本發(fā)明屬于醫(yī)藥衛(wèi)生技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種含銀抗菌敷料的制備方法。

背景技術(shù)：

皮膚作為人體免疫系統(tǒng)的重要組成部分，起到防止外界有害物質(zhì)進(jìn)入皮下組織的作用。創(chuàng)傷往往不可避免地造成皮膚破損，而由此侵入的病原體如細(xì)菌，傷口易出現(xiàn)發(fā)炎、化膿、感染，從而產(chǎn)生疤痕及組織病變，而在抗生素大量應(yīng)用前由開(kāi)放性傷口引發(fā)的感染則造成了眾多患者的死亡。如今，反復(fù)的炎癥造成了很多愈合問(wèn)題，例如難以愈合的慢性傷口。因此，減少皮下組織的暴露程度，創(chuàng)造一個(gè)濕性愈合環(huán)境以加速受損皮膚愈合，抑制創(chuàng)面處微生物病原體的增殖，對(duì)于傷口愈合有著積極的作用。

近年來(lái)，患者對(duì)醫(yī)用敷料的性能要求不斷提高，醫(yī)用敷料不但要起保護(hù)支持創(chuàng)面的作用，而且要?jiǎng)?chuàng)造利于創(chuàng)面愈合的環(huán)境，同時(shí)又要能夠滿(mǎn)足一般患者的經(jīng)濟(jì)條件?；谶@些，開(kāi)發(fā)一種經(jīng)濟(jì)且性能良好的醫(yī)用敷料是十分有意義的。

納米銀粒子是一種粒子直徑在100nm以?xún)?nèi)的銀單質(zhì)，通常20-50nm比較常見(jiàn)，由于獨(dú)特的物理與化學(xué)性能，被廣泛應(yīng)用于化工、醫(yī)療、光電材料等領(lǐng)域。納米銀粒子具有十分優(yōu)秀的抗菌性，與一般抗菌物質(zhì)相比，其具有生物毒性小、廣譜抗菌、生效快的優(yōu)點(diǎn)。

經(jīng)本申請(qǐng)人研究發(fā)現(xiàn)，目前棉是自然界中來(lái)源最廣的醫(yī)用敷料原料，是傳統(tǒng)醫(yī)用敷料的代表。棉質(zhì)醫(yī)用敷料具有一定的吸水性，質(zhì)地柔軟，價(jià)格便宜，但其吸水性較差，無(wú)法大量吸收傷口滲出液，而且，純棉類(lèi)敷料最大的問(wèn)題就是在護(hù)理傷口后，極容易發(fā)生粘連，在去除粘連紗布是往往會(huì)造成傷口的二次創(chuàng)傷，并且純棉類(lèi)敷料無(wú)抗菌性，不利于傷口的愈合。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)上述問(wèn)題本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種高抗菌、不粘連、利于傷口愈合的含銀抗菌敷料，同時(shí)其制備方法簡(jiǎn)單。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題的技術(shù)方案如下：一種含銀抗菌敷料的制備方法，包括以下步驟：

A、在10-20℃條件下，將脫脂棉紗布加入到質(zhì)量濃度為20-24％的氫氧化鈉溶液中進(jìn)行溶脹反應(yīng)，反應(yīng)后過(guò)濾干燥，得到產(chǎn)物A；

B、在70-80℃條件下，將產(chǎn)物A加入到質(zhì)量濃度為15-25％的氯乙酸水溶液中反應(yīng)，反應(yīng)后用乙酸調(diào)至中性，并用乙醇洗滌并干燥，得到羧甲基取代度為0.45-0.5的羧甲基纖維素棉；

C、在20-30℃條件下，將聚乙烯吡咯烷酮溶解于乙醇中，得到聚乙烯吡咯烷酮質(zhì)量濃度為0.01-0.05％聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液，然后再加入硝酸銀，得到硝酸銀質(zhì)量濃度為0.005-0.01％硝酸銀乙醇溶液；

D、在20-30℃條件下，將步驟B中得到的羧甲基纖維素棉加入到步驟C中得到的硝酸銀乙醇溶液中，進(jìn)行攪拌混合，得到混合液，并在40-50℃條件下干燥，然后加入到抗壞血酸質(zhì)量濃度為0.01-0.1％的抗壞血酸乙醇溶液中浸漬，并干燥，最后在紫外光照射下反應(yīng)0.5-1h，得到含銀抗菌敷料。

進(jìn)一步，在步驟A中，所述脫脂棉紗布與氫氧化鈉溶液的質(zhì)量比為1：(25-30)，所述溶脹反應(yīng)時(shí)間控制在30-40min。

進(jìn)一步，在步驟B中，所述氯乙酸水溶液與產(chǎn)物A的質(zhì)量比為10：(2-5)，乙酸的質(zhì)量濃度為20-30％。

進(jìn)一步，在步驟B中，所述反應(yīng)時(shí)間控制在15-20min，干燥溫度控制在70-80℃。

進(jìn)一步，在步驟C中，所述聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液中聚乙烯吡咯烷酮的質(zhì)量濃度為0.01％，所述硝酸銀乙醇溶液中硝酸銀的質(zhì)量濃度為0.005％。

進(jìn)一步，在步驟D中，所述混合時(shí)間控制在20-30min，浸漬時(shí)間控制在5-10min。

進(jìn)一步，在步驟D中，所述紫外線(xiàn)的波長(zhǎng)為380nm。

進(jìn)一步，在步驟D中，所述抗壞血酸乙醇溶液中抗壞血酸的質(zhì)量濃度為

0.1％。

進(jìn)一步，在步驟D中，所述抗壞血酸乙醇溶液與混合液體積比為1：(30-35)。

本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明將脫脂棉紗布作為本發(fā)明基礎(chǔ)敷料進(jìn)行改性，通過(guò)對(duì)脫脂棉紗布進(jìn)行羧甲基化改性，以及利用原位還原納米銀粒子直接生成在改性脫脂棉紗布表面，具有結(jié)合緊密不易脫落的優(yōu)點(diǎn)，其制備方法簡(jiǎn)單，最后得到的含銀抗菌敷料具有高抗菌性、吸水性，不粘連傷口，避免傷口的二次創(chuàng)傷以及受感染，從而傷口愈合快。

附圖說(shuō)明

圖1為普通脫脂棉紗布與實(shí)施例1中含銀抗菌敷料形貌觀察圖；

圖2為實(shí)施例1含銀抗菌敷料的透射電鏡照片；

圖3為實(shí)施例1含銀抗菌敷料進(jìn)行抗菌性能測(cè)試結(jié)果抑菌圈圖；

圖4為動(dòng)物傷口愈合情況形貌圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖對(duì)本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

A、在10℃條件下，將脫脂棉紗布加入到質(zhì)量濃度為20％的氫氧化鈉溶液中進(jìn)行溶脹反應(yīng)30min，反應(yīng)后過(guò)濾干燥，得到產(chǎn)物A；

B、在70℃條件下，將產(chǎn)物A加入到質(zhì)量濃度為15％的氯乙酸水溶液中反應(yīng)15min，反應(yīng)后用質(zhì)量濃度為20％的乙酸調(diào)至中性，并用乙醇洗滌并在70℃條件下干燥，得到羧甲基取代度為0.47的羧甲基纖維素棉，其脫脂棉紗布與氫氧化鈉溶液的質(zhì)量比為1：25，氯乙酸水溶液與產(chǎn)物A的質(zhì)量比為5：1；

C、在20℃條件下，將聚乙烯吡咯烷酮溶解于乙醇中，得到聚乙烯吡咯烷酮質(zhì)量濃度為0.01％的聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液，然后再加入硝酸銀，得到硝酸銀質(zhì)量濃度為0.005％的硝酸銀乙醇溶液，此處乙醇為無(wú)水乙醇，其質(zhì)量濃度為99.99％，僅僅是用于溶解聚乙烯吡咯烷酮；

D、在20℃條件下，將步驟B中得到的羧甲基纖維素棉加入到步驟C中得到的硝酸銀乙醇溶液中，進(jìn)行攪拌混合20min，得到混合液，并在40℃條件下干燥，然后加入到抗壞血酸質(zhì)量濃度為0.01％的抗壞血酸乙醇溶液中浸漬5min，并干燥，最后在紫外光照射下反應(yīng)0.5h，得到含銀抗菌敷料，其紫外線(xiàn)的波長(zhǎng)為380nm，抗壞血酸乙醇溶液與混合液體積比為1：30。

實(shí)施例2

A、在15℃條件下，將脫脂棉紗布加入到質(zhì)量濃度為22％的氫氧化鈉溶液中進(jìn)行溶脹反應(yīng)35min，反應(yīng)后過(guò)濾干燥，得到產(chǎn)物A；

B、在75℃條件下，將產(chǎn)物A加入到質(zhì)量濃度為20％的氯乙酸水溶液中反應(yīng)18min，反應(yīng)后用質(zhì)量濃度為25％的乙酸調(diào)至中性，并用乙醇洗滌并在75℃條件下干燥，得到羧甲基取代度為0.45的羧甲基纖維素棉，其脫脂棉紗布與氫氧化鈉溶液的質(zhì)量比為1：28，氯乙酸水溶液與產(chǎn)物A的質(zhì)量比為10：3；

C、在25℃條件下，將聚乙烯吡咯烷酮溶解于乙醇中，得到聚乙烯吡咯烷酮質(zhì)量濃度為0.03％聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液，然后再加入硝酸銀，得到硝酸銀質(zhì)量濃度為0.008％的硝酸銀乙醇溶液，此處乙醇為無(wú)水乙醇，其質(zhì)量濃度為99.99％，僅僅是用于溶解聚乙烯吡咯烷酮；

D、在25℃條件下，將步驟B中得到的羧甲基纖維素棉加入到步驟C中得到的硝酸銀乙醇溶液中，進(jìn)行攪拌混合25min，得到混合液，并在45℃條件下干燥，然后加入到抗壞血酸質(zhì)量濃度為0.05％的抗壞血酸乙醇溶液中浸漬8min，并干燥，最后在紫外光照射下反應(yīng)0.8h，得到含銀抗菌敷料，其紫外線(xiàn)的波長(zhǎng)為380nm，抗壞血酸乙醇溶液與混合液體積比為1：32。

實(shí)施例3

A、在20℃條件下，將脫脂棉紗布加入到質(zhì)量濃度為24％的氫氧化鈉溶液中進(jìn)行溶脹反應(yīng)40min，反應(yīng)后過(guò)濾干燥，得到產(chǎn)物A；

B、在80℃條件下，將產(chǎn)物A加入到質(zhì)量濃度為25％的氯乙酸水溶液中反應(yīng)20min，反應(yīng)后用質(zhì)量濃度為30％的乙酸調(diào)至中性，并用乙醇洗滌并在80條件下干燥，得到羧甲基取代度為0.5的羧甲基纖維素棉，其脫脂棉紗布與氫氧化鈉溶液的質(zhì)量比為1：30，氯乙酸水溶液與產(chǎn)物A的質(zhì)量比為2：1；

C、在30℃條件下，將聚乙烯吡咯烷酮溶解于乙醇中，得到聚乙烯吡咯烷酮質(zhì)量濃度為0.05％聚乙烯吡咯烷酮乙醇溶液，然后再加入硝酸銀，得到硝酸銀質(zhì)量濃度為0.01％的硝酸銀乙醇溶液，此處乙醇為無(wú)水乙醇，其質(zhì)量濃度為99.99％，僅僅是用于溶解聚乙烯吡咯烷酮；

D、在30℃條件下，將步驟B中得到的羧甲基纖維素棉加入到步驟C中得到的硝酸銀乙醇溶液中，進(jìn)行攪拌混合30min，得到混合液，并在50℃條件下干燥，然后加入到抗壞血酸質(zhì)量濃度為0.1％的抗壞血酸乙醇溶液中浸漬10min，并干燥，最后在紫外光照射下反應(yīng)1h，得到含銀抗菌敷料，其紫外線(xiàn)的波長(zhǎng)為380nm，抗壞血酸乙醇溶液與混合液體積比為1：35。

1、物理化學(xué)結(jié)構(gòu)分析

在15kV下分別對(duì)普通脫脂棉紗布和本發(fā)明實(shí)施例1制備得到的含銀抗菌敷料進(jìn)行噴金處理，使用掃描電鏡分別對(duì)普通脫脂棉紗布以及實(shí)施例1中得到的含銀抗菌敷料纖維表面形貌觀察，如圖1所示，圖1a為普通脫脂棉紗布的掃描電鏡形貌圖，圖1b為含銀抗菌敷料掃描電鏡形貌圖，圖1c為普通脫脂棉紗布，圖1d為含銀抗菌敷料，觀察可見(jiàn)，較普通脫脂棉紗布(圖1a)，含銀抗菌敷料(圖1b)的纖維結(jié)構(gòu)更加蓬松，擁有更大的表面積，同時(shí)其普通脫脂棉紗布空隙為700μm左右，含銀抗菌敷料空隙為500μm左右。

透射電鏡觀察(TEM)：將實(shí)施例1制備得到的含銀抗菌敷料置于去離子水中，待溶解完全稀釋至合適透光度，使用透射電鏡進(jìn)行觀察，如圖2所示為實(shí)施例1含銀抗菌敷料的透射電鏡照片，可以看到制備的含銀抗菌敷料的纖維表面緊密結(jié)合納米銀粒子，粒徑在50nm左右，利于敷料的抗菌性。

2、含銀抗菌敷料的抗菌性測(cè)試

分別取100微升大腸桿菌與金黃色葡萄球菌菌懸液，均勻涂于固體培養(yǎng)基上，取實(shí)施例1制備得到的含銀抗菌敷料置于培養(yǎng)基表面上，后置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，觀察并測(cè)量抑菌圈，如圖3所示實(shí)施例1含銀抗菌敷料進(jìn)行抗菌性能測(cè)試結(jié)果抑菌圈圖，結(jié)果表明：實(shí)施例1中制備得到的含銀抗菌敷料分別對(duì)大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌有明顯的抑制作用，對(duì)大腸桿菌與金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑分別達(dá)到6mm、7mm。

3、動(dòng)物創(chuàng)傷愈合模型

將購(gòu)買(mǎi)兔子，經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的飼養(yǎng)，備皮后于家兔背部切除直徑為2cm的表皮及真皮組織。止血后分別敷以實(shí)施例1制備得到的含銀抗菌敷料與市售的產(chǎn)于瑞典的“美皮貼”(Mepitel silicone wound contact layer)并留空白對(duì)照。分別于5天、10天、15天觀察并取樣用于組織切片，HE染色觀察分析，如圖4所示為動(dòng)物傷口愈合情況形貌圖，圖4a為創(chuàng)傷愈合情況；圖4b為組織切片HE染色結(jié)果，實(shí)驗(yàn)表明，與未使用敷料的傷口相比，兩種敷料均明顯加快了愈合的速度，使用含銀抗菌敷料的愈合速度則要快于美皮貼。含銀抗菌敷料在與傷口接觸后，迅速并持久地吸收傷口滲出液并膨脹成膠，在傷口表面形成相對(duì)封閉的環(huán)境；負(fù)載的納米銀粒子高效抗菌，防止了傷口感染。該敷料明顯的加快了創(chuàng)面收縮，促進(jìn)了創(chuàng)面愈合(圖4a)。切片表明，含銀抗菌敷料有效的促進(jìn)傷口處成纖細(xì)胞的遷移，提高了傷口愈合過(guò)程中形成新皮的質(zhì)量(圖4b)。

4、羧甲基取代度的影響

通過(guò)一系列單因素實(shí)驗(yàn)，得到不同的反應(yīng)時(shí)間及氯乙酸和氫氧化鈉濃度對(duì)羧甲基取代度(DS)和含銀抗菌敷料的物理特性(吸水能力、成膠形態(tài)、機(jī)械性能)的影響。增加這三個(gè)變量中任意一個(gè)，都會(huì)令羧甲基取代度增大，此外，氯乙酸濃度對(duì)羧甲基取代度的影響最大。通過(guò)制備一系列不同取代度的改性材料并測(cè)試其機(jī)械性能及可溶解性，最終選定取代度為0.47。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。