本發(fā)明涉及生物科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體是涉及一種獲取完整羊腦的開顱方法。

背景技術(shù)：

羊是非常重要的家養(yǎng)動物，是我們?nèi)?、毛、奶等物質(zhì)資源的主要來源之一。羊的生長和發(fā)育與激素密切相關(guān)，然而大部分激素都來自于腦內(nèi)，如生長激素。在科學(xué)研究過程中，為了探究腦內(nèi)激素的生成和代謝，需要獲得腦內(nèi)完整的組織。如繁殖與下丘腦分泌的促性腺激素釋放激素密切相關(guān)，為了研究下丘腦調(diào)控促性腺激素釋放激素分泌機(jī)制，我們必須獲取完整的下丘腦組織。腦內(nèi)還有一些特殊的樣品如垂體、松果體也需要在獲得完整羊腦的前提下才能獲得。所以如何巧妙的開顱，獲取完整組織對科學(xué)研究具有非常大的價值。另一方面，在制作腦內(nèi)標(biāo)本過程中，也常常需要完整的組織，標(biāo)本可作為商品具有經(jīng)濟(jì)價值，所以獲取完整羊腦開顱的方法也具有一定的經(jīng)濟(jì)價值。

目前對于人開顱進(jìn)行手術(shù)的方法技術(shù)很多，但是羊和人的結(jié)構(gòu)完全不一樣，而羊乃至很多動物都沒有系統(tǒng)的方法用于開顱，所以我們研制的開顱方法具有創(chuàng)新性和先進(jìn)性。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問題是，針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種獲取完整羊腦的開顱方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

一種獲取完整羊腦的開顱方法，包括以下步驟：

S1：屠宰山羊后，于1-60min內(nèi)取下完整的羊頭，并與0.01-12h內(nèi)進(jìn)行開顱操作；

S2：使用手術(shù)刀切割皮膚劃線：在羊頭顱頂?shù)难蚪乔?cm處(眼睛后上方)切割一條橫向線，該位置下面為大腦前沿；縱向沿顱頂中線向后(往脖子方向)切割一條縱向線；左右耳下方處各一條線，分別為左線和右線，所述左線和右線在頸骨之上斜向上經(jīng)過耳下方和橫向線相交；

S3：使用手術(shù)刀和剪刀分別沿橫向線、縱向線、左線和右線各切除1cm寬皮膚，沿著左線和右線切割耳下方時，需要將一些肉切除；

S4：固定羊頭，可將羊頭放于凳子上，使用手工鋼鋸對準(zhǔn)各條線進(jìn)行切割，切割深度為1±0.02cm，優(yōu)選1cm，在鋸顱頂時特別要注意，不能切割過深；

S5：將鑿子插入顱頂橫向切割縫隙，通過杠桿原理，將顱蓋骨打開，或握住羊角往兩邊用力，掰開羊頭；

S6：完整暴露羊腦后，將羊腦微微提起，使用手術(shù)刀，從前往后逐步切割，獲取完整羊腦；

S7：將羊腦反過來，可以清晰的看到“花生瓣”狀的下丘腦，將下丘腦用小剪刀小心剪下；

S8：將羊頭正面放，使用手術(shù)刀沿大腦中線向下切割，打開大腦，在大腦和小腦連接位置可以看到一個圓圓的小球，該樣品為松果體；

S9:使用手術(shù)刀切割垂體窩軟骨，盡力往兩邊切割，最后用剪刀取出完整的垂體，取出的垂體還帶著軟骨和膜，將膜和軟骨小心去除，獲得完整腦垂體；

S10：完成采樣，獲取了完整的腦部組織，包括大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體。

進(jìn)一步地，在上述方案中，屠宰山羊后，于1-20min內(nèi)取下完整的羊頭。

進(jìn)一步地，在上述方案中，取下完整的羊頭后，在0.01-1h內(nèi)進(jìn)行開顱操作。

進(jìn)一步地，在上述方案中，將取下的大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體用DEPC處理水洗滌后，用裝有RNA保存液的EP管盛裝保存。

作為另一種選擇，將取下的大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體用下述配方的溶液密封浸泡保存：鹽酸胍22.15％、焦磷酸鐵18.2％、富馬酸亞鐵2.88％、二硫蘇糖醇0.328％、鹽酸賴氨酸0.012％、N-?；苌?.65％、冷凍保護(hù)劑2～5％、水加至100％，所述冷凍保護(hù)劑為二甲基亞砜，保存溫度設(shè)置在-40～-60℃。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明的發(fā)明人通過對山羊頭部結(jié)構(gòu)的細(xì)致觀察和解剖，確定羊頭的骨骼結(jié)構(gòu)、羊腦所處的位置、羊頭各骨骼連接點，制定了一套獲取羊完整腦組織的開顱方法，該方法具有一定的系統(tǒng)性，操作簡單，保證腦組織不被破壞，從而獲得腦內(nèi)完整的組織，包括大腦、小腦、下丘腦、垂體、松果體，不僅有助于科學(xué)研究，而且在制作腦內(nèi)標(biāo)本方面具有一定的經(jīng)濟(jì)價值。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的切割劃線示意圖；

圖2是本發(fā)明沿各線切割皮膚示意圖；

其中，1-橫向線、2-縱向線、3-左線、4-右線。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式來對本方面進(jìn)行更進(jìn)一步詳細(xì)的說明：

實施例1：

一種獲取完整羊腦的開顱方法，包括以下步驟：

S1：屠宰山羊后，于1min內(nèi)取下完整的羊頭，并與0.01h內(nèi)進(jìn)行開顱操作；

S2：使用手術(shù)刀切割皮膚劃線：在羊頭顱頂?shù)难蚪乔?cm處(眼睛后上方)切割一條橫向線1，該位置下面為大腦前沿；縱向沿顱頂中線向后(往脖子方向)切割一條縱向線2；左右耳下方處各一條線，分別為左線3和右線4，所述左線3和右線4在頸骨之上斜向上經(jīng)過耳下方和橫向線1相交；

S3：使用手術(shù)刀和剪刀分別沿橫向線1、縱向線2、左線3和右線4各切除1cm寬皮膚，沿著左線3和右線4切割耳下方時，需要將一些肉切除；

S4：固定羊頭，可將羊頭放于凳子上，使用手工鋼鋸對準(zhǔn)各條線進(jìn)行切割，切割深度為0.98cm，在鋸顱頂時特別要注意，不能切割過深；

S5：將鑿子插入顱頂橫向切割縫隙，通過杠桿原理，將顱蓋骨打開，或握住羊角往兩邊用力，掰開羊頭；

S6：完整暴露羊腦后，將羊腦微微提起，使用手術(shù)刀，從前往后逐步切割，獲取完整羊腦；

S7：將羊腦反過來，可以清晰的看到“花生瓣”狀的下丘腦，將下丘腦用小剪刀小心剪下；

S8：將羊頭正面放，使用手術(shù)刀沿大腦中線向下切割，打開大腦，在大腦和小腦連接位置可以看到一個圓圓的小球，該樣品為松果體；

S9:使用手術(shù)刀切割垂體窩軟骨，盡力往兩邊切割，最后用剪刀取出完整的垂體，取出的垂體還帶著軟骨和膜，將膜和軟骨小心去除，獲得完整腦垂體；

S10：完成采樣，獲取了完整的腦部組織，包括大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體。

S11：將取下的大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體用DEPC處理水洗滌后，用裝有RNA保存液的EP管盛裝保存。

實施例2：

一種獲取完整羊腦的開顱方法，包括以下步驟：

S1：屠宰山羊后，于20min內(nèi)取下完整的羊頭，并與1h內(nèi)進(jìn)行開顱操作；

S2：使用手術(shù)刀切割皮膚劃線：在羊頭顱頂?shù)难蚪乔?cm處(眼睛后上方)切割一條橫向線1，該位置下面為大腦前沿；縱向沿顱頂中線向后(往脖子方向)切割一條縱向線2；左右耳下方處各一條線，分別為左線3和右線4，所述左線3和右線4在頸骨之上斜向上經(jīng)過耳下方和橫向線1相交；

S3：使用手術(shù)刀和剪刀分別沿橫向線1、縱向線2、左線3和右線4各切除1cm寬皮膚，沿著左線3和右線4切割耳下方時，需要將一些肉切除；

S4：固定羊頭，可將羊頭放于凳子上，使用手工鋼鋸對準(zhǔn)各條線進(jìn)行切割，切割深度為1cm，在鋸顱頂時特別要注意，不能切割過深；

S5：將鑿子插入顱頂橫向切割縫隙，通過杠桿原理，將顱蓋骨打開，或握住羊角往兩邊用力，掰開羊頭；

S6：完整暴露羊腦后，將羊腦微微提起，使用手術(shù)刀，從前往后逐步切割，獲取完整羊腦；

S7：將羊腦反過來，可以清晰的看到“花生瓣”狀的下丘腦，將下丘腦用小剪刀小心剪下；

S8：將羊頭正面放，使用手術(shù)刀沿大腦中線向下切割，打開大腦，在大腦和小腦連接位置可以看到一個圓圓的小球，該樣品為松果體；

S9:使用手術(shù)刀切割垂體窩軟骨，盡力往兩邊切割，最后用剪刀取出完整的垂體，取出的垂體還帶著軟骨和膜，將膜和軟骨小心去除，獲得完整腦垂體；

S10：完成采樣，獲取了完整的腦部組織，包括大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體。

S11：將取下的大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體用下述配方的溶液密封浸泡保存：鹽酸胍22.15％、焦磷酸鐵18.2％、富馬酸亞鐵2.88％、二硫蘇糖醇0.328％、鹽酸賴氨酸0.012％、N-?；苌?.65％、二甲基亞砜3％、水加至100％，保存溫度設(shè)置在-60℃。

實施例3：

一種獲取完整羊腦的開顱方法，包括以下步驟：

S1：屠宰山羊后，于60min內(nèi)取下完整的羊頭，并與12h內(nèi)進(jìn)行開顱操作；

S2：使用手術(shù)刀切割皮膚劃線：在羊頭顱頂?shù)难蚪乔?cm處(眼睛后上方)切割一條橫向線1，該位置下面為大腦前沿；縱向沿顱頂中線向后(往脖子方向)切割一條縱向線2；左右耳下方處各一條線，分別為左線3和右線4，所述左線3和右線4在頸骨之上斜向上經(jīng)過耳下方和橫向線1相交；

S3：使用手術(shù)刀和剪刀分別沿橫向線1、縱向線2、左線3和右線4各切除1cm寬皮膚，沿著左線3和右線4切割耳下方時，需要將一些肉切除；

S4：固定羊頭，可將羊頭放于凳子上，使用手工鋼鋸對準(zhǔn)各條線進(jìn)行切割，切割深度為1.02cm，在鋸顱頂時特別要注意，不能切割過深；

S5：將鑿子插入顱頂橫向切割縫隙，通過杠桿原理，將顱蓋骨打開，或握住羊角往兩邊用力，掰開羊頭；

S6：完整暴露羊腦后，將羊腦微微提起，使用手術(shù)刀，從前往后逐步切割，獲取完整羊腦；

S7：將羊腦反過來，可以清晰的看到“花生瓣”狀的下丘腦，將下丘腦用小剪刀小心剪下；

S8：將羊頭正面放，使用手術(shù)刀沿大腦中線向下切割，打開大腦，在大腦和小腦連接位置可以看到一個圓圓的小球，該樣品為松果體；

S9:使用手術(shù)刀切割垂體窩軟骨，盡力往兩邊切割，最后用剪刀取出完整的垂體，取出的垂體還帶著軟骨和膜，將膜和軟骨小心去除，獲得完整腦垂體；

S10：完成采樣，獲取了完整的腦部組織，包括大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體。

S11：將取下的大腦、小腦、下丘腦、松果體、腦垂體用下述配方的溶液密封浸泡保存：鹽酸胍22.15％、焦磷酸鐵18.2％、富馬酸亞鐵2.88％、二硫蘇糖醇0.328％、鹽酸賴氨酸0.012％、N-?；苌?.65％、二甲基亞砜5％、水加至100％，保存溫度設(shè)置在-40℃。

在上述說明中，使用較佳的實施方式說明了本發(fā)明，但本發(fā)明并不限定于上述實施方式，當(dāng)然能夠在不脫離本發(fā)明的主旨的范圍內(nèi)進(jìn)行各種改變。