【技術(shù)領(lǐng)域】

本發(fā)明涉及多酚提取技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及龍眼核多酚提取方法。

背景技術(shù)：

龍眼，為無(wú)患子科植物龍眼的果實(shí)，性溫味甘，益心脾，補(bǔ)氣血，具有良好有滋養(yǎng)補(bǔ)益作用，可用于心脾虛損氣血不足所致的失眠健忘驚悸眩暈等癥，中國(guó)為世界龍眼生產(chǎn)大國(guó)，主產(chǎn)于廣東廣西福建四川等地種植面積超過(guò)，龍眼肉產(chǎn)量在萬(wàn)噸以上。龍眼核為龍眼的種仁，直徑0.8-1.2cm，表皮紅褐色，有光澤，一端有長(zhǎng)橢圓形灰白色種臍，質(zhì)堅(jiān)硬。氣味微淡而微苦。龍眼核的質(zhì)量占龍眼果實(shí)質(zhì)量的17％左右。由于沒(méi)有進(jìn)行綜合利用，每年廢棄的龍眼核質(zhì)量達(dá)幾十萬(wàn)噸。

龍眼除了龍眼果肉具有很高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值外，其種子也有顯著功效。龍眼核含有豐富的淀粉、還原糖、粗纖維、蛋白質(zhì)、果膠、多酚等天然產(chǎn)物，同時(shí)還含有多種礦物元素、維生素以及人體必須氨基酸等營(yíng)養(yǎng)素。其中淀粉含量為60.88％，還原糖含量為9.67％，粗纖維含量為6.85％，蛋白質(zhì)含量為5.58％，果膠含量為5.19％，多酚含量為4.72％，脂肪含量為3.23％。而其中的多酚又被稱(chēng)為“第七類(lèi)營(yíng)養(yǎng)素”，多酚即多羥基苯，如苯二酚、苯三酚等，是植物及微生物中產(chǎn)生的酚類(lèi)次生代謝產(chǎn)物，具有抗氧化、抗凝血、與金屬離子的絡(luò)合等特性。多酚作為天然抗氧化劑，具有抗衰老、抗輻射、清體自由基等功能，對(duì)心腦血管疾病的防治，如冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化、腦血栓等方面具有良好功效。對(duì)龍眼深加工的廢棄物龍眼核的開(kāi)發(fā)利用，已成為近幾年兩廣、福建等龍眼主要產(chǎn)地的食品、農(nóng)產(chǎn)品加工方向的一個(gè)研究熱點(diǎn)。而現(xiàn)階段對(duì)于龍眼核多酚提取及純化工藝研究，仍未見(jiàn)有具有實(shí)際生產(chǎn)意義的工藝方法的報(bào)道，這主要是由于目前絕大多數(shù)的研究其目的只是為了進(jìn)行物質(zhì)結(jié)構(gòu)和生物活性分析，所述規(guī)模仍只停留在實(shí)驗(yàn)室階段，并且設(shè)備投入、生產(chǎn)成本偏高，工藝復(fù)雜，引入的添加、雜質(zhì)成分較多，成品的純度和活性也有待進(jìn)一步的提高。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

鑒于以上內(nèi)容，有必要提供龍眼核多酚提取方法，以充分利用龍眼核的營(yíng)養(yǎng)保健價(jià)值。

本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

龍眼核多酚提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)龍眼核洗凈烘干；

(2)將烘干后的龍眼核粉碎，得到龍眼核粉；

(3)將龍眼核粉加水調(diào)漿，然后加入α－淀粉酶進(jìn)行酶解，得到酶解物；

(4)將酶解物中加入乙醇溶液，攪拌均勻后經(jīng)微波提取工藝提取得到浸出液；

(5)將浸出液減壓過(guò)濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；

(6)將龍眼核多酚粗提物加水配成溶液，流過(guò)大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附；

(7)將吸附后的樹(shù)脂過(guò)濾，用40％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。

進(jìn)一步的，所述龍眼核烘干使龍眼核最終失水率達(dá)25％-32％，所述烘干溫度為45-55℃，烘干時(shí)間為15-30h。

進(jìn)一步的，所述龍眼核粉碎成30-40目。

進(jìn)一步的，所述步驟3)中按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化30-60分鐘。

進(jìn)一步的，所述步驟4)中加入60％-70％的乙醇溶液，所述微波提取工藝為在3300mhz微波頻率，在500w-1000w的微波功率下，輔助提取20-180秒。

進(jìn)一步的，所述微波提取工藝為每隔15-20s微波功率依次設(shè)置為600w、700w、600w、700w、600w、700w。

進(jìn)一步的，所述微波提取工藝為每隔15-20s微波功率依次設(shè)置為700w、800w、700w、800w。

進(jìn)一步的，所述步驟6)將所述多酚粗提物加水配成20mg/ml的溶液，流過(guò)大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃。

進(jìn)一步的，所述步驟7)的大孔樹(shù)脂類(lèi)型為h1020。

進(jìn)一步的，所述步驟7)使用40％乙醇進(jìn)行洗脫，流過(guò)大孔樹(shù)脂的流速為3-4bv/h。

本發(fā)明從龍眼核提取多酚的方法，為經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)后得到的優(yōu)選試驗(yàn)參數(shù)，每個(gè)步驟均可有效提高龍眼核多酚的提取率及純度。

本發(fā)明先利用烘干技術(shù)合理控制龍眼核水分，降低龍眼核內(nèi)多酚氧化酶活性，在下一步酶解過(guò)程中減少多酚的損失。使用酶解技術(shù)酶解龍眼核的淀粉，使龍眼核多酚更易析出利于下一步多酚的提取。

當(dāng)微波在3300mhz微波頻率，在500w-1000w的微波功率下對(duì)龍眼核細(xì)胞壁破壞力最佳，使得龍眼核中的多酚溶出并擴(kuò)散，如果繼續(xù)加大功率，則會(huì)破壞多酚性質(zhì)，導(dǎo)致提取率降低。更佳的當(dāng)微波功率呈波浪形循環(huán)時(shí)，龍眼核細(xì)胞在一高一低兩個(gè)功率循環(huán)震蕩下，可最大限度使多酚析出，提高提取率。

經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)驗(yàn)證經(jīng)多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，大孔樹(shù)脂類(lèi)型為h1020吸附率和解析率均較高，可達(dá)到9.1％以上，使用40％乙醇進(jìn)行洗脫，洗脫率較高達(dá)到94.3％。

【具體實(shí)施方式】

實(shí)施例1

(1)龍眼核洗凈在溫度為45℃進(jìn)行烘干，使得龍眼核最終失水率達(dá)25％。

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成30目，得到龍眼核粉。

(3)將龍眼核粉加水調(diào)漿，按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化30分鐘，然后加入α－淀粉酶進(jìn)行酶解，得到酶解物。

(4)將酶解物按1:4比例中加入60％％的乙醇溶液，攪拌均勻后在3300mhz微波頻率，在500ww的微波功率下，輔助提取20秒，提取得到浸出液。

(5)將浸出液減壓過(guò)濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；此時(shí)龍眼核多酚提取率為64.2％。

(6)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過(guò)類(lèi)型為h1020大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃。

(7)將吸附后的樹(shù)脂過(guò)濾，用40％乙醇進(jìn)行洗脫，流過(guò)大孔樹(shù)脂的流速為3bv/h，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。此時(shí)多酚提取物純度為81.2％。

實(shí)施例2

(1)龍眼核洗凈在溫度為55℃進(jìn)行烘干，使得龍眼核最終失水率達(dá)32％。

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成40目，得到龍眼核粉。

(3)將龍眼核粉加水調(diào)漿，按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化60分鐘，然后加入α－淀粉酶進(jìn)行酶解，得到酶解物。

(4)將酶解物按1:4比例中加入70％的乙醇溶液，攪拌均勻后在3300mhz微波頻率，在1000w的微波功率下，輔助提取180秒，提取得到浸出液；

(5)將浸出液減壓過(guò)濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；此時(shí)龍眼核多酚提取率為66.3％。

(6)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過(guò)類(lèi)型為h1020大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃；

(7)將吸附后的樹(shù)脂過(guò)濾，用40％乙醇進(jìn)行洗脫，流過(guò)大孔樹(shù)脂的流速為4bv/h，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。經(jīng)以上步驟此時(shí)多酚提取物純度為81.5％。

實(shí)施例3

(1)龍眼核洗凈在溫度為50℃進(jìn)行烘干，使得龍眼核最終失水率達(dá)28％。

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成35目，得到龍眼核粉；

(3)將龍眼核粉加水調(diào)漿，按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化40分鐘，然后加入α－淀粉酶進(jìn)行酶解，得到酶解物；

(4)將酶解物按1:4比例中加入65％的乙醇溶液，攪拌均勻后在3300mhz微波頻率，在800w的微波功率下，輔助提取100秒，提取得到浸出液；

(5)將浸出液減壓過(guò)濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；此時(shí)龍眼核多酚提取率為67.4％。

(6)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過(guò)類(lèi)型為h1020大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃；

(7)將吸附后的樹(shù)脂過(guò)濾，用40％乙醇進(jìn)行洗脫，流過(guò)大孔樹(shù)脂的流速為4bv/h，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。經(jīng)以上步驟此時(shí)多酚提取物純度為81.0％。

實(shí)施例4

(1)龍眼核洗凈在溫度為46℃進(jìn)行烘干，使得龍眼核最終失水率達(dá)27％。

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成35目，得到龍眼核粉；

(3)將龍眼核粉加水調(diào)漿，按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化39分鐘，然后加入α－淀粉酶進(jìn)行酶解，得到酶解物；

(4)將酶解物按1:4比例中加入65％的乙醇溶液，攪拌均勻后在3300mhz微波頻率，每隔20s微波功率依次設(shè)置為700w、800w、700w、800w，輔助提取80秒，提取得到浸出液；

(5)將浸出液減壓過(guò)濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；此時(shí)龍眼核多酚提取率為84.6％。

(6)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過(guò)類(lèi)型為h1020大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃；

(7)將吸附后的樹(shù)脂過(guò)濾，用40％乙醇進(jìn)行洗脫，流過(guò)大孔樹(shù)脂的流速為4bv/h，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。經(jīng)以上步驟此時(shí)多酚提取物純度為81.7％。

實(shí)施例5

(1)龍眼核洗凈在溫度為49℃進(jìn)行烘干，使得龍眼核最終失水率達(dá)30％。

(2)將烘干后的龍眼核粉碎成33目，得到龍眼核粉；

(3)將龍眼核粉加水調(diào)漿，按料水比1∶4加水調(diào)漿，攪拌均勻后，每克料水混合物加入1200uα－淀粉酶，在ph5.5、溫度90℃下液化40分鐘，然后加入α－淀粉酶進(jìn)行酶解，得到酶解物；

(4)將酶解物按1:4比例中加入68％的乙醇溶液，攪拌均勻后在3300mhz微波頻率，每隔20s微波功率依次設(shè)置為600w、700w、600w、700w、600w、700w，輔助提取100秒，提取得到浸出液；

(5)將浸出液減壓過(guò)濾干燥提取液，得龍眼核多酚粗提物；此時(shí)龍眼核多酚提取率為85.3％。

(6)將龍眼核多酚粗提物加水配成20mg/ml溶液，流過(guò)類(lèi)型為h1020大孔樹(shù)脂進(jìn)行吸附，水浴振蕩12h，水浴溫度為30℃；

(7)將吸附后的樹(shù)脂過(guò)濾，用40％乙醇進(jìn)行洗脫，流過(guò)大孔樹(shù)脂的流速為3.5bv/h，洗脫液濃縮后干燥，得到多酚提取物。經(jīng)以上步驟此時(shí)多酚提取物純度為82.1％。