本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種具有活血祛瘀、調(diào)經(jīng)止痛的中藥組合物，具體涉及一種新生化方有效部位、有效成分的組合物及其制備方法。

背景技術(shù)：

痛經(jīng)為婦科最常見的癥狀之一，約有75％的婦女發(fā)生痛經(jīng)。痛經(jīng)分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩大類，原發(fā)性痛經(jīng)是指月經(jīng)前及行經(jīng)期間，下腹及腰部痙攣性疼痛，嚴(yán)重時(shí)伴有惡心、嘔吐、肢冷，尤其多見于未婚青年婦女。中醫(yī)藥治療婦科疾病有悠久的歷史，以辨證辨病結(jié)合，中醫(yī)藥愈加顯現(xiàn)其獨(dú)特的治療優(yōu)勢(shì)，但目前治療痛經(jīng)的復(fù)方藥物多存在配方藥味組成多、用藥量大、使用不便、成分復(fù)雜、有效部位不明確，復(fù)方中起療效的物質(zhì)基礎(chǔ)不清楚，并存在一定的不良反應(yīng)等問題，因此很有必要在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下去粗存精、優(yōu)選出一種藥物配比精簡(jiǎn)、療效確切，副作用小、服用方便，用于活血祛瘀、調(diào)經(jīng)止痛的藥物。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種新生化方有效部位、有效成分的組合物，該組合物藥物配比精簡(jiǎn)、用藥量少、療效好、副作用更小、服用方便，并且具有活血祛瘀、調(diào)經(jīng)止痛的作用；本發(fā)明的另一目的在于提供該組合物的制備方法。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種新生化方有效部位、有效成分組合物，由以下重量份配比的原料制備而成：

益母草總生物堿20-40份，紅花總黃酮10-20份，川芎嗪5-10份，阿魏酸10-20份，苦杏仁苷5-10份，甘草酸1-5份，當(dāng)歸揮發(fā)油1-5份，干姜總酚10-20份，甘草苷1-5份。

有選的，所述原料重量份配比為益母草總生物堿25-35份，紅花總黃酮12-18份，川芎嗪6-8份，阿魏酸12-18份，苦杏仁苷6-8份，甘草酸2-4份，當(dāng)歸揮發(fā)油2-4份，干姜總酚12-18份，甘草苷2-4份。

本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn)方案為：

一種新生化方有效部位、有效成分組合物的制備方法，包含如下步驟：

步驟一，根據(jù)所述的重量份配比稱取各原料；

步驟二，取當(dāng)歸揮發(fā)油采用β-環(huán)糊精包合，β-環(huán)糊精溶解于純化水中，加入用乙醇溶解的當(dāng)歸揮發(fā)油溶液，采用高速分散器包合，包合溶液采用5000-30 000 Da截留分子量的超濾膜分離，收集超濾液，超濾液采用100-800 Da截留分子量的納濾膜濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥處理得藁本內(nèi)酯噴干粉；

步驟三，將益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷粉碎成細(xì)粉，與藁本內(nèi)酯噴干粉混勻后，和藥學(xué)上可接受的載體，如紅糖、藥用淀粉、蔗糖，制備成臨床上所能接受的劑型。

所述步驟二中當(dāng)歸揮發(fā)油和β-環(huán)糊精的重量比為1:5-20。

所述臨床上所能接受的劑型為水煎劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、糖漿劑、栓劑、注射劑或微囊劑型。

本發(fā)明的更進(jìn)一步改進(jìn)方案為：

用所述的一種新生化方有效部位、有效成分組合物制成的水煎劑、膠囊劑、片劑、顆粒劑、糖漿劑、栓劑、注射劑或微囊劑。

所述各原料通過以下方法提?。阂婺覆菘偵飰A通過益母草水提取，提取液調(diào)pH至3-4后采用陽(yáng)離子交換樹脂富集制備得到；紅花總黃酮通過紅花水提取，提取液調(diào)pH至2-3后采用聚酰胺樹脂富集制備得到；川芎嗪是通過川芎水提取后調(diào)節(jié)溶液pH至2-3，乙醇醇沉，進(jìn)而通過C18制備色譜富集得到；阿魏酸為通過川芎水提取后調(diào)節(jié)溶液pH至7-8，乙醇醇沉，進(jìn)而通過C18制備色譜富集得到；苦杏仁苷為苦杏仁水提取，提取液調(diào)pH至2-3后采用聚酰胺樹脂富集制備得到；甘草酸和甘草苷的制備方法為通過甘草水提取后采用大孔樹脂富集，進(jìn)而采用不同濃度乙醇洗脫、分段，獲得甘草酸和甘草苷；當(dāng)歸揮發(fā)油通過當(dāng)歸水蒸氣蒸餾制備得到；、干姜總酚的制備方法為干姜水提取，提取液調(diào)pH至2-3后采用聚酰胺樹脂富集制備得到。另外，上述各原料均可以從市場(chǎng)購(gòu)得。

本發(fā)明在前期對(duì)古今治療痛經(jīng)方劑進(jìn)行篩選，在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，辨證施治，結(jié)合痛經(jīng)的發(fā)病機(jī)理和發(fā)病癥狀，以活血化瘀為治療依據(jù)進(jìn)行篩選處方，確定以益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚、甘草苷和當(dāng)歸揮發(fā)油組成的中藥組合物。

本發(fā)明基于中醫(yī)辨證施治結(jié)合現(xiàn)代藥理學(xué)研究，益母草總生物具有抗炎、鎮(zhèn)痛和抗痛經(jīng)效用，紅花總黃酮通過抗血小板聚集實(shí)現(xiàn)活血化瘀，川芎嗪抗血栓形成，阿魏酸可以抗血小板聚集和血栓、抗炎、增強(qiáng)免疫力，苦杏仁苷抗炎，甘草酸可以保肝抗病毒，干姜總酚可抑制血小板環(huán)氧合酶產(chǎn)生，抑制凝血酶原激酶產(chǎn)生、血小板聚集，甘草苷活血化瘀，改善血管微循環(huán)，當(dāng)歸揮發(fā)油可以升高子宮NO水平，從而對(duì)原發(fā)性痛經(jīng)有較好的效果。本發(fā)明在中醫(yī)藥辨證施治的指導(dǎo)下去粗存精，精簡(jiǎn)配伍組方。根據(jù)藥理篩選結(jié)果表明，中藥組合物活活血祛瘀、調(diào)經(jīng)止痛作用強(qiáng)，用藥量更少，不良反應(yīng)更低。

本發(fā)明的有益效果為：

（1）本發(fā)明在前期對(duì)古今治療痛經(jīng)方劑進(jìn)行篩選，在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下，辨證施治，結(jié)合痛經(jīng)的發(fā)病機(jī)理和發(fā)病癥狀，以活血化瘀為治療依據(jù)進(jìn)行藥物配比的篩選，去粗存精，精簡(jiǎn)藥味，確定以益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷和當(dāng)歸揮發(fā)油進(jìn)行組合，并優(yōu)化提取物的重量配比，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明提供的中藥組合物具有很好的活血祛瘀、調(diào)經(jīng)止痛功效，藥味精簡(jiǎn)后在保證良好功效的同時(shí)，臨床用藥量更少。

（2）本發(fā)明提供的中藥組合物制備方法，有效避免了中藥湯劑煎煮過程中由于酸堿成分形成復(fù)合物導(dǎo)致有效部位、有效成分沉淀?yè)p失，在保障藥物療效的同時(shí)實(shí)現(xiàn)中藥資源合理利用。

具體實(shí)施方式

以下各實(shí)施例所用新生化方有效部位、有效成分均由市場(chǎng)購(gòu)得。

實(shí)施例1：中藥組合物的制備

取益母草總生物堿300g，紅花總黃酮150g，川芎嗪60g，阿魏酸150g，苦杏仁苷60g，甘草酸30g，干姜總酚150g，甘草苷30g，當(dāng)歸揮發(fā)油35 mL。取當(dāng)歸揮發(fā)油采用β-環(huán)糊精包合，重量比1:10，β-環(huán)糊精溶解于純化水中，緩慢加入用乙醇溶解的當(dāng)歸揮發(fā)油溶液，采用高速分散器包合，包合溶液采用10 000 Da截留分子量的超濾膜分離，收集超濾液，超濾液采用100 Da截留分子量的納濾膜濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥處理得藁本內(nèi)酯噴干粉；益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷粉碎成細(xì)粉與藁本內(nèi)酯噴干粉混勻，加入800g紅糖混合均勻，加水制成軟材，過20目篩制粒，干燥，制成顆粒，包裝，即得顆粒劑。

實(shí)施例2：中藥組合物的制備

取益母草總生物堿200g，紅花總黃酮100g，川芎嗪50g，阿魏酸100g，苦杏仁苷50g，甘草酸10g，干姜總酚100g，甘草苷10g，當(dāng)歸揮發(fā)油10 mL。取當(dāng)歸揮發(fā)油采用β-環(huán)糊精包合，重量比1:5，β-環(huán)糊精溶解于純化水中，緩慢加入用乙醇溶解的當(dāng)歸揮發(fā)油溶液，采用高速分散器包合，包合溶液采用20000 Da截留分子量的超濾膜分離，收集超濾液，超濾液采用300 Da截留分子量的納濾膜濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥處理得藁本內(nèi)酯噴干粉；益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷粉碎成細(xì)粉與藁本內(nèi)酯噴干粉混勻，加入藥用淀粉1000g混合均勻，加水制成軟材，過20目篩制粒，干燥，制成顆粒裝入膠囊，每粒0.3g。

實(shí)施例3：中藥組合物的制備

取益母草總生物堿400g，紅花總黃酮200g，川芎嗪100g，阿魏酸200g，苦杏仁苷100g，甘草酸50g，干姜總酚200g，甘草苷50g，當(dāng)歸揮發(fā)油50 mL。取當(dāng)歸揮發(fā)油采用β-環(huán)糊精包合，重量比1:20，β-環(huán)糊精溶解于純化水中，緩慢加入用乙醇溶解的當(dāng)歸揮發(fā)油溶液，采用高速分散器包合，包合溶液采用10000 Da截留分子量的超濾膜分離，收集超濾液，超濾液采用100 Da截留分子量的納濾膜濃縮，濃縮液經(jīng)噴霧干燥處理得藁本內(nèi)酯噴干粉；益母草總生物堿、紅花總黃酮、川芎嗪、阿魏酸、苦杏仁苷、甘草酸、干姜總酚和甘草苷粉碎成細(xì)粉與藁本內(nèi)酯噴干粉混勻，加入蔗糖600g，混合均勻，2000 mL水溶解，0.22 μm微孔濾膜過濾，包裝，即得糖漿劑。

實(shí)施例4

根據(jù)實(shí)施例1的方法將各原料混勻后，按照常規(guī)方法，制成水煎劑、片劑、栓劑、注射劑或微囊劑。

實(shí)施例5：對(duì)縮宮素所致的小鼠離體子宮收縮的影響

實(shí)驗(yàn)方法：取未孕雌性小鼠，體重18～22g；實(shí)驗(yàn)前連續(xù)3天腹腔注射苯甲酸雌二醇1mg·kg^-1·d^-1，以同步化子宮并增加子宮對(duì)縮宮素的敏感性。于第4日實(shí)驗(yàn)時(shí)脫頸椎處死，剖腹取子宮，剝離附著于子宮壁上的結(jié)締組織和脂肪，置于Locke’s溶液中清洗，用細(xì)線分別扎住子宮頸端及兩側(cè)卵巢端，一端固定于浴槽底部，另一端連接在張力換能器上。置于20ml Locke’s液恒溫浴槽中，溫度為(37±0.1)℃，持續(xù)供氧，pH 7.3，通過調(diào)節(jié)螺母加1g的負(fù)荷(10mN)，平衡40min，待子宮收縮穩(wěn)定，自發(fā)節(jié)律恢復(fù)后，開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

預(yù)先記錄5-10min正常收縮曲線，繼加入縮宮素注射劑10μL，終濃度為5μL/L，作用15min后再加入中藥組合物（實(shí)施例1、實(shí)施例2和實(shí)施例3制得）、四物湯為受試藥物，各受試藥物加入的初始濃度均為1g受試藥物/mL，浴槽中受試藥物的終濃度為10mg受試藥物/mL，觀察藥物對(duì)縮宮素引起子宮痙攣性收縮的抑制作用。

標(biāo)本穩(wěn)定后，記錄正?；顒?dòng)曲線作為對(duì)照。將各受試藥物加入營(yíng)養(yǎng)管中，待反應(yīng)達(dá)到峰值后，用新鮮營(yíng)養(yǎng)液沖洗3-5次，穩(wěn)定后可重復(fù)使用。

采用T檢驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)給藥前及給藥后子宮的平均肌張力，計(jì)算抑制子宮收縮的百分率 (IR%)。：IR(%)＝(給藥前參數(shù)-給藥后參數(shù))/給藥前參數(shù)×100，具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表1所示。

表1 各藥物對(duì)縮宮素所致的小鼠離體子宮收縮的影響(n=10)

由表1各藥物對(duì)縮宮素所致的小鼠離體子宮收縮的影響結(jié)果表明，本發(fā)明提供的中藥組合物具有比四物湯具有更好的抑制子宮收縮的作用，因此，實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步表明本發(fā)明提供的中藥組合物，通過合理配比后，起到很好的協(xié)同增效作用，臨床上藥效強(qiáng)、用量少、安全、便于服用。

實(shí)施例6：對(duì)家兔體外血漿凝血酶時(shí)間 (TT) 影響的實(shí)驗(yàn)研究

實(shí)驗(yàn)方法：取新西蘭白兔，雄性，6只，禁食8h后，用戊巴比妥鈉麻醉，頸動(dòng)脈取血，用3.8%枸櫞酸鈉(血與抗凝劑體積比為9:1)抗凝收集于塑料離心管中，以3000r·min^-1離心10min，吸取上層溶液，制備成待測(cè)血漿，以蒸餾水作為空白對(duì)照，在測(cè)試杯每個(gè)道中加入10μL中藥組合物 (實(shí)施例1、實(shí)施例2和實(shí)施例3制得)、四物湯，再分別加待測(cè)血漿50μL，37℃預(yù)溫3min后，加入0.1mol·L^-1 pH 7.4Tris-HCl緩沖液稀釋的15U·mL^-1凝血酶溶液50μL。用LG-PABER-I型血小板聚集凝血因子分析儀測(cè)定各藥物組的體外凝血時(shí)間，并以[(給藥組凝血時(shí)間-對(duì)照組凝血時(shí)間)/對(duì)照組凝血時(shí)間]×100％計(jì)算各藥物組的凝血時(shí)間延長(zhǎng)率。具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表2所示。

表2 各藥物對(duì)家兔體外血漿凝血酶時(shí)間的影響

注：*與空白對(duì)照組比較，*P ＜0.05，**P ＜0.01

通過表2實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，和四物湯相比，本發(fā)明提供的中藥組合能夠更加顯著延長(zhǎng)家兔體外血漿凝血酶時(shí)間，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明通過科學(xué)配比后，起到協(xié)同增效的作用，抗凝血作用增強(qiáng)，本發(fā)明提供的中藥組合物組成更精簡(jiǎn)，用藥量更少，可以避免多味藥帶來(lái)的不良反應(yīng)。