本發(fā)明涉及農(nóng)作物深加工領(lǐng)域，尤其涉及一種木瓜葉氨基酸的提取方法。

背景技術(shù)：

近年來美國(guó)和日本研究人員發(fā)現(xiàn)，木瓜葉提取物具有抗癌作用，對(duì)一系列實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的人類腫瘤細(xì)胞有效，其中包括子宮頸癌、乳腺癌、肝癌、肺癌、胰腺癌等，提取物濃度越高，抗癌效果越明顯，但其抗癌原理和發(fā)揮抗癌作用的具體成分還有待進(jìn)一步研究。然而，國(guó)內(nèi)外對(duì)木瓜植物的研究主要集中在木瓜果實(shí)，對(duì)木瓜葉的功能性成分的研究少有報(bào)道。

我國(guó)木瓜廣有栽培，但人們僅對(duì)木瓜的保健價(jià)值有所認(rèn)識(shí)，而對(duì)于具有重要藥用價(jià)值的莖葉沒有重視，果實(shí)采收后莖葉大多直接丟棄，造成極大浪費(fèi)，因此對(duì)木瓜葉的開發(fā)利用十分必要。本發(fā)明以木瓜葉為原料，對(duì)其中的氨基酸進(jìn)行提取，并采用HPLC 法分析木瓜葉氨基酸的組成，以期為木瓜葉功能性成分的研究開發(fā)提供參考。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供了一種木瓜葉氨基酸的提取方法，其特征在于，是通過以下步驟實(shí)現(xiàn)的：

1) 粉碎浸泡：將木瓜葉清洗干凈，打磨成粗粉并用清水常溫下浸泡12-16 小時(shí)，得木瓜葉粗粉浸泡液，將木瓜葉磨成粉并浸泡利于將淀粉等物質(zhì)浸泡出來，便于后邊步驟的提?。?/p>

2) 過濾濃縮：將步驟1) 中得到的木瓜葉粗粉浸泡液進(jìn)行二次過濾處理，取過濾液置于濃縮裝置中進(jìn)行減壓濃縮，進(jìn)行二次處理有益將木瓜葉浸泡液中的雜質(zhì)給過濾掉，將壓強(qiáng)控制在一定范圍內(nèi)將木瓜葉中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很好地濃縮在濃縮液中；

3) 醇浸：在步驟2) 中的濃縮液加入質(zhì)量百分比濃度為78％ -80％的乙醇進(jìn)行攪拌處理，然后進(jìn)行一次冷浸處理，冷浸時(shí)間為40-60 分鐘，然后取上清液再加入質(zhì)量百分比為80％ -85％的乙醇進(jìn)行二次冷浸處理，冷浸時(shí)間為40-60 分鐘，冷浸醇稀為了讓濃縮液中的必需氨基酸成分完成稀釋在乙醇溶液中；

4) 提?。簩⒉襟E3) 中的醇浸液置于回流裝置中先進(jìn)行乙醇回流處理，然后再進(jìn)行沸水回流提取，將醇浸液先進(jìn)行醇提取再進(jìn)行水提取，步驟精準(zhǔn)，提取充分；5) 交換洗脫：將步驟4) 中的回流提取液置于強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂中進(jìn)行交換處理然后用堿性溶液進(jìn)行洗脫，收集到的液體為從木瓜葉中提取的必需氨基酸，在酸性條件下，帶正電荷的氨基與樹枝上的-SO3H 交換，可以將氨基酸交換出來。

6)成品：置提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重。

優(yōu)選的是，所述的一種木瓜葉氨基酸的提取方法，其特征在于，步驟1) 中粗粉的粒徑為30-50目，粗粉與清水的料液比為1:10-1:15。

優(yōu)選的是，所述的一種木瓜葉氨基酸的提取方法，其特征在于，步驟2) 中濃縮的壓力控制在50-60kpa。

優(yōu)選的是，所述的一種木瓜葉氨基酸的提取方法，其特征在于，步驟3) 中一次冷浸處理中濃縮液和加入乙醇的比例為1:10-1:20，二次冷浸處理中濃縮液和加入乙醇的比例為1:8-1:15，冷浸的溫度控制在15-20℃。

優(yōu)選的是，所述的一種木瓜葉氨基酸的提取方法，其特征在于，步驟4) 中乙醇回流提取中乙醇的濃度為78％-90％。

本發(fā)明的有益效果，通過本發(fā)明的方法步驟將木瓜葉磨成粉并浸泡利于將淀粉等物質(zhì)浸泡出來，進(jìn)行二次處理有益將木瓜葉浸泡液中的雜質(zhì)給過濾掉，將壓強(qiáng)控制在一定范圍內(nèi)將木瓜葉中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很好地濃縮在濃縮液中，然后經(jīng)過冷浸醇稀為了讓濃縮液中的必需氨基酸成分完成稀釋在乙醇溶液中進(jìn)行提取，步驟精準(zhǔn)，不僅能夠?qū)⒛竟先~中的氨基酸成分給提取出來，而且提取充分，具有很廣闊的發(fā)展前景。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說明，但絕對(duì)不是對(duì)本發(fā)明范圍的限制。下面參照實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)闡述本發(fā)明，但是本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明并不限于這些實(shí)施例以及使用的制備方法。而且，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的描述可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行等同替換、組合、改良或修飾，這些都包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。

實(shí)施例1

1) 粉碎浸泡：取500克木瓜葉清洗干凈，打磨成粗粉，粗粉的粒徑為30-50 目，加入清水，粗粉與清水的料液比為1:10，常溫下浸泡12 小時(shí)，得木瓜葉粗粉浸泡液，將木瓜葉磨成粉并浸泡利于將淀粉等物質(zhì)浸泡出來，便于后邊步驟的提??；

2) 過濾濃縮：將步驟1) 中得到的木瓜葉粗粉浸泡液進(jìn)行二次過濾處理，取過濾液置于濃縮裝置中進(jìn)行減壓濃縮，壓強(qiáng)控制在50kpa，進(jìn)行二次處理有益將木瓜葉浸泡液中的雜質(zhì)給過濾掉，將壓強(qiáng)控制在一定范圍內(nèi)將木瓜葉中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)很好地濃縮在濃縮液中；

3) 醇浸：在步驟2) 中的濃縮液加入質(zhì)量百分比濃度為78％的乙醇進(jìn)行攪拌處理，冷浸處理中濃縮液和加入乙醇的比例為1:10，冷浸的溫度控制在15℃，冷浸時(shí)間為60 分鐘，然后取上清液再加入質(zhì)量百分比為85％的乙醇進(jìn)行二次冷浸處理，二次冷浸處理中濃縮液和加入乙醇的比例為1:15，冷浸時(shí)間為60分鐘，冷浸醇稀為了讓濃縮液中的必需氨基酸成分完成稀釋在乙醇溶液中；

4) 提?。簩⒉襟E3) 中的醇浸液置于回流裝置中先進(jìn)行乙醇回流處理，然后再進(jìn)行沸水回流提取，乙醇回流提取中乙醇的濃度為78％，將醇浸液先進(jìn)行醇提取再進(jìn)行水提取，步驟精準(zhǔn)，提取充分；

5) 交換洗脫：將步驟4) 中的回流提取液置于強(qiáng)酸性陽離子交換樹脂中進(jìn)行交換處理然后用堿性溶液進(jìn)行洗脫，收集到的液體為從木瓜葉中提取的必需氨基酸，在酸性條件下，帶正電荷的氨基與樹枝上的-SO3H 交換，可以將氨基酸交換出來；

6)成品：置提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重，得到木瓜葉氨基酸成品。

本發(fā)明得到的木瓜葉氨基酸成品檢測(cè)結(jié)果如下：

表1 木瓜葉中氨基酸的組成及含量

本發(fā)明氨基酸提取率3.67%，HPLC分析結(jié)果表明，木瓜葉中含有13種氨基酸，總含量為4.66 mg/g，其中必需氨基酸7種，占總氨基酸含量的22.96%；非必需氨基酸6種，占總氨基酸含量的77.04%。在各種氨基酸中，精氨酸含量最多，占總氨基酸含量的43.78%； 其次是蘇氨酸和丙氨酸。

盡管本發(fā)明的實(shí)施方案已公開如上，但其并不僅僅限于說明書和實(shí)施方式中所列運(yùn)用，它完全可以被適用于各種適合本發(fā)明的領(lǐng)域，對(duì)于熟悉本領(lǐng)域的人員而言，可容易地實(shí)現(xiàn)另外的修改，因此在不背離權(quán)利要求及等同范圍所限定的一般概念下，本發(fā)明并不限于特定的細(xì)節(jié)和這里示出與描述的實(shí)施例。