亚洲成年人黄色一级片,日本香港三级亚洲三级,黄色成人小视频,国产青草视频,国产一区二区久久精品,91在线免费公开视频,成年轻人网站色直接看

從積雪草中提取積雪草總皂苷的方法與流程

文檔序號:11897286閱讀:1485來源:國知局

本發(fā)明屬于生物提取技術領域,具體涉及一種從積雪草中提取積雪草總皂苷的方法。



背景技術:

積雪草(Centella asiatica(L.)Urban)為傘形科積雪草樹植物,因其葉子酷似馬蹄狀或半個銅錢,所以又名馬蹄草、連錢草等,民間也有地方稱其為胡薄荷、地錢草等。積雪草在許多國家和地區(qū)的傳統(tǒng)醫(yī)藥領域中的應用歷史悠久,我國中醫(yī)中藥對積雪草的內(nèi)服和外用已有兩千年歷史,最早被《神農(nóng)本草經(jīng)》一書所收載。據(jù)《本草綱目》記載,積雪草味苦、辛,性寒,無毒,歸肝、脾、腎、胃經(jīng),其功效為活血、消腫止痛,并有清熱解毒、利尿等。積雪草的化學成分主要有三萜類、黃酮類、多炔烯類和揮發(fā)油類等。三萜類主要有三萜皂苷類,如積雪草苷、羥基積雪草苷等,和三萜酸類,如積雪草酸、羥基積雪草酸等。積雪草的化學成分中,三萜類皂苷是研究最早,生物學活性研究最深入的一大類組分。積雪草總皂苷主要由積雪草苷和羥基積雪草苷組成,它們屬于烏蘇烷型的五環(huán)三萜皂苷,是積雪草藥理活性的最主要成分。積雪草總皂苷一般先用溶劑法提取,然后采用平均孔徑較小的大孔樹脂進行純化,如HPD-100(平均孔徑為8.5~9.0nm)、HPD-300(平均孔徑為5.0~5.5nm),由于大孔樹脂對目標成分的吸附和篩選針對性不是很強,在吸附過程中很多雜質(zhì)會吸附到樹脂孔隙中,而解吸時,由于孔隙較小,目標成分并不能解吸完全,因此,純化后的積雪草總皂苷的收率和純度均不高。



技術實現(xiàn)要素:

本發(fā)明解決的技術問題是提供一種從積雪草中提取積雪草總皂苷的方法,該方法提取得到的積雪草總皂苷收率大,純度高。

本發(fā)明提供的技術方案是提供一種從積雪草中提取積雪草總皂苷的方法,包括以下步驟:

1)將積雪草粉碎,用60~70v%乙醇溶液回流提取,將提取液過濾,濾液回收溶劑,再加40~50℃水溶解,得到粗提液;

2)往粗提液加入稀土鹽混合,攪勻,得到混合液;

3)將混合液上X-5型號大孔樹脂柱,先水洗至無色,然后用體積濃度為50~70v%乙醇洗脫,收集乙醇洗脫液,將洗脫液回收乙醇,干燥,得到積雪草總皂苷。

步驟1)中,乙醇的用量為積雪草重量的10~20倍,回流提取1~3次,每次1~3h。

體積濃度為60~70%的乙醇可充分溶解積雪草中的三萜類物質(zhì),包括三萜類皂苷和三萜酸類物質(zhì)。積雪草皂苷由于它們的分子中往往結(jié)合有多數(shù)糖分子,羥基數(shù)目多,能表現(xiàn)出一定的親水性,但是親水性不強,微溶于水中,而三萜酸類極性較小,不能溶于水中。因此采用40~50℃溫水可幫助積雪草皂苷溶解,積雪草酸類物質(zhì)不溶于水中,以達到去除三萜酸類成分的目的。

步驟2)中,所述稀土鹽為稀土氯化物、稀土硫酸鹽或稀土硝酸鹽。稀土氯化物可以是氯化鑭、氯化鈰、氯化鐠、氯化釹、氯化釤、氯化銪、氯化釓、氯化鋱、氯化鏑、氯化鈥、氯化鉺、氯化銩、氯化鐿、氯化镥、氯化鈧和氯化釔;稀土硫酸鹽可以是硫酸鑭、硫酸鈰、硫酸鐠、硫酸釹、硫酸釤、硫酸銪、硫酸釓、硫酸鋱、硫酸鏑、硫酸鈥、硫酸鉺、硫酸銩、硫酸鐿、硫酸镥、硫酸鈧和硫酸釔;稀土硝酸鹽可以是硝酸鑭、硝酸鈰、硝酸鐠、硝酸釹、硝酸釤、硝酸銪、硝酸釓、硝酸鋱、硝酸鏑、硝酸鈥、硝酸鉺、硝酸銩、硝酸鐿、硝酸镥、硝酸鈧和硝酸釔。

稀土元素與積雪草總皂苷上羥基、羧基上的氧原子形成配位鍵和,形成化學親和力,根據(jù)軟硬酸堿理論,由于稀土是硬酸,積雪草總苷是軟堿,因此,兩者的結(jié)合不是特別穩(wěn)固。

稀土鹽的用量為粗提液總重的0.1~0.5%時,稀土元素可與目標成分充分配位。

步驟3)中,X-5型號大孔樹脂為非極性樹脂,粒徑為0.3~1.25mm,比表面積為500~600m2/g,平均孔徑為29~30nm。其孔徑遠遠大于積雪草總皂苷的分子粒徑。而稀土的配位數(shù)較大,與其進行配位鍵和的含氧官能團數(shù)目往往達不到其最高配位數(shù),因此稀土還會與大孔樹脂中的C產(chǎn)生交聯(lián),以達到吸附的效果。

為了保證稀土元素與大孔樹脂的交聯(lián),混合液的上柱速度越小,效果越好,經(jīng)申請人大量實驗,混合液上柱速度為0.5~0.8BV/h,交聯(lián)效果最好。

由于稀土元素與積雪草總皂苷的結(jié)合十分不穩(wěn)固,而積雪草總皂苷與乙醇的親和力極強,采用體積濃度為50~70%乙醇可將積雪草總皂苷順利從樹脂柱中洗脫下來,洗脫劑用量為1~2BV,洗脫速度為2~2.5BV/h。

與現(xiàn)有技術相比,本方法針對目標成分進行吸附和解吸附,提取的積雪草總皂苷收率高達97%以上,純度高達99.5%以上

具體實施方式

以下具體實施例對本發(fā)明作進一步闡述,但不作為對本發(fā)明的限定。

以下百分數(shù)為體積百分數(shù)。

實施例1

1)將積雪草粉碎,加入積雪草總重10倍的60%乙醇溶液回流提取1次,每次1h,將提取液過濾,將濾液回收溶劑,再加40℃水溶解,除去濾渣,即得粗提液;

2)往粗提液加入其重量0.1%的氯化鑭混合,攪勻,得到混合液;

3)將混合液上X-5型號大孔樹脂柱,上柱速度為0.5BV/h,先水洗至無色,然后用體積濃度為50%乙醇洗脫,乙醇的用量為1BV,洗脫速度為2BV/h,收集乙醇洗脫液,回收乙醇,干燥,得到積雪草總皂苷。

經(jīng)HLPC分析,積雪草總皂苷的回收率為97.24%以上,純度高達99.50%以上。

實施例2

1)將積雪草粉碎,加入積雪草總重20倍的70%乙醇溶液回流提取3次,每次3h,將提取液合并,過濾,將濾液回收溶劑,再加50℃水溶解,除去濾渣,即得粗提液;

2)往粗提液加入其重量0.5%的硫酸鈰混合,攪勻,得到混合液;

3)將混合液上X-5型號大孔樹脂柱,上柱速度為0.8BV/h,先水洗至無色,然后用體積濃度為70%乙醇洗脫,乙醇的用量為2BV,洗脫速度為2.5BV/h,收集乙醇洗脫液,回收乙醇,干燥,得到積雪草總皂苷。

經(jīng)HLPC分析,積雪草總皂苷的回收率為97.33%以上,純度高達99.58%以上。

實施例3

1)將積雪草粉碎,加入積雪草總重15倍的65%乙醇溶液回流提取2次,每次2h,將提取液合并,過濾,將濾液回收溶劑,再加45℃水溶解,除去濾渣,即得粗提液;

2)往粗提液加入其重量0.3%的硝酸鐠混合,攪勻,得到混合液;

3)將混合液上X-5型號大孔樹脂柱,上柱速度為0.6BV/h,先水洗至無色,然后用體積濃度為60%乙醇洗脫,乙醇的用量為1.5BV,洗脫速度為2.5BV/h,收集乙醇洗脫液,回收乙醇,干燥,得到積雪草總皂苷。

經(jīng)HLPC分析,積雪草總皂苷的回收率為97.18%以上,純度高達99.55%以上。

實施例4

1)將積雪草粉碎,加入積雪草總重10倍的70%乙醇溶液回流提取3次,每次1h,將提取液合并,過濾,將濾液回收溶劑,再加50℃水溶解,除去濾渣,即得粗提液;

2)往粗提液加入其重量0.1%的氯化鉺混合,攪勻,得到混合液;

3)將混合液上X-5型號大孔樹脂柱,上柱速度為0.8BV/h,先水洗至無色,然后用體積濃度為50%乙醇洗脫,乙醇的用量為2BV,洗脫速度為2BV/h,收集乙醇洗脫液,回收乙醇,干燥,得到積雪草總皂苷。

經(jīng)HLPC分析,積雪草總皂苷的回收率為97.09%以上,純度高達99.63%以上。

當前第1頁1 2 3 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1