本發(fā)明涉及一種增強免疫力的組合物及其制備方法，屬于保健食品的
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：免疫力是機體對“自己”和“非己”抗原的識別及應(yīng)答，以維持機體的生理平衡。即是以機體免疫器官，其包括胸腺、骨髓、淋巴結(jié)、脾臟及其組織內(nèi)的免疫細胞、免疫分子所構(gòu)成的免疫系統(tǒng)來防病、抗病，維護人體正常生理功能，從而使人們健康生活和工作?，F(xiàn)代免疫理論認為免疫系統(tǒng)由免疫器官、免疫細胞和免疫分子組成人體的免疫防御系統(tǒng)，相互依賴，相互制約發(fā)揮免疫防御、免疫穩(wěn)定和免疫監(jiān)視三大功能：①防御病原體的侵害，包括病毒、細菌、真菌、衣原體、支原體，即抗感染免疫；②監(jiān)視并清除體內(nèi)衰老或受到損傷不能修復(fù)的細胞；③防止體內(nèi)細胞的惡性變態(tài)及異常增殖。各個組成部分有各自的功能，相互之間又有著普遍的聯(lián)系，并且與神經(jīng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)構(gòu)成網(wǎng)絡(luò)。免疫正常情況下是消除“非己”，行使免疫防御、免疫穩(wěn)定、免疫監(jiān)視功能，達到中醫(yī)所謂的“陰平陽秘”對于未病學(xué)中潛病態(tài)、前病態(tài)中醫(yī)采取的是治未病的防治思想。治未病就是預(yù)先采取措施防止疾病的發(fā)生與發(fā)展、傳變?！爸挝床　卑▋煞矫娴暮x，一方面是未病先防，一方面是已病防變?！端貑?四氣調(diào)神大論》提出“圣人不治已病治未病，不治已亂治未亂”，《素問?八正神明論》云：“上工救其萌芽”，于疾病未發(fā)生之時進行治療，實為一種預(yù)防思想?！督饏T要略?臟腑經(jīng)絡(luò)先后病脈篇》“見肝之病，知肝傳脾，當先實脾”即為“治未病”思想即病變的具體體現(xiàn)。李梢認為：“治未病”是對未病態(tài)身心兩端，內(nèi)外環(huán)境作合乎自然的調(diào)養(yǎng)，消除疾病于萌芽、隱匿狀態(tài)?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)主要通過應(yīng)用保健藥品，補充維生素和蛋白質(zhì)，加強營養(yǎng)等提高機體免疫力。隨著社會經(jīng)濟發(fā)展水平的提高和人民健康意識的增強，人們越來越多地認識到增強免疫力的重要性，具有該功能的產(chǎn)品也越來越多地受到了人們的關(guān)注。人類對于健康的重新認識，使得“防病勝于治病”的理念深入人心，保健食品以其可以長期安全服用的優(yōu)點，深得人們的認同。因而，開發(fā)具有增強免疫力功能的產(chǎn)品具有廣闊的市場前景。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明目的是提供了一種具有增強免疫力功能的組合物。本發(fā)明的另外一個目的是提供了該組合物的制備方法。本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：本發(fā)明是由下述重量份的原料藥制成的：蝦青素1-15份、葡萄皮提取物10-50份、玫瑰花提取物25-55份。優(yōu)選為：蝦青素4-10份、葡萄皮提取物20-40份、玫瑰花提取物35-45份。進一步優(yōu)選為：蝦青素6.7份、葡萄皮提取物33.3份、玫瑰花提取物41.7份。本發(fā)明涉及一種組合物，它是在現(xiàn)有中醫(yī)理論的基礎(chǔ)上，進行科學(xué)配伍，發(fā)揮藥物之間相互協(xié)同的作用，從而篩選出能有效增強免疫力的組方。本發(fā)明中各原料藥的作用機理如下：蝦青素：又名蝦黃質(zhì)、龍蝦殼色素，是一種類胡蘿卜素，也是類胡蘿卜素合成的最高級別產(chǎn)物，呈深粉紅色，化學(xué)結(jié)構(gòu)類似于β-胡蘿卜素。研究表明,蝦青素能顯著影響動物的免疫功能，在有抗原存在時，能明顯促進脾細胞產(chǎn)生抗體的能力，增強T細胞的作用，刺激體內(nèi)免疫球蛋白的產(chǎn)生。蝦青素還能夠部分恢復(fù)年老小鼠的體液免疫系統(tǒng)，其中可使小鼠體內(nèi)的IgM、IgA和IgG分別都增加至10mol/L，表明在抗原入侵初期，它能增強特異性體液免疫反應(yīng)。另外，蝦青素還可以增強小鼠釋放白細胞介素-Iα和腫瘤壞死因子α的能力，其作用比β-胡蘿卜素和角黃素強得多。由此認為，蝦青素有很強的誘導(dǎo)細胞分裂的活性，具有重要的免疫調(diào)節(jié)作用。葡萄皮提取物：是一種對人類健康具有顯著作用的天然活性物質(zhì)，其主要成分為多酚類化合物，研究表明，多酚類化合物有著很好的調(diào)節(jié)免疫作用，可極大地減少肝癌、肝移植術(shù)后排斥反應(yīng)的發(fā)生。高路等為深入了解葡萄皮提取物的免疫調(diào)節(jié)功能，從特異性免疫和非特異性免疫兩方面進行了研究，發(fā)現(xiàn)不同劑量的葡萄皮提取物均能顯著提高免疫抑制模型鼠的巨噬細胞吞噬率、血清半數(shù)溶血值、機體抗體形成的細胞數(shù)量、淋巴細胞轉(zhuǎn)化率等，證明葡萄皮提取物對免疫功能低下和免疫缺陷能發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用。玫瑰花提取物：性質(zhì)溫和、可緩和情緒、補血氣，美顏護膚、對肝及胃有調(diào)理的作用，并具有消除疲勞、改善體質(zhì)，改善內(nèi)分泌失調(diào)，解除腰酸背痛，滋潤養(yǎng)顏，護膚美容，活血，促進血液循環(huán)之功能。為了使本發(fā)明組合物的功效能發(fā)揮到最大化，在組合物中還可以加入輔酶Q10、西洋參提取物、枸杞子提取物、山藥提取物中的一種或幾種。本發(fā)明組合物的制備方法如下：取所述重量份的蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，過篩，混合，不加或者加入適量輔料，按常規(guī)工藝制成藥劑學(xué)上可接受的制劑。如可以制成常用的片劑（分散片、泡騰片、口腔崩解片、含片、咀嚼片、泡騰片）、膠囊劑（硬膠囊、軟膠囊）、顆粒劑、丸劑（滴丸劑）、散劑等固體制劑形式的口服藥物，也可以制成糖漿、酒劑、酊劑、口服液等液體制劑形式的口服藥物；還可以制成膏劑、凝膠劑、軟膏劑、巴布劑、貼膏劑、搽劑、洗劑、涂膜劑等外用制劑形式的外用藥物。因此，該藥物組合物中除有效成分外，還可以含有藥學(xué)上可以接受的輔料。這里所述的輔料，可以根據(jù)不同的制劑有所不同，如在片劑、膠囊劑、顆粒劑等固體制劑中常用的稀釋劑、崩解劑、賦形劑、粘合劑、潤滑劑、表面活性劑、填充劑等；在糖漿、口服液等液體制劑形式中常用的表面活性劑、稀釋劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、矯味劑、增稠劑、助流劑等；在凝膠劑、軟膏劑等外用制劑形式中常用的藥用油性基質(zhì)、水性基質(zhì)、防腐劑、抗氧劑、保濕劑、透皮吸收促進劑、表面活性劑等。其常用輔料如淀粉、乳糖、蔗糖、糊精、糖粉、微晶纖維素、甘露醇、木糖醇、聚乙二醇、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣、改良淀粉、山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮、重質(zhì)碳酸鎂、羧甲基纖維素鈉、羥丙甲基纖維素、甲基纖維素、乙基纖維素、羧甲淀粉鈉、羥丙基纖維素、聚維酮K30、白陶土、預(yù)膠化淀粉、硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠、甜葉菊苷、甜菜堿、阿司帕坦、甘草甜素、糖精鈉、冰糖、蜂蜜、蜂蠟、大豆油、麻油、玉米油、花生油、蓖麻油、魚油、枸櫞酸、碳酸氫鈉、碳酸鈉、卡拉膠、瓊脂、明膠、海藻酸鈉、甲殼素、黃原膠、瓜耳豆膠、西黃耆膠、阿拉伯膠、槐豆膠、刺梧桐膠、硬脂酸、單硬脂酸甘油酯、聚丙烯酰胺、交聯(lián)型聚丙烯酸鈉、聚乙烯醇、卡波姆、山梨酸、山梨酸鉀、羥苯乙酯、苯甲醇、尼泊金、硫柳汞、二甲基亞砜、氮酮、三乙醇胺、氫氧化鈉、甘油、丙二醇、BHT、BHA、十二烷基硫酸鈉、吐溫類、司盤類、焦糖色、番茄紅素、赤蘚紅、檸檬黃、胭脂蟲紅等。本發(fā)明組合物優(yōu)先被制成軟膠囊，軟膠囊的組成為：包括囊心內(nèi)容物和囊殼，按重量份計，囊心內(nèi)容物中有效成分36-120份、助懸劑5-20份、稀釋劑180-230份；囊殼按重量份計，明膠100-300份、增塑劑400-600份、純化水100-300份、著色劑1-20份。該軟膠囊的制備方法為：（1）囊殼制備方法：明膠、增塑劑、著色劑、純化水加熱，攪拌均勻，配制成明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物混合均勻，得藥粉；將助懸劑、藥粉分別依次加入稀釋劑中，攪拌均勻，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝，即得軟膠囊。具體來說，軟膠囊的制備方法為：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入增塑劑、著色劑，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將助懸劑與1/3稀釋劑混合，加熱溶解，降溫,加入葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，攪拌，加入蝦青素及剩余2/3稀釋劑，混合均勻，過膠體磨研磨，過濾，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝，即得軟膠囊。制劑中稀釋劑是指大豆油、丙二醇、麻油、玉米油、花生油、蓖麻油、魚油中的一種或幾種；助懸劑是指卡波姆、海藻酸鈉、甲殼素、蜂蠟、黃原膠、阿拉伯膠中的一種或幾種；增塑劑是指甘油、山梨醇、枸櫞酸中的一種或幾種；著色劑是指焦糖色、番茄紅素、赤蘚紅、檸檬黃、胭脂蟲紅中的一種。其中，稀釋劑優(yōu)選魚油；助懸劑優(yōu)選蜂蠟；增塑劑優(yōu)選甘油；著色劑優(yōu)選胭脂蟲紅。本發(fā)明涉及的葡萄皮提取物、玫瑰花提取物可以由購買市售品得到或者采取以下制備方法得到：葡萄皮提取物：取葡萄皮加水或不同濃度的乙醇提取，提取液濃縮干燥得粗提物；或進一步采用水提醇沉法、有機溶劑萃取法、柱層析法、二氧化碳超臨界萃取法、水蒸氣蒸餾法的一種或幾種聯(lián)合使用進行適當精制后得精提物；上述粗提物或精提物即為葡萄皮提取物；玫瑰花提取物：取玫瑰花加水或不同濃度的乙醇提取，提取液濃縮干燥得粗提物；或進一步采用水提醇沉法、有機溶劑萃取法、柱層析法、二氧化碳超臨界萃取法、水蒸氣蒸餾法的一種或幾種聯(lián)合使用進行適當精制后得精提物；上述粗提物或精提物即為玫瑰花提取物。優(yōu)選采取以下制備方法得到：葡萄皮提取物：取葡萄皮加4-20倍量水提取1-4次，每次1-3小時，提取液合并，離心，過濾，濾液減壓濃縮，減壓干燥，粉碎成細粉，即為葡萄皮提取物；或者，葡萄皮提取物：取葡萄皮加4-20倍量20-95%乙醇提取1-4次，每次1-3小時，提取液合并，過濾，濾液減壓回收乙醇至無醇味，繼續(xù)濃縮，干燥，粉碎成細粉，即為葡萄皮提取物。玫瑰花提取物：取玫瑰花加4-20倍量水提取1-4次，每次1-3小時，提取液合并，離心，過濾，濾液減壓濃縮，減壓干燥，粉碎成細粉，即為玫瑰花提取物；或者，玫瑰花提取物：取玫瑰花加4-20倍量20-95%乙醇提取1-4次，每次1-3小時，提取液合并，過濾，濾液減壓回收乙醇至無醇味，繼續(xù)濃縮，干燥，粉碎成細粉，即為玫瑰花提取物。在對上述有效藥用成分進行提取時可采用的具體操作和/或使用方法，既可以是以所述的各比例量的藥物成分為原料，分別提取其有效藥用成分后再混合的方式，也可以采用按所說比例量的各藥物原料混合后再共同提取的方式。采用不同的提取手段、設(shè)備及提取時所需的理想或最佳的提取溫度、溶劑用量、提取時間、提取次數(shù)等具體條件，則可根據(jù)實際情況通過試驗被篩選和找到。以下通過實施例形式的具體實施方式，對本發(fā)明的上述內(nèi)容作進一步的詳細說明。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于以下的實施例。凡基于本發(fā)明上述內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)均屬于本發(fā)明的范圍。具體實施方式實施例1囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素6.7g葡萄皮提取物33.3g玫瑰花提取物41.7g蜂蠟12g魚油206.3g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠225g甘油500g胭脂蟲紅5g二氧化鈦1.5g純化水500g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、胭脂蟲紅、二氧化鈦，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蜂蠟與1/3魚油混合，加熱溶解，降溫,加入葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，攪拌，加入蝦青素及剩余2/3魚油，混合均勻，過膠體磨研磨，過濾，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝，即得軟膠囊。實施例2囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素10g葡萄皮提取物20g玫瑰花提取物45g蜂蠟20g魚油230g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠300g甘油400g胭脂蟲紅18g二氧化鈦2g純化水100g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、胭脂蟲紅、二氧化鈦，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蜂蠟與1/3魚油混合，加熱溶解，降溫,加入葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，攪拌，加入蝦青素及剩余2/3魚油，混合均勻，過膠體磨研磨，過濾，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝即得軟膠囊。實施例3囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素4g葡萄皮提取物40g玫瑰花提取物35g蜂蠟5g魚油180g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠100g甘油600g胭脂蟲紅1g二氧化鈦1g純化水300g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、胭脂蟲紅、二氧化鈦，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蜂蠟與1/3魚油混合，加熱溶解，降溫,加入葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，攪拌，加入蝦青素及剩余2/3魚油，混合均勻，過膠體磨研磨，過濾，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝即得軟膠囊。實施例4囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素15g葡萄皮提取物10g玫瑰花提取物55g蜂蠟15g魚油225g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠250g甘油400g胭脂蟲紅15g純化水250g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、胭脂蟲紅，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蜂蠟與1/3魚油混合，加熱溶解，降溫,加入葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，攪拌，加入蝦青素及剩余2/3魚油，混合均勻，過膠體磨研磨，過濾，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝即得軟膠囊。實施例5囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素1g葡萄皮提取物50g玫瑰花提取物25g蜂蠟10g魚油200g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠250g甘油550g胭脂蟲紅10g純化水250g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、胭脂蟲紅，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物混合均勻，得藥粉；將魚油加熱，加入蜂蠟熔融；降溫，加入藥粉，攪拌均勻，過膠體磨研磨，過篩，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝即得軟膠囊。實施例6囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素7g葡萄皮提取物30g玫瑰花提取物40g卡波姆10g黃原膠5g大豆油210g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠280g甘油350g山梨醇100g番茄紅素20g純化水280g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、山梨醇、番茄紅素，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物混合均勻，得藥粉；將大豆油加熱，加入卡波姆、黃原膠熔融；降溫，加入藥粉，攪拌均勻，過膠體磨研磨，過篩，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝即得軟膠囊。實施例7囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素6g葡萄皮提取物35g玫瑰花提取物42g卡波姆10g海藻酸鈉10g花生油150g丙二醇50g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠150g甘油280g枸櫞酸130赤蘚紅12g純化水220g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、枸櫞酸、赤蘚紅，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物混合均勻，得藥粉；將花生油、丙二醇加熱，加入卡波姆、海藻酸鈉熔融；降溫，加入藥粉，攪拌均勻，過膠體磨研磨，過篩，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝即得軟膠囊。實施例8囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素12g葡萄皮提取物45g玫瑰花提取物30g蜂蠟10g甲殼素5g阿拉伯膠5g蓖麻油100g麻油90g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠280g甘油470g檸檬黃8g純化水270g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、檸檬黃，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物混合均勻，得藥粉；將蓖麻油、麻油加熱，加入蜂蠟、甲殼素、阿拉伯膠熔融；降溫，加入藥粉，攪拌均勻，過膠體磨研磨，過篩，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝即得軟膠囊。實施例9囊心內(nèi)容物處方原料名稱投料量（1000粒）蝦青素8g葡萄皮提取物35g玫瑰花提取物42g蜂蠟12g玉米油210g囊殼處方原料名稱投料量（1000粒）明膠230g甘油500g焦糖色6g純化水250g制備方法如下：（1）囊殼制備方法：將純化水加熱至70-80℃，再加入甘油、焦糖色，攪拌均勻，加入明膠，繼續(xù)攪拌，抽真空脫盡氣泡，過濾，保溫，得明膠溶液，待用；（2）囊心制備方法：將蜂蠟與1/3玉米油混合，加熱溶解，降溫,加入葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，攪拌，加入蝦青素及剩余2/3玉米油，混合均勻，過膠體磨研磨，過濾，抽真空脫盡氣泡，得藥液，待用；（3）將配好的藥液和明膠溶液置于制丸機中，壓丸，定型，洗丸，干燥，選丸，包裝即得軟膠囊。實施例10蝦青素7g、葡萄皮提取物30g、玫瑰花提取物45g取處方量的蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，過篩，加入適量預(yù)膠化淀粉、阿司帕坦，混勻，加入適量微粉硅膠，混勻，制粒，干燥，包裝，即得顆粒劑。實施例11蝦青素12g、葡萄皮提取物30g、玫瑰花提取物35g取處方量的蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，過篩，加入適量甘露醇、阿司帕坦，混勻，制粒，干燥，壓片，即得咀嚼片。實施例12蝦青素5g、葡萄皮提取物45g、玫瑰花提取物30g取處方量的蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，過篩，加入適量乳糖，混勻，制粒，干燥，裝膠囊，即得膠囊劑。實施例13蝦青素6g、葡萄皮提取物15g、玫瑰花提取物50g取處方量的蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，過篩，加入適量輔料，常規(guī)方法制成丸劑。實施例14蝦青素15g、葡萄皮提取物45g、玫瑰花提取物25g取處方量的蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，過篩，加入適量輔料，常規(guī)方法制成袋裝茶劑。實施例15蝦青素4g、葡萄皮提取物35g、玫瑰花提取物50g取處方量的蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物，過篩，加入適量輔料，常規(guī)方法制成口服液體制劑。以上實施例1-15中涉及的葡萄皮提取物、玫瑰花提取物可以采取以下任一制備方法得到：葡萄皮提取物：取葡萄皮加水或不同濃度的乙醇提取，提取液濃縮干燥得粗提物；或進一步采用水提醇沉法、有機溶劑萃取法、柱層析法、二氧化碳超臨界萃取法、水蒸氣蒸餾法的一種或幾種聯(lián)合使用進行適當精制后得精提物；上述粗提物或精提物即為葡萄皮提取物；優(yōu)選為：取葡萄皮加4-20倍量水提取1-4次，每次1-3小時，提取液合并，離心，過濾，濾液減壓濃縮，干燥，粉碎成細粉，即為葡萄皮提取物；或者：取葡萄皮加4-20倍量20-95%乙醇提取1-4次，每次1-3小時，提取液合并，過濾，濾液減壓回收乙醇至無醇味，繼續(xù)濃縮，干燥，粉碎成細粉，即為葡萄皮提取物。玫瑰花提取物：取玫瑰花加水或不同濃度的乙醇提取，提取液濃縮干燥得粗提物；或進一步采用水提醇沉法、有機溶劑萃取法、柱層析法、二氧化碳超臨界萃取法、水蒸氣蒸餾法的一種或幾種聯(lián)合使用進行適當精制后得精提物；上述粗提物或精提物即為玫瑰花提取物；優(yōu)選為：取玫瑰花加4-20倍量水提取1-4次，每次1-3小時，提取液合并，離心，過濾，濾液減壓濃縮，干燥，粉碎成細粉，即為玫瑰花提取物；或者：取玫瑰花加4-20倍量20-95%乙醇提取1-4次，每次1-3小時，提取液合并，過濾，濾液減壓回收乙醇至無醇味，繼續(xù)濃縮，干燥，粉碎成細粉，即為玫瑰花提取物。以上實施例1-15中涉及的蝦青素、葡萄皮提取物、玫瑰花提取物可以通過購買市售品得到。根據(jù)上述內(nèi)容，在不脫離本發(fā)明基本技術(shù)思想前提下，按照本領(lǐng)域的普通技術(shù)知識和慣用手段，顯然還可以作出其他多種形式的修改、替換和變更。通過以下實驗進一步闡述本發(fā)明所述組合物的有益效果：增強免疫力功能試驗1、材料和方法（1）樣品：按照實施例1-3制備的樣品。（2）實驗動物：18-22g昆明種健康清潔級小鼠192只，共分為四批進行實驗，每批隨機分為4組，每組12只。實驗一批進行臟器/體重比值測定、遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)實驗、半數(shù)溶血值(HC50)的測定和抗體生成細胞數(shù)的測定；實驗二批進行碳廓清實驗；實驗三批進行小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗；實驗四批進行ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗和NK細胞活性測定。（3）劑量：受試物以無菌水配制，每日一次經(jīng)口給予，連續(xù)灌胃33天后測各項指標。小鼠灌胃體積為0.1mL/10g鼠重。同時設(shè)一空白對照組(0g/kgBW)，用無菌水替代受試物，每日灌胃體積與各受試物組相同。（4）實驗方法：A.臟器體重比值的測定小鼠稱重后頸椎脫臼處死，取脾臟和胸腺，去盡筋膜，用濾紙吸干臟器表面血污，稱重，計算脾臟體重比值和胸腺體重比值。B.遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)實驗(足跖增厚法)取羊血，生理鹽水洗滌3次，每只鼠經(jīng)腹腔注射2％(v/v，用生理鹽水配制)壓積SRBC(2000r/min，10min)0.2mL，致敏后4d，測量左后足跖部厚度，同一部位測量三次，取平均值。然后在測量部位皮下注射20％(v/v，用生理鹽水配制)壓積SRBC20μL，于注射后24h測量左后足跖部厚度，以攻擊前后足跖厚度的差值來表示DTH的程度。受試樣品組的差值顯著高于對照組的差值，可判定該項實驗結(jié)果陽性。C.ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗(MTT法)無菌取脾，置于盛有適量無菌Hank’s液的小平皿中，用鑷子輕輕將脾磨碎，制成單個細胞懸液。經(jīng)200目篩網(wǎng)過濾，制成細胞懸液。用Hank’s液洗3次，每次離心10min(1000r/min)。然后將細胞懸浮于1mL的完全培養(yǎng)液中，鏡檢計數(shù)，調(diào)整細胞濃度為3×106個/mL。再將脾細胞懸液分兩孔加入24孔培養(yǎng)板中，每孔1mL，在其中一孔加75μLConA液(相當于7.5μg/mL)，另一孔作為對照，置5％CO2，37℃CO2孵箱中培養(yǎng)72h。培養(yǎng)結(jié)束前4h，每孔輕輕吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液，同時加入MTT(5mg/mL)50μL/孔，繼續(xù)培養(yǎng)4h。培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入1mL酸性異丙醇，吹打混勻，使紫色結(jié)晶完全溶解。然后將此液體移入比色杯中，在755分光光度計上比色測定，波長570nm。淋巴細胞的增殖能力用加ConA孔的光密度值減去不加ConA孔的光密度值代表淋巴細胞的增值能力。受試樣品組的光密度差值顯著高于對照組的光密度差值，可判定該項實驗結(jié)果陽性。D.抗體生成細胞數(shù)的測定(Jerne改良玻片法)取羊血，生理鹽水洗滌3次，每只鼠經(jīng)腹腔注射2％(v/v，用生理鹽水配制)壓積SRBC0.2mL。將SRBC免疫5天后的小鼠頸椎脫臼處死，取出脾臟，輕輕磨碎脾臟，制成細胞懸液。離心(1000r/min)10min，用Hank’s液洗2遍，最后將細胞懸液在8mLHank’s液中。將瓊脂糖加熱溶解后，與等量雙倍Hank’s液混合，分裝小試管，每管0.5mL，再向管內(nèi)加10％(v/v，用SA液配制)壓積SRBC50μL、脾細胞懸液8μL，迅速混勻后，傾倒于已刷瓊脂糖薄層的玻片上，做平行片，待瓊脂凝固后，將玻片水平扣放在片架上，放入二氧化碳培養(yǎng)箱中37℃溫育1h，然后用SA緩沖液稀釋的補體(1∶8)加入到玻片架凹槽內(nèi)，繼續(xù)溫育1.5h后，計數(shù)溶血空斑數(shù)。用空斑數(shù)/全脾細胞來表示。受試樣品組的空斑數(shù)顯著高于對照組的空斑數(shù)，可判定該項實驗結(jié)果陽性。E.半數(shù)溶血值(HC50)的測定取羊血，生理鹽水洗滌3次，每只鼠經(jīng)腹腔注射2％(v/v，用生理鹽水配制)壓積SRBC0.2mL進行免疫。5天后，摘除眼球取血于離心管內(nèi)，放置約1h，將凝固血與管壁剝離，使血清充分析出，2000r/min離心10min，收集血清。用SA緩沖液將血清稀釋為300倍，取1mL置試管內(nèi)，依次加入10％(v/v，用SA緩沖液配制)壓積SRBC0.5mL，補體1mL(用SA緩沖液按1∶8稀釋)。另設(shè)不加血清的對照管(以SA緩沖液代替)。置37℃恒溫水浴中保溫15min后，冰浴終止反應(yīng)。2000r/min離心10min，取上清1mL，加都氏試劑至3mL。同時取10％(v/v，用SA緩沖液配制)的壓積SRBC0.25mL，加都氏試劑至4mL于另一試管中，充分混勻，放置10min后，于540nm處以對照管作空白，分別測定各管光密度值。溶血素的量以半數(shù)溶血值(HC50)表示，按下式計算：樣品半數(shù)溶血值＝樣品光密度值/SRBC半數(shù)溶血時的光密度值×稀釋倍數(shù)受試樣品組的HC50顯著高于對照組的HC50，可判定該項實驗結(jié)果陽性。F.小鼠碳廓清實驗按體重從小鼠尾靜脈注射稀釋4倍的印度墨汁(0.05mL/10g)。待墨汁注入，立即計時。注入墨汁后2、10min，分別從內(nèi)眥靜脈叢取血20μL，并將其加到2mL0.1％Na2CO3溶液中。用755分光光度計在600nm波長處測光密度值(OD)，以Na2CO3溶液作空白對照。將小鼠處死，取肝臟和脾臟稱重。以碳廓清指數(shù)(a)表示小鼠碳廓清的能力，按下式計算a：k＝(lgOD1-lgOD2)/(t2-t1)a＝體重÷(肝重+脾重)×k1/3受試樣品組的碳廓清指數(shù)顯著高于對照組的碳廓清指數(shù)，可判定該項實驗結(jié)果陽性。G.小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗(半體內(nèi)法)小鼠腹腔注射20％(v/v，用生理鹽水配制)雞紅細胞(2000r/min，10min)懸液1mL，間隔30min，頸椎脫臼處死，將其仰位固定于鼠板上，經(jīng)腹腔注入生理鹽水2mL，轉(zhuǎn)動鼠板1min。取腹腔巨噬細胞洗液1mL，分別滴于2片載玻片上，放入墊有濕紗布的搪瓷盒內(nèi)，移置37℃孵箱溫育30min。孵畢，于生理鹽水中漂洗，以除去未貼片細胞。晾干，以1∶1丙酮甲醇溶液固定，Gicmsa-磷酸緩沖液染色，再用蒸餾水漂洗晾干。油鏡下計數(shù)，每片計數(shù)100個巨噬細胞，按下式計算吞噬率和吞噬指數(shù)：吞噬百分率(％)＝吞噬雞紅細胞的巨噬細胞數(shù)/計數(shù)的巨噬細胞數(shù)×100吞噬指數(shù)＝被吞噬的雞紅細胞總數(shù)/計數(shù)的巨噬細胞數(shù)得出的吞噬百分率再按下式進行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換，X＝Sin-1，式中P為吞噬百分率，用小數(shù)表示。所得數(shù)據(jù)為計量資料，受試樣品組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)均顯著高于對照組的吞噬百分率和吞噬指數(shù)，可判定該項實驗結(jié)果陽性。H.NK細胞活性的測定(乳酸脫氫酶LDH測定法)實驗前24h將靶細胞YAC-1進行傳代培養(yǎng)，應(yīng)用前以Hank’s液洗3次，用含10％小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細胞濃度為4×105個/mL。受試小鼠頸椎脫臼處死，無菌取脾，制成脾細胞懸液，用Hank’s液洗2次，每次離心10min(1000r/min)。棄上清將細胞漿彈起，加入0.5mL滅菌水20秒，裂解紅細胞后再加入0.5mL2倍Hank’s液及8mLHank’s液，1000r/min，10min離心，用1mL含10％小牛血清的RPMI1640完全培養(yǎng)液重懸，鏡檢計數(shù)，用RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細胞濃度為2×107個/mL。使效靶比為50∶1。取靶細胞和效應(yīng)細胞各100μL，加入U形96孔培養(yǎng)板中；靶細胞自然釋放孔加靶細胞和培養(yǎng)液各100μL，靶細胞最大釋放孔加靶細胞和1％NP40各100μL；上述各項均設(shè)三個平行孔，37℃、5％CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h，將96孔板以1500r/min離心5min，每孔吸取上清100μL置平底96孔培養(yǎng)板中，加入LDH基質(zhì)液100μL，反應(yīng)3-10min，然后每孔加入1mol/L的HCl溶液30μL終止反應(yīng)，在酶標儀490nm處測光密度值(OD)，計算NK細胞活性：NK細胞活性(％)＝(反應(yīng)孔OD-自然釋放孔OD)/(最大釋放孔OD-自然釋放孔OD)×100得出的NK細胞活性按下式進行數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換，X＝Sin-1，式中P為NK細胞活性，用小數(shù)表示。所得數(shù)據(jù)為計量資料，受試樣品組的NK細胞活性顯著高于對照組的NK細胞活性，可判定該項實驗結(jié)果陽性。（5）數(shù)據(jù)處理用SPSS軟件進行數(shù)據(jù)處理。采用方差分析，但需按方差分析的程序先進行方差齊性檢驗，方差齊，計算F值，F(xiàn)值＜F0.05，結(jié)論：各組均數(shù)間差異無顯著性，F(xiàn)值≥F0.05，P≤0.05，用多個實驗組和一個對照組間均數(shù)的兩兩比較方法進行統(tǒng)計；對非正態(tài)或方差不齊的數(shù)據(jù)進行適當?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)或方差齊要求后，用轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計；若變量轉(zhuǎn)換后仍未達到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗進行統(tǒng)計。（6）結(jié)果判定依據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范)》（2003版）規(guī)定：在細胞免疫功能、體液免疫功能、單核-巨噬細胞功能、NK細胞活性四個方面任兩個方面結(jié)果陽性，可判定該受試樣品具有增強免疫力功能作用。其中細胞免疫功能測定項目中的兩個實驗結(jié)果均為陽性，或任一實驗的兩個劑量組結(jié)果陽性，可判定細胞免疫功能測定結(jié)果陽性。體液免疫功能測定項目中的兩個實驗結(jié)果均為陽性，或任一實驗的兩個劑量組結(jié)果陽性，可判定體液免疫功能測定結(jié)果陽性。單核-巨噬細胞功能測定項目中的兩個實驗結(jié)果均為陽性，或任一實驗的兩個劑量組結(jié)果陽性，可判定單核-巨噬細胞功能結(jié)果陽性。NK細胞活性測定實驗的一個以上劑量組結(jié)果陽性，可判定NK細胞活性結(jié)果陽性。2、結(jié)果（1）本發(fā)明組合物對小鼠體重的影響通過稱重可知，小鼠的初始體重在四批實驗動物各樣品組與空白對照組間比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。即小鼠的初始體重在各組間較為均衡。經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，小鼠的體重在各樣品組與空白對照組間比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。即本發(fā)明組合物對小鼠體重無不良影響。（2）本發(fā)明組合物對小鼠臟器/體重比值的影響表1本發(fā)明組合物對小鼠脾臟/體重比值的影響(±S)組別動物數(shù)（只）脾臟/體重比值（mg/g）P值空白對照組125.5±0.8——樣品組1125.4±1.00.771樣品組2125.2±0.70.546樣品組3125.6±1.10.819由表1可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物后，各樣品組脾臟/體重比值與空白對照組比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。即本發(fā)明組合物對小鼠的脾臟/體重比值無特別影響。表2本發(fā)明組合物對小鼠胸腺/體重比值的影響(±S)組別動物數(shù)（只）胸腺/體重比值（mg/g）P值空白對照組122.3±1.5——樣品組1122.5±0.80.779樣品組2122.6±1.00.652樣品組3122.4±0.90.804由表2可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各劑量組胸腺/體重比值與空白對照組比較，差異均無顯著性(P＞0.05)。即本發(fā)明組合物對小鼠的胸腺/體重比值無特別影響。（3）本發(fā)明組合物對小鼠細胞免疫功能的影響表3本發(fā)明組合物對小鼠遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)(DTH)的影響(±S)組別動物數(shù)（只）足跖腫脹度（mm）P值空白對照組120.51±0.17——樣品組1120.89±0.12*0.022樣品組2120.92±0.09*0.018樣品組3120.90±0.15*0.020*與空白對照組比較，P＜0.05由表3可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各樣品組與空白對照組比較，小鼠的足跖腫脹度有顯著性差異（P＜0.05）。即本發(fā)明組合物能顯著提高小鼠足跖腫脹度。表4本發(fā)明組合物對小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化實驗的影響(±S)組別動物數(shù)（只）淋巴細胞增殖能力（OD差值）P值空白對照組120.22±0.24——樣品組1120.51±0.12*0.022樣品組2120.46±0.15*0.030樣品組3120.44±0.09*0.035*與空白對照組比較，P＜0.05由表4可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各樣品組與空白對照組比較，小鼠的淋巴細胞增殖能力有顯著性差異（P＜0.05）。即本發(fā)明組合物能顯著提高ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化能力。（4）本發(fā)明組合物對體液免疫的影響表5本發(fā)明組合物對小鼠抗體生成細胞數(shù)的影響(±S)組別動物數(shù)（只）溶血空斑數(shù)（×103/全脾）P值空白對照組12120±55——樣品組112195±42*0.036樣品組212208±40*0.027樣品組312201±38*0.032*與空白對照組比較，P＜0.05由表5可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各樣品組與空白對照組比較，小鼠抗體生成細胞數(shù)有顯著性差異（P＜0.05）。即本發(fā)明組合物能顯著提高小鼠抗體生成細胞數(shù)。表6本發(fā)明組合物對小鼠半數(shù)溶血值(HC50)的影響(±S)組別動物數(shù)（只）樣品半數(shù)溶血值P值空白對照組12158±37——樣品組112225±28*0.019樣品組212217±32*0.028樣品組312220±41*0.024*與空白對照組比較，P＜0.05由表6可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各樣品組與空白對照組比較，小鼠的半數(shù)溶血值有顯著性差異（P＜0.05）。即本發(fā)明組合物能顯著提高小鼠半數(shù)溶血值。（5）本發(fā)明組合物對小鼠單核-巨噬細胞吞噬功能的影響表7本發(fā)明組合物對小鼠碳廓清能力的影響(±S)組別動物數(shù)（只）吞噬指數(shù)（a）P值空白對照組124.24±0.45——樣品組1126.37±0.19*0.014樣品組2126.22±0.47*0.021樣品組3126.34±0.28*0.018*與空白對照組比較，P＜0.05由表7可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各樣品組與空白對照組比較，小鼠的碳廓清能力有顯著性差異（P＜0.05）。即本發(fā)明組合物能顯著提高小鼠的碳廓清能力。表8本發(fā)明組合物對小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率的影響(±S)組別動物數(shù)（只）吞噬率（%）吞噬率平方根反正弦轉(zhuǎn)換值P值空白對照組1222±180.40±0.15——樣品組11240±10*0.78±0.120.035樣品組21242±11*0.80±0.140.030樣品組31238±15*0.69±0.170.042*與空白對照組比較，P＜0.05由表8可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各樣品組與空白對照組比較，吞噬率有顯著性差異（P＜0.05）。即本發(fā)明組合物能顯著提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率。表9本發(fā)明組合物對小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬指數(shù)的影響(±S)組別動物數(shù)（只）吞噬指數(shù)P值空白對照組120.29±0.18——樣品組1120.72±0.12*0.028樣品組2120.68±0.17*0.035樣品組3120.62±0.15*0.039*與空白對照組比較，P＜0.05由表9可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各樣品組與空白對照組比較，吞噬指數(shù)有顯著性差異（P＜0.05）。即本發(fā)明組合物能顯著提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬指數(shù)。（6）本發(fā)明組合物對小鼠NK細胞活性的影響表10本發(fā)明組合物對小鼠NK細胞活性的影響(±S)組別動物數(shù)（只）NK細胞活性（%）NK細胞活性平方根反正弦轉(zhuǎn)換值P值空白對照組1222.4±8.10.42±0.12——樣品組11245.5±6.3*0.85±0.120.026樣品組21240.7±7.7*0.76±0.180.033樣品組31239.8±6.5*0.73±0.150.038*與空白對照組比較，P＜0.05由表10可見，經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，各樣品組與空白對照組比較，小鼠NK細胞活性有顯著性差異（P＜0.05）。即本發(fā)明組合物能顯著提高小鼠NK細胞活性。本發(fā)明實施例4-15均按照上述方法進行了相似的試驗，結(jié)果與上述結(jié)果相同。3、結(jié)論經(jīng)口給予小鼠本發(fā)明組合物33天后，與空白對照組比較，本發(fā)明組合物能顯著提高小鼠足跖腫脹度(P＜0.05)、提高ConA誘導(dǎo)的小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化能力(P＜0.05)、提高小鼠抗體生成細胞數(shù)(P＜0.05)、提高小鼠半數(shù)溶血值(P＜0.05)、提高小鼠的碳廓清能力(P＜0.05)、提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬率(P＜0.05)、提高小鼠巨噬細胞吞噬雞紅細胞吞噬指數(shù)(P＜0.05)、提高小鼠NK細胞活性（P＜0.05），且本發(fā)明組合物對小鼠體重增長無不良影響。根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范》（2003版）對增強免疫力保健食品的評判標準可知，本發(fā)明組合物具有增強免疫力的功能。當前第1頁1 2 3