本發(fā)明總地涉及使用微針遞送具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物。
背景技術(shù)：
：角質(zhì)層(sc)構(gòu)成對外源物質(zhì)(包括小分子量材料)的主要屏障。滲入皮膚的物質(zhì)必須擴(kuò)散通過sc的高度組織化的細(xì)胞間脂質(zhì)雙層。該細(xì)胞間微路徑(其為親脂性的)是外源物質(zhì)沿著遞送載體和sc之間的濃度梯度通過被動擴(kuò)散經(jīng)過sc屏障的主要途徑。已知能夠進(jìn)行有效被動擴(kuò)散并因此滲透通過sc屏障的分子的理想性質(zhì)為小于600da的分子量。對于高分子量的分子，旨在去除sc屏障的技術(shù)，如膠帶剝離和抽吸、激光或者熱消融是不實用的，而到目前為止無針注射還未能替代常規(guī)的基于針的遞送。在二十世紀(jì)七十年代首次提出了使用由多個微突起(microprotrusion)組成的微結(jié)構(gòu)化設(shè)備來破壞角質(zhì)層屏障的概念。已開發(fā)了包含固體微突起的各種設(shè)備來產(chǎn)生將刺穿角質(zhì)層留下微觀孔，并將使得能夠進(jìn)行隨后的向內(nèi)藥物遞送或者間隙液向外遷移的系統(tǒng)。本領(lǐng)域中已經(jīng)描述使用例如硅或聚合物制備固體微突起和微針陣列，例如參見wo2009040548、us6743211、us6743211、us6743211、ie2005/0825、us60/749.086、us6924087、us6743211、us6663820、us6743211、us6767341、us6743211、us6663820、us6652478、us6743211、us6749792、us6451240、us6767341、us6743211、us6230051、us6908453、us7108681、us6931277b1、ep1517722b1、us20060200069a1、us6611707、us6565532、us6960193、us6743211、us6379324、wo2007/040938a1、us6256533、us6743211、us6591124、us7027478、us6603987、us6821281和us6565532。本領(lǐng)域中目前已知的此類系統(tǒng)的使用與非常小量的藥物遞送的問題相關(guān)。顯然，需要穩(wěn)健的替代策略來增強(qiáng)高分子量輸送通過sc。技術(shù)實現(xiàn)要素：如所證實的，本發(fā)明人已經(jīng)顯示根據(jù)本發(fā)明的微針可用高溶脹性和高粘彈性聚合物刺穿角質(zhì)層。因此，在本發(fā)明的第一方面，提供包括多個部分的微針，其中所述多個部分包括遠(yuǎn)端部分和近端部分，所述多個部分中的至少兩個由不同聚合物制成，并且所述遠(yuǎn)端部分由至少一種具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物制成。在一個實施方案中，至少一種具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物具有介于500kda和100000kda之間、優(yōu)選介于1000kda和20000kda之間、且更優(yōu)選介于2100kda和15000kda之間的高分子量。在一個實施方案中，所述具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物選自透明質(zhì)酸、交聯(lián)透明質(zhì)酸、聚乙二醇交聯(lián)的pmve/ma、甲基乙烯基醚的共聚物及其混合物，并且優(yōu)選所述具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物選自交聯(lián)透明質(zhì)酸、聚乙二醇交聯(lián)的pmve/ma、甲基乙烯基醚的共聚物及其混合物。在一個實施方案中，所述具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物為聚乙二醇交聯(lián)的pmve/ma。在一個實施方案中，所述遠(yuǎn)端部分包含成孔的碳酸鹽試劑。在一個實施方案中，至少所述近端部分是水溶性的。在一個實施方案中，所述遠(yuǎn)端部分在插入皮膚后分離。在一個實施方案中，至少所述近端部分比所述遠(yuǎn)端部分更快降解。在一個實施方案中，所述微針可刺穿哺乳動物的角質(zhì)層。在一個實施方案中，所述遠(yuǎn)端部分是活性成分。在一個實施方案中，所述遠(yuǎn)端部分包含活性成分。在一個實施方案中，所述遠(yuǎn)端部分在插入皮膚后溶脹。在一個實施方案中，所述遠(yuǎn)端部分在插入皮膚后不到1h即溶脹。在一個實施方案中，在插入皮膚后1小時所述遠(yuǎn)端部分的直徑增加到至少2倍。在本發(fā)明的第二方面，提供包含多個所述微針的片狀面膜。在本發(fā)明的第三方面，提供所述微針在化妝品領(lǐng)域中和/或用于減少皮膚皺紋的用途。在本發(fā)明的第四方面，提供一種形成包含微針陣列的片材(sheet)的方法，所述方法包括以下步驟：(a)提供具有對應(yīng)所述微針的負(fù)形(negative)的空腔的模具，(b)將包含具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物的材料的共混物填充到所述模具中以模塑(mold)遠(yuǎn)端部分，(c)干燥所述模具，(d)用可溶材料的共混物澆注(cast)所述模具，(e)干燥所述模具，和(f)從模具中取出所述微針。附圖簡述圖1顯示由表2中指定的配方制備的peg交聯(lián)的pmve/ma(f1~f4)的溶脹比。圖2顯示表2中指定的peg交聯(lián)的pla的溶脹比。圖3顯示透明質(zhì)酸、交聯(lián)透明質(zhì)酸和peg交聯(lián)的pmve/ma的溶脹比。圖4顯示在動態(tài)掃頻測試中凝膠的粘彈性。圖5顯示通過施加壓力30s插入穿過全層新生豬皮的由f2(a)和f3(b)配方制備的mn-1(420μm)和由f2(c)和f3(d)制備的mn-2(280μm)的插入后的oct圖像。圖6顯示經(jīng)48h溶脹進(jìn)入全層豬皮的mn-f2和mn-f3的oct圖像。圖7顯示mn在不同時間間隔的體積(以mm3/cm2計)(平均值±sd，n=5)。圖8顯示在去除透明膠粘帶后保持插入全層豬皮中的溶脹mn。實施發(fā)明的最佳方式用于輸送高分子量聚合物通過生物屏障的微針根據(jù)本發(fā)明，具有高溶脹性的聚合物是在生理鹽水溶液或磷酸鹽緩沖鹽水中1小時體外培養(yǎng)(invitroincubation)后能夠溶脹至少超過10倍、優(yōu)選在1小時培養(yǎng)后能夠溶脹至少20倍、更優(yōu)選在1小時培養(yǎng)后能夠溶脹至少30倍、甚至更優(yōu)選在1小時培養(yǎng)后能夠溶脹至少40倍、并且最優(yōu)選在1小時培養(yǎng)后能夠溶脹約45-55倍的聚合物。該溶脹比可通過下面實施例部分中描述的方法來計算。根據(jù)本發(fā)明，具有高粘彈性的聚合物是在生理鹽水溶液或磷酸鹽緩沖鹽水中體外培養(yǎng)后將形成凝膠的聚合物。該凝膠在用流變儀進(jìn)行的動態(tài)掃頻測試中即使在低頻率(0.01hz)下展現(xiàn)高彈性模量g’、高粘性模量g’’、小于1的tan(δ)(tan(δ)=g’’/g’)和高稠度(consistency)g*(g*2=g’2+g’’2)。在本申請中，提及“微針”作為所用的微突起或微突出(microprojection)的類型。本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解：在許多情況下，相同的發(fā)明原理適用于使用其它微突起或微突出來穿透皮膚或其它生物膜。其它微突起或微突出可包括，例如美國專利號6,219,574和加拿大專利申請?zhí)?,226,718中所描述的微刀片(microblade)，和美國專利號6,652,478中所描述的有棱微針(edgedmicroneedle)?？偟貋碚f，優(yōu)選所述微突出具有至少約100μm、至少約150μm、至少約200μm、至少約250μm或至少約300μm的高度?？偟貋碚f，還優(yōu)選所述微突出具有不超過約1mm、不超過約800μm、不超過約500μm或在一些情況下不超過約300μm的高度。所述微突出可具有至少3:1(高度比底部直徑)、至少約2:1或至少約1:1的縱橫比。在一個實施方案中，所述微針形狀為具有圓形底部的圓錐形，其在底部上方逐漸變細(xì)至微針高度處的一點。合適地，在本發(fā)明的陣列的實施方案中，所述微針可在其底部具有1-500μm的直徑。在一個實施方案中，本發(fā)明的微針和用于本發(fā)明的微針可具有50-300μm范圍內(nèi)，例如100-200μm的直徑。在另一實施方案中，本發(fā)明的微針可具有1μm至50μm范圍內(nèi)，例如20-50μm范圍內(nèi)的直徑。近端部分在一個實施方案中，所述近端部分由一種或更多種可溶聚合物制成。所述近端部分是包含近端的部分。合適的聚合物的實例包括但不必局限于：具有低分子量(優(yōu)選低于50kda、更優(yōu)選低于10kda)的透明質(zhì)酸；單糖(例如，葡萄糖、果糖、半乳糖)；二糖(例如，蔗糖、乳糖、麥芽糖)；低聚糖、糊精、葡聚糖、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚(甲基乙烯基醚/馬來酸酐)、聚乙烯吡咯烷酮和gantrez類型聚合物。在本發(fā)明的特定實施方案中，合適的聚合物是gantrez類型聚合物如聚(甲基/乙烯基醚/馬來酸)(pmve/ma)及其酯，和聚(甲基/乙烯基醚/馬來酸酐)(pmve/mah)。遠(yuǎn)端部分在一個實施方案中，所述遠(yuǎn)端部分由一種或更多種形成水凝膠的聚合物制成。所述遠(yuǎn)端部分是包含遠(yuǎn)端的部分。合適的聚合物的實例包括但不必局限于：具有高分子量(優(yōu)選超過500kda、更優(yōu)選超過1000kda、甚至更優(yōu)選超過2100kda)的透明質(zhì)酸；交聯(lián)透明質(zhì)酸；交聯(lián)聚乙二醇；聚乙二醇交聯(lián)的聚乳酸/聚乙醇酸/乳酸-乙醇酸共聚物/聚二噁烷酮；苯乙烯-丙烯酸嵌段共聚物；聚乙二醇交聯(lián)的聚(甲基/乙烯基醚/馬來酸)(peg交聯(lián)的pmve/ma)；交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮；羥基乙酸淀粉鈉；纖維素；天然膠和合成膠；藻酸鹽；聚丙烯酸鈉和peg-交聯(lián)的gantrez類型聚合物(peg交聯(lián)的gantrez)。gantrez類型聚合物包括聚(甲基/乙烯基醚/馬來酸)(pmve/ma)及其酯，和聚(甲基/乙烯基醚/馬來酸酐)(pmve/mah)。在本發(fā)明的優(yōu)選實施方案中，具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物包含不同百分比的成孔試劑，如碳酸鈉(na2co3)。根據(jù)本發(fā)明，成孔試劑是能夠引起聚合物上的游離酸基電離，從而排斥相鄰基團(tuán)并甚至進(jìn)一步打開結(jié)構(gòu)的試劑。為了用于經(jīng)皮遞送，微針必須能夠在角質(zhì)層中產(chǎn)生開口。合適地，當(dāng)沿著微針長度在微針上施加小于50.0n/cm2，例如小于20.0n/cm2，如小于10n/cm2的插入壓力時所述微針不由于手動力而破裂。遠(yuǎn)端部分的釋放根據(jù)本發(fā)明，所述近端部分由在插入皮膚后能夠溶解的聚合物制成。歸功于所述近端部分的溶解和所述遠(yuǎn)端部分的體積膨脹，所述遠(yuǎn)端部分將分離并保留在皮膚中?？山Y(jié)合微針片的施加來加入任選的外部水以加速近端部分的溶解，所述水在微針片之前或之后施加。藥物遞送任選地，聚合物的交聯(lián)可用于進(jìn)一步改變微突起的強(qiáng)度和溶脹特性以及微突起用于活性劑遞送的釋放特性。例如，在僅需要一劑的情況下，輕度交聯(lián)的水凝膠微突起可快速遞送藥物。中度交聯(lián)的水凝膠微突起可用于允許延長的藥物遞送，因此促進(jìn)了藥物持續(xù)遞送進(jìn)入皮膚。微針在片狀面膜中的用途微針可具有任何合適的尺寸和形狀以用于片材中來刺穿角質(zhì)層。該片材的微針被設(shè)計來刺破并任選穿過角質(zhì)層。合適地，可改變微針的高度以便允許穿透進(jìn)入上表皮或遠(yuǎn)至深層表皮。可改變片材中個體微針的每一個之間的頂端分離距離以確保穿透皮膚，同時具有足夠小的分離距離以提供高的經(jīng)皮輸送速率。在該設(shè)備的實施方案中，微突起之間的頂端分離距離的范圍可在50-1000μm，如100-400μm或200-300μm范圍內(nèi)。這允許實現(xiàn)角質(zhì)層的有效穿透和具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物的提高的遞送之間的折中。對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將明顯的是：本發(fā)明的微針可采取任何合理的形狀，包括但不限于圓錐形、棒狀和/或柱形。因此(assuch)，所述微針可在頂端具有與底部相同的直徑或者在從底部到頂端的方向上直徑可逐漸變細(xì)。用于片材的化妝品支撐物支撐物例如選自面膜、擦拭巾(wipe)、貼片(patch)，和一般而言，全部類型的多孔基底。優(yōu)選地，這些支撐物具有長圓形(oblong)結(jié)構(gòu)，即具有比它們被限定于其中的平面的尺寸小的厚度。另一支撐物可例如為植絨敷貼器(flockedapplicator)。該敷貼器包含例如由其表面上覆蓋有植絨的彈性體或塑料制成的主體?？汕懈钪挝镆员愠蕡A盤、面膜、毛巾、手套、預(yù)切卷的形式或適合于化妝品用途的任何其它形式。微針在化妝品領(lǐng)域中的用途使用微針片遞送具有高溶脹性和高粘彈性的聚合物以通過減少皺紋的出現(xiàn)來改善皮膚的審美外觀?；|(zhì)量的減少導(dǎo)致皮膚厚度降低和皮膚彈性變差，引起皺紋的形成。位于皮膚中的遠(yuǎn)端部分將隨著其吸收皮膚中的水一起進(jìn)一步溶脹并增加體積。皺紋部位的皮膚表面下方的這種體積膨脹從皮膚內(nèi)部推動皺紋并使得皺紋變得更淺和更寬。在特定實施方案中，本發(fā)明的微針可用于向皮膚施加半永久或永久標(biāo)記。制造微針的方法一種形成微針陣列的方法，包括以下步驟：(a)提供具有對應(yīng)所述微針的負(fù)形的空腔的模具，(b)將具有高溶脹性和高粘彈性的材料的共混物填充到澆注用模具中以模塑遠(yuǎn)端部分，(c)在室溫下干燥若干小時，(d)用可溶材料的共混物澆注所述模具，(e)在室溫下干燥(并且任選加熱)，和(f)從模具取出所述微針并將片材切成所需形狀。在閱讀以下描述(僅通過舉例方式給出)并參考附圖后，將更好地理解本發(fā)明。實施例在測試1和測試2中篩選peg交聯(lián)的pmve/ma、peg交聯(lián)的聚乳酸、透明質(zhì)酸和交聯(lián)透明質(zhì)酸的可溶脹材料，以從溶脹性能和粘彈性(其是皮膚中的膨脹(plumping)和固定的適合性的指示)的角度選擇用于微針的遠(yuǎn)端部分的材料。將基于測試1和2中的結(jié)果選擇的可溶脹材料用于微針的成型(prototyping)。在測試3和測試4中進(jìn)一步研究了這些原型經(jīng)48小時的插入和皮膚內(nèi)溶脹。遠(yuǎn)端部分的材料選擇：體外溶脹性能測試材料peg交聯(lián)的pmve/ma：通過在室溫下干燥含水聚合物共混物(表1)48小時并在烘箱中在80℃下固化24小時以誘導(dǎo)peg和pmve/ma(gantrez?s-97)之間的化學(xué)交聯(lián)來制備樣品f1-4：表1.peg交聯(lián)的pmve/ma(peg-pmve/ma)的配方樣品(wt%)pmve/mapeg10kdana2co3去離子水f1207.5369.5f2207.5567.5f3157.5374.5f4157.5572.5peg交聯(lián)的聚乳酸(peg-pla)表2.用于測試的peg交聯(lián)的聚乳酸(peg-pla)edl-40(dl)peg-pla，peo40mol%edl-50(dl)peg-pla，peo50mol%edl-60(dl)peg-pla，peo60mol%el-40(l)pla-co-peg，peo40mol%高分子量透明質(zhì)酸和交聯(lián)透明質(zhì)酸表3.高分子量透明質(zhì)酸(ha)和交聯(lián)透明質(zhì)酸(ha)交聯(lián)ha交聯(lián)透明質(zhì)酸ha-1透明質(zhì)酸，分子量為1300-1800kdaha-2透明質(zhì)酸，分子量為1800-2150kdaha-3透明質(zhì)酸，分子量為2200kda測試方法：將測試材料稱重為w0并在生理鹽水溶液中在室溫下經(jīng)7小時溶脹。在定期間隔移走所述材料，用濾紙擦拭以除去過量水并稱重為wt。使用以下等式計算溶脹比，并然后畫成圖。t時刻的溶脹比=。結(jié)果圖1顯示peg交聯(lián)的pmve/ma(f1~f4)的溶脹比。在10min中后中斷了f4的溶脹研究，這是因為f4是溶解而不是溶脹；然而，na2co3的添加導(dǎo)致溶脹顯著增加。f2和f3在溶脹時具有高的流體吸收能力并還具有良好的機(jī)械強(qiáng)度。peg交聯(lián)的pla的溶脹性能：圖2顯示了表2中指定的peg交聯(lián)的pla的溶脹比。發(fā)現(xiàn)這些材料的溶脹性能展現(xiàn)以下順序：edl-60>el-40>edl-50>edl-40。高分子量ha、交聯(lián)ha和peg交聯(lián)的pmve/ma(f2和f3)的溶脹性能：圖3比較了透明質(zhì)酸(ha-1~3)、交聯(lián)透明質(zhì)酸和peg交聯(lián)的pmve/ma(f2和f3)的溶脹性能。高分子量ha在7小時培養(yǎng)期間顯示更好的溶脹，且在具有高分子量的三種ha中ha-3顯示最快的溶脹和最高的溶脹比。發(fā)現(xiàn)這些材料的溶脹性能展現(xiàn)以下順序：交聯(lián)ha>f3>ha-3>ha-2>f2>ha-1。結(jié)論：發(fā)現(xiàn)所選材料的溶脹性能展現(xiàn)以下順序：交聯(lián)ha>f3>ha-3>ha-2>f2>ha-1。遠(yuǎn)端部分的材料選擇：體外粘彈性測試材料交聯(lián)ha交聯(lián)透明質(zhì)酸ha-1透明質(zhì)酸，分子量為1300-1800kdaha-2透明質(zhì)酸，分子量為1800-2150kdaha-3透明質(zhì)酸，分子量為2200kdaf2通過在室溫下干燥表2中的含水聚合物共混物f248小時并在烘箱中在80℃下固化24小時以誘導(dǎo)peg和pmve/ma之間的化學(xué)交聯(lián)來制備f3通過在室溫下干燥表2中的含水聚合物共混物f348小時并在烘箱中在80℃下固化24小時以誘導(dǎo)peg和pmve/ma之間的化學(xué)交聯(lián)來制備測試方法：將測試材料放入濾器(strainer)中并在室溫下在生理鹽水溶液中培養(yǎng)以模擬皮膚內(nèi)的溶脹。在7小時后，測試材料在濾器中溶脹并形成凝膠。移走這些凝膠并用濾紙擦拭以除去過量水。使用流變儀在動態(tài)掃頻測試中在以下條件下測定粘彈性：幾何形狀：椎板幾何形狀測試設(shè)置：動態(tài)掃頻測試(應(yīng)變控制)應(yīng)變：0.1%溫度：32℃初始頻率：0.01hz最終頻率：10hz10倍頻點數(shù)：10使用以下等式計算tan(δ)和g*，并然后畫成圖。。結(jié)果：圖4顯示使用流變儀測定的凝膠的粘彈性。值低于1的tan(δ)意味著彈性行為比粘性特征更強(qiáng)，其中材料表現(xiàn)地更像凝膠。該物理化學(xué)行為是皮膚中的膨脹和固定的適合性的指示，特別是在主要模擬與皮膚接觸的低頻0.01-0.1hz的情況下。因此，根據(jù)tan(δ)的值，材料的用于固定的凝膠行為展現(xiàn)以下順序：交聯(lián)ha、f3、f2、ha-3、ha-1和ha-2。較高的g*意味著較高的凝膠硬度，其表明抵抗皮膚擠壓以保持形狀的能力。根據(jù)g*的值，特別是低頻下的g*值，材料的硬度展現(xiàn)以下順序：f3、交聯(lián)ha、f2、ha-1、ha-3和ha-2。結(jié)論評價的大多數(shù)材料具有低tan(δ)和高g*，這有益于在皮膚內(nèi)的形狀保持和固定。發(fā)現(xiàn)三種最好的材料是f3、交聯(lián)ha和f2。因為溶脹性能展示交聯(lián)ha>f3>ha-3>ha-2>f2>ha-1的順序，所以溶脹性能和粘彈性需要平衡以選擇用于微針的遠(yuǎn)端部分的材料。發(fā)現(xiàn)f2、f3和交聯(lián)ha用于微針的遠(yuǎn)端部分是最好的。具有peg交聯(lián)的pmve/ma(f2/f3)作為遠(yuǎn)端部分的微針(mn)的皮膚內(nèi)插入測試樣品：樣品針長度遠(yuǎn)端部分近端部分mn-1-f2420μm表2中的f2pmve/ma(gantrez?s-97)mn-1-f3420μm表2中的f3pmve/ma(gantrez?s-97)mn-2-f2280μm表2中的f2pmve/ma(gantrez?s-97)mn-2-f3280μm表2中的f3pmve/ma(gantrez?s-97)測試方法：微針的制備：根據(jù)以下圖解表示以兩步驟方法使用高度為420μm的mn-1的模具和高度為280μm的mn-2的模具制備微針(mn)：將0.05g的f2或f3共混物(表2)放入模具中并用刮鏟將該共混物鋪展以覆蓋mn孔的整個區(qū)域。將mn模具離心以迫使該共混物進(jìn)入mn孔中。使mn在室溫下干燥。然后，將pmve/ma(gantrez?s-97)澆注進(jìn)入模具中。將mn模具離心以迫使該共混物進(jìn)入mn孔中。然后使mn干燥并放入80℃的烘箱中保持24h。然后從模具中移走mn并用熱手術(shù)刀切割側(cè)壁。。mn離體(exvivo)穿透進(jìn)入皮膚將全層離體豬皮放置在用磷酸鹽緩沖鹽水潤濕的織物床(abedoftissue)上以模擬間隙液的底流(underflow)。將該皮膚拉緊并用金屬別針固定在支撐物上以模擬體內(nèi)的情況。用拇指經(jīng)30秒將mn樣品手動插入全層新生豬皮內(nèi)，施加的力與按壓按鈕以呼叫電梯時所用的力類似。使用透明膠粘帶將mn保持在合適位置。使用光學(xué)相干斷層成像術(shù)(oct)評定mn進(jìn)入皮膚中的穿透深度。結(jié)果圖5顯示mn(mn-1-f2/f3和mn-2-f2/f3)穿過全層新生豬皮的穿透深度，且表4顯示不同mn的平均插入深度。觀察到的穿透變化性可通過從相同mn陣列的不同mn觀察到的不同穿透速率解釋。所有由f2和f3制成的針成功地穿透到皮膚中，如下面的oct圖像(圖4)中所示。大約mn-1-f2/f3長度的74%(~310μm)和mn-2-f2/f3長度的72%(~200μm)穿透到皮膚中。表4.不同mn陣列的穿透深度平均值(平均值±s.d.，n=4)測試樣品插入深度(μm)穿透的皮膚層mn-1-f2313±13真皮mn-1-f3309±4真皮mn-2-f2198±16表皮mn-2-f3207±9表皮結(jié)論使用f2和f3材料作為遠(yuǎn)端部分和可溶gantrez作為近端部分成功地制備了兩種原型。兩種原型都以它們總長度的平均72–74%穿透到皮膚中而沒有破壞，如oct圖像中所示。具有peg-pmve/ma(f2/f3)作為遠(yuǎn)端部分的微針(mn)的皮膚內(nèi)溶脹測試樣品：樣品針長度遠(yuǎn)端部分近端部分mn-f2600μm表2中的f2pmve/ma(gantrez?s-97)mn-f3600μm表2中的f3pmve/ma(gantrez?s-97)使用高度為600μm的mn的模具按照第8頁上的測試3中詳述的程序以兩步驟方法制備微針。測試方法：mn進(jìn)入皮膚中的溶脹將全層離體豬皮放置在凝膠創(chuàng)傷敷料上，并在磷酸鹽緩沖鹽水中預(yù)平衡24小時以模擬間隙液的底流。將該皮膚拉緊并用金屬別針固定在支撐物上以模擬體內(nèi)的情況。將mn手動插入皮膚內(nèi)。在實驗期間在37℃的培養(yǎng)箱中保持此設(shè)置。使用oct監(jiān)測mn進(jìn)入皮膚中的溶脹，并研究設(shè)定時間：0、0.5、1、3、6、24和48h的mn體積的變化。結(jié)果使用高度為600μm的mn的模具將mn-f2和mn-f3按照其尺寸成型。圖6顯示mn-f2和mn-f3在不同時間間隔展示形狀變化并在皮膚中溶脹。觀察到mn-f2和mn-f3的遠(yuǎn)端部分保持使皮膚膨脹并保留在皮膚內(nèi)至少48小時。圖7畫出在48小時插入皮膚期間每cm2由mn所占體積。使用不同時間點單個mn的平均體積進(jìn)行計算；mn陣列覆蓋0.5x0.5cm的表面，其中有361個mn。在插入皮膚中48小時后，在測定為1cm2的表面上由mn-f2和mn-f3所占的流體體積分別為21.02±5.29和23.08±4.65μl/cm2。如圖7中所示，發(fā)現(xiàn)與mn-f2相比，在不同時間點mn-f3所占的總體積更大，表明兩種mn的遠(yuǎn)端部分的溶脹都在插入皮膚中后立即開始并持續(xù)至少48小時。在施加后，如圖8中所示，mn-f2和mn-f3的遠(yuǎn)端部分保持插入皮膚中，這是由于可溶近端部分的溶解。結(jié)論使用f2和f3作為遠(yuǎn)端部分將mn-f2和mn-f3按照其尺寸成型。這兩種mn的遠(yuǎn)端部分在施加后成功地保留在皮膚中。在48小時插入皮膚期間充分觀察到這兩種mn的遠(yuǎn)端部分的溶脹，且mn-f3顯示比mn-f2更好的溶脹(約5倍溶脹)。觀察到它們在皮膚中的膨脹和固定持續(xù)至少48小時。當(dāng)前第1頁12