本發(fā)明涉及肺高壓模型建立領(lǐng)域，具體涉及一種大鼠動(dòng)靜脈分流肺高壓模型及建立方法。

背景技術(shù)：

肺動(dòng)脈高壓(PH)是一類以肺小動(dòng)脈的血管痙攣、內(nèi)膜增生及重構(gòu)、微血栓病灶形成、肺血管阻力進(jìn)行性增高為主要特征的一種疾病,能夠?qū)е掠倚乃ソ摺⒐δ苁芟?、最終死亡的疾病。PH動(dòng)物模型的制作方法包括慢性低氧法、野百合堿注射法、分流手術(shù)等方法?，F(xiàn)有的動(dòng)靜脈分流模型存在血管阻斷時(shí)間長(zhǎng)、損傷大、存活率低等缺點(diǎn)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

為解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供大鼠動(dòng)靜脈分流肺高壓模型及建立方法，從而改進(jìn)了原有動(dòng)靜脈分流模型，建立更實(shí)用的動(dòng)靜脈分流造模方法，本發(fā)明另外一個(gè)目的，是提供一種可吸收止血凝膠的制備方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目標(biāo)，本發(fā)明的技術(shù)方案為：

一種大鼠動(dòng)靜脈分流肺高壓模型建立方法，包括如下步驟：

(1)大鼠麻醉后，取腹正中切口，暴露腹主動(dòng)脈和下腔靜脈，將海綿墊于左腎動(dòng)脈起始部，并用血管鉗將腹主動(dòng)脈夾閉；

(2)以腹主動(dòng)脈的左腎動(dòng)脈起始部至其末端段的下2/3處之左側(cè)壁為穿刺點(diǎn)，用針頭以45°角穿透腹主動(dòng)脈壁進(jìn)入相鄰的下腔靜脈內(nèi)，撤出針頭，用粘合劑封閉腹主動(dòng)脈破口，并壓迫止血，之后移走血管鉗，整個(gè)腹主動(dòng)脈阻斷時(shí)間控制在5～10分鐘以內(nèi)；縫合腹壁。

優(yōu)選的，大鼠為雄性大鼠。

優(yōu)選的，麻醉是指腹腔內(nèi)注射2.5％水合氯醛麻醉。

優(yōu)選的，步驟(2)中的穿刺針頭為12號(hào)針頭。

優(yōu)選的，步驟(1)海綿為可吸收止血海綿。

所述的可吸收止血海綿還可以為一次性使用的可吸收止血海綿。

優(yōu)選的，所述的可吸收止血海綿的制備方法，包括如下步驟：

1)將殼聚糖乙酸酯溶解于0.5％(v/v)的醋酸溶液得到0.5％的殼聚糖溶液；

2)將豬膠原蛋白溶解在0.5％(v/v)的醋酸溶液得到5％的豬膠原蛋白溶液；

3)將以上2個(gè)步驟的溶液混合，室溫高速攪拌30min后置于止血海綿模具中，冷凍干燥后形成止血海綿，經(jīng)消毒射線照射20min后得到成品。

優(yōu)選的，所述的殼聚糖的脫乙?；潭葹?6％。

步驟(2)中粘合劑優(yōu)選為：纖維蛋白粘合劑。

步驟(2)中粘合劑為：豬源纖維蛋白粘合劑。

本發(fā)明的有益效果為：

該造模方法能夠有效的引起大鼠肺動(dòng)脈高壓，該模型穩(wěn)定。

其存活率及有效率明顯優(yōu)于現(xiàn)有的動(dòng)靜脈造模方案。

原有的手術(shù)造模模型需手術(shù)縫合動(dòng)脈破口，其腹主動(dòng)脈阻斷時(shí)間需20分鐘以上，難以避免腹主動(dòng)脈以下組織的缺血再灌注損傷，且手術(shù)損傷較大，開腹時(shí)間較長(zhǎng)，常伴有腸道血供不足，其存活率約為60％～80％，明顯低于我組的存活率，且手術(shù)縫合常會(huì)造成腹主動(dòng)脈的狹窄，其造模成功率約為85％，低于我組100％的成功率。故本實(shí)驗(yàn)的造模方法在存活率及造模成功率方面均優(yōu)于原有的造模方法，有一定的創(chuàng)新性和實(shí)用性。

本發(fā)明使用的可吸收止血海綿，制備方法簡(jiǎn)單，吸收止血效果快，成本低，效果好。

本發(fā)明使用的豬源纖維蛋白粘合劑的效果顯著，優(yōu)于其他纖維蛋白粘合劑。

附圖說明

圖1：B超示腹主動(dòng)脈向下腔靜脈的分流存在；

圖2：B超所示的動(dòng)靜脈造口；

圖3：分流量約300mm/s

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)發(fā)明涉及的技術(shù)方案進(jìn)行進(jìn)一步說明，以便有助于本發(fā)明的理解，但不作為對(duì)技術(shù)方案的限制，該技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)工程師可根據(jù)上述發(fā)明的內(nèi)容作出一些非本質(zhì)性的改進(jìn)和調(diào)整。

實(shí)施例1：大鼠動(dòng)靜脈分流肺高壓模型的建立：

雄性SD大鼠只，體重180～280g，隨機(jī)分為3周對(duì)照組(n＝10)、假手術(shù)組(n＝10)和手術(shù)組(n＝20)組。手術(shù)組大鼠腹腔內(nèi)注射2.5％水合氯醛(40mg/kg體重)麻醉后，取腹正中切口，暴露腹主動(dòng)脈和下腔靜脈，將海綿墊于左腎動(dòng)脈起始部，并用血管鉗將腹主動(dòng)脈夾閉。以腹主動(dòng)脈的左腎動(dòng)脈起始部至其末端段的下2/3處之左側(cè)壁為穿刺點(diǎn)，用12號(hào)一次性針頭以45°角穿透腹主動(dòng)脈壁進(jìn)入相鄰的下腔靜脈內(nèi)，撤出針頭，用豬源纖維蛋白粘合劑膠封閉腹主動(dòng)脈破口，并壓迫止血，之后移走血管鉗，整個(gè)腹主動(dòng)脈阻斷時(shí)間控制在5～10分鐘以內(nèi)。并縫合腹壁，腹腔注射無水頭孢唑林鈉(100mg/kg體重)預(yù)防感染。假手術(shù)組大鼠僅單純開腹，暴露腹主動(dòng)脈和下腔靜脈，不作分流手術(shù)。術(shù)后3組均飼養(yǎng)6周。6周后手術(shù)組存活18只(存活率90％)，假手術(shù)組存活9只，對(duì)照組存活10只。三組6周后均行動(dòng)物B超檢查，導(dǎo)管測(cè)壓，病理切片。手術(shù)組大鼠B超檢查示：腹主動(dòng)脈向下腔靜脈分流存在，肺動(dòng)脈瓣輕到中度返流，右心室肥厚；漂浮導(dǎo)管測(cè)壓示大鼠肺動(dòng)脈壓力大于25mmHg；病理示肺血管增生，微血栓存在，右心室肌細(xì)胞增粗。對(duì)照組及假手術(shù)組未見肺動(dòng)脈高壓及相關(guān)病理改變。

豬源纖維蛋白粘合劑的從市場(chǎng)購(gòu)買，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字S20100007，生產(chǎn)廠家：廣州倍繡生物技術(shù)有限公司。

所述的可吸收止血海綿是采用如下的制備方法制得，包括如下步驟：

1)將殼聚糖乙酸酯溶解于0.5％(v/v)的醋酸溶液得到0.5％的殼聚糖溶液；

2)將豬膠原蛋白溶解在0.5％(v/v)的醋酸溶液得到5％的豬膠原蛋白溶液；

3)將以上2個(gè)步驟的溶液混合，室溫高速攪拌30min后置于止血海綿模具中，冷凍干燥后形成止血海綿，經(jīng)消毒射線照射20min后得到成品。

所述的殼聚糖的脫乙?；潭葹?6％。

實(shí)施例2：大鼠動(dòng)靜脈分流肺高壓模型的建立：

(1)大鼠麻醉后，取腹正中切口，暴露腹主動(dòng)脈和下腔靜脈，將海綿墊于左腎動(dòng)脈起始部，并用血管鉗將腹主動(dòng)脈夾閉；

(2)以腹主動(dòng)脈的左腎動(dòng)脈起始部至其末端段的下2/3處之左側(cè)壁為穿刺點(diǎn)，用針頭以45°角穿透腹主動(dòng)脈壁進(jìn)入相鄰的下腔靜脈內(nèi)，撤出針頭，用粘合劑封閉腹主動(dòng)脈破口，并壓迫止血，之后移走血管鉗，整個(gè)腹主動(dòng)脈阻斷時(shí)間控制在5～10分鐘以內(nèi)；縫合腹壁。

術(shù)后3組均飼養(yǎng)6周。6周后手術(shù)組存活18只(存活率90％)，假手術(shù)組存活9只，對(duì)照組存活10只。三組6周后均行動(dòng)物B超檢查，導(dǎo)管測(cè)壓，病理切片。手術(shù)組大鼠B超檢查示：腹主動(dòng)脈向下腔靜脈分流存在，肺動(dòng)脈瓣輕到中度返流，右心室肥厚；漂浮導(dǎo)管測(cè)壓示大鼠肺動(dòng)脈壓力大于25mmHg；病理示肺血管增生，微血栓存在，右心室肌細(xì)胞增粗。對(duì)照組及假手術(shù)組未見肺動(dòng)脈高壓及相關(guān)病理改變。

豬源纖維蛋白粘合劑的從市場(chǎng)購(gòu)買，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字S20100007，生產(chǎn)廠家：廣州倍繡生物技術(shù)有限公司。

所述的可吸收止血海綿是采用如下的制備方法制得，包括如下步驟：

1)將殼聚糖乙酸酯溶解于0.5％(v/v)的醋酸溶液得到0.5％的殼聚糖溶液；

2)將豬膠原蛋白溶解在0.5％(v/v)的醋酸溶液得到5％的豬膠原蛋白溶液；

3)將以上2個(gè)步驟的溶液混合，室溫高速攪拌30min后置于止血海綿模具中，冷凍干燥后形成止血海綿，經(jīng)消毒射線照射20min后得到成品。

實(shí)施例3：大鼠動(dòng)靜脈分流肺高壓模型的建立：

雄性SD大鼠只，體重180～280g，隨機(jī)分為3周對(duì)照組(n＝10)、假手術(shù)組(n＝10)和手術(shù)組(n＝20)組。手術(shù)組大鼠腹腔內(nèi)注射2.5％水合氯醛(40mg/kg體重)麻醉后，取腹正中切口，暴露腹主動(dòng)脈和下腔靜脈，將海綿墊于左腎動(dòng)脈起始部，并用血管鉗將腹主動(dòng)脈夾閉。以腹主動(dòng)脈的左腎動(dòng)脈起始部至其末端段的下2/3處之左側(cè)壁為穿刺點(diǎn)，用12號(hào)一次性針頭以45°角穿透腹主動(dòng)脈壁進(jìn)入相鄰的下腔靜脈內(nèi)，撤出針頭，用豬源纖維蛋白粘合劑膠封閉腹主動(dòng)脈破口，并壓迫止血，之后移走血管鉗，整個(gè)腹主動(dòng)脈阻斷時(shí)間控制在5～10分鐘以內(nèi)。并縫合腹壁，腹腔注射無水頭孢唑林鈉(100mg/kg體重)預(yù)防感染。假手術(shù)組大鼠僅單純開腹，暴露腹主動(dòng)脈和下腔靜脈，不作分流手術(shù)。術(shù)后3組均飼養(yǎng)6周。6周后手術(shù)組存活18只(存活率90％)，假手術(shù)組存活9只，對(duì)照組存活10只。三組6周后均行動(dòng)物B超檢查，導(dǎo)管測(cè)壓，病理切片。手術(shù)組大鼠B超檢查示：腹主動(dòng)脈向下腔靜脈分流存在，肺動(dòng)脈瓣輕到中度返流，右心室肥厚；漂浮導(dǎo)管測(cè)壓示大鼠肺動(dòng)脈壓力大于25mmHg；病理示肺血管增生，微血栓存在，右心室肌細(xì)胞增粗。對(duì)照組及假手術(shù)組未見肺動(dòng)脈高壓及相關(guān)病理改變。

豬源纖維蛋白粘合劑的從市場(chǎng)購(gòu)買。

所述的可吸收止血海綿是采用如下的制備方法制得，包括如下步驟：

1)將殼聚糖乙酸酯溶解于0.5％(v/v)的醋酸溶液得到0.5％的殼聚糖溶液；

2)將豬膠原蛋白溶解在0.5％(v/v)的醋酸溶液得到5％的豬膠原蛋白溶液；

3)將以上2個(gè)步驟的溶液混合，室溫高速攪拌30min后置于止血海綿模具中，冷凍干燥后形成止血海綿，經(jīng)消毒射線照射20min后得到成品。

以上實(shí)施例說明了本發(fā)明的詳細(xì)步驟和優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，上述實(shí)施例不以任何形式限制本發(fā)明，凡采用等同替換或等效變換的方式所獲得的技術(shù)方案，均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。