本發(fā)明涉及一種具有補(bǔ)氣益血作用的中藥組合物及其制備方法，屬于藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
八珍液為衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十冊收載，其處方由黨參、茯苓、白芍、白術(shù)(麩炒)、熟地黃、當(dāng)歸、川芎、甘草組成，該藥具有補(bǔ)氣益血的功效，用于氣血兩虛，面色萎黃，食欲不振，四肢乏力，月經(jīng)過多等。其制備方法為：當(dāng)歸、川芎、白術(shù)、白芍分別用原生藥7倍、茯苓用原生藥6倍的70％乙醇，浸漬48小時(shí)后分別進(jìn)行滲漉，其中當(dāng)歸和川芎分別收集初漉液180ml和90ml,另器保存,繼續(xù)滲漉,收集全部漉液；黨參、熟地黃、甘草加水煎煮二次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過,濾液濃縮至相對密度約為1.20，加乙醇使含醇量約50％，攪勻，靜置，濾過，濾液與續(xù)漉液合并,回收乙醇,濃縮至適量,加入上述當(dāng)歸、川芎初漉液及單糖漿294ml，再用水或乙醇調(diào)配，使成1000ml，攪勻，靜置，濾過，即得，制得的八珍液含有15～22％的乙醇。
八珍液由八珍湯而來，八珍湯為方劑中氣血雙補(bǔ)的經(jīng)典方，八珍制劑除八珍液外，還有八珍丸、八珍丸(濃縮丸)、八珍片、八珍膠囊、八珍顆粒等，臨床常用于治療病后虛弱、各種慢性病，以及婦女月經(jīng)不調(diào)等屬氣血兩虛者。除八珍液外，其余劑型均不含有乙醇。對八珍液處方工藝進(jìn)行分析，八珍液中的乙醇為增溶劑，非藥理性成分，其作用是對不溶于水而可溶于15～22％乙醇的這部分藥用物質(zhì)進(jìn)行增溶，使之不發(fā)生沉淀，保留在八珍液中。
在臨床應(yīng)用過程中，我們發(fā)現(xiàn)由于八珍液制劑中含15～22％的乙醇，對胃腸道有較大的刺激性，很多患者服用后感到不適，尤其是不擅飲酒的女性和胃腸道潰瘍等需禁酒的患者。對于酒精過敏的患者服用后會產(chǎn)生過敏反應(yīng)，出現(xiàn)全身發(fā)熱、心跳加快、皮膚潮紅、起粒狀丘疹、瘙癢等，這些都極大的限制了其臨床應(yīng)用。因此，需要發(fā)明一種不含乙醇、副作用小、適合酒精過敏患者服用的八珍液。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的是提供一種具有補(bǔ)氣益血作用的中藥組合物及其制備方法，該中藥組合物不含乙醇、對胃腸道的刺激小、適合不擅飲酒的女性、胃腸道潰瘍等需禁酒的患者及酒精過敏患者服用。
本發(fā)明所述中藥組合物由以下重量配比的中藥原料制成：
所述的中藥組合物的制備方法包括如下步驟：
(1)當(dāng)歸、川芎、白術(shù)、白芍分別用原生藥7倍、茯苓用原生藥6倍的70％乙醇，浸漬48小時(shí)后分別進(jìn)行滲漉，其中當(dāng)歸和川芎分別收集初漉液180ml和90ml，另器保存，繼續(xù)滲漉，收集全部漉液；
(2)黨參、熟地黃、甘草加水煎煮兩次，每次2小時(shí)，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20(60℃)，加乙醇使含醇量為50％，攪勻，靜置，濾過，濾液備用；
(3)上述濾液與續(xù)漉液合并，回收乙醇，濃縮至相對密度為1.20(60℃)的清膏，備用；
(4)當(dāng)歸、川芎初漉液合并，加入適量增溶劑，攪勻，回收乙醇，當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液備用；
(5)取清膏，加入當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液，加入適量矯味劑、防腐劑，加水調(diào)配使成1000ml，攪勻，靜置，濾過，灌裝，即得。
步驟(2)中所述的黨參、熟地黃、甘草加水煎煮工藝中，第一次加水量為黨參、熟地黃、甘草總重量的4～12倍，第二次加水量為黨參、熟地黃、甘草總重量的2～10倍；優(yōu)選第一次加水量為黨參、熟地黃、甘草總重量的6倍，第二次加水量為黨參、熟地黃、甘草總重量的4倍。
步驟(3)、(4)中所述的回收乙醇工序采用減壓法，在真空條件下進(jìn)行低溫連續(xù)回收乙醇，溫度低、速度快，可避免熱敏物質(zhì)的損失，真空度為-0.02～-0.08Mpa，溫度為40℃～70℃，優(yōu)選50℃。
步驟(4)中加入增溶劑后再回收乙醇，所述增溶劑可采用聚山梨酯80、聚山梨酯60、泊洛沙姆、卵磷脂、大豆磷脂、聚甘油脂肪酸酯、蔗糖脂肪酸酯、丙二醇脂肪酸酯中的一種或幾種，優(yōu)選聚山梨酯80，用量為每1000毫升八珍液種含聚山梨酯80 2.5-20ml，優(yōu)選為每1000毫升八珍液種含聚山梨酯80 20ml。
步驟(5)中所述矯味劑可采用單糖漿、甜菊素、阿司帕坦、三氯蔗糖、山梨醇、枸櫞酸、香精中的一種或幾種，優(yōu)選甜菊素，用量為每1000毫升八珍液種含甜菊素0.5-5g，優(yōu)選為每1000毫升八珍液種含甜菊素2g。
本發(fā)明所制得的中藥組合物中可加入適量防腐劑，可采用苯甲酸及其鹽、山梨酸及其鹽、尼泊金類中的一種或幾種，優(yōu)選山梨酸鉀，用量為每1000毫升八珍液種含山梨酸鉀0.5-5g，優(yōu)選為每1000毫升八珍液種含山梨酸鉀2.5g。
在發(fā)明本申請中藥組合物的過程中，我們意外地發(fā)現(xiàn)在回收乙醇前加入適量的聚山梨酯80或其他非乙醇類增溶劑，則在乙醇回收過程中藥液能始終保持澄清，沒有不溶成分析出，而常規(guī)方法為直接回收乙醇，藥液渾濁，有大量的沉淀析出，與常規(guī)直接回收乙醇相比，加入增溶劑后回收乙醇可以使藥液中水溶性差的成分很好地保留在回收液中。對(1)未回收乙醇的藥液、(2)加入增溶劑再回收乙醇所得的藥液、(3)直接回收乙醇所得的藥液、(4)直接回收乙醇后加入增溶劑所得的藥液進(jìn)行比較，考察指標(biāo)包括：a當(dāng)歸、川芎、白術(shù)、黨參、白芍的薄層圖譜，b高效液相法測定芍藥苷的含量，c液相全波長掃描圖譜，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：(1)與(2)在薄層圖譜的斑點(diǎn)數(shù)量大小顏色、芍藥苷含量及全波長掃描圖譜上均具有一致性，無顯著性差異，而(1)與(3)、(1)與(4)均有所差異，表明(3)、(4)相比(1)成分均有不同程度的損失。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有顯著的優(yōu)點(diǎn)和意義：
本發(fā)明采用非乙醇型增溶劑很好地保留了原八珍液的藥用物質(zhì)，產(chǎn)品中不含有乙醇，對腸胃道的刺激性小，而且去乙醇后產(chǎn)品的口感有很大的改善，不擅飲酒的女性、胃腸道潰瘍等需禁酒的患者及酒精過敏的患者均可放心服用，拓寬了臨床治療對象的范圍，提高了患者的臨床用藥順應(yīng)性。
下面以本發(fā)明中藥組合物(按照實(shí)施例1的方法制得)對比部頒標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十冊項(xiàng)下“八珍液”(按照其方法制得的八珍液)進(jìn)行藥效學(xué)研究：
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩⒈景l(fā)明中藥組合物與八珍液進(jìn)行對比，觀察其在補(bǔ)血、抗疲勞、增強(qiáng)免疫等方面的藥效作用。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：昆明種小鼠，雌雄各半，體重18～22g。
實(shí)驗(yàn)藥物：八珍液(按部頒標(biāo)準(zhǔn)制法制得，0.495g生藥/ml，本發(fā)明中藥組合物0.495g生藥/ml。藥物在實(shí)驗(yàn)前用生理鹽水配置，灌胃給藥。
1、對失血性血虛小鼠紅細(xì)胞(RBC)和血紅蛋白(Hb)的影響
昆明種小鼠60只，雌雄各半，隨機(jī)分為6組，每組10只。本發(fā)明中藥組合物分別灌胃給藥0.825g、1.65g、3.30g生藥/kg，八珍液組灌胃給藥1.65g生藥/kg，模型對照組和陰性對照組灌胃同體積的生理鹽水，每日1次，連續(xù)7d。模型對照組及各給藥組小鼠，給藥1、3、5d由眼底靜脈叢放血0.4ml，共放血3次，同時(shí)改變其正常飲食量，飼料控制在每日75g/kg體重，自由飲水，連續(xù)7d。在造模開始的第0、5、7d，每只小鼠尾靜脈取血20μl，檢測外周血RBC數(shù)和Hb濃度。結(jié)果見表1、表2。
表1對小鼠外周血RBC的影響
注：與模型對照組比*P＜0.05，與模型對照組比**P＜0.01；與陰性對照組比ΔP＜0.05，與陰性對照組比ΔΔP＜0.01。
表2對小鼠外周血Hb的影響
注：與模型對照組比*P＜0.05，與模型對照組比**P＜0.01；與陰性對照組比ΔP＜0.05，與陰性對照組比ΔΔP＜0.01。
結(jié)果表明，本發(fā)明中藥組合物組和八珍液組在給藥7d時(shí)，對失血性血虛小鼠紅細(xì)胞(RBC)和血紅蛋白(Hb)數(shù)與模型組相比有顯著的提高(P＜0.01)，組間無顯著性差異(P＞0.05)。
2、對小鼠缺氧耐受時(shí)間的影響
昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。本發(fā)明中藥組合物分別灌胃給藥0.825g、1.65g、3.30g生藥/kg，八珍液組灌胃給藥1.65g生藥/kg，陰性對照組灌胃同體積的生理鹽水，每日1次.連續(xù)給藥7d。末次給藥1h后，將小白鼠放于150ml廣口瓶中，封口，立即計(jì)時(shí)，記錄動(dòng)物死亡時(shí)間。結(jié)果見表3。
表3對小鼠缺氧耐受時(shí)間的影響
注：與對照組比*P＜0.05，與陰性對照組比**P＜0.01。
結(jié)果表明，本發(fā)明中藥組合物組和八珍液組能顯著延長小鼠常壓缺氧耐受時(shí)間，與陰性對照組比有顯著性差異(P＜0.01)，組間無顯著性差異(P＞0.05)。
3、對小鼠抗疲勞的影響
昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。本發(fā)明中藥組合物分別灌胃給藥0.825g、1.65g、3.30g生藥/kg，八珍液組灌胃給藥1.65g生藥/kg，陰性對照組灌胃同體積的生理鹽水，每日1次，連續(xù)給藥7d。末次給藥1h后，將鼠尾負(fù)重2g回形針，放于水槽中，水深25cm，水溫20±0.5℃，計(jì)算小鼠自落水開始至鼻孔沉入水中10s不再浮出水面的時(shí)間，作為小鼠游泳時(shí)間指標(biāo)。結(jié)果見表4。
表4對小鼠游泳時(shí)間的影響
注：與對照組比*P＜0.05，與陰性對照組比**P＜0.01。
結(jié)果表明，本發(fā)明中藥組合物組和八珍液組能顯著延長小鼠游泳時(shí)間，與陰性對照組比有顯著性差異(P＜0.01)，組間無顯著性差異(P＞0.05)。
4、對小鼠非特導(dǎo)性免疫功能的影響
昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只。本發(fā)明中藥組合物組分別灌胃給藥0.825g、1.65g、3.30g生藥/kg，八珍液組灌胃給藥1.65g生藥/kg，陰性對照組灌胃同體積的生理鹽水，每日1次，連續(xù)14d。各組小鼠在末次給藥前稱取體質(zhì)量，給藥1h后，經(jīng)尾靜脈注射稀釋的印度墨汁(用無菌生理鹽水稀釋5倍)，注射容量為10ml/kg。分別于注入墨汁后2min和10min從眶后靜脈叢取血20ul加入到2ml0.1％Na2CO3溶液中，搖勻以Na2CO3溶液為空白對照，測定光密度值。小鼠行脫頸椎處死，取胸腺、脾臟稱濕重，計(jì)算胸腺、脾臟器指數(shù)、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬指數(shù)(K)。結(jié)果見表5、表6。
表5對小鼠碳粒廓清功能指標(biāo)的影響
注：與陰性對照組比*P＜0.05，與陰性對照組比**P＜0.01。
結(jié)果表明，本發(fā)明組合物中、大劑量組和八珍液組能使吞噬指數(shù)K顯著增加，與陰性對照組比有顯著性差異(P＜0.01)，組間無顯著性差異(P＞0.05)。
表6對小鼠胸腺指數(shù)和脾指數(shù)的影響
注：與陰性對照組比*P＜0.05，與陰性對照組比**P＜0.01。
結(jié)果表明，本發(fā)明組和八珍液組能使脾指數(shù)顯著增加，與陰性對照組比有顯著性差異(P＜0.01)，組間無顯著性差異(P＞0.05)。
本發(fā)明中藥組合物能顯著提高失血性血虛小鼠紅細(xì)胞(RBC)和血紅蛋白(Hb)數(shù)，增加小鼠的耐缺氧能力，提高小鼠的抗疲勞能力，延長小鼠平均存活時(shí)間，提高吞噬指數(shù)(K)和脾臟指數(shù)，與八珍液相比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，說明本發(fā)明中藥組合物與八珍液在補(bǔ)血、抗疲勞、耐缺氧、提高免疫方面藥效相當(dāng)。
具體實(shí)施方式
以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但并不因此而限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例1
制備方法：以上八味，當(dāng)歸、川芎、白術(shù)、白芍分別用原生藥7倍、茯苓用原生藥6倍的70％乙醇，浸漬48小時(shí)后分別進(jìn)行滲漉，其中當(dāng)歸和川芎分別收集初漉液180ml和90ml，另器保存，繼續(xù)滲漉，收集全部漉液；黨參、熟地黃、甘草加水煎煮兩次，每次2小時(shí)，第一次加6倍量水，第二次加4倍量水，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20(60℃)，加乙醇使含醇量為50％，攪勻，靜置，濾過，濾液與續(xù)漉液合并，回收乙醇，濃縮至相對密度約為1.20(60℃)清膏，備用；當(dāng)歸、川芎初漉液合并，加入20ml聚山梨酯80，攪勻，回收乙醇，得當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液，備用。取上述清膏，加入當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液及單糖漿294ml，加入山梨酸鉀2.5g，加水調(diào)配使成1000ml，攪勻，靜置，濾過，灌裝，即得。
實(shí)施例2
制備方法：以上八味，當(dāng)歸、川芎、白術(shù)、白芍分別用原生藥7倍、茯苓用原生藥6倍的70％乙醇，浸漬48小時(shí)后分別進(jìn)行滲漉，其中當(dāng)歸和川芎分別收集初漉液180ml和90ml，另器保存，繼續(xù)滲漉，收集全部漉液；黨參、熟地黃、甘草加水煎煮兩次，每次2小時(shí)，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20(60℃)，加乙醇使含醇量為50％，攪勻，靜置，濾過，濾液與續(xù)漉液合并，回收乙醇，濃縮至相對密度約為1.20(60℃)清膏，備用；當(dāng)歸、川芎初漉液合并，加入12ml聚山梨酯60，攪勻，回收乙醇，得當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液，備用。取上述清膏，加入當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液及甜菊素2g、山梨酸鉀2.5g，加水調(diào)配使成1000ml，攪勻，靜置，濾過，灌裝，即得。
實(shí)施例3
制備方法：以上八味，當(dāng)歸、川芎、白術(shù)、白芍分別用原生藥7倍、茯苓用原生藥6倍的70％乙醇，浸漬48小時(shí)后分別進(jìn)行滲漉，其中當(dāng)歸和川芎分別收集初漉液180ml和90ml，另器保存，繼續(xù)滲漉，收集全部漉液；黨參、熟地黃、甘草加水煎煮兩次，每次2小時(shí)，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20(60℃)，加乙醇使含醇量為50％，攪勻，靜置，濾過，濾液與續(xù)漉液合并，回收乙醇，濃縮至相對密度約為1.20(60℃)清膏，備用；當(dāng)歸、川芎初漉液合并，加入10g泊洛沙姆，攪勻，回收乙醇，得當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液，備用。取上述清膏，加入當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液及單糖漿300ml、苯甲酸鈉2.5g，加水調(diào)配使成1000ml，攪勻，靜置，濾過，灌裝，即得。
實(shí)施例4
制備方法：以上八味，當(dāng)歸、川芎、白術(shù)、白芍分別用原生藥7倍、茯苓用原生藥6倍的70％乙醇，浸漬48小時(shí)后分別進(jìn)行滲漉，其中當(dāng)歸和川芎分別收集初漉液180ml和90ml，另器保存，繼續(xù)滲漉，收集全部漉液；黨參、熟地黃、甘草加水煎煮兩次，每次2小時(shí)，第一次加8倍量水，第二次加6倍量水，合并煎液，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.20(60℃)，加乙醇使含醇量為50％，攪勻，靜置，濾過，濾液與續(xù)漉液合并，回收乙醇，濃縮至相對密度約為1.20(60℃)清膏，備用；當(dāng)歸、川芎初漉液合并，加入10g卵磷脂，攪勻，回收乙醇，得當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液，備用。取上述清膏，加入當(dāng)歸、川芎初漉液的回收液及阿斯帕坦2.5g、羥苯乙酯2g，加水調(diào)配使成1000ml，攪勻，靜置，濾過，灌裝，即得。