本發(fā)明屬于醫(yī)藥及美容護(hù)膚領(lǐng)域，具體地涉及一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊及制備方法及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

載體的攝取以及內(nèi)化與其發(fā)揮作用或逃避清除系統(tǒng)密切相關(guān)，影響其在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。粒子的尺寸、形狀、剛性及表面化學(xué)修飾均影響載體的生物學(xué)特性，合理制備不同理化性質(zhì)的藥物載體至關(guān)重要。長徑比是載體設(shè)計(jì)的重要參數(shù)，調(diào)節(jié)長徑比可以改善材料的生物分布及腫瘤穿透性。在對多個系統(tǒng)的研究中均發(fā)現(xiàn)，長徑比影響細(xì)胞對載體的內(nèi)化行為：Yoo等研究發(fā)現(xiàn)PLGA球形粒子比橢圓形粒子內(nèi)化快并且內(nèi)化數(shù)目也高四倍(Yoo,J.W.；Doshi,N.；Mitragotri,S.,Macromol.Rapid Commun.2010,31(2),142-148.)。長徑比(AR)約為2.5(60-90nm×160-190nm)的介孔硅棒的細(xì)胞內(nèi)化量大于AR≈1.5(60-80nm×110-130nm)及AR≈4.5(50-70nm×260-300nm)的細(xì)胞內(nèi)化量(Meng,H.；Yang,S.；Li,Z.；Xia,T.；Chen,J.；Ji,Z.；Zhang,H.；Wang,X.；Lin,S.；Huang,C.；Zhou,Z.H.；Zink,J.I.；Nel,A.E.,ACS Nano 2011,5(6),4434-4447.)。剛性對藥物載體內(nèi)化的影響也逐漸受到重視，國家納米科學(xué)中心蔣興宇組研究表明，剛性越強(qiáng)越容易通過細(xì)胞膜，剛性改變影響細(xì)胞攝取效率(Sun,J.；Zhang,L.；Wang,J.；Feng,Q.；Liu,D.；Yin,Q.；Xu,D.；Wei,Y.；Ding,B.；Shi,X.；Jiang,X.,Adv.Mater.2015,27(8),1402-1407.)。Samir Mitragotri組研究表明軟納米粒子(10kPa)比硬納米粒子(3000kPa)有更優(yōu)的循環(huán)特性和更強(qiáng)的靶向效果(Anselmo,A.C.；Zhang,M.；Kumar,S.；Vogus,D.R.；Menegatti,S.；Helgeson,M.E.；Mitragotri,S.,ACS nano,2015,9(3):3169-3177.)。此外，Samir Mitragotri組研究發(fā)現(xiàn)粒子的細(xì)胞內(nèi)定位展示出明顯的形狀、尺寸依賴性，這一發(fā)現(xiàn)有利于設(shè)計(jì)針對細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞核的藥物載體以實(shí)現(xiàn)高效細(xì)胞內(nèi)遞送(Kolhar,P.；Mitragotri,S.,Adv.Funct.Mater.2012,22(18),3759-3764.)。以上研究均表明為了更合理的進(jìn)行藥物載體的設(shè)計(jì)，優(yōu)化高效、特殊用途載體(長循環(huán)、精確定位、高效攝取等)均需要制備具有不同理化性質(zhì)的藥物載體。目前的研究仍處于起步階段，還有待繼續(xù)深化、細(xì)致研究。

在藥物傳遞系統(tǒng)中，微囊類這種中空結(jié)構(gòu)載體受到了越來越多的關(guān)注。層層自組裝(Layer-by-layer,LbL)技術(shù)是制備微囊類載體最常用的方法。該技術(shù)由于其簡便易行、適用性強(qiáng)等優(yōu)勢而在中空微囊制備中備受重視。通過改變模板可以用LbL法制備不同尺寸、形狀的微囊(Shchepelina,O.；Kozlovskaya,V.；Kharlampieva,E.；Mao,W.；Alexeev,A.；Tsukruk,V.V.,Macromol.Rapid Commun.2010,31(23),2041-2046；Yashchenok,A.；Parakhonskiy,B.；Donatan,S.；Kohler,D.；Skirtach,A.；H.,J.Mater.Chem.B 2013,1(9),1223-1228.)，此外通過改變組裝層數(shù)以及殼層材料，可以在其他性質(zhì)不變的前提下改變微囊的剛性，是制備不同理化性質(zhì)中空結(jié)構(gòu)的理想方法。然而，目前LbL法制備微囊還主要集中于利用球形模板制備球形微囊，如Hartmann等用碳酸鈣球形模板制備不同材料、不同剛性的LbL球形微囊，通過包載的pH敏感熒光染料的顏色變化研究剛性對細(xì)胞攝取以及溶酶體酸化過程的影響研究，結(jié)果表明柔軟的微粒比剛性強(qiáng)的微粒更易進(jìn)入溶酶體，酸化時間與剛性成正比(Hartmann,R.；Weidenbach,M.；Neubauer,M.；Fery,A.；Parak,W.J.,Angew Chem Int Ed Engl 2015,54(4),1365-1368.)。少數(shù)用非球形粒子作為模板，主要集中在無機(jī)微粒，如Caruso組用棒狀硅顆粒作為模板制備不同長徑比的微囊，微囊的長徑比與內(nèi)化速度成負(fù)相關(guān)，而進(jìn)入細(xì)胞后大多數(shù)與溶酶體共定位，微囊長徑比只影響內(nèi)化動力學(xué)不影響材料的細(xì)胞內(nèi)命運(yùn)(Shimoni,O.；Yan,Y.；Wang,Y.；Caruso,F.,ACS Nano 2013,7(1),522-530.)。目前常用的模板去除通常需要?dú)浞?、鹽酸、四氫呋喃等，條件比較苛刻；以某些微球作為模板如聚苯乙烯等，模板殘留是必須解決的問題。方法簡單普適、模板生物相容性好及形狀、剛性可控的微囊及其制備方法還未見報(bào)道。

PLGA是一種具有良好生物相容性和生物降解性的醫(yī)用高分子材料，經(jīng)美國FDA批準(zhǔn)可用作器械和藥用輔料。PLGA可以在體內(nèi)降解，最終代謝產(chǎn)物為CO₂和H₂O。以PLGA微粒作為制備微囊的模板，不僅可解決模板殘留問題，而且去除PLGA模板的過程也相對簡便溫和，是微囊模板的理想材料。此外，利用乳液溶液揮發(fā)法調(diào)整制備條件，可以制備不同尺寸的纖維狀、棒狀微粒(ZL201010291154.2；Li,R.；Li,X.；Liu,L.；Zhou,Z.；Tang,H.；Zhang,Q.,Macromol.Rapid Commun.2010,31(22),1981-1986.)，以此為模板用LbL法在溫和的條件下制備棒狀的聚合物微囊，調(diào)整其幾何形狀及力學(xué)性質(zhì)使其具有更優(yōu)的生物學(xué)功能，更佳的生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用的研究還未見報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種工藝簡單、重現(xiàn)性好，形狀可控、通透性可調(diào)節(jié)的，具有良好生物相容性的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊。

本發(fā)明的第二個目的是提供一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊的制備方法。

本發(fā)明的第三個目的是提供一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊的應(yīng)用。

本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：

一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊的制備方法，包括如下步驟：

(1)將濃度為2mg/mL帶正電荷的聚合物溶液和棒狀模板乳酸基聚合物微粒混合，得混合液一，使棒狀模板乳酸基聚合物微粒在混合液一中的濃度為10⁶-10⁹/mL；所述帶正電荷的聚合物溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30-120min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第一種微粒；將第一種微粒與濃度為2mg/mL的帶負(fù)電荷的聚合物溶液混合，得混合液二，混合液二的體積與混合液一的體積相等，所述帶負(fù)電荷的聚合物溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30-120min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第二種微粒；

(2)重復(fù)步驟(1)1-15正整數(shù)次；

(3)向步驟(2)獲得的微粒中加入戊二醛水溶液進(jìn)行交聯(lián)，離心，水洗，得到最終微粒；溶解最終微粒內(nèi)部的乳酸基聚合物，再水洗得到殼層可控的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊。

乳酸基聚合物為分子量5,000-50,000的聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)、分子量為5,000-50,000的聚乳酸(PLA)或分子量為5,000-50,000的左旋聚乳酸(PLLA)。

帶正電荷的聚合物為分子量15,000-900,000的聚烯丙基胺鹽酸鹽(PAH)或FITC標(biāo)記的聚烯丙基胺鹽酸鹽(FITC標(biāo)記的PAH)，其中PAH的分子量為15,000-900,000。

帶負(fù)電荷的聚合物為分子量70,000-1,000,000的聚苯乙烯磺酸鈉(PSS)。

上述方法制備的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊。

乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊在制備載功效組份微囊中的應(yīng)用。

本發(fā)明的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊是一種中空微囊，可負(fù)載生物大分子類藥物等功效組份。以乳酸基聚合物微粒作為制備棒狀微囊的模板，不僅可解決模板殘留問題，而且去除乳酸基聚合物模板的過程也相對簡便溫和。本發(fā)明的方法易于通過控制尺寸、形狀等調(diào)節(jié)其生物性能，操作簡單，制備工藝普適性強(qiáng)，適合于規(guī)?；a(chǎn)，所用材料具有良好的生物相容性、生物可降解性且無免疫原性。本發(fā)明適合在功效組份載體、靶向遞送及美容護(hù)膚領(lǐng)域中應(yīng)用。

附圖說明

圖1為實(shí)施例1用不同分子量PLGA制備的棒狀微粒的掃描電鏡照片.(a)50K；(b)10K；(c)5K。

圖2為實(shí)施例2用不同分子量PLA制備的棒狀微粒的掃描電鏡照片.(a)50K；(b)10K；(c)5K。

圖3為實(shí)施例2用不同分子量PLLA制備的棒狀微粒的掃描電鏡照片.(a)50K；(b)10K；(c)5K。

圖4為實(shí)施例3用PLGA棒狀微粒制備的不同層數(shù)微囊的掃描電鏡照片.(a)N-(PAH/PSS)₂；(b)N-(PAH/PSS)₄；(c)N-(PAH/PSS)₈；(d)N-(PAH/PSS)₁₆。

圖5為實(shí)施例4用PLLA棒狀微粒為模板制備的棒狀微囊.(a-c)分別為N-(PAH/PSS)₃，N-(PAH/PSS)₄，N-(PAH/PSS)₅的透射電鏡照片，(d)N-(PAH/PSS)₅的光鏡照片。

圖6為實(shí)施例7中包載500kDa葡聚糖(a)及250kDa葡聚糖(b)的棒狀微囊的激光共聚焦圖片。

圖7為實(shí)施例9中RAW264.7細(xì)胞對不同層數(shù)棒狀微囊的攝取情況。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，本發(fā)明的實(shí)施例是為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠更好地理解本發(fā)明，但并不對本發(fā)明作任何限制。

各實(shí)施例中的聚合物的分子量，均為重均分子量。

實(shí)施例1

棒狀模板分子量50,000的PLGA微粒的制備：

稱取聚乳酸-羥基乙酸共聚物(50:50，分子量5萬)50mg，加入到10mL的二氯甲烷中溶解；

將0.736g多聚磷酸鈉(STP)，加入到50mL質(zhì)量濃度為0.5％PVA(聚合度550-650，醇解度88％)水溶液中攪拌至溶解；

將10mLPLGA的二氯甲烷溶液與50mL含有STP的PVA溶液混合，800rpm攪拌兩小時，8,000rpm離心，水洗，得到棒狀微粒懸液。將上述PLGA微粒懸液滴在硅片上自然干燥。

棒狀模板分子量5,000的PLGA微粒的制備：

原料采用：聚乳酸-羥基乙酸共聚物(50:50，分子量5,000)其它步驟同棒狀模板分子量50,000的PLGA微粒的制備。

棒狀模板分子量10,000的PLGA微粒的制備：

原料采用：聚乳酸-羥基乙酸共聚物(50:50，分子量1萬)其它步驟同棒狀模板分子量50,000的PLGA微粒的制備。

掃描電鏡下拍照，見圖1。

實(shí)施例2

棒狀模板分子量50,000的PLA微粒的制備：

稱取聚乳酸(分子量5萬)50mg，加入到10mL的二氯甲烷中溶解；

將0.736g多聚磷酸鈉(STP)，加入到50mL質(zhì)量濃度為0.5％PVA(聚合度550-650，醇解度88％)水溶液中攪拌至溶解。

將10mLPLA的二氯甲烷溶液與50mL含有STP的PVA溶液混合，800rpm攪拌兩小時，8,000rpm離心，水洗，得到棒狀微粒懸液。將上述PLA微粒懸液滴在硅片上自然干燥。

棒狀模板分子量5,000的PLA微粒的制備：原料采用：聚乳酸(分子量5,000)，其它步驟同棒狀模板分子量50,000的PLA微粒的制備。

棒狀模板分子量10,000的PLA微粒的制備：原料采用：聚乳酸(分子量1萬)，其它步驟同棒狀模板分子量50,000的PLA微粒的制備。

掃描電鏡下拍照，見圖2。

棒狀模板分子量50,000、10,000、5,000的PLLA微粒的制備，參見棒狀模板PLA微粒的制備。掃描電鏡下拍照，見圖3。

上述棒狀模板乳酸基聚合物微粒的制備實(shí)施例是為了使本領(lǐng)域的技術(shù)人員能夠更好地理解本發(fā)明，但并不對本發(fā)明作任何限制，用其它方法制備的上述微粒都可以用于本發(fā)明。

實(shí)施例3

一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊的制備方法，包括如下步驟：

將濃度為2mg/mL PAH(分子量17,500)溶液和棒狀模板PLGA微粒(分子量5,000)混合，得混合液一，使棒狀模板微粒在混合液一中的濃度為10⁸/mL；所述PAH溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第一種微粒；將第一種微粒與濃度為2mg/mL的PSS(分子量80,000)溶液混合，得混合液二，混合液二的體積與混合液一的體積相等，所述PSS溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第二種微粒；

(2)重復(fù)步驟(1)1次；

(3)向步驟(2)獲得的微粒中加入質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液進(jìn)行交聯(lián)，離心，水洗，得到最終微粒；用體積比為1:1的丙酮和N-甲基吡咯烷酮混合液溶解最終微粒內(nèi)部的PLGA，再水洗得到殼層可控的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊。

質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液與步驟(1)中的混合液一的體積比為1：1。

本實(shí)施例步驟(2)中重復(fù)的次數(shù)用3、7、15次替代本實(shí)施例的1次，其它同本實(shí)施例，制備殼層可控的棒狀微囊懸液。

將上述殼層可控的棒狀微囊懸液滴在硅片上自然干燥，掃描電鏡下拍照，見圖4。

圖4中的(a)N-(PAH/PSS)₂為步驟(2)重復(fù)1次；

(b)N-(PAH/PSS)₄為步驟(2)重復(fù)3次；

(c)N-(PAH/PSS)₈為步驟(2)重復(fù)7次；

(d)N-(PAH/PSS)₁₆為步驟(2)重復(fù)15次。

實(shí)施例4

一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊的制備方法，包括如下步驟：

將濃度為2mg/mL PAH(分子量15,000)溶液和棒狀模板PLLA微粒(分子量10,000)混合，得混合液一，使棒狀模板微粒在混合液一中的濃度為10⁶/mL；所述PAH溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合120min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第一種微粒；將第一種微粒與濃度為2mg/mL的PSS(分子量70,000)溶液混合，得混合液二，混合液二的體積與混合液一的體積相等，所述PSS溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合120min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第二種微粒；

(2)重復(fù)步驟(1)2次；

(3)向步驟(2)獲得的微粒中加入質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液進(jìn)行交聯(lián)，離心，水洗，得到最終微粒；用體積比為1:1的丙酮和N-甲基吡咯烷酮混合液溶解最終微粒內(nèi)部的PLLA，再水洗得到殼層可控的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊懸液。

質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液與步驟(1)中的混合液一的體積比為1:1。

本實(shí)施例步驟(2)中重復(fù)的次數(shù)用3、4次替代本實(shí)施例的2次，其它同本實(shí)施例，制備殼層可控的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊懸液。

將上述殼層可控的棒狀微囊懸液滴在硅片上自然干燥，掃描電鏡下拍照，見圖5。

本實(shí)施例利用帶相反電荷的聚合物交替沉積于PLGA和PLA上，溶解模板最終形成微囊，因此其他尺度的PLGA、PLA微粒，例如：在分子量為5000-50000的任意微粒同樣可以作為模板制備不同尺寸的棒狀微囊。

實(shí)施例5

一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊的制備方法，包括如下步驟：

(1)將濃度為2mg/mL PAH(分子量17,500)溶液和棒狀模板PLGA微粒(分子量5,000)混合，得混合液一，使棒狀模板微粒在混合液一中的濃度為10⁸/mL；所述PAH溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第一種微粒；將第一種微粒與濃度為2mg/mL的PSS(分子量1,000,000)溶液混合，得混合液二，混合液二的體積與混合液一的體積相等，所述PSS溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第二種微粒；

(2)重復(fù)步驟(1)1次；

(3)向步驟(2)獲得的微粒中加入質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液進(jìn)行交聯(lián)，離心，水洗，得到最終微粒；用體積比為1:1的丙酮和N-甲基吡咯烷酮混合液溶解最終微粒內(nèi)部的PLGA，再水洗得到殼層可控的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊。

質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液與步驟(1)中的混合液一的體積比為1:1。

實(shí)施例6

一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊的制備方法，包括如下步驟：

(1)將濃度為2mg/mL PAH(分子量900,000)溶液和棒狀模板PLGA微粒(分子量5,000)混合，得混合液一，使棒狀模板微粒在混合液一中的濃度為10⁸/mL；所述PAH溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第一種微粒；將第一種微粒與濃度為2mg/mL的PSS(分子量80,000)溶液混合，得混合液二，混合液二的體積與混合液一的體積相等，所述PSS溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第二種微粒；

(2)重復(fù)步驟(1)1次；

(3)向步驟(2)獲得的微粒中加入質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液進(jìn)行交聯(lián)，離心，水洗，得到最終微粒；用體積比為1:1的丙酮和N-甲基吡咯烷酮混合液溶解最終微粒內(nèi)部的PLGA，再水洗得到殼層可控的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊。

質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液與步驟(1)中的混合液一的體積比為1:1。

實(shí)施例7

一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊在制備載藥棒狀微囊中的應(yīng)用

將實(shí)施例3中制備的棒狀微囊(N-(PAH/PSS)₈)置于pH＝10的500kDa葡聚糖水溶液(2mg/mL)中，共混1小時，再將pH調(diào)至7，離心水洗，激光共聚焦顯微鏡觀察(圖6a)。

將實(shí)施例3中制備的棒狀微囊(N-(PAH/PSS)₈)置于pH＝4的250kDa葡聚糖水溶液(2mg/mL)中，共混1小時，再將pH調(diào)至7，離心水洗，激光共聚焦顯微鏡觀察(圖6b)。

由于本領(lǐng)域公知，模型藥葡聚糖是多糖的代表，葡聚糖能包載于棒狀微囊中，因此，其他多糖也能包載于棒狀微囊中。

實(shí)施例8

一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊的制備方法，包括如下步驟：

(1)將濃度為2mg/mL PAH(分子量17,500)溶液和棒狀模板分子量5,000的PLGA微?；旌?，得混合液一，使棒狀模板微粒在混合液一中的濃度為10⁸/mL；所述PAH溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第一種微粒；將第一種微粒與濃度為2mg/mL的PSS(分子量80,000)溶液混合，得混合液二，混合液二的體積與混合液一的體積相等，所述PSS溶液的溶劑為0.5M的NaCl水溶液；旋轉(zhuǎn)混合30min，離心，除去上清液，0.5M的NaCl水溶液洗，離心，得到第二種微粒；

(2)用FITC-PAH(分子量15,000)替代步驟(1)中的PAH，其它同步驟(1)；

(3)向步驟(2)獲得的微粒中加入質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液進(jìn)行交聯(lián)，離心，水洗，得到最終微粒；用體積比為1:1的丙酮和N-甲基吡咯烷酮混合液溶解最終微粒內(nèi)部的PLGA，再水洗得到殼層可控的乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊，用N-(PAH/PSS)(FITC-PAH/PSS)表示(簡稱a)

質(zhì)量濃度2％戊二醛水溶液與步驟(1)中的混合液一的體積比為1:1。

步驟(2)為在本實(shí)施例步驟(2)之后再重復(fù)步驟(1)2次、4次，替代本實(shí)施例的步驟(2)，其它其它同本實(shí)施例，制備殼層可控的棒狀微囊懸液分別用

N-(PAH/PSS)(FITC-PAH/PSS)(PAH/PSS)₂(簡稱b)

N-(PAH/PSS)(FITC-PAH/PSS)(PAH/PSS)₄(簡稱c)

實(shí)施例9

一種乳酸基聚合物微粒為模板的棒狀微囊在調(diào)節(jié)細(xì)胞攝取中的應(yīng)用

將實(shí)施例8制備的(N-(PAH/PSS)(FITC-PAH/PSS)、N-(PAH/PSS)(FITC-PAH/PSS)(PAH/PSS)₂和N-(PAH/PSS)(FITC-PAH/PSS)(PAH/PSS)₄)，分別與RAW264.7細(xì)胞共孵育1h，細(xì)胞與微囊的個數(shù)比例為1:5，PBS洗兩次，加胰酶消化，吹打成單細(xì)胞懸液，流式細(xì)胞術(shù)檢測FITC陽性細(xì)胞比例(圖7)，隨著層數(shù)的增多，陽性細(xì)胞增加，推測微囊的厚度可以調(diào)節(jié)細(xì)胞攝取，以LbL法改變微囊的層數(shù)進(jìn)而調(diào)節(jié)細(xì)胞的攝取行為，這類微囊類載體在生物醫(yī)藥領(lǐng)域有潛在的應(yīng)用價值。