本發(fā)明屬于醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種如意牌氣血雙補(bǔ)丸的新用途。
背景技術(shù)：
：近年來(lái)，隨著人們生活水平的改善，飲食不斷去粗取精，冠心病已成為一種常見的心血管疾病，多見于中老年人，它已成為嚴(yán)重危害人類身心健康的主要疾病之一，主要是冠狀動(dòng)脈血管發(fā)生動(dòng)脈粥樣硬化病變而引起血管腔狹窄或阻塞，造成心肌缺血、缺氧或壞死而導(dǎo)致的心臟病。世界衛(wèi)生組織將冠心病分為5大類：無(wú)癥狀心肌缺血(隱匿性冠心病)、心絞痛、心肌梗死、缺血性心力衰竭(缺血性心臟病)和猝死5種臨床類型，臨床中常常分為穩(wěn)定性冠心病和急性冠狀動(dòng)脈綜合征。目前，主要通過以下方式來(lái)治療冠心病：1、生活習(xí)慣改變：戒煙限酒，低脂低鹽飲食，適當(dāng)體育鍛煉，控制體重等；2、藥物治療：抗血栓(抗血小板、抗凝)，減輕心肌氧耗(β受體阻滯劑)，緩解心絞痛(硝酸酯類)，調(diào)脂穩(wěn)定斑塊(他汀類調(diào)脂藥)；3、血運(yùn)重建治療：包括介入治療(血管內(nèi)球囊擴(kuò)張成形術(shù)和支架植入術(shù))和外科冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)。其中，藥物治療是所有治療的基礎(chǔ)，介入和外科手術(shù)治療后也要堅(jiān)持長(zhǎng)期的標(biāo)準(zhǔn)藥物治療。治療冠心病的藥物有中藥和西藥，但以西藥為主，中藥主要使用的是活血化瘀類藥物。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種如意牌氣血雙補(bǔ)丸的新用途，能夠用于治療冠心病。本發(fā)明的目的是提供了一種如意牌氣血雙補(bǔ)丸的新用途，具體是在治療冠心病藥物中的應(yīng)用，為冠心病領(lǐng)域提供了新的思路。優(yōu)選的，所述冠心病是指因氣虛血瘀引起的冠心病。中醫(yī)認(rèn)為冠心病的病位在心，是一種本虛表實(shí)、虛實(shí)夾雜的慢性病，氣滯、血瘀、痰濁、寒凝、正氣不足是其主要的發(fā)病因素，但心與肺、肝、脾、腎關(guān)系密切，四臟功能失調(diào)會(huì)影響到心主血脈之功能，導(dǎo)致氣血運(yùn)行不暢，不通則痛。目前，用于冠心病的主要是祛瘀、活血類中藥，以緩解疼痛，其他中藥應(yīng)用較少。如意牌氣血雙補(bǔ)丸是申請(qǐng)人研制生產(chǎn)的國(guó)藥準(zhǔn)字(Z37020471)OTC的藥品，由黃芪、當(dāng)歸等11味中藥組成，具有補(bǔ)氣養(yǎng)血的功效，主要用于氣虛血虧引起的少氣懶言，語(yǔ)言低微，面色萎黃，四肢無(wú)力形體消瘦，經(jīng)血不調(diào)。目前未見將其用于冠心病治療的報(bào)道。發(fā)明人在尋找冠心病治療藥物時(shí)，對(duì)如意牌氣血雙補(bǔ)丸的治療效果進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，如意牌氣血雙補(bǔ)丸對(duì)因氣虛血瘀引起的冠心病有一定療效，是一種很好的可行性藥物。上述如意牌氣血雙補(bǔ)丸由下列成分按質(zhì)量份數(shù)組成：制備方法是：取以上十一味藥材，粉碎成極細(xì)粉，過篩，混勻。每100g粉末加煉蜜80～110g制成小蜜丸，即得。上述配方中，黨參、白術(shù)、甘草補(bǔ)脾益氣；當(dāng)歸、白芍、熟地滋養(yǎng)心肝；何首烏、女貞子補(bǔ)腎養(yǎng)肝，滋陰益精血；黃芪配黨參大補(bǔ)元?dú)猓浒讝X益氣補(bǔ)脾，配當(dāng)歸補(bǔ)氣生血，加川芎入血分而理氣，則當(dāng)歸、熟地補(bǔ)而不滯；丹參活血祛瘀，各原料藥協(xié)同配合，共起氣血雙補(bǔ)之功效。本發(fā)明的有益效果是：經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，如意牌氣血雙補(bǔ)丸能顯著升高冠心病氣虛血瘀證模型小鼠的血清NO含量和6-keto-PGF1含量，能顯著降低冠心病氣虛血瘀證模型小鼠的ET-1含量和TXB2含量，也能明顯提高患者血清NO含量，還能降低患者炎癥水平和ET、CRP含量，對(duì)于冠心病具有很好的治療作用?？梢姡缫馀茪庋p補(bǔ)丸不僅具有補(bǔ)氣養(yǎng)血的功效，還具有活血化瘀的功效，拓寬其應(yīng)用領(lǐng)域，也為冠心病領(lǐng)域提供了新的治療藥物，具有很好的臨床研究意義。具體實(shí)施方式下面通過具體的研究實(shí)驗(yàn)對(duì)如意牌氣血雙補(bǔ)丸的治療效果進(jìn)行進(jìn)一步的說明。下列試驗(yàn)中所用氣血雙補(bǔ)丸均為申請(qǐng)人生產(chǎn)的如意牌氣血雙補(bǔ)丸，由黃芪200質(zhì)量份、當(dāng)歸200質(zhì)量份、熟地黃200質(zhì)量份、何首烏(酒炙)100質(zhì)量份、黨參100質(zhì)量份、女貞子(酒炙)50質(zhì)量份、白芍100質(zhì)量份、川芎50質(zhì)量份、丹參50質(zhì)量份、白術(shù)(麩炒)100質(zhì)量份和甘草50質(zhì)量份配成。規(guī)格為每袋裝9g，相當(dāng)于生藥4.5g。養(yǎng)心氏片由青島國(guó)風(fēng)藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，由黃芪、人參等13味中藥組成，規(guī)格為每片重0.3g，相當(dāng)于生藥0.89g。試驗(yàn)一主要驗(yàn)證如意牌氣血雙補(bǔ)丸對(duì)氣虛血瘀證模型小鼠的TXB2、6-keto-PGF1α、NO和ET-1的影響。1材料1.1動(dòng)物SPF級(jí)昆明小鼠90只，雌雄各半，體質(zhì)量(28±2)g，由山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，動(dòng)物質(zhì)量合格證號(hào)：SCXK(魯)2014005。1.2藥品與試劑氣血雙補(bǔ)丸用10倍量和8倍量水加熱回流提取，每次提取1h，合并水煎液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收乙醇并濃縮，制成2g生藥/ml的混懸液。養(yǎng)心氏片用10倍量和8倍量水加熱回流提取，每次提取1h，合并水煎液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收乙醇并濃縮，制成1g生藥/ml的混懸液。1.3儀器垂體后葉注射液(產(chǎn)品批號(hào)150503，南京新百藥業(yè)有限公司)，TXB2(批號(hào)20150002，上海基免實(shí)業(yè)有限公司)，6-keto-PGF1α試劑盒(批號(hào)20141203，上海嵐派生物科技有限公司)，一氧化氮試劑盒(型號(hào)wi81612，北京若水合科技有限公司)、ET試劑盒(ARB12825，北京百奧萊博科技有限公司)，低速冷凍離心機(jī)(DDL-8M，上海精密儀器儀表有限公司)，UV765紫外可見分光光度計(jì)(上海儀電分析儀器有限公司)，精密移液器、注射器、灌胃針頭、水浴鍋、小動(dòng)物心電圖機(jī)、自動(dòng)洗板儀、酶標(biāo)儀、37℃恒溫箱。2方法2.1動(dòng)物分組90只小鼠依據(jù)雌雄、體質(zhì)量隨機(jī)分為以下6組：空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、養(yǎng)心氏片組、氣血雙補(bǔ)丸高劑量組、氣血雙補(bǔ)丸中劑量組和氣血雙補(bǔ)丸低劑量組。其中模型對(duì)照組為氣虛血瘀證模型組，養(yǎng)心氏片組為對(duì)氣虛血瘀證模型施加養(yǎng)心氏片的組，氣血雙補(bǔ)丸高劑量組為對(duì)氣虛血瘀證模型施加如意牌氣血雙補(bǔ)丸的高劑量組，氣血雙補(bǔ)丸中劑量組為對(duì)氣虛血瘀證模型施加如意牌氣血雙補(bǔ)丸的中劑量組，氣血雙補(bǔ)丸低劑量組為對(duì)氣虛血瘀證模型施加如意牌氣血雙補(bǔ)丸的低劑量組。2.2氣虛血瘀證模型的建立與給藥采用高脂飲食、饑餓等多因素復(fù)合方法復(fù)制氣虛血瘀證模型：適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，空白對(duì)照組給予正常飲食，模型對(duì)照組和4個(gè)治療組給予饑餓喂養(yǎng)，食量為正常小鼠每日攝食量的60％，飼料為高脂飼料，造模周期為4周。建模的具體方法可參考《中醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)》2007年第13卷第11期中第81-83頁(yè)，黃麗,雷磊發(fā)表的論文《氣虛血瘀證動(dòng)物模型研究應(yīng)用現(xiàn)狀》和《中華中醫(yī)藥雜志》2006年第21卷第7期中第424-426頁(yè)，尹軍祥等發(fā)表的論文《氣虛血瘀證動(dòng)物模型制作方法與評(píng)價(jià)》。模型建立成功后開始給藥，給藥量按成人常規(guī)劑量折算后的劑量。養(yǎng)心氏片組灌胃養(yǎng)心氏片0.5g/kg；氣血雙補(bǔ)丸低、中、高劑量組依次灌胃2、4、8g/kg氣血雙補(bǔ)丸，空白對(duì)照組和模型對(duì)照組給予等量生理鹽水，理療均1次/天，連續(xù)給藥4周。2.3心肌缺血模型的建立氣虛血瘀證造模周期結(jié)束后，各組小鼠禁食不禁水，12小時(shí)后進(jìn)行心肌缺血造模。6組按30單位/kg劑量注射垂體后葉素，記錄注射時(shí)間，15min后，烏拉坦1μg/g麻醉小鼠，心電圖機(jī)記錄小鼠注射垂體后葉素后一定時(shí)間的Ⅱ?qū)?lián)心電圖，通過軟件記錄數(shù)據(jù)，觀察心率和T波高度變化來(lái)判斷心肌缺血造模是否成功。2.4檢測(cè)指標(biāo)給藥結(jié)束后，摘小鼠眼球取血，將血漿置于離心管中，在溫度為4℃的冰箱靜置4小時(shí)后，低溫下3500r/rain離心15min，提取血清，置于離心管中，-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩Ｈ∩蠈友鍣z測(cè)TXB2，6-keto-PGF1α含量，操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行，采用硝酸酶還原法測(cè)定血清NO含量；采用ELISA法測(cè)定血清ET-1含量。酶標(biāo)儀測(cè)定吸光度值，進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)。2.5統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPASS19.0統(tǒng)計(jì)分析軟件處理。數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(s)表示，對(duì)符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)兩獨(dú)立樣本均數(shù)間比較用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；方差齊的樣本間兩兩比較采用s-n-K檢驗(yàn)，方差不齊的樣本兩兩比較采用Dunnet-t檢驗(yàn)，多個(gè)樣本間的比較采用單因素方差分析。以P＜0.05為差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3結(jié)果3.1各組小鼠血清TXB2，6-keto-PGF1α的變化表1各組小鼠血清TXB2，6-keto-PGF1α對(duì)比結(jié)果(ng﹒L-1,n＝15,)組別劑量/(g/kg-1)TXB26-keto-PGFlα空白對(duì)照組—94.52±15.31**243.96±11.88**模型對(duì)照組—123.05±23.10226.32±17.09養(yǎng)心氏片組0.594.65±18.52*243.25±9.29**如意牌氣血雙補(bǔ)丸高劑量組895.11±20.24*244.09±9.68**如意牌氣血雙補(bǔ)丸中劑量組499.97±19.67*241.65±12.34如意牌氣血雙補(bǔ)丸低劑量組2102.32±20.31*240.38±11.56*注：與模型對(duì)照組對(duì)比，*p＜0.05,p**＜0.01。3.2各組小鼠血清NO、ET-1的變化表2各組小鼠血清NO、ET-1的變化(n＝15)組別劑量/(g.kg-1)NO(μmol/ml)ET-1(pg/ml)空白對(duì)照組—89.06±3.6532.11±1.25模型對(duì)照組—67.34±5.08*67.55±1.99*養(yǎng)心氏片組0.588.65±4.17*33.25±1.37**如意牌氣血雙補(bǔ)丸高劑量組888.35±3.27**34.68±1.55**如意牌氣血雙補(bǔ)丸中劑量組483.54±4.68**45.98±1.38**如意牌氣血雙補(bǔ)丸低劑量組280.97±5.31**50.47±1.22**注：與模型對(duì)照組對(duì)比，*p＜0.05,p**＜0.01。4結(jié)論各組小鼠血清TXB2，6-keto-PGF1α對(duì)比結(jié)果表明，與模型對(duì)照組對(duì)比，各治療組的TXB2含量均降低，6-keto-PGF1α含量均升高，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05或P＜0.01)。與空白組比較，模型組小鼠血清NO含量顯著下降，ET-1含量顯著增高(P＜0.05)；與模型組相比，各治療組小鼠血清的NO含量均顯著升高，ET-1含量顯著降低，且氣血雙補(bǔ)丸各干預(yù)組存在明顯的劑量-效應(yīng)關(guān)系。實(shí)驗(yàn)二主要驗(yàn)證如意牌氣血雙補(bǔ)丸對(duì)人體血ET、N0、CRP和相關(guān)炎癥因子變化。1資料與方法l.1入選標(biāo)準(zhǔn)取用80例冠心病患者為門診或住院部病例，根據(jù)患者就診先后順序?qū)⒒颊叻譃橹委熃M與對(duì)照組。治療組4O例，其中男27例，女13例，年齡55～72歲，平均(66.8±5.6)歲；病程3.8～23.7年，平均病程(11.7±3.2)年；合并高血壓10例，合并糖尿病5例。對(duì)照組40例，其中男23例，女l7例；年齡54～71歲，平均年齡(65.34±6.2)歲；病程2.9～20.6年，平均病程(10.4±2.6)年；合并高血壓13例，合并糖尿病3例。兩組患者在年齡、性別等資料方面比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。1.2病例選擇西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)WH0《關(guān)于缺血性心臟病的命名和診斷標(biāo)準(zhǔn)》以及第五版《內(nèi)科學(xué)》中冠心病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，均有心絞痛反復(fù)發(fā)作史和缺血性ST-T的改變。中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)：參照衛(wèi)生部1993年制定發(fā)布的《中藥新藥治療冠心病的臨床研究指導(dǎo)原則》和國(guó)家中醫(yī)藥管理局1994年發(fā)布的《中醫(yī)病證診斷療效標(biāo)準(zhǔn)》，主證為：胸悶，氣短，心悸，神倦乏力，面色紫暗，舌淡紫，脈弱而澀，屬氣虛血瘀者。1.3治療方法治療組口服氣血雙補(bǔ)丸每次9克，每日3次。對(duì)照組口服養(yǎng)心氏片每次2片，每日3次。30d為1個(gè)療程，4個(gè)療程后統(tǒng)計(jì)療效。1.4觀測(cè)指標(biāo)及方法治療前后各組順利取外周靜脈血立即送化驗(yàn)室，CRP測(cè)定采用顆粒增強(qiáng)免疫透射比濁法，多點(diǎn)定標(biāo)后在BS-330E深圳邁瑞全自動(dòng)生化分析儀上測(cè)定，ET-1的測(cè)定采用放射免疫分析法使用內(nèi)皮素放射免疫分析藥盒(購(gòu)自北京北方生物技術(shù)研究所)直接測(cè)定。N0的測(cè)定采用硝酸還原酶法，使用NO試劑盒(購(gòu)自上海撫生實(shí)業(yè)有限公司)，應(yīng)用分光光度儀比色法測(cè)定血漿中亞硝酸鹽濃度，換算后得出血漿N0含量。血清IL-6、TNF-α、ICAM-1水平，檢測(cè)指標(biāo)均采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定。在知情同意的原則下，選擇靜脈血作為觀察樣本，住院病人入院后次日凌晨6點(diǎn)時(shí)進(jìn)行采血,以及藥物干預(yù)后4周空腹采血。此外觀察患者臨床癥狀，肝、腎功能，電解質(zhì)和血、尿、大便常規(guī)。1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)用醫(yī)學(xué)統(tǒng)計(jì)軟件SPSS16.0處理分析，計(jì)量資料數(shù)據(jù)以表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用X檢驗(yàn)；等級(jí)資料采用Ridit分析。2結(jié)果2.1血ET、N0、CRP變化表3治療組治療前后ET、N0、CRP變化注：與本組治療前比較,1)P<0.05，與對(duì)照組比較,2)P＞0.05。2.2兩組治療前后相關(guān)炎癥因子比較表4治療組治療前后IL-6、TNF-α及ICAM-1的比較(pg/ml，n＝30)注：與本組治療前比較,1)P<0.05，與對(duì)照組比較,2)P＞0.05。3、結(jié)論治療組與對(duì)照組治療后可明顯降低患者ET、CRP含量，提高血清NO含量，降低患者血清IL-6、TNF-α及ICAM-1的水平，與治療前相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，治療組與對(duì)照組相比無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。通過上述兩則試驗(yàn)表明：如意牌氣血雙補(bǔ)丸不僅具有補(bǔ)氣養(yǎng)血的功效，還具有活血化瘀的功效，在治療氣虛血瘀型冠心病方面與常用藥養(yǎng)心氏片具有同等藥效，能夠作為治療冠心病的藥物。以上所述，僅是本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并非是對(duì)本發(fā)明作其它形式的限制，任何熟悉本專業(yè)的技術(shù)人員可能利用上述揭示的技術(shù)內(nèi)容加以組合、變更或改型均為本發(fā)明的等效實(shí)施例。但是凡是未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對(duì)以上實(shí)施例所作的任何簡(jiǎn)單修改、等同變化與改型，仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3