，以及濕度對(duì)含量的影響。試驗(yàn)結(jié)果見表3。
表3高濕度試驗(yàn)結(jié)果
tab.3resultofhumidityinfluence
由試驗(yàn)結(jié)果可知，芪參養(yǎng)心微丸在高濕度條件下，第10天時(shí)黃芪甲苷、烏頭堿、蘆丁含量均有變化，考慮為第10天時(shí)微丸吸潮，丸體略軟，表面略粘，重量略有增加。
3.加速試驗(yàn)
取3批芪參養(yǎng)心微丸裝于具塞錐形瓶中密封，置于相對(duì)濕度為75％±5％，溫度為37℃～40℃的條件下放置6個(gè)月，分別于第1、2、3、6月末取樣一次，按1.考察項(xiàng)目下內(nèi)容檢查。試驗(yàn)結(jié)果見表4。
表4加速試驗(yàn)結(jié)果
tab.4resultofacceleratedtest
試驗(yàn)結(jié)果表明，芪參養(yǎng)心微丸在加速條件下密閉保存各項(xiàng)指標(biāo)無明顯變化。
由以上影響因素試驗(yàn)和加速試驗(yàn)結(jié)果可知，芪參養(yǎng)心微丸應(yīng)密閉保存，并置于陰涼干燥處。
(3)芪參養(yǎng)心微丸對(duì)阿霉素誘導(dǎo)心力衰竭大鼠的保護(hù)作用研究。
1材料
清潔級(jí)雄性sd大鼠50只，體重200±20g，自由飲食飲水。
芪參養(yǎng)心微丸(自制)；阿霉素(上海瀚香生物科技)；卡托普利片(中美上海施貴寶制藥)；大鼠腦鈉肽(bnp)、超敏肌鈣蛋白(hs-ctn)、半乳糖凝集素-3(galectin-3)、可溶性基質(zhì)溶素-2(sst2)、超敏c反應(yīng)蛋白(hs-crp)試劑盒(上海西唐生物科技)；其余試劑為分析純。
2設(shè)備
高速冷凍離心機(jī)(美國beckman公司)；bas124s分析天平(賽多利斯)；超低溫冰箱(美國thermo公司)。
3方法
3.1造模與分組
預(yù)留10只sd大鼠作為正常組，其他制作慢性心力衰竭大鼠模型，將阿霉素用生理鹽水配成質(zhì)量濃度為2.5g/l的溶液。每周ip阿霉素溶液2.5mg/kg，每周1次，共6周，累計(jì)總量15mg/kg。造模期間有8只大鼠相繼死亡，從32只造模成功的大鼠中選30只分為模型組、卡托普利組和芪參養(yǎng)心微丸組。
3.2給藥
于造模第5周起，按分組分別ig給藥。卡托普利陽性藥組給藥劑量為6.25mg/kg，芪參養(yǎng)心微丸組給藥劑量為3g/kg，正常組和模型組ig給予同體積蒸餾水。給藥體積為5ml/kg，每日1次，連續(xù)4周。
3.3血清bnp、hs-ctn、galectin-3、sst2、hs-crp測(cè)定
大鼠末次給藥后，禁食不禁水12h，于次日稱體重后，用25％烏拉坦4ml/kgip麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈取血，靜置4h后，4℃，3000r/min離心20min，分離血清，儲(chǔ)存于-80℃冰箱中。按照elisa試劑盒說明書進(jìn)行檢測(cè)。
3.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
采用spss20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料采用
3.5結(jié)果
由表1顯示，模型組大鼠血清bnp、hs-ctn、galectin-3、sst2、hs-crp水平均顯著高于正常組(p＜0.05)，表明造模成功，大鼠心功能受損。經(jīng)陽性對(duì)照藥卡托普利片干預(yù)，血清bnp、hs-ctn、galectin-3、sst2、hs-crp水平均顯著下降，與模型組有顯著差異(p＜0.05)。芪參養(yǎng)心微丸組大鼠經(jīng)芪參養(yǎng)心微丸干預(yù)后，血清bnp、hs-ctn、galectin-3、sst2、hs-crp水平均顯著下降，亦與模型組有顯著差異(p＜0.05)。但卡托普利組與芪參養(yǎng)心微丸組大鼠間，血清bnp、hs-ctn、galectin-3、sst2、hs-crp水平無顯著差異(p＞0.05)，表明芪參養(yǎng)心微丸取得了與陽性藥卡托普利同樣的藥效，能顯著改善心衰的相應(yīng)指標(biāo)，從而改善心功能，減輕心力衰竭癥狀。
表1芪參養(yǎng)心微丸對(duì)心力衰竭大鼠血清bnp、hs-ctn、galectin-3、sst2、hs-crp的影響
注：#p＜0.05vs正常組；*p＜0.05vs模型組；▲p＜0.05vs卡托普利組
本發(fā)明制成的藥品為棕黃色或棕褐色微丸，圓整度較好，外形美觀，既具有芪參養(yǎng)心湯的所有功效，又具有現(xiàn)代藥劑的優(yōu)點(diǎn)，質(zhì)量穩(wěn)定可控，滿足廣大患者的需求。且制備方法簡(jiǎn)便易行，成本較低，質(zhì)量可控，成品收率高。