本發(fā)明涉及一種二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物制劑。

技術(shù)背景

二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物，如cn101381371、us20100210856al公開(kāi)的6-氨基-4-(2,4二甲氧苯基)-4-氫[1,2]二硫雜環(huán)戊烯[4,3-b]-吡咯酮-甲酸乙酯(以下簡(jiǎn)稱zl004)，由母核結(jié)構(gòu)1,2一二硫雜環(huán)戊烯[4,3-b]吡咯-5-(4h)-酮環(huán)修飾改造而成的化合物，由上海醫(yī)藥工業(yè)研究院化學(xué)制藥部王國(guó)平研究員合成，此類結(jié)構(gòu)化合物己有專利報(bào)道，具有抗菌、抗腫瘤活性等特點(diǎn)，如webster等(wo2003/080624)、stachel等(helveticachimicaacta2002，85，4453)、陳庚輝等(cn1642599a)、川田修司等(jp63-284181,jpll-279179)、webster等(us6020360,w099/12543)、godfrey&dell(gb2170498)、郭迎平等(cn101522688a)的報(bào)導(dǎo)。zl004結(jié)構(gòu)如下所示，除抗癌、抑菌作用外，還有升高白細(xì)胞的作用，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。

zl004化學(xué)結(jié)構(gòu)式

zl004為黃色的結(jié)晶性粉末，熔點(diǎn)216℃－220℃，強(qiáng)光、高熱條件下穩(wěn)定，室溫長(zhǎng)期放置穩(wěn)定，溶液遇堿水解不穩(wěn)定；在二氯甲烷、吡啶、mf、nmp等溶劑中溶解，乙醇中極微溶解，在水中溶解度小于1μg/ml，屬于幾乎不溶類藥物。

微觀上，其難溶性使其無(wú)法以分子狀態(tài)透過(guò)生物膜，分散于水溶性的循環(huán)系統(tǒng)，作用于生物靶細(xì)胞。宏觀上，增加了口服、粘膜途徑、注射途徑給藥的難度，前期實(shí)驗(yàn)也證實(shí)其特殊物理性質(zhì)限制藥效的充分發(fā)揮，只有通過(guò)自身結(jié)構(gòu)的修飾或是制劑方面的優(yōu)化，作用于靶向細(xì)胞效率，提高生物利用度。

納米混懸劑是一種新的給藥劑型。所謂的納米混懸劑是以表面活性劑或聚合物為穩(wěn)定劑，將納米尺度的藥物粒子分散在水中形成的穩(wěn)定膠體分散體系。納米混懸劑能顯著提高藥物的溶出速率和生物利用度。此外，由于納米結(jié)晶粒徑極小，還能增加與黏膜的黏附性，延長(zhǎng)藥物在體內(nèi)的滯留時(shí)間而提高藥物的生物利用度。不論是難溶于水的藥物，還是既難溶于水又難溶于油的藥物，都可以通過(guò)該方法制備得到相應(yīng)的納米結(jié)晶。納米結(jié)晶是一種制劑中間體，可直接制備口服制劑、滴眼劑或噴霧劑，也可制備成為注射混懸劑，通過(guò)肌肉注射，實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)效緩控釋給藥。

目前納米混懸劑的制備方法主要有top-down和bottom-up兩類技術(shù)。topdown技術(shù)是將大顆粒的藥物結(jié)晶分散到納米范圍尺寸，如高壓均質(zhì)法和介質(zhì)研磨法；bottom-up技術(shù)是將溶液中藥物分子聚集形成納米范圍粒徑的結(jié)晶，如乳化法和溶劑反溶劑法。由于bottom-up技術(shù)制備過(guò)程需使用有機(jī)溶劑或油相、所制備混懸劑中藥物濃度低、不利于工業(yè)化生產(chǎn)等缺點(diǎn)，目前國(guó)外己上市的采用納米混懸劑均采用介質(zhì)研磨或勻質(zhì)等topdown技術(shù)。通過(guò)研磨或者勻質(zhì)過(guò)程，可以將微米尺寸(通常50～500微米)的藥物顆粒破碎成亞微米尺寸或納米尺寸的微粒，在穩(wěn)定劑的保護(hù)下，均勻分散于液體介質(zhì)中。根據(jù)研磨過(guò)程中加液與否可以分為濕磨法和干磨法，干磨法由于沒(méi)有液體的存在，研磨過(guò)程中能量輸入大，磨珠與藥物碰撞產(chǎn)熱較高，容易引起藥物性質(zhì)發(fā)生改變，因此需要對(duì)樣品進(jìn)行控溫，操作條件要求高，不利于轉(zhuǎn)化生產(chǎn)(adcharapongpeerapat,chalermphonwanawongthai.formationmechanismofcolloidalnanoparticlesobtainedfromprobucol/pvp/sdsternarygroundmixture.int.j.pharm.352(2008)309-316)。

濕磨法具有大量?jī)?yōu)點(diǎn)，包括：所得到的混懸劑中的微粒粒徑分布窄；可封閉研磨，磨罐和磨珠采用性質(zhì)穩(wěn)定的材質(zhì)，容易保證樣品的純度；工藝簡(jiǎn)單、易控制、便于分離磨珠、適合工業(yè)化生產(chǎn)；直接獲得高濃度納米混懸液，可稀釋或固體化；無(wú)有機(jī)溶劑(與溶劑揮發(fā)法制備固體分散體，或溶劑一非溶劑沉淀法制備納米混懸劑等技術(shù)比較)；室溫或低溫加工，有利于藥物穩(wěn)定；能顯著提高難溶性藥物的溶出度，有利于改善藥物吸收。目前，美國(guó)fda批準(zhǔn)上市的基于納米混懸劑口服制劑中，多數(shù)采用濕磨法。

濕法研磨的球磨機(jī)有很多類型，如：行星式球磨機(jī)、籃式球磨機(jī)、高能球磨機(jī)、立式球磨機(jī)、珠子磨等。行星式球磨機(jī)，其工作原理為：利用磨罐自轉(zhuǎn)和公轉(zhuǎn)產(chǎn)生的離心力、及磨罐與磨珠間的摩擦力等的作用，使磨珠與藥物在罐內(nèi)產(chǎn)生相互沖擊、摩擦、上下翻滾，使得磨珠與磨料在高速運(yùn)轉(zhuǎn)中相互之間猛烈碰撞、擠壓，大大提高了研磨效率和研磨效果(王繼杰.球磨機(jī)的研究進(jìn)展及實(shí)用技術(shù)綜述.中國(guó)陶瓷工業(yè)，2007，14(5):32-34.)

濕磨法制備難溶性藥物的納米混懸劑，通常耗時(shí)較長(zhǎng)，分散后的顆粒易發(fā)生聚集，導(dǎo)致產(chǎn)品不穩(wěn)定，生物利用度得不到改善。因此，選擇適宜的研磨條件(包括磨球的材質(zhì)、直徑和用量，球磨機(jī)轉(zhuǎn)速等)和適宜的穩(wěn)定劑，以提高研磨效率和有效降低粒徑。防止分散的藥物顆粒聚集和提高混懸劑的物理穩(wěn)定性，是成功制備難溶性藥物納米混懸劑的關(guān)鍵。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物納米混懸劑及制備方法，以克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，滿足相關(guān)領(lǐng)域應(yīng)用的需要。

本發(fā)明所述的二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物納米混懸劑，以1ml注射用水為基準(zhǔn)，含有：

二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物5～100mg，優(yōu)選40～60mg

助懸劑1～20mg，優(yōu)選8～12mg

潤(rùn)濕劑1～10mg，優(yōu)選4～6mg

使得體系的ph為6～7.5的ph調(diào)節(jié)劑，以及

使得體系達(dá)到等滲的滲透壓調(diào)節(jié)劑；

其中：二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物的顆粒以體積平均徑計(jì)，粒徑分布均在3微米以下，平均直徑在800納米左右，zeta電位可達(dá)-10～-50mv；

優(yōu)選的，硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物與潤(rùn)濕劑的質(zhì)量比為20:1-1:2；

優(yōu)選的，硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物與助懸劑的質(zhì)量比為10:1-1:1。

優(yōu)選的，所述的二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物為6-氨基-4-(2,4二甲氧苯基)-4-氫[1,2]二硫雜環(huán)戊烯[4,3-b]-吡咯酮-甲酸乙酯；

所述的助懸劑選自羧甲基纖維素或其鈉鹽、羥丙基纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、十八醇、海藻酸鈉、聚乙二醇4000中的一種或一種以上；

所述潤(rùn)濕劑選自吐溫、卵磷脂、泊洛沙姆、聚氧乙烯蓖麻油中的一種或一種以上；

所述ph調(diào)節(jié)劑選自磷酸鈉、磷酸鉀或檸檬酸鈉中的一種或一種以上；

所述滲透壓調(diào)節(jié)劑選甘露醇、葡萄糖、木糖醇、山梨醇、乳糖或氯化鈉中的一種或一種以上；

本發(fā)明所述的二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物納米混懸劑的制備方法，包括以下步驟：

(1)先將助懸劑和潤(rùn)濕劑加入至注射用水中，溶解或者溶脹；

(2)將步驟(1)配制的溶液與二硫雜環(huán)戊烯并吡咯酮類化合物加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入研磨珠，以一定的介質(zhì)填充率(磨珠和研磨物料混合物的體積占磨罐容積的百分率為介質(zhì)填充率)，并根據(jù)球磨機(jī)的型號(hào)選擇適宜的轉(zhuǎn)速、時(shí)間，研磨至適宜的粒徑，即得.

(3)研磨完成后，加入滲透壓調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)至等滲，用調(diào)節(jié)ph調(diào)節(jié)劑調(diào)節(jié)ph值至6～7.5，即得；

球磨機(jī)中磨罐與研磨珠的材質(zhì)通?？梢赃x擇氧化鋯、瑪瑙、不銹鋼、玻璃或交聯(lián)的聚苯乙烯樹(shù)脂等，磨珠和研磨物料混合物的體積占磨罐容積的百分率為介質(zhì)填充率，其在5％-60％范圍內(nèi)，更優(yōu)選10-40％，最優(yōu)選15-30％，磨珠直徑在0.1-10毫米；

轉(zhuǎn)速優(yōu)選在200-650rpm，更優(yōu)選為300-600rpm，最優(yōu)選為500-600rpm；所述研磨時(shí)間優(yōu)選10-180min，更優(yōu)選30-120min，最優(yōu)選60-90min；

本發(fā)明的制備方法，操作簡(jiǎn)便、不使用有機(jī)溶劑、適用于工業(yè)化生產(chǎn)通過(guò)選擇合適的穩(wěn)定劑，可獲得高效的分散效果，分散時(shí)間短至幾個(gè)小時(shí)，有效減小藥物顆粒尺寸至3微米以下(大部分藥物顆粒小于1微米)；所得納米混懸劑中藥物含量高、且分散的顆粒不易發(fā)生聚集、穩(wěn)定性良好；能顯著提高zl004的溶解速度。所制備的zl004納米混懸劑，混懸劑的穩(wěn)定性良好，放置30天粒徑無(wú)明顯增大，即顆粒無(wú)明顯聚集。zl004納米混懸劑可直接注射于肌肉或皮下，實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)效緩控釋釋藥，也可以采用離心、超濾等方法濃縮后，或加入適宜的藥用輔料后經(jīng)過(guò)噴霧干燥、冷凍干燥等方法干燥后，再進(jìn)一步采用藥劑學(xué)公知的技術(shù)制成片劑，膠囊劑等劑型。

附圖說(shuō)明

圖1為實(shí)施例1的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖2為實(shí)施例2的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖3為實(shí)施例3的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖4為實(shí)施例4的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖5為實(shí)施例5的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖6為實(shí)施例6的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖7為實(shí)施例7的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖8為實(shí)施例8的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖9為實(shí)施例9的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖10為實(shí)施例10的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖11為實(shí)施例11的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖12為實(shí)施例12的產(chǎn)物的粒徑分布。

圖13為實(shí)施例13的產(chǎn)物的粒徑分布。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明所用主要設(shè)備為：

行星式球磨機(jī)(德國(guó)fritschpulverisette6)

激光粒度儀(日本horibala920)

納米粒度和zeta電位分析儀(英國(guó)馬爾文zetasizernanozs)

測(cè)定zl004納米混懸劑的粒徑及電位大?。簩⒈景l(fā)明所制得的zl004納米混懸劑用蒸餾水稀釋5倍(體積)，用馬爾文zetasizernanozs測(cè)定其zeta電位，采用激光粒度儀(日本horibala920)測(cè)定粒徑。

溶出度試驗(yàn)方法：

將本發(fā)明的zl004納米混懸劑與zl004原料藥進(jìn)行溶出度對(duì)比實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示本發(fā)明所制得的zl004納米混懸劑溶出速率明顯高于zl004原料藥。溶出度實(shí)驗(yàn)方法為：取zl004原料藥10mg、配以相應(yīng)比例的輔料，混勻；本發(fā)明的zl004納米混懸劑適量(zl00410mg)各3份，依照槳法測(cè)定其溶出度，以含1％十二烷基硫酸鈉，ph＝7.4的磷酸緩沖液1000ml為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為50rpm，水溫為37℃。分別在5、15、30、60、75、90、105、120min吸取5ml溶液，采用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，經(jīng)hplc測(cè)定含量后計(jì)算不同時(shí)間的累積溶出度。

實(shí)施例1

處方：

制備方法：

稱取處方量的peg-4000、吐溫80、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得；

將制備得到的混懸劑稀釋后，測(cè)定粒徑及zeta電位，體積平均粒徑為755.0nm，zeta電位為-19.2mv。粒徑分布見(jiàn)圖1。

實(shí)施例2

處方：

制備方法：

稱取處方量的羧甲基纖維素鈉、吐溫80、zl004加入處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，將混懸劑收集轉(zhuǎn)移至10mlep管，并采用注射用水稀釋至，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為756.2nm，zeta電位為-44.0mv。將制劑放置30天后，測(cè)試粒徑為765.4nm.

實(shí)施例3

處方：

制備方法：

稱取處方量的聚乙烯吡咯烷酮、吐溫80、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為793.5nm，zeta電位為-23.9mv。

實(shí)施例4

處方：

制備方法：

稱取處方量的海藻酸鈉、吐溫80、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為781.9nm，zeta電位為-49.6mv。

實(shí)施例5

處方：

制備方法：

稱取處方量的甘油、吐溫80、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為776.1nm，zeta電位為-21.3mv。

實(shí)施例6

處方：

制備方法：

稱取處方量的羥丙基纖維素、吐溫80、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為829.7nm，zeta電位為-27.4mv。

實(shí)施例7

處方：

制備方法：

稱取處方量的羥丙甲基纖維素、吐溫80、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為687.1nm，zeta電位為-24.3mv。

實(shí)施例8

處方：

制備方法：

稱取處方量的羧甲基纖維素鈉、甘油、吐溫80、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為765.4nm，zeta電位為-36.7mv。

實(shí)施例9

處方：

制備方法：

稱取處方量的羧甲基纖維素鈉、泊洛沙姆188、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為793.5nm，zeta電位為-48.4mv，將制劑室溫放置30天后，測(cè)量粒徑為807.3nm。

實(shí)施例10

處方：

制備方法：

稱取處方量的羧甲基纖維素鈉、甘油、泊洛沙姆188、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為718.5nm，zeta電位為-35.4mv。

實(shí)施例11

處方：

制備方法：

稱取處方量的羧甲基纖維素鈉、吐溫80、zl004加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以500rmp的轉(zhuǎn)速，研磨90min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為1052.3nm，zeta電位為-43.6mv。

實(shí)施例12

處方：

制備方法：

稱取處方量的羧甲基纖維素鈉、吐溫80、zl004、加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用氯化鈉調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用磷酸緩沖液調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為706.4nm，zeta電位為-45.2mv。

實(shí)施例13

處方：

制備方法：

稱取處方量的羧甲基纖維素鈉、吐溫80、zl004、加入到處方量的注射用水中，混勻，將上述輔料溶解或者溶脹后形成溶液，再將其與zl004共同加入至行星式球磨機(jī)中，混勻，形成研磨物料混合物，加入30粒直徑為1.0mm的瑪瑙磨珠，置行星式球磨機(jī)中，以600rmp的轉(zhuǎn)速，研磨60min。研磨完成后，采用山梨醇調(diào)節(jié)滲透壓至等滲，采用檸檬酸鈉調(diào)節(jié)ph值至7，即得。將制備得到的混懸劑適當(dāng)稀釋后測(cè)定粒徑及zeta電位。體積平均粒徑為715.7nnm，zeta電位為-47.8mv。