本發(fā)明涉及中醫(yī)藥尤其是苗藥技術領域，具體涉及一種治療急性軟組織損傷的中藥酊劑的制備方法。

背景技術：

急性軟組織損傷在中醫(yī)屬“筋傷”的范疇，是骨傷科最常見的疾病。臨床主要癥狀為局部的瘀腫、疼痛、畸形和功能障礙。中醫(yī)認為“氣傷痛、血傷腫”，明確指出損傷之證多傷及氣血，血離脈道，瘀血凝結，血瘀氣滯，氣血運行受阻，出現(xiàn)局部青紫、腫痛、活動障礙。此病雖不危及生命，但卻給患者的生活和健康以及工作帶來嚴重的影響，需要我們及時地進行有效的治療。

對于本類疾病的治療，西醫(yī)尚無特效的治療方法，而中醫(yī)及民族醫(yī)藥外治方法較多，療效較好且安全，在臨床中得到廣泛的應用。療效學研究已經(jīng)證明中藥在治療急性軟組織損傷所導致的疼痛、腫脹，關節(jié)功能障礙方面有明顯的效果，且外用方法可以直達病所，通過皮膚為媒介吸收藥物，使藥物作用于損傷局部，迅速減輕局部炎癥水腫，達到消除炎癥、緩解疼痛的效果?，F(xiàn)代的藥理學研究也表明了中藥在抗炎消腫、對抗致炎因子、增加痛閾值、改善微循環(huán)等多方面有著明顯的作用。

目前治療急性軟組織損傷的中成藥主要有：三七活血膏、云南白藥酊、展筋酊、消痛酊劑、花紅消腫止痛酊、復方紅花酚等。這些藥物都經(jīng)過多年的臨床應用，具有各自的特點和療效，然而，如何在這些現(xiàn)有藥物的基礎上進一步開發(fā)出新的具有更好效果的治療急性軟組織損傷的藥物，依然是廣大醫(yī)藥領域學者專家們面臨的一個技術難題。

貴州中草藥資源豐富，苗藥為具有貴州特色的民族藥物。苗醫(yī)是中國民族醫(yī)藥的重要組成部分，至今已經(jīng)有三千多年的歷史，尤以其內(nèi)病外治的療法聞名中外。在苗醫(yī)的理論體系中，損傷的的病機是一個人身體過于疲勞，無法抵御過量的負荷，導致人體的氣血、經(jīng)絡的運動不正常，產(chǎn)生疼痛不適的癥狀。苗醫(yī)治病的過程就是要采用各種手段使人體氣血、經(jīng)絡疏通，達到疼痛消除，各個器官功能恢復正常的目的。因此，利用貴州苗藥為原料，研發(fā)出一種治療急性軟組織的中藥制劑，是十分有意義的。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種用于治療急性軟組織損傷的苗藥傷科止痛液的制備方法，使其具有抗炎消腫、對抗致炎因子、止血、鎮(zhèn)痛、改善微循環(huán)、增強免疫、促進修復等各方面的功效，而且也促進了貴州苗藥這種民族藥物的應用和推廣。

本發(fā)明的技術方案是這樣的：

本發(fā)明的苗藥傷科止痛液，它由如下重量份數(shù)的原料藥制成：水冬瓜根皮9份，透骨香6份，伸筋草6份，黃芩6份，黃連6份，生梔子6份，黃柏6份，煅石膏6份，紫草6份，天花粉6份，醋乳香3份，醋沒藥3份，姜黃3份，醋延胡索3份，當歸3份，紅花3份，澤蘭3份，川芎3份，燙骨碎補3份，生大黃3份，續(xù)斷3份，冰片2份，薄荷腦2份。

其制備方法是這樣的：以上23味，除冰片、薄荷腦外，其余混合裝紗布袋置容器中，加入60％乙醇，密封冷浸2次，第一次加5.6倍量，第二次加4倍量，每次冷浸7天，每日攪拌一次，過濾，棄渣。兩次浸液合并，混勻；取冰片2g、薄荷腦2g，混合，加入少量乙醇使溶解，緩緩加入上述藥液中，加60％乙醇至1000ml，攪勻，分裝，即得。

本發(fā)明在劑型方面充分吸收了傳統(tǒng)的苗醫(yī)外治法的優(yōu)點，以苗醫(yī)傷科良藥水冬瓜根皮、透骨香為主要組成的外用酊劑。方中水冬瓜根皮、透骨香為君藥，水冬瓜根皮別名大接骨丹、嘎炯令豆得，《苗族醫(yī)學》曰：水冬瓜根皮性熱、味辛、微苦、屬熱藥，入冷經(jīng)?；钛?，舒筋接骨?！吨腥A本草》記載本藥苦，涼，功效清熱解毒，活血散瘀，是治療跌打損傷及外傷出血的良藥。透骨香別名豆珍空、都透松，《苗族醫(yī)學》曰：透骨香性熱，味麻、辣，屬熱藥，入冷經(jīng)?；钛觯娼钕[，止痛，祛風濕。《貴州草藥》記載該藥辛，溫，功效舒筋活血，主要治療跌打損傷。伸筋草舒筋活血，黃連、黃芩、生梔子涼血止血，黃柏瀉火解毒，煅石膏清熱收濕、斂瘡生肌，紫草涼血活血、解毒，天花粉清熱、消腫排膿，共為臣藥，川芎、醋乳香、醋沒藥活血伸筋、散瘀止痛，醋延胡索、姜黃、當歸活血行氣、通絡止痛，紅花、澤蘭活血祛瘀、消腫止痛，燙骨碎補活血止痛、續(xù)筋接骨，生大黃涼血、逐瘀通經(jīng)，續(xù)斷強筋骨、調(diào)血脈、續(xù)折傷共為佐藥；冰片、薄荷腦芳香開竅，可使局部血管擴張，血液循環(huán)加速，促進病理產(chǎn)物和炎癥滲出物的吸收，并使病態(tài)組織(如結疤、粘連等)軟化和分解，緩和骨骼、肌肉經(jīng)脈痙攣性疼痛，共為使藥；用酊劑為溶媒，一方面酒精有活血化瘀之效，另一方面促進藥物有效成分溶出及皮膚的滲透能力。

以上諸藥合用，共收活血化瘀，消腫止痛之功。苗藥傷科止痛液組成藥物分別具有抗炎消腫、對抗致炎因子、止血、鎮(zhèn)痛、改善微循環(huán)、增強免疫、促進修復等各方面的功效。

本發(fā)明根據(jù)各原料藥臨床應用及功能主治的特色，選擇各原料藥在本發(fā)明中的提取或制備方法如下：水冬瓜根皮、透骨香、伸筋草、黃芩、黃連、生梔子、黃柏、煅石膏、紫草、天花粉、醋乳香、醋沒藥、姜黃、醋延胡索、當歸、紅花、澤蘭、川芎、燙骨碎補、生大黃和續(xù)斷在本發(fā)明中用60％乙醇提??；冰片和薄荷腦在本發(fā)明中采用加入少量乙醇使溶解，緩緩滴加入藥液中的制備方法。

臨床觀察結果也表明，苗藥傷科止痛液在疼痛、腫脹、壓痛、瘀斑、功能障礙等方面具有良好的療效。中醫(yī)骨傷科治療急性軟組織損傷，外敷中藥是其特色，具有局部療效肯定，全身副作用少的特點，顯示出傳統(tǒng)醫(yī)學治療的優(yōu)勢。

附圖說明

圖1是本發(fā)明的工藝流程圖；

圖2是苗藥傷科止痛液中紅花薄層鑒別；

圖3是苗藥傷科止痛液中黃芩薄層鑒別；

圖4是苗藥傷科止痛液中大黃薄層鑒別。

具體實施方式

下面結合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步的詳細說明，但本發(fā)明的保護范圍不受具體實施例的任何限制，而是由權利要求加以限定。

實施例1：

1.處方組成：

2.功能主治：活血化瘀，消腫止痛。用于各種跌打損傷、軟組織損傷腫痛瘀血者。

3.用法用量：用時將藥水適量以棉墊或紗布浸濕敷或涂擦患處，一日2～3次。

4.基本工藝路線的確定：

本發(fā)明所選的藥味，除水冬瓜根皮、透骨香收載于《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》2003年版外，其余飲片均收載入2015版《中國藥典》一部，且基源穩(wěn)定，資源豐富。本實施例根據(jù)處方各味藥材有效成分及藥理研究資料綜合分析，將該品劑型定為酊劑，既起到局部理療的作用，又使藥液直達患處而起到活血化瘀、消腫止痛之功。在盡量保持原臨床用藥特色的前提下，將本品的工藝路線確定如下：除冰片、薄荷腦外，其余飲片→加60％乙醇→冷浸提2次，每次7天→濾過、合并濾液→加入冰片、薄荷腦(用適量乙醇溶解)→分裝。如圖1所示。

5.藥材前處理工藝研究

處方中中藥飲片均符合《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》2003年版及《中國藥典》2015版一部標準，由貴陽中醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院韓云霞主任藥師鑒定。其中：

水冬瓜根皮本品應符合《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》2003年版一部107頁水冬瓜根皮項規(guī)定。

透骨香 本品應符合《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》2003年版一部308頁透骨香項規(guī)定。

伸筋草 本品應符合《中國藥典》2015年版一部177頁伸筋草項規(guī)定。

黃連 本品應符合《中國藥典》2015年版一部303-305頁黃連項規(guī)定。

梔子 本品應符合《中國藥典》2015年版一部248頁梔子項規(guī)定。

黃柏 本品應符合《中國藥典》2015年版一部305-306頁黃柏項規(guī)定。

煅石膏 本品應符合《中國藥典》2015年版一部95頁煅石膏項規(guī)定。

黃芩 本品應符合《中國藥典》2015年版一部301-302頁黃芩項規(guī)定。

天花粉 本品應符合《中國藥典》2015年版一部56頁天花粉項規(guī)定。

紫草 本品應符合《中國藥典》2015年版一部340-341頁紫草項規(guī)定。

醋乳香 本品應符合《中國藥典》2015年版一部223頁醋乳香項規(guī)定。

醋沒藥 本品應符合《中國藥典》2015年版一部186-187頁醋沒藥項規(guī)定。

姜黃 本品應符合《中國藥典》2015年版一部264-265頁姜黃項規(guī)定。

當歸 本品應符合《中國藥典》2015年版一部133-134頁當歸項規(guī)定。

紅花 本品應符合《中國藥典》2015年版一部151頁紅花項規(guī)定。

澤蘭 本品應符合《中國藥典》2015年版一部228頁澤蘭項規(guī)定。

川芎 本品應符合《中國藥典》2015年版一部40-41頁川芎項規(guī)定。

醋延胡索 本品應符合《中國藥典》2015年版一部139-140頁醋延胡索項規(guī)定。

大黃 本品應符合《中國藥典》2015年版一部23-24頁大黃項規(guī)定。

續(xù)斷 本品應符合《中國藥典》2015年版一部一部329-330頁續(xù)斷項規(guī)定。

燙骨碎補 本品應符合《中國藥典》2015年版一部256頁燙骨碎補項規(guī)定。

冰片 本品應符合《中國藥典》2015年版一部146頁冰片項規(guī)定。

薄荷腦 本品應符合《中國藥典》2015年版一部420頁薄荷腦項規(guī)定。

6.工藝條件的篩選

6.1提取工藝研究

6.1.1藥材吸醇率的測定

按處方比例稱取藥材(薄荷腦、冰片除外)96g，加700ml的60％的乙醇浸泡，待藥材全部浸透后，濾出全部未被吸收的溶劑，求得吸醇率。結果見表1。

表1 藥材吸醇率試驗結果(n＝3)

由表1可知，藥材平均吸醇率為157.3％，為方便操作，以吸醇率為1.6倍計算，即藥材吸醇量為藥材重的1.6倍。因此首次醇提時應該多加藥材重量的1.6倍量的醇。

6.2.正交試驗優(yōu)選醇提條件

6.2.1正交試驗因素水平的選擇

影響醇提的主要因素有：醇濃度、加醇量、浸提次數(shù)、浸提時間等。本試驗以這4個因素為考察因素，各取3個水平，進行L₉(3⁴)正交試驗，篩選醇提工藝條件，因素水平表見表2。醇提正交試驗結果見表3，醇提正交試驗方差分析見表4。

表2 醇提正交因素水平表

6.2.2指標選擇

為了使工藝能充分反映藥物療效，并結合本發(fā)明藥物組成的特點及本發(fā)明的功能主治，以本發(fā)明中黃芩的有效成分黃芩苷濃度和黃芩苷含量(綜合評分分別為50和50)為評價指標對工藝進行綜合評價，優(yōu)選醇提條件。

6.2.3樣品制備

按處方量稱取藥材(薄荷腦、冰片除外)，共計96g，共9份，按L9(3 ⁴)正交試驗條件及醇提正交因素水平進行醇提，過濾，混合即得。

6.2.4試驗樣品中黃芩苷的測定

6.2.4.1儀器：Agilent 1260高效液相色譜儀；梅特勒-托利多AE電子分析天平(METTLER TOLEDO十萬分之一)；Ultimate XB-C₁₈色譜柱(250×4.6mm 5μm)；SK8210HP型超聲波清洗機(上?？茖С晝x器有限公司)；DZF-6210真空干燥箱(上海齊欣科學儀器有限公司)；AE240微量分析天平(上海梅特勒儀器有限公司)。

試藥：色譜甲醇(江蘇漢邦科技有限公司)；水(娃哈哈飲用純凈水)，貴陽娃哈哈食品有限公司制造；磷酸(江蘇漢邦科技有限公司)；黃芩苷(中國藥品生物制品檢定所，批號:110715-201318，供含量測定用)；樣品(自制，試驗樣品)。

色譜條件與系統(tǒng)適應性試驗：色譜柱:Ultimate XB-C₁₈色譜柱(250×4.6mm 5μm)；甲醇-0.2％磷酸水溶液梯度洗脫：0～16min(47:53)，l7～24min(95:5)，25～30min(47:53)；檢測波長為280nm；柱溫30℃；流速為1ml/min。理論板數(shù)按黃芩苷峰計算應不低于2500。

6.2.4.2對照品溶液的制備：精密稱取在60℃減壓干燥4小時的黃芩苷對照品0.01117g，置50ml量瓶中，用70％甲醇稀釋至刻度，搖勻；再精密量取5ml置10ml容量瓶中，用70％甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成含黃芩苷104.2161μg/ml的對照品溶液。

6.2.4.3供試品溶液的制備：取試驗樣品10ml，精密量取，置50ml量瓶中，加70％乙醇約30ml，加熱回流提取30分鐘，放冷，濾過，濾液轉移至50ml量瓶中，加70％乙醇定容，用0.45μm微孔濾膜過濾，即得。2.4.4含量測量精密吸取對照品溶液及供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，記錄，計算含量，結果見表3。

表3醇提工藝條件L₉(3⁴)正交試驗安排及結果

注：黃芩苷濃度和黃芩苷質量的權重系數(shù)為0.5

表4方差分析表

F_0.01(1,2)＝99.00 F_0.05(1,2)＝19.00

以樣品溶液中黃芩苷的濃度和黃芩苷含量作為評價指標進行綜合分析，由表3正交試驗結果直觀分析和表4方差分析表可知，因素A(醇濃度)有顯著性差異，且因素A中A1>A2>A3，則應選擇A1為醇提工藝條件參數(shù)；其他B(乙醇量)、C(浸泡時間)、D(浸泡次數(shù))均無顯著性差異，但結合大生產(chǎn)實際，為了降低了生產(chǎn)成本，無顯著性差異的B、C、D因素應選擇B1、C1、D2為醇提工藝條件，故選擇醇提工藝為A1B1C1D2，即浸提2次，第1次加5.6倍量乙醇(扣除藥材吸醇率)，第2次加4倍量乙醇，每次提取7天。

6.2.5優(yōu)選醇提工藝條件驗證

根據(jù)優(yōu)選的最佳醇提工藝，驗證三批，驗證試驗結果見表5。

表5醇提正交驗證結果表

由上表結果可知，驗證試驗結果與正交結果相一致，說明醇提工藝條件基本穩(wěn)定，可作為醇提工藝條件。

7.制劑成型工藝研究

7.1.劑型選擇依據(jù)

本發(fā)明由水冬瓜根皮、透骨香、黃芩、黃柏等藥材組成，本方是貴陽中醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院骨二科長期臨床實踐的經(jīng)驗方。原工藝生產(chǎn)可行，臨床療效確切，但原有標準停留在定性鑒別上，標準粗糙。我院從2009年起，就開始對苗藥傷科止痛液進行臨床觀察和研究，其間進行大樣本的臨床觀察研究，將該品研制為酊劑，具有使用方便，起效快等特點，既起到局部理療的作用，又使藥液直達患處而起到活血化瘀、消腫止痛之功。在沿用原工藝路線基礎上，并對原工藝進行驗證、細化，同時對主要有效成分進行定性、定量控制，提高了質量標準，以達到療效好的目的，因此，我們認為選擇酊劑是合理的。

7.2.不同批次苗藥傷科止痛液乙醇量測定，見表6。

表6不同批次苗藥傷科止痛液乙醇量實驗及數(shù)據(jù)

結果：通過對苗藥傷科止痛液8個批次的的樣品進行乙醇量的測定，結果表明：其平均乙醇量為51.1％，根據(jù)臨床使用劑量、使用時的難易程度，在本發(fā)明中苗藥傷科止痛液的乙醇量為46.0％—56.0％。

當然，以上只是發(fā)明的具體應用范例，本發(fā)明還有其他的實施方式，凡采用等同替換或等效變換形成的技術方案，均落在本發(fā)明所要求的保護范圍之內(nèi)。