本發(fā)明涉及一種用于老年性陰道炎的植物精油，屬于植物提取物的應(yīng)用
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：老年性陰道炎發(fā)生于絕經(jīng)以后、卵巢切除者或盆腔放射治療后，其發(fā)病率據(jù)報(bào)道高達(dá)98.5％，常見于絕經(jīng)后的老年婦女。老年性陰道炎主要癥狀為白帶增多，多為黃水樣，嚴(yán)重者可為膿性，有臭味，有時(shí)為淡血性，甚至發(fā)生少量陰道流血。常伴有下腹及陰道墜脹感或陰道皮膚受炎性分泌物影響，可產(chǎn)生輕度瘙癢。檢查見陰道呈老年性改變，皺壁消失，上皮菲薄，黏膜充血，表面常有散在點(diǎn)狀充血，嚴(yán)重時(shí)上皮剝脫形成表淺潰瘍，子宮頸也有點(diǎn)狀充血。老年性陰道炎如經(jīng)久不愈，黏膜下結(jié)締組織纖維化后，陰道彈性消失，使陰道狹窄，尤以穹隆部多見，以致暴露宮頸困難。老年性陰道炎的病因是：因卵巢功能衰退，雌激素水平降低，陰道壁萎縮，黏膜變薄，上皮細(xì)胞內(nèi)糖原含量減少，陰道內(nèi)ph增高，局部抵抗力降低，致病菌容易入侵繁殖引起炎癥。同時(shí)，由于陰道黏膜萎縮，上皮菲薄，血運(yùn)不足，使陰道抵抗力降低，便于細(xì)菌侵入繁殖引起炎癥病變。另外，個(gè)人衛(wèi)生習(xí)慣不良，營(yíng)養(yǎng)缺乏，尤其是b族維生素缺乏，可能與發(fā)病有關(guān)。此外，手術(shù)切除雙側(cè)卵巢、卵巢早衰、盆腔放療后、長(zhǎng)期閉經(jīng)、長(zhǎng)期哺乳等均可引起本病發(fā)生。老年性陰道炎可以引起陰道壁潰瘍，導(dǎo)致陰道粘連，嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致陰道狹窄甚至閉鎖，這時(shí)原本增多的分泌物會(huì)出現(xiàn)流出不暢的情況，形成陰道內(nèi)甚至子宮內(nèi)膿液堆積，使炎癥加重。同時(shí)，老年是各種惡性疾病的好發(fā)年齡，如宮頸癌或子宮內(nèi)膜癌等。這些疾病早期表現(xiàn)不典型，與老年性陰道炎癥狀可以有相似的地方。目前治療老年性陰道炎原則為補(bǔ)充雌激素，增強(qiáng)陰道抵抗力，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)。常規(guī)治療藥物及方法如下：1.增強(qiáng)陰道抵抗力針對(duì)病因給予雌激素制劑，可局部用藥，也可全身給藥。妊馬雌酮軟膏局部涂抹，每日2次，或雌三醇乳膏，第1周內(nèi)局部，每天使用1次，然后根據(jù)緩解情況逐漸減低至維持量(如每周用2次)。2.抑制細(xì)菌生長(zhǎng)用1％乳酸或0.5％醋酸液沖洗陰道，每日1次，增加陰道酸度，抑制細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。陰道沖洗后，局部應(yīng)用抗生素治療。上述這些治療方法單一，且多采用抗生素治療法。長(zhǎng)期使用抗生素會(huì)出現(xiàn)不良反應(yīng)。甚至，由于長(zhǎng)期使用抗生素，打破陰道正常的微生態(tài)環(huán)境的菌群平衡，從而導(dǎo)致雙重感染，菌群失調(diào)，引發(fā)抗生素耐藥等，最終導(dǎo)致頑固性的陰道炎，久治不愈。本發(fā)明將精油有與中藥提取物有機(jī)結(jié)合，制備成用于治療老年性陰道炎的功效性方劑植物精油組合物，從而克服抗生素治療老年性陰道炎的缺陷。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為解決現(xiàn)有技術(shù)中抗生素治療老年性陰道炎的問題，本發(fā)明提供一種的植物精油復(fù)合制劑，無人工合成制劑，治療老年性陰道炎的作用。本發(fā)明通過下列技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：一種用于老年性陰道炎的植物精油，由下列體積份的組分組成：荷荷巴精油，天竺葵精油，胡蘿卜籽精油，洋甘菊精油，玉蘭花精油，人參精油，白芷精油，茶樹精油，印蒿精油，充分混勻，得到混合液a相備用，配置中藥復(fù)方乙醇溶液為b相，將a相加入b相中，充分混勻后得到成品。所述的中藥復(fù)方乙醇溶液由郁金、吳茱萸、木通、菟絲子、鹿角霜和桂枝制備而成。本發(fā)明植物精油的制備方法按以下步驟進(jìn)行：1)采用蒸餾法，分別將荷荷巴，天竺葵花，胡蘿卜籽，洋甘菊，玉蘭花，人參，白芷，綠茶，印蒿進(jìn)行蒸餾，制備出相應(yīng)的粗制精油；2)將所述的荷荷巴，天竺葵，胡蘿卜籽，洋甘菊，玉蘭花，人參，白芷，綠茶，印蒿的粗制精油分別進(jìn)行二氧化碳超臨界萃取，得到純度更髙的二級(jí)精油；3)將所述的二級(jí)精油根椐需要分別進(jìn)行劃段分餾萃取，其中，所述荷荷巴二級(jí)精油收集荷荷巴精油；所述天竺葵二級(jí)精油收集天竺葵精油；所述胡蘿卜籽二級(jí)精油收集胡蘿卜籽精油；所述洋甘菊二級(jí)精油收集洋甘菊精油；所述玉蘭花二級(jí)精油收集玉蘭花精油；所述人參二級(jí)精油收集人參精油；所述白芷二級(jí)精油收集白芷精油；所述綠茶二級(jí)精油收集綠茶精油；所述印蒿二級(jí)精油收集印蒿精油；分別得到劃段分餾后的高純度單組份精油；4)按體積份數(shù)稱取荷荷巴精油6～8份，天竺葵精油4～6份，胡蘿卜籽精油8～10份，洋甘菊精油6～8份，玉蘭花精油5～7份，人參精油5～7份，白芷精油4～6份，茶樹精油8～10份，印蒿精油6～8份，和10-25份所述中藥復(fù)方乙醇溶液分別加入到密封混料罐中，常溫下邊攪拌邊加入，加完后再繼續(xù)攪拌3分鐘；所述的中藥復(fù)方乙醇溶液由如下步驟獲得：按重量份數(shù)計(jì)，將郁金3-5份、吳茱萸1-2份、木通1-10份、菟絲子2-3份、鹿角霜0.1-1份和桂枝2-3份，用65％乙醇浸泡、過濾得到的濾液，獲得中藥復(fù)方乙醇溶液；5)將密封混料罐中的精油混合液加入大混料罐后高速攪拌5分鐘，混合均勻后進(jìn)行灌裝，灌裝時(shí)邊攪拌邊灌裝，經(jīng)包裝后即可得到產(chǎn)品。本發(fā)明植物精油的應(yīng)用：用于治療老年性陰道炎，本發(fā)明治療老年性陰道炎是通過調(diào)節(jié)陰道微環(huán)境菌群、酸堿度平衡和調(diào)節(jié)內(nèi)分泌實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明可通過多重途徑治療老年性陰道炎，包括噴霧劑、洗劑。有益效果：本發(fā)明利用精油的高揮發(fā)性和高滲透性及多種精油與中藥提取協(xié)同增效作用來達(dá)到治老年性陰道炎的目的，克服用單一精油抗菌效果差，易復(fù)發(fā)的缺陷。本發(fā)明的作用在于(1)本發(fā)明對(duì)桿菌、化膿性金黃色葡萄球菌、念珠菌、真菌等致病菌屬的殺菌率大于99％；(2)有明顯的除異味、止癢功效；(3)長(zhǎng)期使用不改變陰道內(nèi)的酸堿平衡，無抗藥性，無毒副作用，對(duì)陰道粘膜僅有極輕微的刺激作用；(4)至今未發(fā)現(xiàn)有禁忌人群，對(duì)過敏體質(zhì)人群也未發(fā)現(xiàn)有過敏作用；(5)具有促進(jìn)雌激素分泌的作用；(6)同時(shí)具有治療和保健的功效，對(duì)女性生殖系統(tǒng)及身心有一定的調(diào)節(jié)作用；具體實(shí)施方式：實(shí)施例1本發(fā)明制備方法：分別將荷荷巴全草，天竺葵花，胡蘿卜籽，洋甘菊，玉蘭花，人參，白芷，綠茶，印蒿分別進(jìn)行蒸餾，制備出相應(yīng)的粗制精油；將所述的荷荷巴，天竺葵，胡蘿卜籽，洋甘菊，玉蘭花，人參，白芷，綠茶，印蒿的粗制精油分別進(jìn)行二氧化碳超臨界萃取，得到相應(yīng)的二級(jí)精油；其中，二氧化碳超臨界萃取的操作是：將粗制精油裝入萃取器中，加熱到40℃，萃取壓力為20mpa，萃取流速為25l·h-1，連續(xù)萃取8h，二氧化碳和萃取出的精油的混合物輸入分離器中，減至常壓并降至室溫，其中的二氧化碳與精油分離，得到二級(jí)精油；將所述的二級(jí)精油根據(jù)需要分別進(jìn)行劃段分餾，其中，荷荷巴二級(jí)精油在分餾時(shí)收集230-270℃的餾分；天竺葵二級(jí)精油在分餾時(shí)收集210-260℃的餾分；胡蘿卜籽二級(jí)精油在分餾時(shí)收集260-300℃的餾分；洋甘菊二級(jí)精油在分餾時(shí)收集140-180℃的餾分；玉蘭花二級(jí)精油在分餾時(shí)收集210-260℃的餾分；人參二級(jí)精油在分餾時(shí)收集240-300℃的餾分；白芷二級(jí)精油在分餾時(shí)收集150-200℃的餾分；綠茶二級(jí)精油在分餾時(shí)收集200℃的餾分；印蒿二級(jí)精油在分餾時(shí)收集170-200℃的餾分；分別得到劃段分餾后的高純度單組份精油；按體積份數(shù)稱取荷荷巴精油6份，天竺葵精油4份，胡蘿卜籽精油8份，洋甘菊精油6份，玉蘭花精油5份，人參精油5份，白芷精油4份，茶樹精油80份，印蒿精油6份，和10份所述中藥復(fù)方乙醇溶液分別加入到密封混料罐中，常溫下邊攪拌邊加入，加完后再繼續(xù)攪拌3分鐘；所述的中藥復(fù)方乙醇溶液由如下步驟獲得：按將郁金3kg、吳茱萸1kg、木通1kg份、菟絲子2kg、鹿角霜0.1kg和桂枝2kg份，用30l65％乙醇浸泡、過濾得到的濾液，獲得中藥復(fù)方乙醇溶液；5)將密封混料罐中的精油混合液加入大混料罐后高速攪拌5分鐘，混合均勻后進(jìn)行灌裝，灌裝時(shí)邊攪拌邊灌裝，經(jīng)包裝后即可得到產(chǎn)品。采用ph計(jì)測(cè)得制備得到的植物精油的ph值為4.1±0.2，接近人體正常的陰道酸堿度，起到平衡老年性陰道炎陰道局部酸堿值的作用。實(shí)施例2本實(shí)施例與實(shí)施例1不同的是按體積份數(shù)，稱取荷荷巴精油8份，天竺葵精油6份，胡蘿卜籽精油10份，洋甘菊精油8份，玉蘭花精油7份，人參精油7份，白芷精油6份，茶樹精油10份，印蒿精油8份，和10-25份所述中藥復(fù)方乙醇溶液分別加入到密封混料罐中，常溫下邊攪拌邊加入，加完后再繼續(xù)攪拌3分鐘；所述的中藥復(fù)方乙醇溶液由如下步驟獲得：按重量份數(shù)計(jì)，將郁金5kg、吳茱萸2kg、木通10kg、菟絲子3kg、鹿角霜1kg和桂枝3kg，用30l65％乙醇浸泡、過濾得到的濾液，獲得中藥復(fù)方乙醇溶液；其他操作同實(shí)施例1。實(shí)施例3本實(shí)施例與實(shí)施例1不同的是按體積份數(shù)稱取荷荷巴精油6～8份，天竺葵精油4～6份，胡蘿卜籽精油8～10份，洋甘菊精油6～8份，玉蘭花精油5～7份，人參精油5～7份，白芷精油4～6份，茶樹精油8～10份，印蒿精油6～8份，和10-25份所述中藥復(fù)方乙醇溶液分別加入到密封混料罐中，常溫下邊攪拌邊加入，加完后再繼續(xù)攪拌3分鐘；所述的中藥復(fù)方乙醇溶液由如下步驟獲得：按重量份數(shù)計(jì)，將郁金4kg、吳茱萸1.5kg、木通8kg、菟絲子2.5kg、鹿角霜0.8kg和桂枝2.5kg，用30l65％乙醇浸泡、過濾得到的濾液，獲得中藥復(fù)方乙醇溶液；其他操作同實(shí)施例1。實(shí)施例4本發(fā)明實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物應(yīng)用測(cè)試：自2013年11月始，至2014年12月底止，公司分別在上海，江蘇等地區(qū)，分別對(duì)已被珍斷確定患老年性陰道炎的患者女性用本發(fā)明對(duì)臨床效果進(jìn)行了測(cè)試，年齡為55-60歲，參加試用總?cè)藬?shù)為97名。使用方法為：噴劑的使用方法：對(duì)準(zhǔn)患者陰部?jī)?nèi)褲內(nèi)側(cè)的相應(yīng)部位的護(hù)墊上，噴5-8下，噴后立即穿上，3次/日，癥重者可4-6次/日，6天為一個(gè)療程。洗劑的方法為：用本品2ml放進(jìn)300ml溫水中，用潔凈紗布沾水清洗外陰及陰道，癥輕者2次/日，重者3-4次/日，一般一個(gè)療程即可痊愈。注意事項(xiàng)：本品不可直接噴到陰部。結(jié)果顯示：調(diào)查試用及統(tǒng)計(jì)結(jié)果見下表1：表1本發(fā)明的臨床效果測(cè)試結(jié)果調(diào)查結(jié)果顯示本發(fā)明的產(chǎn)品對(duì)老年性陰道炎具有較好的療效，平均治愈率是93.9％。是一種有潛力的治療老年性陰道炎的消毒產(chǎn)品。實(shí)施例6實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物復(fù)合物的抑菌試驗(yàn)。1、材料測(cè)試菌種：大腸桿菌，金色葡萄球菌，白色念珠菌。待測(cè)樣品：實(shí)施例1所得植物精油。2、方法按照qb/t2738-2012《日化產(chǎn)品抗菌抑菌效果的評(píng)價(jià)方法》其中抗菌型日化產(chǎn)品的殺菌效果檢驗(yàn)方法中的懸液定量法測(cè)定實(shí)施例1制備的用于老年性陰道炎的植物精油的殺菌率。3、結(jié)果按實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物復(fù)合物的老年性陰道炎殺菌劑實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2所示。表2實(shí)施例1所得用于老年性陰道炎的天然植物精油的殺菌率結(jié)果4、結(jié)論：從表2可知實(shí)施例1所制備的植物精油對(duì)大腸桿菌，金色葡萄球菌，白色念珠菌均都有顯著的殺菌作用，且使用于老年性陰道炎中不會(huì)改變陰道內(nèi)的酸堿平衡，無抗藥性，無毒副作用，對(duì)女性生殖系統(tǒng)和身心有一定的調(diào)節(jié)作用，適合使用在老年性陰道炎的殺菌中。實(shí)施例7皮膚刺激性試驗(yàn)包括急性皮膚刺激性試驗(yàn)和多次皮膚刺激性試驗(yàn)。依據(jù)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范(2007版)》，對(duì)實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物進(jìn)行急性皮膚刺激性試驗(yàn)和多次皮膚刺激性試驗(yàn)。(1)急性皮膚刺激性試驗(yàn)方法：取sd大鼠10只，試驗(yàn)前約24h，將大鼠背部脊柱兩側(cè)毛剪掉，不可損傷表皮，去毛范圍左、右各約3cm×3cm。取實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物約0.5ml直接涂在一側(cè)皮膚上，然后用二層紗布(2.5cm×2.5cm)和一層玻璃紙或類似物覆蓋，再用無刺激性膠布和繃帶加以固定。另一側(cè)皮膚作為對(duì)照。采用封閉試驗(yàn)，敷用時(shí)間為4h。試驗(yàn)結(jié)束后用溫水清除殘留實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物。分別在清除實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物后的1、24、48和72h觀察大鼠涂抹部位皮膚的紅斑和水腫反應(yīng)情況。結(jié)果顯示，清除實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物后1、24、48和72h大鼠皮膚均未出現(xiàn)紅斑和水腫現(xiàn)象。由此可見，實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物對(duì)皮膚無刺激性。(2)多次皮膚刺激性試驗(yàn)方法：取sd大鼠10只，試驗(yàn)前約24h，將大鼠背部脊柱兩側(cè)被毛剪掉，去毛范圍各為3cm×3cm，涂抹面積2.5cm×2.5cm。取實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物約0.5ml直接涂在一側(cè)皮膚上，另一側(cè)涂溶劑作為對(duì)照，每天涂抹1次，連續(xù)涂抹14d。從第二天開始，每次涂抹前應(yīng)剪毛，用水清除殘留實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物。一小時(shí)后觀察大鼠涂抹部位皮膚的紅斑和水腫反應(yīng)情況。結(jié)果顯示，將實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物連續(xù)14天涂布于大鼠一側(cè)皮膚后，均未出現(xiàn)紅斑和水腫現(xiàn)象。由此可見，實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物對(duì)皮膚無刺激性。實(shí)施例8實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物的抑菌環(huán)試驗(yàn)1、材料測(cè)試菌種：大腸桿菌，金色葡萄球菌，白色念珠菌菌懸液。待測(cè)樣品：實(shí)施例1所得植物精油復(fù)合物，中藥復(fù)方乙醇溶液(按實(shí)施例1制備)荷荷巴精油，天竺葵精油，胡蘿卜籽精油，洋甘菊精油，玉蘭花精油，人參精油，白芷精油，茶樹精油，印蒿精油。培養(yǎng)基：營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基2、方法取無菌并干燥的濾紙片。每片滴加實(shí)際待測(cè)樣品20μl，然后將濾紙片平放于清潔的無菌平皿內(nèi)，置室溫下自然干燥后備用。陰性對(duì)照樣片的制備：取無菌干燥濾紙片，每片滴加無菌蒸餾水20μl，干燥后備用。試驗(yàn)菌的接種：用無菌棉拭子蘸取濃度為5×105cfu/ml～5×106cfu/ml大腸桿菌，金色葡萄球菌，白色念珠菌菌懸液，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板表面均勻涂抹。蓋好平皿，置室溫干燥5min。待測(cè)樣品貼放：每次試驗(yàn)貼放1個(gè)染菌平板，每個(gè)平板貼放4片試驗(yàn)樣片，1片陰性對(duì)照樣片，共5片。用無菌鑷子取樣片貼放于平板表面。各樣片中心之間相距25mm以上，與平板的周緣相距15mm以上。貼放好后，用無菌鑷子輕壓樣片，使其緊貼于平板表面。蓋好平皿，置37℃溫箱，在24、48小時(shí)分別培養(yǎng)觀察結(jié)果。用游標(biāo)卡尺測(cè)量抑菌環(huán)的直徑(包括貼片)并記錄。試驗(yàn)重復(fù)3次。抑菌環(huán)寬度＝抑菌環(huán)的直徑-貼片直徑。實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物的可用于治療老年性陰道炎，其抑菌效果符合表3的規(guī)定。表3實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物的抗(抑)菌效果可見，本發(fā)明治療老年性陰道炎效果顯著，與單味精油或中藥復(fù)方相比，其抑制真菌作用顯著，且有效作用時(shí)間較長(zhǎng)。實(shí)施例9評(píng)價(jià)實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物對(duì)白色念珠菌陰道炎模型動(dòng)物炎癥的影響。建立白色念珠菌陰道炎動(dòng)物模型：雌性新西蘭大白兔，用5號(hào)頭皮針硅膠管凃無菌石蠟油，緩慢插入大白兔陰道約5～8cm，注入白色念珠菌懸液0.25ml，原位停留2～3min，防止菌懸液溢出，每天1次，連續(xù)3d。分組與給藥：將白色念珠菌陰道炎模型大白兔隨機(jī)分成12組：模型組，陽(yáng)性組，實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物組，中藥復(fù)方乙醇溶液(按實(shí)施例1制備)，荷荷巴精油，天竺葵精油，胡蘿卜籽精油，洋甘菊精油，玉蘭花精油，人參精油，白芷精油，茶樹精油，印蒿精油組。每組6只。每天陰道給藥1次，連續(xù)7d。分別在給藥第7、14、60天判斷標(biāo)準(zhǔn)陰道清潔度分級(jí)，顯微鏡下觀察細(xì)菌數(shù)，計(jì)算有效率。有效率(％)＝好轉(zhuǎn)的動(dòng)物數(shù)/各組總動(dòng)物數(shù)×100％。ⅰ級(jí)、ⅱ級(jí)清潔度表示正常，ⅲ級(jí)表示有炎癥，ⅳ級(jí)表示有嚴(yán)重炎癥。陰道炎治愈、好轉(zhuǎn)標(biāo)準(zhǔn)：陰道外觀正常，清潔度ⅰ級(jí)，無雜菌生長(zhǎng)，病理檢查無炎性細(xì)胞浸潤(rùn)為治愈；陰道外觀正常，清潔度ⅱ級(jí)或ⅰ級(jí)，無或每平皿1～2個(gè)致病菌落，病理檢查大致正常為好轉(zhuǎn)。結(jié)果顯示：如表4。實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物能顯著性抑制陰道炎模型動(dòng)物的炎癥，有效率達(dá)100％，與單味精油相比，其抑菌作用顯著。且與陽(yáng)性組相比，有效作用時(shí)間較長(zhǎng)，在60日內(nèi)無復(fù)發(fā)。表4實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物對(duì)白色念珠菌陰道炎模型動(dòng)物炎癥的影響實(shí)施例10評(píng)價(jià)實(shí)施例2制備的植物精油對(duì)雌激素分泌的影響。雌性icr小鼠，隨機(jī)分成3組：空白組，陽(yáng)性組，實(shí)施例2制備的植物精油組。每組10只。每天陰道給藥1次，劑量為空白組按照20μl/只的生理鹽水；陽(yáng)性對(duì)照組5μl/只的雌激素；實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物組10μl/只，連續(xù)10d。分別在最后一次給藥后，眼球取血，采用放射免疫法檢測(cè)小鼠血漿中雌激素的含量。結(jié)果顯示：如表5。實(shí)施例2制備的植物精油能顯著性促進(jìn)小鼠血漿中，與空白組相比，有顯著性差異(p＜0.01)，效果優(yōu)于陽(yáng)性雌激素組。表5實(shí)施例1制備的植物精油復(fù)合物對(duì)血漿雌激素含量的影響雌二醇含量(pmol/l)空白組57.5±18.1雌激素504.1±73.2*實(shí)施例1植物精油662.0±94.1**當(dāng)前第1頁(yè)12