本發(fā)明涉及式(ⅰ)所示的雙環(huán)醇(bicyclol)的新醫(yī)藥用途，其具體為雙環(huán)醇在治療和/或預(yù)防糖尿病的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

糖尿病是由遺傳、環(huán)境、免疫等因素相互作用而引起的代謝失調(diào)性內(nèi)分泌疾病，以高血糖為主要標(biāo)志，分為i型糖尿病和ii型糖尿病。i型糖尿病又名胰島素依賴型糖尿病，是由于自身免疫損傷等原因引起體內(nèi)胰島β細(xì)胞損害，導(dǎo)致胰島素絕對(duì)缺乏而引起的高血糖病癥，“三多一少”癥狀明顯。ii型糖尿病是由于體內(nèi)對(duì)胰島素的敏感性下降(相對(duì)缺乏)而導(dǎo)致的糖脂代謝紊亂，以高血糖高血脂為顯著特點(diǎn)，往往伴有胰島素抵抗。糖尿病作為一種代謝紊亂性疾病，可引發(fā)腎衰竭、失明、酮癥酸中毒及心腦血管疾病等嚴(yán)重并發(fā)癥，已成為繼惡性腫瘤和心腦血管病之后嚴(yán)重威脅人類健康的第三大非傳染性疾病。近年來(lái)我國(guó)糖尿病的患病率呈顯著遞增趨勢(shì)迅速增加，給社會(huì)和家庭帶來(lái)巨大壓力和沉重負(fù)擔(dān)，研發(fā)更多可用于臨床的安全有效的降糖藥物顯得尤其重要。

目前糖尿病的治療主要集中在多種降血糖藥和胰島素治療，但均存在嚴(yán)重的毒副作用，且均不能有效預(yù)防并發(fā)癥的發(fā)生。這些藥物主要分為如下幾類：(1) 胰島素，降糖效果明顯，但易發(fā)生低血糖反應(yīng)，皮下注射可出現(xiàn)皮膚病變。(2)促胰島素分泌劑：磺酰脲類，如格列本脲、格列吡嗪、格列齊特等；非磺酰脲類，如瑞格列耐和那格列耐，此類藥物較易發(fā)生低血糖反應(yīng)，有肝腎毒性。(3)雙胍類：如二甲雙胍，有降低體重的作用，并可能出現(xiàn)乳酸血癥。(4)α-葡萄糖苷酶抑制劑：阿卡波糖和伏格列波糖，常見腸道多氣、腹脹等不良反應(yīng)。(5)胰島素增敏劑，即噻啶烷二酮類藥物：曲格列酮、羅格列酮，常見有水腫、體重增加、肝損害等不良反應(yīng)。

雙環(huán)醇(bicyclol)是我國(guó)第一個(gè)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家一類抗肝炎藥物，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所劉耕陶院士和張純貞教授所在的科研小組研發(fā)，臨床具有良好的保肝降酶作用和一定的抗肝炎病毒活性，服用方便，無(wú)明顯不良反應(yīng)，被廣泛應(yīng)用于治療慢性乙肝、丙肝及各種原因引起的肝損傷，最近臨床研究顯示，雙環(huán)醇與二甲雙胍合用可用于治療糖尿病相關(guān)非酒精性脂肪肝，對(duì)非酒精性脂肪肝具有良好活性。其作用機(jī)制與抗氧化，免疫調(diào)節(jié)，抑制炎癥因子和保護(hù)肝細(xì)胞線粒體有關(guān)。本發(fā)明人在對(duì)雙環(huán)醇的深入基礎(chǔ)研究中發(fā)現(xiàn)，其能顯著促進(jìn)巨噬細(xì)胞pparγ的表達(dá)，活性與抗糖尿病藥物羅格利酮相當(dāng)，隨對(duì)雙環(huán)醇抗糖尿病作用進(jìn)行系統(tǒng)研究，并申請(qǐng)本專利。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明解決的技術(shù)問題在于提供雙環(huán)醇在制備治療和/或預(yù)防i型糖尿病或ii型糖尿病藥物中的應(yīng)用。

為解決本發(fā)明的技術(shù)問題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明技術(shù)方案的第一方面是提供如式(ⅰ)所示雙環(huán)醇及其藥學(xué)上可接受的鹽在制備治療和/或預(yù)防糖尿病藥物中的應(yīng)用，其中所述的糖尿病選自i型糖尿病或ii型糖尿病。

為驗(yàn)證本發(fā)明本發(fā)明的技術(shù)方案，本發(fā)明提供了兩個(gè)動(dòng)物模型，第一個(gè)動(dòng)物模型為鏈脲霉素誘導(dǎo)的i型糖尿病動(dòng)物模型：鏈脲霉素(streptozotocin，stz)是亞硝基脲類似物，能通過自身含有的葡萄糖結(jié)構(gòu)被胰島β細(xì)胞上的葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白glut2轉(zhuǎn)運(yùn)，進(jìn)入胰島β細(xì)胞，干擾葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)，誘導(dǎo)dna烷基化，并產(chǎn)生自由基選擇性損傷胰島β細(xì)胞，導(dǎo)致胰島β細(xì)胞壞死，使細(xì)胞內(nèi)胰島素合成受損，造成胰島素缺乏。一次性大劑量注射stz常用于誘導(dǎo)i型糖尿病動(dòng)物模型，該化合物引起的糖尿病高血糖反應(yīng)及酮癥均較緩和，所致糖尿病模型更加穩(wěn)定。

本發(fā)明的第二個(gè)動(dòng)物模型為與人類發(fā)病機(jī)制極為相似的自發(fā)性ii型kkay小鼠糖尿病動(dòng)物模型：kkay小鼠是一種輕度肥胖伴有胰島素抵抗型的自發(fā)性糖尿病動(dòng)物，遺傳背景來(lái)源于c57bl/6小鼠，有明顯的糖代謝紊亂、高血糖、脂質(zhì)代謝紊亂和高胰島素血癥等代謝異常綜合征和糖尿病癥狀，其發(fā)病是在遺傳易感的基礎(chǔ)上加環(huán)境因素而誘發(fā)，與人類ⅱ型糖尿病表現(xiàn)極為相似，常用作ii型糖尿病動(dòng)物模型。

本發(fā)明利用上述兩個(gè)模型評(píng)價(jià)了雙環(huán)醇抗糖尿病活性。

本發(fā)明技術(shù)方案的第二方面是提供一種藥物組合物在制備治療和/或預(yù)防糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的藥物組合物包含式(i)所示的雙環(huán)醇或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑，

其中，所述藥物組合物包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、丸劑、滴丸劑、預(yù)乳劑、微乳劑、混懸劑、糖漿劑、腸溶制劑、注射劑。

為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何的給藥方式給藥。

本發(fā)明的化合物或藥物組合物的給藥劑量依照所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動(dòng)物的個(gè)體情況，給藥途徑和劑型等可以有大范圍的變化。一般來(lái)講，本發(fā)明化合物每天的合適劑量范圍為25-400mg/kg體重。上述劑量可以一個(gè)劑量單位或分成幾個(gè)劑量單位給藥，這取決于醫(yī)生的臨床經(jīng)驗(yàn)以及包括運(yùn)用其它治療手段的給藥方案。

本發(fā)明的化合物或組合物可單獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。當(dāng)本發(fā)明的化合物與其它治療藥物存在協(xié)同作用時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整它的劑量。

有益技術(shù)效果

在本發(fā)明中，雙環(huán)醇灌胃給藥對(duì)stz誘導(dǎo)的i型糖尿病小鼠模型顯示顯著的抗糖尿病活性，與模型組比較，雙環(huán)醇連續(xù)給藥14天，能顯著降低i型糖尿病小鼠空腹血糖水平，改善stz誘導(dǎo)的i型糖尿病小鼠胰腺組織病理?yè)p傷，顯著增加胰島β細(xì)胞數(shù)量，減少胰島β細(xì)胞的變性和壞死。在自發(fā)性ii型糖尿病kkay小鼠模型，雙環(huán)醇連續(xù)灌胃給藥21天，能顯著降低ii型糖尿病小鼠空腹血糖水平，改善胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，改善ii型糖尿病小鼠胰腺組織胰島病理?yè)p傷，顯著增加胰島β細(xì)胞數(shù)目，同 時(shí)對(duì)ii型糖尿病小鼠血脂升高和alt升高具有顯著降低活性。在本發(fā)明中，雙環(huán)醇在i型糖尿病模型降血糖作用與二甲雙胍相當(dāng)，但對(duì)胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用和對(duì)胰島病理的改善作用活性優(yōu)于二甲雙胍。在自發(fā)性ii型糖尿病小鼠模型，雙環(huán)醇降血糖作用溫和，與羅格列酮比較，具有不增加ii型糖尿病小鼠動(dòng)物體重、降低血脂和改善肝損傷的優(yōu)勢(shì)，且雙環(huán)醇在臨床用于治療肝病多年無(wú)嚴(yán)重不良反應(yīng)事件，本發(fā)明中雙環(huán)醇在糖尿病動(dòng)物模型其起效劑量(低于50mg/kg)亦低于肝病動(dòng)物模型起效劑量(100mg/kg)，綜合以上信息，雙環(huán)醇用于糖尿病治療安全、有效，且有預(yù)防糖尿病相關(guān)心腦血管疾病和糖尿病相關(guān)肝臟疾病的作用。

附圖說(shuō)明

圖1：雙環(huán)醇對(duì)stz誘導(dǎo)i型糖尿病小鼠胰腺組織病理改變的影響(200×)

圖2：雙環(huán)醇對(duì)stz誘導(dǎo)i型糖尿病小鼠胰腺組織病理單位面積胰島細(xì)胞數(shù)的增加作用(n＝6-10)。^###p<0.001，與空白對(duì)照組比較；^**p<0.01，^***p<0.001，與模型組比較

圖3：kkay小鼠ii型糖尿病模型動(dòng)物體重變化情況(n＝6)

圖4：雙環(huán)醇對(duì)kkayii型糖尿病小鼠空腹血糖的影響(上)及實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)各組小鼠血糖值分布(下)。^###p<0.001，與空白對(duì)照組比較；^**p<0.01，^***p<0.001，與模型組比較

圖5：雙環(huán)醇對(duì)kkayii型糖尿病小鼠血清生化指標(biāo)的影響。^###p<0.001，與空白對(duì)照組比較；^*p<0.05，^***p<0.001，與模型組比較

圖6：雙環(huán)醇對(duì)-kayii型糖尿病小鼠葡萄糖耐量、胰島素水平及胰島素抵抗的影響。^###p<0.001，與空白對(duì)照組組比較；^*p<0.05，^***p<0.001，與模型組比較

圖7：雙環(huán)醇對(duì)kkayii型糖尿病小鼠胰腺組織病理改變的改善作用(200×)

圖8：雙環(huán)醇對(duì)kkayii型糖尿病小鼠胰腺組織病理單位面積胰島細(xì)胞數(shù)的增加作用(n＝6)。^###p<0.001，與空白對(duì)照組比較；^*p<0.05，^**p<0.01，^***p<0.001，與模型組比較

具體實(shí)施方式

本發(fā)明提供了雙環(huán)醇在制備治療和/或預(yù)防糖尿病藥物中的應(yīng)用，下面列舉實(shí)施例進(jìn)一步對(duì)本發(fā)明予以說(shuō)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。

實(shí)施例1利用i型糖尿病動(dòng)物模型對(duì)化合物進(jìn)行檢測(cè)

1鏈脲霉素(stz)誘導(dǎo)的i型糖尿病小鼠模型建立及給藥方法

spf級(jí)雄性icr小鼠(20～22g)，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，飼養(yǎng)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所glp動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。自由攝食、飲水，溫度20±3℃，相對(duì)濕度50.0±10.0％，間隔12小時(shí)開燈光照。實(shí)驗(yàn)中所有操作均遵循北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查指南。小鼠適應(yīng)環(huán)境后禁食18h，除空白對(duì)照組小鼠，其余小鼠均單次腹腔注射stz180mg/kg[stz溶于檸檬酸鈉緩沖液(ph4.2-4.5)中，臨用前配制]，空白對(duì)照組小鼠腹腔注射相同量的溶劑。72h后stz注射組動(dòng)物出現(xiàn)三多癥狀(多食、多飲、多尿)，葡萄糖氧化酶法測(cè)定空腹血糖高于11.1mmol/l者為造模成功。將造模成功小鼠根據(jù)血糖值隨機(jī)分組，分別為stz模型組、雙環(huán)醇50mg/kg組、雙環(huán)醇100mg/kg組、雙環(huán)醇200mg/kg組、及陽(yáng)性對(duì)照藥二甲雙胍(北京京豐制藥，批號(hào)：141160)200mg/kg組。各給藥組均按10ml/kg量口服給藥，每天一次，連續(xù)給藥14天，空白對(duì)照組和stz模型組給予相同量的溶劑(0.5％cmc-na)。于末次給藥后，小鼠禁食不禁水12h，摘眼球取血處死動(dòng)物。

2血糖指標(biāo)測(cè)定

于給藥前和末次給藥后分別取血，葡萄糖氧化酶試劑盒檢測(cè)空腹葡萄糖含量。

3胰腺病理檢測(cè)

取小鼠胰腺標(biāo)本，經(jīng)10％甲醛固定，常規(guī)脫水透明、石蠟包埋、切片后，進(jìn)行h.e.染色，光鏡下檢查胰腺組織特別是胰島病理狀態(tài)，分析并照相。

4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)以均數(shù)平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。組間比較用t檢驗(yàn)，以p<0.05表示有顯著性差異。

5實(shí)驗(yàn)結(jié)果

5.1雙環(huán)醇對(duì)stz誘導(dǎo)的i型糖尿病小鼠一般狀況及體重的影響

分組、給藥及動(dòng)物體重情況見表1。小鼠注射stz后，體重明顯下降，出現(xiàn)“三多一少”癥狀(多食、多飲、多尿)，動(dòng)物精神狀態(tài)不佳，造模后第5天開始無(wú)論模型組還是給藥組動(dòng)物均出現(xiàn)死亡，至實(shí)驗(yàn)結(jié)束，模型組動(dòng)物共死亡3只(死亡率33.3％)，雙環(huán)醇各給藥組和二甲雙胍組動(dòng)物均各死亡2只(死亡率25.0％)。雙環(huán)醇降低動(dòng)物死亡率的作用與二甲雙胍相當(dāng)。雙環(huán)醇連續(xù)給藥14天，與模型組比較，動(dòng)物體重?zé)o明顯降低。

表1stz誘導(dǎo)i型糖尿病模型分組及動(dòng)物初始體重、終末體重情況(n＝6-10)。

^###p＜0.001，與空白對(duì)照組比較。

5.2雙環(huán)醇對(duì)stz誘導(dǎo)的i型糖尿病小鼠空腹血糖的影響

結(jié)果見表2，stz能顯著升高小鼠空腹血糖水平，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，血糖進(jìn)一步升高。雙環(huán)醇連續(xù)給藥14天，50，100，200mg/kg劑量均能顯著降低stz引起的小鼠空腹血糖升高，空腹血糖值與模型組比較有顯著性差異。陽(yáng)性對(duì)照藥二甲雙胍亦能顯著降低空腹血糖水平，雙環(huán)醇在該模型對(duì)空腹血糖的降低作用與二甲雙胍相當(dāng)。

表2雙環(huán)醇對(duì)stz誘導(dǎo)i型糖尿病小鼠空腹血糖的影響(n＝6-10)

^###p＜0.001，與空白對(duì)照組比較；^*p＜0.05，^**p＜0.01，^***p＜0.001，與模型組比較。

5.3雙環(huán)醇對(duì)stz誘導(dǎo)的i型糖尿病小鼠胰腺組織病理學(xué)改變的影響

胰腺病理結(jié)果見圖1，空白對(duì)照組小鼠胰腺小葉結(jié)構(gòu)正常，胰島多見，呈圓形、橢圓形或條索狀，輪廓清晰，胰島β細(xì)胞豐富。stz模型組小鼠胰島變少、變小，胰島和腺泡之間的結(jié)締組織增生，僅存的胰島形狀不規(guī)則，與周圍組織界限不明顯，胰島內(nèi)胰島β細(xì)胞數(shù)量減少、空泡變性、壞死或消失，使胰島呈空虛狀態(tài)。雙環(huán)醇50，100，200mg/kg各給藥組對(duì)stz誘導(dǎo)的i型糖尿病小鼠胰腺病理?yè)p傷均 有顯著改善作用，顯著增加β細(xì)胞數(shù)量，減少胰島β細(xì)胞的變性和壞死，部分恢復(fù)胰島形態(tài)的完整性。雙環(huán)醇100mg/kg、200mg/kg劑量對(duì)胰島β細(xì)胞的保護(hù)作用和對(duì)胰島病理的改善作用活性優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥二甲雙胍200mg/kg。單位面積內(nèi)胰島細(xì)胞數(shù)量統(tǒng)計(jì)結(jié)果見圖2、表3。

表3雙環(huán)醇對(duì)stz誘導(dǎo)i型糖尿病小鼠胰島細(xì)胞數(shù)的影響(n＝6-10)

^###p＜0.001，與空白對(duì)照組比較；^**p＜0.01，^***p＜0.001，與模型組比較。

實(shí)施例2利用ii型糖尿病動(dòng)物模型對(duì)化合物檢測(cè)

1ii型糖尿病動(dòng)物模型的建立及給藥方法

spf級(jí)雄性kkay小鼠(11周齡)，由中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，飼養(yǎng)于中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所glp動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。高脂飼料喂養(yǎng)(購(gòu)自中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，自由攝食、飲水，溫度20±3℃，相對(duì)濕度50.0±10.0％，間隔12小時(shí)開燈光照。實(shí)驗(yàn)中所有操作均遵循北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理審查指南。動(dòng)物適應(yīng)環(huán)境1周后，尾尖取血，用羅氏血糖儀測(cè)定空腹4小時(shí)血糖，血糖值大于11.1mmol/l者為模型成功。按血糖值將kkay小鼠隨機(jī)分為4組：模型組，雙環(huán)醇50mg/kg組，雙環(huán)醇100mg/kg組及羅格列酮(重慶涪陵制藥，批號(hào)：15070034)10mg/kg組。另設(shè)空白對(duì)照組為同周齡的雄性c57bl/6小鼠，每組6只。分組后第2天按10ml/kg灌胃給藥，模型組和空白組動(dòng)物給予相同量的溶劑(0.5％cmc-na)。每天給藥一次，給藥周期21天，每三天記錄一次體重，觀察飲水情況和飲食情況。

2血糖指標(biāo)測(cè)定

動(dòng)物禁食不禁水4小時(shí)，尾尖取血，羅氏血糖儀測(cè)定血糖值。

3口服葡萄糖耐量檢測(cè)(ogtt)

kkay小鼠連續(xù)給藥第18天，動(dòng)物禁食不禁水4小時(shí)后，按2g/kg劑量口服給予葡萄糖，分別測(cè)定給予葡萄糖后0min、30min、60min、120min時(shí)的空腹血糖，繪制血糖趨勢(shì)圖，計(jì)算趨勢(shì)圖曲線下面積(auc)，auc越大，表明胰島素利用越不敏感。

4血清生化指標(biāo)測(cè)定

kkay小鼠連續(xù)給藥第21天，動(dòng)物禁食不禁水4小時(shí)，測(cè)定空腹血糖后，摘眼球取血，制備血清。全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alt)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(ast)、甘油三酯(tg)、總膽固醇(cho)、高密度脂蛋白膽固醇(hdl-c)、低密度脂蛋白膽固醇(ldl-c)含量。

5胰島素抵抗指標(biāo)檢測(cè)

aplco胰島素檢測(cè)試劑盒檢測(cè)血清中的胰島素含量，依據(jù)下列公式計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(homa-ir)和胰島素敏感指數(shù)(isi)。

homa-ir＝fbg(mmol/l)×fins(miu/l)/22.5

isi＝1/(fbg(mmol/l)×fins(miu/l))

homa-ir值越高，isi值越低，說(shuō)明胰島素敏感性越差，胰島素抵抗越明顯。fbg：空腹血糖濃度，fins：空腹胰島素含量。

6胰腺病理檢測(cè)

取小鼠胰腺標(biāo)本，經(jīng)10％甲醛固定，常規(guī)脫水透明、石蠟包埋、切片后，進(jìn)行h.e.染色，光鏡檢查胰腺組織特別是胰島病理狀態(tài)，分析并照相

7統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

數(shù)據(jù)以均數(shù)平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。組間比較用t檢驗(yàn)，以p<0.05表示有顯著性差異。

8實(shí)驗(yàn)結(jié)果

8.1雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠一般狀況及體重變化影響

結(jié)果見表4、圖3。與空白對(duì)照組相比，kkay小鼠比同周齡的c57bl/6小鼠體型肥胖，體重偏大，三多(多食、多飲、多尿)癥狀明顯。雙環(huán)醇連續(xù)給藥21天，對(duì)kkay糖尿病小鼠體重?zé)o明顯升高或降低作用，而陽(yáng)性對(duì)照藥羅格列酮連續(xù)給藥21天，kkay小鼠體重顯著增加，與未給藥kkay模型組動(dòng)物比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，與文獻(xiàn)報(bào)道一致：羅格列酮有增加體重的不良反應(yīng)。

表4kkay小鼠ii型糖尿病模型分組及動(dòng)物初始體重、終末體重情況(n＝6)

^###p＜0.001，與空白對(duì)照組比較；^*p＜0.05，與模型組比較。

8.2雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠空腹血糖的影響

結(jié)果見表5、圖4。在開始給藥前，kkay小鼠根據(jù)血糖值分組，模型組及各給藥組動(dòng)物空腹血糖值均顯著高于c57bl/6空白對(duì)照組動(dòng)物，模型組與各給藥組血糖值相當(dāng)。隨著實(shí)驗(yàn)進(jìn)行，模型組動(dòng)物血糖值呈逐漸升高趨勢(shì)。雙環(huán)醇給藥組在第二周和第三周，與模型組比較空腹血糖水平降低，第三周更為明顯，雙環(huán)醇100mg/kg組在第三周空腹血糖平均值與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。陽(yáng)性對(duì)照藥羅格列酮極顯著降低kkay糖尿病小鼠空腹血糖水平，雙環(huán)醇與羅格列酮比較，降糖作用緩和。

表5雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠空腹血糖的影響(n＝6)

^###p＜0.001，與空白對(duì)照組比較；^**p＜0.01，^***p＜0.001，與模型組比較。

8.3雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠血清生化指標(biāo)的影響

結(jié)果見表6、圖5。與c57bl/6空白對(duì)照組比較，kkay小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alt)、甘油三酯(tg)、總膽固醇(cho)、低密度脂蛋白膽固醇(ldl-c)含量均顯著升高。雙環(huán)醇連續(xù)給藥21天，對(duì)高血糖引起的脂質(zhì)代謝紊亂如血清tg、 cho、ldl-c的升高有明顯降低作用，其中100mg/kg組的降低作用與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。雙環(huán)醇100mg/kg對(duì)kkay糖尿病小鼠肝臟損傷有顯著保護(hù)作用，顯著降低alt水平。陽(yáng)性對(duì)照藥羅格列酮僅降低血清tg水平，對(duì)血清cho、ldl-c反有升高的趨勢(shì)，提示其有增加心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)。雙環(huán)醇在預(yù)防糖尿病并發(fā)癥如調(diào)節(jié)血脂和保肝方面活性方面優(yōu)于羅格列酮。

表6雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠血清生化指標(biāo)的影響(n＝6)

^###p＜0.001，與空白對(duì)照組比較；^*p＜0.05，^***p＜0.001，與模型組比較。

8.4雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠胰島素抵抗的影響

結(jié)果見表7、表8、圖6。在葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)(ogtt)中，各組動(dòng)物血糖變化均先上升，約30min達(dá)峰值，后逐漸降低。血糖變化曲線下面積auc可反映胰島素敏感性情況，auc越大，表明機(jī)體對(duì)胰島素越不敏感，雙環(huán)醇50，100mg/kg能降低auc，但與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。胰島素含量測(cè)定結(jié)果顯示，雙環(huán)醇50，100mg/kg均能顯著降低血清胰島素水平，與模型組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。經(jīng)計(jì)算，雙環(huán)醇各劑量組亦能顯著降低胰島素抵抗指數(shù)(homa-ir)，升高胰島素敏感指數(shù)(isi)，提示雙環(huán)醇具有改善胰島素抵抗的作用，其100mg/kg活性優(yōu)于50mg/kg。陽(yáng)性對(duì)照藥羅格列酮顯著降低血糖水平，降低auc，顯著降低血清胰島素水平，降低homa-ir，升高isi。羅格列酮在kkay糖尿病小鼠改善胰島素抵抗方面活性優(yōu)于雙環(huán)醇。

表7雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)血糖變化的影響(n＝6)

表8雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠血清胰島素含量、胰島素抵抗指數(shù)(homa-ir)、胰島素敏感指數(shù)(isi)的影響(n＝6)

^###p＜0.001，與空白對(duì)照組比較；^*p＜0.05，^***p＜0.001，與模型組比較。

8.5雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠胰腺病理組織學(xué)觀察

結(jié)果見表9、圖7、圖8。c57bl/6空白對(duì)照組小鼠胰腺小葉結(jié)構(gòu)正常，胰島多見，呈圓形、橢圓形或條索狀，輪廓清晰，胰島β細(xì)胞豐富。kkay糖尿病小鼠的胰腺組織胰島形狀仍較完整，形態(tài)多樣，或與空白對(duì)照組相當(dāng)、或增大、或縮小，增大的胰島形態(tài)可能與發(fā)生胰島素抵抗之后胰島的代償反應(yīng)有關(guān)，但kkay糖尿病小鼠胰腺組織單位面積內(nèi)胰島β細(xì)胞數(shù)目較空白對(duì)照組顯著減低。雙環(huán)醇50，100mg/kg給藥組胰腺組織病理狀態(tài)較模型組明顯改善，胰島形態(tài)規(guī)則，與模型組相比，各給藥組的胰腺形態(tài)較規(guī)則，單位面積內(nèi)胰島β細(xì)胞數(shù)目較模型組顯著增多。陽(yáng)性對(duì)照藥羅格列酮亦改善胰腺組織病理狀態(tài)，單位面積內(nèi)胰島β細(xì)胞數(shù)目較模型組顯著增多。

表9雙環(huán)醇對(duì)ii型糖尿病小鼠胰島細(xì)胞數(shù)的影響(n＝6)

^###p＜0.001，與空白對(duì)照組比較；^*p＜0.05，^**p＜0.01，^***p＜0.001，與模型組比較。