本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，特別涉及山奈酚在制備用于預(yù)防和/或治療由睪酮水平過高引起的疾病的藥物中的用途。

背景技術(shù)：

睪酮(testosterone，T)作為最主要的雄激素在人體尤其是男性機(jī)體中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。睪酮水平過高，會(huì)引起痤瘡、男性脫發(fā)、前列腺增生、前列腺癌等病變。另外，睪酮在前列腺的發(fā)生中起著重要作用，高于正常水平的睪酮是引發(fā)和促進(jìn)前列腺增生的重要因素。

山奈酚(Kaempferol，Kae)又名山柰酚-3、山柰素、山柰黃酮醇、四羥基黃酮、百蕊草素Ⅲ，分子結(jié)構(gòu)式為C₁₅H₁₀O₆，是一個(gè)自然存在的黃酮類化合物。山奈酚廣泛存在于各種普通植物種屬中，如翠雀屬、山茶屬、小檗屬、柑橘屬、蕓苔屬、蔥屬、蘋果屬等等，也存在于很多藥用植物中，如蘆薈、藏紅花、大戟、銀杏、貫葉連翹、余甘子、黑加侖、迷迭香等，還存在于很多可食用的植物中，如洋蔥、香蔥、芥末、花椰菜、芹菜等。研究發(fā)現(xiàn)長期通過膳食攝取山奈酚這種很常見的黃酮類化合物，可以降低晚期大腸腺瘤的復(fù)發(fā)率，可以明顯降低患胰腺癌的風(fēng)險(xiǎn)。此外，山奈酚對(duì)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、肺癌、胰腺癌都有很好的抑制作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明人通過廣泛研究發(fā)現(xiàn)，山奈酚能夠降低血清睪酮含量，并基于此完成了本發(fā)明。

本發(fā)明提供了山奈酚在制備用于預(yù)防和/或治療由睪酮水平過高引起的疾病的藥物中的用途。

在本發(fā)明的一個(gè)具體實(shí)施方式中，所述山奈酚通過降低血清睪酮含量來預(yù)防和/或治療所述由睪酮水平過高引起的疾病。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述山奈酚進(jìn)一步通過將LNCaP細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞和/或WPMY-1細(xì)胞阻滯于細(xì)胞分裂的G₂/M期來預(yù)防和/或治療所述由睪酮水平過高引起的疾病。

本文所說的“LNCaP細(xì)胞”是前列腺癌細(xì)胞系的一種，是從前列腺癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶標(biāo)本中建立起來的，保留了前列腺癌腫瘤細(xì)胞學(xué)及其早期分化功能的特征。

本文中，BPH-1細(xì)胞是人前列腺增生細(xì)胞(上皮細(xì)胞)，WPMY-1細(xì)胞是人前列腺間質(zhì)細(xì)胞，上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞是前列腺的主要組成成分。

本文所說的“細(xì)胞分裂的G₂/M期”是指細(xì)胞分裂間期的G₂期和分裂期(M期)。細(xì)胞周期分為間期與分裂期兩個(gè)階段。間期又分為三期，即DNA合成前期(G₁期)、DNA合成期(S期)與DNA合成后期(G₂期)，其中G₂期是有絲分裂的準(zhǔn)備期，在這一時(shí)期，DNA合成終止，大量合成RNA及蛋白質(zhì)，包括微管蛋白和促成熟因子等。分裂期又包括前、中、后，末期，是一個(gè)連續(xù)變化過程，由一個(gè)母細(xì)胞分裂成為兩個(gè)子細(xì)胞。細(xì)胞通過M期一分為二，有的可繼續(xù)分裂進(jìn)行周期循環(huán)，有的轉(zhuǎn)入G₀期。G₀期是脫離細(xì)胞周期暫時(shí)停止分裂的一個(gè)階段，但在一定適宜刺激下，又可進(jìn)入分裂周期。

在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述山奈酚進(jìn)一步通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bid和/或Caspase-3蛋白的表達(dá)來預(yù)防和/或治療所述由睪酮水平過高引起的疾病。

在本發(fā)明的另一個(gè)具體實(shí)施方式中，所述由睪酮水平過高引起的疾病選自痤瘡、男性脫發(fā)、良性前列腺增生和前列腺癌。

在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述藥物給予有需要的對(duì)象的每日劑量以山奈酚計(jì)為10-150mg/kg體重，優(yōu)選為30-120mg/kg體重，更優(yōu)選為50-100mg/kg體重。

在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述藥物給予有需要的對(duì)象的有效濃度以山奈酚計(jì)為0.5-25μM，優(yōu)選1-20μM。

在本發(fā)明的另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述藥物給予有需要的對(duì)象的有效濃度以山奈酚計(jì)為5-20μM，優(yōu)選10-20μM，更優(yōu)選15-20μM。

在本發(fā)明的又一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述藥物給予有需要的對(duì)象的有效濃度以山奈酚計(jì)為20μM。

發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，山奈酚通過降低血清睪酮含量，和/或通過將LNCaP細(xì)胞、BPH-1細(xì)胞和/或WPMY-1細(xì)胞阻滯于細(xì)胞分裂的G₂/M期，和/或通過促進(jìn)細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bax、Bid和/或Caspase-3蛋白的表達(dá)，和/或通過促進(jìn)AR核轉(zhuǎn)位來預(yù)防和/或治療由睪酮水平過高引起的疾病，特別是良性前列腺增生和前列腺癌。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1顯示了山奈酚對(duì)BPH-1(左圖)和WPMY-1細(xì)胞(右圖)增殖的影響(MTT法)；其中C＝Control(對(duì)照組)，與對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；

圖2顯示了山奈酚對(duì)BPH-1(左圖)和WPMY-1細(xì)胞(右圖)增殖的影響(細(xì)胞活力)；其中C＝Control(對(duì)照組)，與對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；

圖3顯示了不同濃度山奈酚對(duì)BPH-1細(xì)胞周期的影響；

圖4顯示了不同濃度山奈酚對(duì)LNCaP細(xì)胞周期的影響；

圖5顯示了不同濃度山奈酚對(duì)LNCaP細(xì)胞凋亡蛋白的影響；

圖6顯示了山奈酚對(duì)大鼠飲水的影響，其中，A：各組大鼠每日飲水量；B：各組大鼠每日平均飲水量；與假手術(shù)組(Sham組)比較^#P<0.05，^##P<0.01，^###P<0.001；與模型組(Model組)比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；

圖7顯示了山奈酚對(duì)大鼠良性前列腺增生的影響。其中，A：各組大鼠前列腺形態(tài)；B：前列腺指數(shù)；C：各組大鼠前列腺組織病理形態(tài)。與假手術(shù)組(Sham組)比較^#P<0.05，^##P<0.01，^###P<0.001；與模型組(Model組)比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；

圖8顯示了山奈酚對(duì)良性前列腺增生大鼠血清中睪酮含量的影響，其中，A：給藥兩周后的血清睪酮含量，B：給藥四周后的血清睪酮含量；其中與假手術(shù)組(Sham組)比較^#P<0.05，^##P<0.01，^###P<0.001；與模型組(Model組)比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1山奈酚對(duì)BPH-1和WPMY-1細(xì)胞增殖的影響

(1)MTT實(shí)驗(yàn)

BPH-1細(xì)胞用10％FBS RPMI 1640培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前換用2％活性炭過濾的FBS RPMI 1640接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，接種5×10³個(gè)細(xì)胞/孔。細(xì)胞種板24小時(shí)貼壁后，換液，加藥，藥物分別作用72小時(shí)。組別設(shè)置分別為：對(duì)照組；Kae(1μM、5μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM)組。

WPMY-1細(xì)胞用10％FBS DMEM培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前換用2％活性炭過濾的FBS DMEM接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，接種5×10³個(gè)細(xì)胞/孔。細(xì)胞種板24小時(shí)貼壁后，換液，加藥，藥物分別作用72小時(shí)。組別設(shè)置分別為：對(duì)照組；Kae(1μM、5μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM)組。

藥物作用72小時(shí)后從培養(yǎng)箱取出細(xì)胞，每孔加入10μl MTT溶液，37℃孵育4小時(shí)。然后吸棄細(xì)胞孔里的液體，每孔加入100μl DMSO溶液，檢測(cè)570nm波長處OD值。

如表1和圖1所示，MTT檢測(cè)結(jié)果顯示，Kae在20μM-50μM濃度下顯著抑制了BPH-1細(xì)胞增殖(P<0.01,P<0.001)；在10μM-50μM濃度下顯著抑制了WPMY-1細(xì)胞增殖(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。

表1山奈酚對(duì)BPH-1和WPMY-1細(xì)胞增殖的影響(MTT)

注：與對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

(2)細(xì)胞活力實(shí)驗(yàn)

BPH-1細(xì)胞用10％FBS RPMI 1640培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前換用2％活性炭過濾的FBS RPMI 1640接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，接種1×10⁴個(gè)細(xì)胞/孔。細(xì)胞種板24小時(shí)貼壁后，換液，加藥，藥物作用72小時(shí)。組別設(shè)置分別為：培養(yǎng)液對(duì)照組、未加藥對(duì)照組；Kae(1μM、5μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM)組。

WPMY-1細(xì)胞用10％FBS DMEM培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前換用2％活性炭過濾的FBS DMEM接種到96孔細(xì)胞培養(yǎng)板，接種1×10⁴個(gè)細(xì)胞/孔。細(xì)胞種板24小時(shí)貼壁后，換液，加藥，藥物作用72小時(shí)。組別設(shè)置分別為：培養(yǎng)液對(duì)照組、未加藥對(duì)照組；Kae(1μM、5μM、10μM、20μM、30μM、40μM、50μM)組。

從冰箱拿出CellTiter-Buffer、CellTiter-Substrate放置至室溫。將11ml緩沖液加到底物的瓶子里配制CellTiter-Glo試劑。輕輕旋轉(zhuǎn)或翻轉(zhuǎn)混勻。藥物作用72小時(shí)后從孵箱中取出96孔黑色細(xì)胞培養(yǎng)板，室溫下放置30分鐘。從每孔吸出50μl培養(yǎng)液，加入50μl CellTiter-Glo試劑。在搖床上混勻2分鐘。室溫下放置10分鐘穩(wěn)定熒光信號(hào)，讀取熒光值。

如表2和圖2所示，細(xì)胞活力檢測(cè)結(jié)果顯示，Kae在10μM-50μM濃度下顯著抑制了BPH-1細(xì)胞增殖P<0.05,P<0.001)；在20μM-50μM濃度下，顯著抑制了WPMY-1細(xì)胞增殖P<0.001)。

表2山奈酚對(duì)BPH-1和WPMY-1細(xì)胞增殖的影響(細(xì)胞活力)

注：與對(duì)照組比較*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001。

實(shí)施例2山奈酚對(duì)BPH-1細(xì)胞周期的影響

BPH-1細(xì)胞用10％FBS RPMI 1640培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前，換用2％活性炭過濾的FBS RPMI 1640接種到6孔細(xì)胞培養(yǎng)板，接種1.5×10⁵個(gè)細(xì)胞/孔。細(xì)胞種板24小時(shí)貼壁后，換液，加藥，藥物作用48小時(shí)。組別設(shè)置分別為對(duì)照組(DMSO)；Kae(5μM,10μM,20μM)組。

藥物作用一定時(shí)間后，從細(xì)胞培養(yǎng)箱取出細(xì)胞，吸棄培養(yǎng)液，用預(yù)冷的PBS溶液洗細(xì)胞一次，每孔加入300μl不含EDTA和酚紅0.25％胰蛋白酶消化液，消化細(xì)胞2分鐘左右，待細(xì)胞松動(dòng)脫落加入300μl 5％活性炭過濾的FBS RPMI 1640中和胰酶。然后將細(xì)胞收集到1.5ml離心管里，4℃離心1000rpm，5分鐘，吸棄上清，收集細(xì)胞。每管加入1ml預(yù)冷的PBS溶液再洗細(xì)胞一次。4℃離心1000rpm，5分鐘，吸棄上清，收集細(xì)胞，每管加入1ml 70％乙醇(提前置于-20℃冰箱預(yù)冷過夜)輕輕混勻，4℃固定過夜。4℃離心1000rpm，5分鐘，吸棄上清，加入1ml預(yù)冷的PBS溶液再洗細(xì)胞一次。4℃離心1000rpm，5分鐘，吸棄上清，每管加入500μl FxCycle^TMPI/Rnase染色溶液，室溫避光孵育15-30分鐘。然后上機(jī)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。采用單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行多組間兩兩比較，當(dāng)*P<0.05認(rèn)為檢驗(yàn)結(jié)果有差異顯著性，當(dāng)**P<0.01被認(rèn)為檢驗(yàn)結(jié)果有極顯著差異。

如表3和圖3所示，流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示在10μM和20μM濃度下，Kae能夠提高G₂/M期DNA含量。

表3山奈酚對(duì)BPH-1細(xì)胞周期的影響

實(shí)施例3山奈酚對(duì)LNCaP細(xì)胞周期的影響

LNCaP細(xì)胞用10％FBS RPMI 1640培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前，換用5％活性炭過濾的FBS RPMI 1640培養(yǎng)72小時(shí)，然后用1％活性炭過濾的FBS RPMI 1640接種到6孔細(xì)胞培養(yǎng)板，接種1.5×10⁵個(gè)細(xì)胞/孔。細(xì)胞種板48小時(shí)貼壁后，換液，加藥，藥物作用72小時(shí)。組別設(shè)置分別為對(duì)照組(DMSO)，Kae(5μM，10μM，20μM)組。

藥物作用一定時(shí)間后，從細(xì)胞培養(yǎng)箱取出細(xì)胞，吸棄培養(yǎng)液，用預(yù)冷的PBS溶液洗細(xì)胞一次，每孔加入300μl不含EDTA和酚紅0.25％胰蛋白酶消化液，消化細(xì)胞2分鐘左右，待細(xì)胞松動(dòng)脫落加入300μl 5％活性炭過濾的FBS RPMI 1640中和胰酶。然后將細(xì)胞收集到1.5ml離心管里，4℃離心1000rpm，5分鐘，吸棄上清，收集細(xì)胞。每管加入1ml預(yù)冷的PBS溶液再洗細(xì)胞一次。4℃離心1000rpm，5分鐘，吸棄上清，收集細(xì)胞，每管加入1ml 70％乙醇(提前置于-20℃冰箱預(yù)冷過夜)輕輕混勻，4℃固定過夜。4℃離心1000rpm，5分鐘，吸棄上清，加入1ml預(yù)冷的PBS溶液再洗細(xì)胞一次。4℃離心1000rpm，5分鐘，吸棄上清，每管加入500μl FxCycle^TMPI/Rnase染色溶液，室溫避光孵育15-30分鐘。然后上機(jī)檢測(cè)。

如表4和圖4所示，流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果顯示在5-20μM濃度下，Kae能夠提高G₂/M期DNA表達(dá)量。

表4山奈酚對(duì)LNCaP細(xì)胞周期的影響

實(shí)施例4山奈酚對(duì)LNCaP細(xì)胞凋亡蛋白表達(dá)的影響

(1)細(xì)胞培養(yǎng)及給藥

LNCaP細(xì)胞用10％FBS RPMI 1640培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)前，換用5％活性炭過濾的FBS RPMI 1640培養(yǎng)72小時(shí)，然后用1％活性炭過濾的FBS RPMI 1640接種到6孔細(xì)胞培養(yǎng)板，接種3.0×10⁵個(gè)細(xì)胞/孔。細(xì)胞種板48小時(shí)貼壁后，換液，加藥，藥物作用48小時(shí)。組別設(shè)置分別為：對(duì)照組、DHT(10nM)、Bic(10μM)、Kae(20μM)；對(duì)照組、DHT(10nM)、Bic(10μM)+DHT(10nM)、Kae(20μM)+DHT(10nM)，其中，Bic是bicalutamide(比卡魯胺)的縮寫，是臨床上用于治療前列腺癌和良性前列腺增生的藥物，在本發(fā)明用作陽性對(duì)照。

(3)Western Blot法檢測(cè)蛋白表達(dá)

吸棄6孔板里的培養(yǎng)液，用PBS溶液洗，用細(xì)胞刮將細(xì)胞刮下，收集于1.5ml EP管，離心收集細(xì)胞。加入預(yù)先配好的細(xì)胞裂解液(RIPA:PMSF＝100:1)，冰浴30分鐘，渦旋幾次使細(xì)胞充分裂解，4℃14.2×10³g離心30分鐘收集上清。測(cè)定蛋白質(zhì)含量的具體步驟參照Micro BCA^TM Protein Assay Kit說明書。Western Blot方法是本領(lǐng)域的常規(guī)方法，本領(lǐng)域技術(shù)人員在得知了本發(fā)明的蛋白質(zhì)(Bax蛋白、Bid蛋白、Caspase-3蛋白)及其對(duì)應(yīng)的抗體(見表5和表6)的基礎(chǔ)上完全可以完成本實(shí)驗(yàn)，本發(fā)明在此不再贅述。

表5一抗稀釋比例

表6二抗稀釋比例

如圖5所示，Western Blot結(jié)果顯示20μM Kae單獨(dú)作用下明顯上調(diào)了Bax蛋白的表達(dá)量，在和10nM DHT共同作用下仍然明顯上調(diào)了Bax蛋白的表達(dá)量。20μM Kae單獨(dú)作用下明顯上調(diào)了Bid蛋白的表達(dá)量，在和10nM DHT共同作用下對(duì)Bid蛋白表達(dá)影響不明顯。20μM Kae對(duì)Caspase-3蛋白的表達(dá)有上調(diào)趨勢(shì)。

實(shí)施例5山奈酚對(duì)大鼠飲水的影響

8周齡SPF級(jí)Wistar雄性大鼠，體重220±20g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼養(yǎng)在中國醫(yī)學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物房的溫度和濕度分別為23±2℃和58-65％。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后行雙側(cè)睪丸摘除術(shù)。

手術(shù)后三周，假手術(shù)組(Sham operation)剩余大鼠11只，手術(shù)組剩余大鼠30只(其中4只大鼠腹部腫大不納入實(shí)驗(yàn))。將雙側(cè)睪丸摘除術(shù)后一般情況良好的24只大鼠分為4組，每組6只。分別為前列腺增生模型組(BPH Model)、非那雄胺組(Fin)、山奈酚低劑量組(Kae-L)、山奈酚高劑量組(Kae-H)。

假手術(shù)組大鼠每日皮下注射0.1ml玉米油，其余各組大鼠每日皮下注射0.1ml丙酸睪酮(TP)。各組大鼠采用灌胃給藥，連續(xù)給藥28天，末次給藥24小時(shí)后麻醉處死動(dòng)物取材。具體處理見表8。

表7分組以及給藥處理情況

如表8和圖6所示，在給藥2周之后，與Sham組比較，Kae-L組和Kae-H組大鼠每日飲水量有了提高，與Model組比較，Kae-L組和Kae-H組大鼠每日飲水量也提高了；如圖7所示，給藥的第14天到第28天之間，Kae-L組和Kae-H組大鼠的平均每日飲水量明顯高于Sham組和Model組(P<0.001)。

表8山奈酚對(duì)大鼠飲水的影響(n＝6)

注：與Sham組比較^#P<0.05，^##P<0.01，^###P<0.001；與Model組比較^*P<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001。

實(shí)施例6山奈酚對(duì)大鼠前列腺組織形態(tài)的影響

按照表7的方法處理大鼠，取材前稱重，每組取出一只體重在320±10g區(qū)間的大鼠，麻醉處死，解剖大鼠取出前列腺拍照。如圖7A所示，與假手術(shù)組(Sham)比較，BPH模型組(Model)大鼠的前列腺體積明顯增大，給予藥物處理后，大鼠前列腺的體積有不同程度的減少。

用電子天平精確稱量前列腺的濕重，用來計(jì)算各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的前列腺指數(shù)，按照公式：前列腺的濕重/大鼠體重×100％，計(jì)算前列腺前列腺指數(shù)(PI)。如表9和圖7B所示，與Sham組比較，Model的PI明顯升高(P<0.001)；給藥處理后，PI不同程度降低，非那雄胺組(Fin)、山奈酚低劑量組(Kae-L)、山奈酚高劑量組(Kae-H)與Model組比較都有顯著性差異(P<0.001，P<0.01，P<0.05)。

將上述取出的前列腺放于4％多聚甲醛中進(jìn)行固定，待石蠟包埋，用于做病理片和免疫組化。用切片機(jī)將石蠟包埋的前列腺組織蠟塊切至4μm/片。二甲苯使石蠟切片脫蠟，經(jīng)各級(jí)乙醇后至水洗，蘇木素染色5分鐘，大量自來水沖洗。鹽酸乙醇分化30秒。自來水浸泡15分鐘。置伊紅液染色2分鐘。脫水，透明，中性樹脂封片。顯微鏡下鏡檢結(jié)果見圖7C?？梢钥闯觯琒ham組腺泡形狀平滑，腺泡壁薄而規(guī)整，上皮細(xì)胞排列緊密整齊，間質(zhì)細(xì)胞少；Model組腺泡皺褶較多，腺泡壁明顯增厚，上皮細(xì)胞排列疏松紊亂，腺泡內(nèi)出現(xiàn)了復(fù)層上皮，間質(zhì)細(xì)胞明顯增多，結(jié)締組織增生較為明顯；各給藥組與Model組相比，間質(zhì)成分有所減少，腺上皮細(xì)胞排列紊亂的現(xiàn)象均得到不同程度的緩解，局部腺泡排列較為密集，不同程度地接近正常對(duì)照組。

表9山奈酚對(duì)良性前列腺增生大鼠PI的影響(n＝6)

注：與假手術(shù)組比較^#P<0.05，^##P<0.01，^###P<0.001；與模型組比較^*P<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001。

實(shí)施例7山奈酚對(duì)大鼠血清中睪酮含量的影響

血清中睪酮含量采用T酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(購自于天津安諾瑞康生物技術(shù)公司)通過酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)，具體方法參照試劑盒說明書。

表10和圖8所示，與Sham組比較，Model組大鼠血清中的睪酮(T)明顯提高(P<0.01)；給藥2周，如圖8中A所示,各給藥組大鼠血清中的T水平有不同程度降低，其中Fin組、Kae-L組與Model組比較都有顯著性差異(P<0.05)，與Sham組比較，Model組大鼠血清中的睪酮(T)明顯提高(P<0.001)；給藥4周，如圖8中B所示,各給藥組大鼠血清中的T水平也有不同程度降低，其中Fin組、Kae-L組與Model組比較都有顯著性差異(P<0.01,P<0.05)。

表10山奈酚對(duì)良性前列腺增生大鼠血清中T含量的影響(n＝6)

注：與Sham組比較^#P<0.05，^##P<0.01，^###P<0.001；與Model組比較^*P<0.05，^**P<0.01，^***P<0.001。

以上對(duì)本發(fā)明所提供的山奈酚在制備用于預(yù)防和/或治療由睪酮水平過高引起的疾病的藥物中的用途進(jìn)行了詳細(xì)介紹。本文中應(yīng)用了具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的原理及實(shí)施方式進(jìn)行了闡述，以上實(shí)施例的說明只是用于幫助理解本發(fā)明的方法及其中心思想。應(yīng)當(dāng)指出，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明原理的前提下，還可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行若干改進(jìn)和修飾，這些改進(jìn)和修飾也落入本發(fā)明權(quán)利要求的保護(hù)。