本發(fā)明涉及一種源自植物的預防或/和治療糖尿病并發(fā)癥的藥物組合物及其制備方法，特別涉及一種預治療糖尿病合并冠心病的組合物及其制備方法，屬于食品、保健品和藥品領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
：糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一類代謝性疾病，它的特征是血糖長時間高于標準值。高血糖會造成三多一少的癥狀：吃多、喝多、尿多、以及體重下降。如果未經(jīng)治療，糖尿病可能引發(fā)許多并發(fā)癥。急性并發(fā)癥包括糖尿病酮酸血癥與高滲透壓高血糖非酮酸性昏迷；嚴重的長程并發(fā)癥則包括心血管疾病、中風、慢性腎臟病、糖尿病足、以及視網(wǎng)膜病變等。糖尿病的成因有二：胰臟無法生產(chǎn)足夠的胰島素，或者是細胞對胰島素不敏感。臨床上糖尿病則被分為三類：(1)第一型糖尿病是由于身體無法生產(chǎn)足夠的胰島素，過去也被叫做胰島素依賴型糖尿病(insulin-dependentdiabetesmellitus,IDDM)或是青少年糖尿病，病因目前不明；(2)第二型糖尿病始于胰島素抵抗(細胞對于胰島素的反應(yīng)不正常)，隨著病情進展胰島素的分泌亦可能漸漸變得不足。這個類型過去被稱為非胰島素依賴型糖尿病(noninsulin-dependentdiabetesmellitus,NIDDM)或成人型糖尿病，病因是體重過重或缺乏運動。也是發(fā)達國家的文明病之一，病人數(shù)不斷攀升；(3)妊娠糖尿病也是常見的糖尿病種類，它指的是過去沒有糖尿病史，但在懷孕期間血糖高于正常值的孕婦身上。糖尿病本身不一定造成危害，但長期血糖增高，大血管、微血管受損并危及心、腦、腎、周圍神經(jīng)、眼睛、足等，據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，糖尿病并發(fā)癥高達100多種，是目前已知并發(fā)癥最多的一種疾病。糖尿病心臟病是糖尿病患者致死的主要原因之一，尤其是在2型糖尿病患者中。廣義的糖尿病心臟病包括冠狀動脈粥樣硬化性心臟病(冠心病)，糖尿病心肌病和糖尿病心臟自主神經(jīng)病變等。糖尿病心臟病與非糖尿病患者相比常起病比較早，糖尿病患者伴冠心病常表現(xiàn)為無痛性心肌梗死，梗死面積比較大，穿壁梗死多，病情多比較嚴重，預后比較差，病死率較高。如冠狀動脈造影和臨床排除冠狀動脈病變，糖尿病患者出現(xiàn)嚴重的心律失常心臟肥大肺淤血和充血性心力衰竭，尤其是難治性心力衰竭臨床可考慮糖尿病心肌病。糖尿病患者有70％～80％死于心血管并發(fā)癥，與非糖尿病患者相比，男性糖尿病患者心血管疾病死亡和充血性心衰發(fā)生的危險性增加2倍，女性增高3倍。除了發(fā)生率和病死率增高之外，糖尿病患者冠狀動脈損害的程度要明顯嚴重，冠狀動脈造影和尸檢顯示糖尿病患者2～3支血管同時受損的發(fā)生率明顯高于非糖尿病對照組，且常呈現(xiàn)彌漫性病變。糖尿病伴有冠心病患者的冠狀動脈病變更加嚴重，表現(xiàn)在病變的范圍更廣范，常為多支血管受累，每支血管彌漫性多處受累；冠狀動脈多為嚴重狹窄，并且患糖尿病的時間越長，狹窄程度更高。雖然糖尿病伴有冠心病患者的冠脈病變嚴重，但是糖尿病患者由于經(jīng)常合并神經(jīng)病變，疼痛的感覺減弱，所以常常沒有典型的冠心病心絞痛表現(xiàn)，而更多見無癥狀的心肌缺血、沒有征兆的心肌梗死，甚至猝死，對生命造成巨大的威脅，治療難度大、預后差。因此，糖尿病患者應(yīng)該警惕在不知不覺中發(fā)生并進展的冠心病，做到早期預防、早期診斷、合理治療。糖尿病冠心病的預防通常采用如下方法：1)服用阿司匹林：抗血小板、抗凝、溶栓、擴血管藥物治療；2)抗高血壓治療，嚴格控制血壓水平，努力將血壓控制在130/80mmHg以下；3)調(diào)脂治療，LDL≤2.6mmol/L；HDL>1.1mmol/L；TG≤1.7mmol/L；TC≤4.6mmol/L；4)控制血糖，控制空腹及餐后血糖；5)生活方式干預，積極改善生活方式，包括飲食、運動、心理以及戒煙等。目前應(yīng)用較多的治療糖尿病的藥物(口服降糖藥)共有五大類，1)磺酰脲類(SU)；2)雙胍類(MET)；3)a-糖苷酶抑制劑；4)非磺脲類促胰島素分泌劑；5)噻唑烷二酮類(TZD)。其中：磺酰脲類(SU)藥物的主要作用是刺激B細胞分泌胰島素，改善胰島素相對不足狀態(tài)。它還有胰外作用，可提高胰島素的敏感性。包括第一代的甲磺丁脲(D860)，第二代的格列苯脲(優(yōu)降糖)，格列比嗪(美吡達)，格列齊特(達美康)，格列喹酮(糖適平)，第三代的格列美脲(亞莫利)等；雙胍類(MET)藥物的主要作用是抑制肝輸出葡萄糖,也可提高胰島素敏感性。同時抑制腸葡萄糖吸收，他不刺激B細胞分泌胰島素。常用的有苯乙雙胍(降糖靈)和二甲雙胍(格華止，迪化糖錠)等；a-糖苷酶抑制劑主要作用不是刺激胰島素分泌，也不是增加胰島素的敏感性，而是抑制小腸a-糖苷酶的活性，延緩葡萄糖的吸收，降低餐后血糖，在一定程度上可提高胰島素敏感性。估計與降低血糖作用有關(guān)。常用的有：阿卡波糖(拜唐蘋)，伏格列波糖(倍欣)等；非磺脲類促胰島素分泌劑，又稱苯酸衍生物(快速胰島素促泌劑)主要作用是刺激餐后胰島素分泌，不刺激餐前胰島素分泌，對肝糖輸出沒有影響，能有效模擬自然，恢復生理性胰島素分泌。早期(第一)相胰島素釋放的重建是控制餐后高血糖的有效手段。常用的有瑞格列奈(諾和龍)和那格列奈(唐力)；噻唑烷二酮類(TZD)是有效和理想的胰島素增敏劑，是一類特定作用于胰島素抵抗的抗糖尿病藥。與傳統(tǒng)藥物相比，其優(yōu)勢在于它能夠全面糾正代謝綜合癥的各種異常狀態(tài)，有效控制2型糖尿病及其心血管并發(fā)癥。常用的有馬來酸羅格列酮(文迪雅)及吡格列酮(艾汀)；UKPDS(英國前瞻性糖尿病研究)顯示，接受飲食治療以及接受磺脲類或雙胍類藥物強化治療的2型糖尿病患者，B細胞功能在逐漸減退，血糖控制越來越差。當B細胞功能減退至藥物不能有效刺激其分泌正常量的胰島素時，應(yīng)及時使用胰島素治療，以保證其糖代謝狀態(tài)正常，對冠心病患者更是如此，可選擇的胰島素有三種類型，短效胰島素，中效胰島素和長效胰島素。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明的主要目的是針對上述預防或/和治療糖尿病合并冠心病的保健品及中藥制劑的現(xiàn)有技術(shù)和產(chǎn)品存在的問題，提供一種用于預防或/和治療糖尿病合并冠心病的藥物組合物及其制備方法。本發(fā)明組合物組方簡單，使用的藥材，具有提高人體免疫能力，對糖尿病、冠心病以及糖尿病合并冠心病的預防、治療效果顯著，同時具有益氣養(yǎng)陰、活血通絡(luò)、化瘀止痛的作用。本發(fā)明預防或/和治療糖尿病合并冠心病的藥物組合物的制備方法簡便、生產(chǎn)工藝穩(wěn)定、價格低廉及便于攜帶和使用。為實現(xiàn)本發(fā)明的目的，本發(fā)明一方面提供一種預防或/和治療糖尿病的組合物，包括如下原料藥：黃芪、地黃、丹參、赤芍、僵蠶。其中，所述原料藥的重量份配比為：黃芪5-40、地黃2-35、丹參5-35、赤芍5-35、僵蠶1-20；優(yōu)選為：生黃芪10-30、熟地黃10-30、丹參10-30、赤芍10-30、僵蠶3-10；進一步優(yōu)選為黃芪20、地黃20、丹參20、赤芍20、僵蠶6。特別是，所述地黃選擇熟地黃；所述黃芪選擇生黃芪。本發(fā)明的藥物黃芪、地黃、丹參、赤芍、僵蠶組合使用，使得各藥物功效產(chǎn)生協(xié)同作用，從而能夠更有效地預防或/和治療糖尿病、冠心病、以及糖尿病并發(fā)癥糖尿病合并冠心病。黃芪為豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根，性溫、味甘，歸肺、脾經(jīng)，具有補氣固表，利尿托毒，排膿，斂瘡生肌的功能，主要用于氣虛乏力，食少便溏，中氣下陷，久瀉脫肛，便血崩漏，表虛自汗，氣虛水腫，癰疽難潰，久潰不斂，血虛痿黃，內(nèi)熱消渴；慢性腎炎蛋白尿，糖尿病等。黃芪的化學成分為黃酮及黃酮甙：如毛蕊異黃酮、2’,4’二羥基-5，6-二甲氧基異黃酮、3-羥基-9，10-二甲氧基紫檀烷，黃芪皂甙Ⅰ、Ⅴ、Ⅲ；還含有大量的黃芪多糖以及β-谷甾醇、亞油酸、亞麻酸、膽堿、甜菜堿、氨基酸、蔗糖、葡萄糖醛酸及微量的葉酸等。黃芪的功用甚多，例如黃芪能使管狀血管和腎臟血管擴張，并使全身末梢血管擴張，皮膚循環(huán)暢盛，血壓下降；能加強心臟收縮，對衰竭的心臟有強心作用；黃芪具有降低血糖和抑菌的作用；能加強正常心臟收縮，對衰竭的心臟有強心作用；能使管狀血管和腎臟血管擴張，并使全身末梢血管擴張，皮膚循環(huán)暢盛，使高血壓患者血壓下降；能顯著降低成纖維細胞膠原合成速率，改善結(jié)締組織增生和血管硬化，增加血管彈性，提高供血量，從而使衰老機體的動脈硬化癥狀得到改善。黃芪中的有效成分可改善充血性心力衰竭的左室構(gòu)型和射血功能，增加缺血心肌大鼠的心臟功能，不會加重缺血心肌的細胞損害，顯著增加心肌細胞膜鈣泵活性，增加細胞內(nèi)鈣離子的轉(zhuǎn)運，從而減少心肌細胞內(nèi)鈣離子的過多積聚。在對病毒感染的心肌細胞的研究中發(fā)現(xiàn)，黃芪注射液可抑制病毒感染細胞的L-型鈣通道電流的增加，減輕病毒對鈉鈣交換電流，并使鈉鈣交換電流的逆轉(zhuǎn)電位負移。而且黃芪總苷可增加病毒感染心肌細胞肌質(zhì)網(wǎng)鈣泵的mRNA的表達，并可提高肌質(zhì)網(wǎng)鈣泵的活力。黃芪多糖能明顯對抗氯化鋇誘發(fā)的大鼠心率失常和氯仿誘發(fā)的小鼠房顫，減慢心律。地黃為玄參科植物地黃的新鮮或干燥塊根，性寒，味甘、苦，入心、肝、腎經(jīng)。具有清熱涼血，養(yǎng)陰生津之功效，主要用于熱病舌絳煩渴，陰虛內(nèi)熱，骨蒸勞熱，內(nèi)熱消渴，吐血，衄血，發(fā)斑發(fā)疹。生地黃加黃酒蒸至黑潤，為熟地黃。熟地黃：為不規(guī)則的塊片、碎塊，大小、厚薄不一。表面烏黑色，有光澤，粘性大。質(zhì)柔軟而帶韌性，不易折斷，端面烏黑色，有光澤。味甜。地黃的化學成分主要有環(huán)烯醚萜及其甙類、糖、氨基酸、有機酸，甾醇、黃酮及維生素等。其中，甾醇類主要有β-谷甾醇、豆甾醇、微量菜油甾醇；黃酮主要有木樨草素、圣草黃素；環(huán)烯醚萜及其甙主要包括梓醇、二氫梓醇、乙酰梓醇、益母草甙、桃葉珊瑚甙、單蜜特力甙、蜜特力甙、甾醇甙、環(huán)烯醚萜A、B、C、D、類葉升麻甙、復合糖質(zhì)、腦苷脂、氯化環(huán)烯醚萜甙、地黃甙A、B、C、地黃苦甙等。熟地黃味甘、性微溫，歸肝、腎經(jīng)，有養(yǎng)血滋陰，補精益髓的功效，適用于肝腎陰虛，腰膝酸軟，骨蒸潮熱，盜汗遺精，內(nèi)熱消渴，血虛萎黃，心悸怔忡，月經(jīng)不調(diào)，崩漏下血，眩暈，耳鳴，須發(fā)早白。熟地為滋補肝腎的重要藥物，不僅能夠養(yǎng)血滋陰，而且能夠生精填髓。熟地黃可單用，或與當歸配伍燉雞，用于血虛證或月經(jīng)不調(diào)；配黃芪、山藥、天冬，煎湯飲，用于消渴(糖尿病)；配枸杞子、菟絲子、覆盆子浸酒，用以補虛抗衰。一日可用15～30g。用法與注意與生地黃相似。丹參為唇形科植物丹參的干燥根及根莖，性寒、味苦，歸心、肝經(jīng)。具有活血祛瘀、安神寧心、消痛止痛的功效，主要用于治療心絞痛、月經(jīng)不調(diào)、痛經(jīng)、癓瘕積聚、胸腹刺痛、熱痹疼痛、肝脾腫大。丹參中含有脂溶性成分：丹參酮Ⅰ、ⅡA、ⅡB、異丹參酮Ⅰ、ⅡA、隱丹參酮、異隱丹參酮、甲基丹參酮、羥基丹參酮ⅡA、丹參新醌A、B、C、二氫異丹參酮Ⅰ、新隱丹參酮、去羥新隱丹參酮等；水溶性的酚性酸化合物：丹參酸A、B、C，丹參酚酸A、B、C、D、E、G，迷迭香酸，迷迭香酸甲酯，紫草酸單甲酯，紫草酸二甲酯，紫草酸乙酯，紫草酸，原兒茶醛，咖啡酸，異阿魏酸等。丹參具有抗腫瘤、抗心肌缺血、抗心梗、抗凝血、激活纖溶、穩(wěn)定紅細胞膜、抗肝肺纖維化、抗炎、抗菌、抗?jié)兒湍腿毖踝饔谩８鶕?jù)實驗研究證明，丹參能明顯降低尿素氮、肌酐甲基胍、胍基丁二酸的血清濃度，既改善了高磷酸血癥，又改善了血中游離氨基酸的晶型，有效促進腎功能恢復。具有調(diào)整凝血纖溶，血小板系統(tǒng)的狀態(tài)，對冠狀動脈循環(huán)有增加流量和擴冠作用并能降低冠脈阻力，對心梗和心肌缺血有較強的保護作用，丹參有抑制凝血，激活纖溶，穩(wěn)定紅細胞膜的作用，并具有抗菌，抗炎和對臟器組織抗纖維化的作用。實驗研究證明，丹參能明顯降低尿素氮、肌酐甲基胍、胍基丁二酸的血清濃度，既改善了高磷酸血癥，又改善了血中游離氨基酸的晶型，有效促進腎功能恢復。丹參具有強心、擴張冠脈和外周血管、抗血栓形成、改善微循環(huán)促進組織的修復與再生作用。赤芍為毛茛科植物芍藥、草芍藥、川赤芍等的根，別稱木芍藥、紅芍藥。赤芍性微寒、味酸、苦，歸肝、脾經(jīng)。具有清熱涼血，散瘀止痛的功能，主要用于溫毒發(fā)斑，吐血衄血，目赤腫痛，肝郁脅痛，經(jīng)閉痛經(jīng)，癥瘕腹痛，跌撲損傷，癰腫瘡瘍。赤芍能清血分實熱，散瘀血留滯。本品功能與丹皮相近，故常與丹皮相須為用。但丹皮清熱涼血的作用較佳，既能清血分實熱，又能治陰虛發(fā)熱；而赤芍只能用于血分實熱，以活血散瘀見長。赤芍主要含有芍藥甙，氧化芍藥甙，苯甲酰芍藥甙，白芍甙，芍藥甙無酮，沒食子酰芍藥甙，芍藥新甙，芍藥內(nèi)酯等，還含有β-谷甾醇，胡蘿卜甙，食子酰基葡萄糖，右旋兒茶精和揮發(fā)油，其中揮發(fā)油主要含苯甲酸，牡丹酚及其他醇類和酚類成分。芍藥甙在根中含量高，全在根皮部分。現(xiàn)代藥理研究說明赤芍具有如下壓力作用：1)抗血栓的作用，赤芍煎劑15-20g(生藥)/kg給大鼠灌胃,使血栓形成時間明顯延長,長度縮短,重量減輕；凝血酶原時間和白陶土部分凝血活酶時間延長,優(yōu)球蛋白溶解時間縮短,表明對血凝有顯著抑制作用。赤芍精(d-兒茶精，d-catechin)200mg/只灌服,每日1次,連續(xù)46日,使高脂飼料飼養(yǎng)的大鼠血小板聚集時間，血小板血栓形成時間和血栓形成時間顯著延長，血栓長度和濕重顯著低于對照組。赤芍精對高粘滯血冠心病患者也有改善血液流變性作用，使中、低切速下全血粘度降低，紅細胞電泳時間延長，血小板聚集性降低；2)抗血小板聚集作用，赤芍提取物在體外對腎上腺素、二磷酸腺苷(ADP)、烙鐵頭蛇毒(TMVA)和花生四烯酸(AA)誘導的血小板聚集均有顯著抑制作用，并使血小板粘附與血小板第三因子活性降低，血小板內(nèi)cAMP含量升高。3)降血脂和抗動脈硬化作用，赤芍浸膏片5g(生藥)/kg，每日服1次，連用10-15星期，使高脂血兔的血漿總膽固醇(Tch),三酰甘油(TG),低密度脂蛋白膽固醇(LDL-Ch)、極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-Ch)顯著降低；高密度脂蛋白膽固醇(HDL-Ch)及HDL2-Ch顯著高于對照組；4)對心血管系統(tǒng)的影響，以0.2％赤芍注射液灌流大鼠離體心臟，使冠脈流量增加28.4％。給麻醉犬動脈注射也使冠脈流量增加，靜脈注射除增加冠脈流量外，也使外周阻力降低，血壓下降；赤芍注射液1g/kg肌內(nèi)注射，對實驗性肺動脈高壓兔有治療和預防作用，使肺血管擴張、肺血流改善、肺動脈壓降低，心輸出量增加，心功能改善。赤芍注射液對肺源性心臟病患者也有擴張肺血管，降低肺動脈壓和肺血管阻力，增加心輸出量，改善右心功能和血液流變性等作用。5)抗腫瘤作用赤芍正丁醇提取物(赤芍D)1～2g/kg腹腔注射,對小鼠S180實體瘤的抑制率為31％-49％。6)保肝作用，赤芍注射液3.3mg/ml，1.67mg/ml和0.7mg/ml，對體外培養(yǎng)肝細胞的DNA合成有明顯促進作用，對肝細胞再生和肝功能恢復有良好影響。赤芍注射液3.75g/kg靜脈注射，對D-半乳糖胺所致大鼠肝損傷有明顯保護作用，使動物存活率增加，肝臟萎縮與丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶明顯低于對照組，F(xiàn)N(單核-巨噬細胞系統(tǒng)的主要調(diào)理素)高于對照組。保肝機制可能是提高大鼠血漿纖維聯(lián)結(jié)蛋白(PFN)的水平,從而增強網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吞噬功能和加強調(diào)理素活性，以保護肝細胞，防止肝臟免疫損傷和促進肝細胞再生。其他還有解痙；降壓、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、抗驚厥；抗炎、抗?jié)?；抗菌、解熱等藥理作用。僵蠶為蠶蛾科昆蟲家蠶BombyxmoriLinnaeus.4～5齡的幼蟲感染(或人工接種)白僵菌Beauveriabassiana(Bals.)Vuillant而致死的幼蟲干燥體。性平，味咸、辛，歸肝、肺、胃經(jīng)。具有祛風定驚，化痰散結(jié)之功效，主要用于驚風抽搐，咽喉腫痛，皮膚瘙癢，頜下淋巴結(jié)炎，面神經(jīng)麻痹。僵蠶主要含蛋白質(zhì)，脂肪，還含多種氨基酸以及鐵、鋅、銅、錳、鉻等微量元素。白僵蠶體表的白粉中含草酸銨。僵蠶的醇水浸出液對小鼠、家兔均有催眠、抗驚厥作用；其提取液在體內(nèi)、外均有較強的抗凝作用；僵蠶粉有較好的降血糖作用；體外試驗，對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌有輕度的抑菌作用；僵蠶對移植性小鼠肉瘤S-180的生長有抑制作用，其醇提取物體外可抑制人體肝癌細胞的呼吸，可用于直腸瘤型息肉的治療?，F(xiàn)代藥理研究還發(fā)現(xiàn)僵蠶具有抗凝、抗血栓、降糖、降脂等作用。僵蠶抗實驗性靜脈血栓及作用機理的研究實驗結(jié)果表明，僵蠶對凝血系統(tǒng)兩條途徑的凝血酶具有明顯的抑制作用，認為僵蠶是通過抑制血液凝固、促纖溶活性而抑制血栓形成的。本發(fā)明的治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物中黃芪、生地補脾固腎，益氣養(yǎng)陰，一則使脾氣升，散精達肺，輸布津液以止渴，二則使腎氣固，封藏精微以縮尿，為君藥；赤芍、丹參、活血通絡(luò)，為臣藥；君臣相配，益氣養(yǎng)陰，生津布津(氣旺生津)；潤燥止渴，活血通絡(luò)。僵蠶祛風定驚，化痰散結(jié)，為佐使藥。本發(fā)明另一方面提供一種治糖尿病合并冠心病的藥物組合物的制備方法，包括如下進行的步驟：1)按照以下重量份配比準備原料藥：黃芪5-40、地黃2-35、丹參5-35、赤芍5-35、僵蠶1-20；2)將原料混合均勻后，對混合物進行加熱提取，收集提取液；3)對提取液進行濃縮處理，制得活性組分。其中，步驟1)中所述原料藥的重量份配比為：生黃芪10-30、熟地黃10-30、丹參10-30、赤芍10-30、僵蠶3-10；優(yōu)選為：黃芪20、地黃20、丹參20、赤芍20、僵蠶6。其中，步驟2)中所述加熱提取按照如下步驟進行：A)將混合原料加入水浸泡，加入的水的重量與混合原料的重量之比為6-12：1，浸泡20-90min后進行第一次煎煮處理，煎煮溫度為80-100℃，煎煮時間為2-5小時；B)將第一次提取液進行過濾，收集濾液；C)向濾渣中至少加入水1次，繼續(xù)進行至少1次煎煮處理，其中，每次加入的水的重量與混合原料原料的重量之比為1-5：1，煎煮溫度為80-100℃，煎煮時間為1-3小時；D)過濾，將濾液合并，獲得所述的提取液。特別是，步驟A)中所述的浸泡時間優(yōu)選為30-60min，加入的水的重量與混合原料的重量之比優(yōu)選為6-9：1；步驟C)中加入的水的重量與混合原料的重量之比為1-3：1。其中，步驟3)中所述活性組分為濃縮浸膏。特別是，所述濃縮浸膏的的相對密度為1.05-1.5。其中，步驟3)中所述濃縮處理將提取液在真空狀態(tài)下進行減壓蒸發(fā)濃縮，濃縮溫度為80-100℃，優(yōu)選為80℃，濃縮時的相對壓力為-0.05～-0.1MPa，優(yōu)選為-0.05～-0.09MPa，進一步優(yōu)選為-0.07MPa。本發(fā)明的用于治療或/和預防糖尿病的中藥組合物可以和藥劑學上可接受的輔料按傳統(tǒng)或現(xiàn)代生產(chǎn)工藝制成臨床可以接受的口服劑型。如膠囊劑、片劑、顆粒劑、丸劑、口服液等。所用的藥物輔料可以是選自《藥物賦形劑手冊》(HandbookofPharmaceuticalexcipients，第2版，由A.Wade和P.J.Weller編輯；AmericanPharmaceuticalAssociation出版，WashingtonandThePharmaceuticalPress,London,1994)等工具書中藥學上可接受的載體，例如淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維、明膠、蔗糖、硬脂酸鎂等。臨床上需要長期用藥，制成固體制劑貯存方便，患者服用便利，也更適應(yīng)市場需求。優(yōu)選的劑型是膠囊劑、顆粒劑、片劑、丸劑、散劑、口服液等。本發(fā)明再一方面提供一種上述任一所述組合物在制備治療或/和預防糖尿病、冠心病、糖尿病合并冠心病藥物和/或保健品中的應(yīng)用。本發(fā)明制備的用于預防或/和治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物使用時，每天口服1-2次，每次3-6克(生藥)，孕婦禁止服用，用藥期間禁止食用辛辣食物以及飲酒，連續(xù)使用28天后，血糖降低，糖尿病合并冠心病心肌缺血癥狀得到改善，心電圖改善。本發(fā)明的和治療糖尿病并發(fā)癥(糖尿病合并冠心病)的組合物具有如下優(yōu)點：1、本發(fā)明的中藥組合物針對口渴尿多，困倦氣短，胸悶胸痛、脈虛細無力的糖尿病并發(fā)癥(糖尿病合并冠心病)的發(fā)病原因?qū)ΠY治療，本發(fā)明的中藥組合物由多種中藥成分復合而成，其中的藥物的活性成分，相互協(xié)同作用，直接針病因，針對糖尿病并發(fā)癥(糖尿病合并冠心病)的形成原因采取多環(huán)節(jié)綜合治療，從糖尿病、冠心病發(fā)病的源頭進行醫(yī)治，治療效果快，作用迅速。2、本發(fā)明預防或/和治療糖尿病并發(fā)癥(糖尿病合并冠心病)組合物組方配伍科學，療效確切，安全性高，質(zhì)量可控；對陰津虧損、燥熱內(nèi)生、瘀血阻絡(luò)的糖尿病并發(fā)癥(糖尿病合并冠心病)的臨床療效顯著，降糖作用顯著，能夠明顯改善患者心肌缺血，使壓低的心電圖的ST段恢復正常，降低糖尿病患者臨床并發(fā)癥的產(chǎn)生。3、本發(fā)明制備的預防或/和治療糖尿病并發(fā)癥(糖尿病合并冠心病)的中藥組合物無毒副作用，制備工藝簡單，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定效果明顯，并且使用方便，填補了現(xiàn)有市場上的中成藥市場的不足。4、本發(fā)明用于預防或治療糖尿病并發(fā)癥(糖尿病合并冠心病)的中藥組合物的制備方法簡單，工藝條件溫和，成本低廉，費用低，降低糖尿病并發(fā)癥的治療成本，節(jié)約臨床衛(wèi)生醫(yī)療成本，適宜市場推廣應(yīng)用，使更多患者從中獲益。附圖說明圖1為本發(fā)明試驗大鼠心肌染色圖像(×200)；圖2為本發(fā)明試驗例大鼠白細胞基因組DNA提取后的凝膠電泳圖；圖3為本發(fā)明實驗大鼠MTHFR基因C677T基因型PCR擴增的凝膠電泳圖；圖4為本發(fā)明實驗大鼠MTHFR基因C677T基因型酶切后的凝膠電泳圖。具體實施方式以下通過試驗例來進一步闡述本發(fā)明所述藥物的有益效果，這些試驗例包括了本發(fā)明藥物的藥效學試驗。這些實施例僅是范例性的，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的配方思路、用途范圍下可以對本發(fā)明技術(shù)方案的細節(jié)和形式進行修改或替換，但這些修改和替換均落入本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。試驗例11、試驗材料1-1、藥品與試劑以實施例1中經(jīng)過干燥、粉碎并過篩制得藥物組合物干浸膏干粉進行試驗。陽性對照藥：降糖舒膠囊(吉林省天泰藥業(yè)股份有限公司；規(guī)格：0.3g*60粒)。以上藥物用蒸餾水溶解，備用。1-2、試劑鏈脲佐菌素(STZ)：美國Sigma公司。實驗前將鏈脲佐菌素溶于0.05M枸櫞酸冰浴緩沖鹽溶液中(pH＝4.2-4.3)配置成13mg/ml溶液，備用。1-3、試驗動物健康SD大鼠(雄性，體重270.0±4.1g)，購自中國醫(yī)學科學院動物所。2、試驗方法取健康SD大鼠，實驗前禁食18小時，自由飲水，然后每日喂以大鼠特殊的高脂飼料(每克飼料含58％脂肪,25.6％碳水化合物,16.4％蛋白質(zhì),由中國醫(yī)學科學院動物所提供)，飼養(yǎng)4周后，給每只大鼠腹腔注射40mg/kg體重的鏈脲佐菌素(STZ)溶液。72小時后，測空腹血糖，高于11.1mmo1/L的SD大鼠，在潔凈無菌條件下采用冠脈結(jié)扎方法造模型大鼠，具體如下：用3％戊巴比妥鈉(30mg/kg)行腹腔注射麻醉后將大鼠四肢及頭部仰臥固定于手術(shù)臺上，頸部皮膚備皮消毒，胸骨上窩上正中切開皮膚0.5cm，向上鈍性分離推開下頜下腺，剪除氣管前肌肉，使氣管在沒有任何拉鉤牽引的情況下能充分顯露，徹底止血后于第2～3氣管環(huán)間行氣管橫行切開，切口長度不超過氣管周徑的1/3，擦干其內(nèi)分泌物后插入氣管插管，深度為0.5～1cm。連接空氣呼吸機進行人工控制呼吸，呼吸頻率90次/分，潮氣量10～12ml，吸呼比設(shè)為1﹕1。左前胸去毛，消毒鋪巾，順肋間隙方向于胸骨左旁第3～4肋間切開皮膚，長約1cm，逐層分離皮下組織、肌肉，于2～3肋骨間撐開進胸，向右上方推開胸腺，可暴露心臟及大血管根部，切開心包，輕擠大鼠胸廓，將心臟擠出，在左心耳下緣與肺動脈圓錐間可以看見左冠脈前降支起始部，用6-0Prolene線縫針，進針深度控制在0.1cm，寬度為0.1～0.2cm(圖1)；回納心臟入胸廓，待動物的數(shù)十次心動周期后，收線打結(jié)；觀察數(shù)分鐘后，徹底止血后逐層關(guān)胸。恢復大鼠自主呼吸，撥出氣管內(nèi)插管，清除氣管內(nèi)分泌物，氣管切口及頸部切口開放，不作縫合。術(shù)后肌肉注射青霉素鈉20萬單位/d，連續(xù)5天抗感染。隨機挑選30只糖尿病合并冠心病模型大鼠，分為3組(試驗組、陽性藥物對照組、模型組)，每組10只。其中試驗組(即中藥組)的10只SD大鼠每日灌胃給予本發(fā)明藥物“降糖心絡(luò)通”4.5g/Kg；劑量為臨床用量的10倍，連續(xù)給藥8周；陽性藥物對照組的10只SD大鼠每日灌胃給予陽性對照藥物降糖舒膠囊4.5g/Kg；劑量為臨床用量的10倍，連續(xù)給藥8周；模型組的SD大鼠每日灌胃給予等體積生理鹽水，連續(xù)給藥8周。另取10只健康SD大鼠作為空白對照組(正常組)，空白對照組大鼠給予普通飼料，正常飲食，自由飲水。在其他SD大鼠造模后給予相應(yīng)藥物的試驗階段，同樣每日灌胃給予等體積生理鹽水，連續(xù)8周。于給藥后2、4、6、8周測量大鼠體重、FBG(禁食4小時尾部取血,葡萄糖氧化酶法)；在實驗的第0、4、8周末，禁食12小時，稱重后股靜脈采血；喂養(yǎng)8周，并在采血后處死全部大鼠，無菌條件下取出心臟及主動脈，心臟10％福爾馬林固定，主動脈在凍存管內(nèi)液氮驟冷，-80℃保存。3、檢測方法以及檢測結(jié)果3-1、檢測對象①病理染色大鼠心底部橫斷面。②取靜脈血檢測：血糖及血脂的檢測，采用酶免法測定Hcy的濃度；③MTHFR基因型分析；④限制性酶切PCR擴增產(chǎn)物；⑤電泳檢測。3-2、檢測方法觀察治療前后亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因多態(tài)性表達及血清同型半胱氨酸(Hcy)的變化。3-2-1、基因組DNA的提取選用天根公司的TIANampBloodDNAKit血液基因組DNA提取試劑盒(離心柱型)提取基因組DNA。1).處理血標本：從用EDTA抗凝的血標本中吸取500μl抗凝血加入至1.5ml離心管中，往離心管中加入1000μl的細胞裂解液CL，充分混和均勻，靜置5分鐘，待紅細胞充分溶解后，11500rpm離心1分鐘，吸去離心管中的上清液，留下白細胞沉淀。2).重復上述步驟一次(細胞裂解液CL為800μl)，完成后，往離心管中收集到的白細胞沉淀中加200μl的緩沖液GS，振蕩至徹底混勻。3).向離心管中加入20μl的蛋白酶K，混勻。4).再往離心管中加入200μl的緩沖液GB，充分顛倒混勻，56℃水浴鍋放置10分鐘，期間顛倒混勻數(shù)次，直至溶液變清亮為止。5).向離心管中加入200μl的無水乙醇，可出現(xiàn)絮狀沉淀物，充分混勻。6).將所得的溶液和沉淀物都加入一個吸附柱CB3中，并將吸附柱CB3放入收集管中，12000rpm離心30秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB3放回收集管中。7).向吸附柱CB3中加入500μl的緩沖液GD，12000rpm離心30秒，倒掉廢液，再將吸附柱CB3放回收集管中。8).向吸附柱CB3中加入600μl的漂洗液PW，12000rpm離心30秒，倒掉廢液，再將吸附柱CB3放回收集管中。9).重復步驟8)一次。10).將吸附柱CB3放入收集管中，12000rpm離心2分鐘，倒掉廢液。11).將吸附柱CB3置于室溫放置數(shù)分鐘，徹底晾干吸附柱中殘余的漂洗液。12).將吸附柱CB3轉(zhuǎn)入1.5ml無菌的離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加100μl洗脫緩沖液TB，室溫放置5分鐘，12000rpm離心1分鐘，將溶液收集到離心管中。13).重復步驟12)一次，將收集到的溶液置于無菌離心管中，-20℃冷凍保存?zhèn)溆谩?-2-2、聚合酶鏈式反應(yīng)3-2-2-1、基因組DNA的鑒定及定量①取用洗脫緩沖液TB溶解基因組DNA4μl加入1ml蒸餾水內(nèi)，充分混勻，加入比色杯。②在紫外分光光度計上，用蒸餾水作為對照物，測定基因DNA在260nm以及280nm處的吸光度，這兩處的波長吸光度可以反映堿基共軛雙鍵和蛋白質(zhì)的含量。當OD260/OD280的比值在1.8～2.0之間說明DNA純度較高，樣品合格。當比值＜1.8說明有蛋白質(zhì)或酚污染，用上述方法進行純化處理；比值＞2.0說明RNA污染，需要使用RNA酶處理樣品。③含有5μg/ml的雙鏈DNA溶液在波長為260nm的吸光度為1，因此樣品的實際DNA濃度為OD260×稀釋倍數(shù)250×50μg/ml。④根據(jù)實際測得的樣品DNA濃度，用緩沖液TB溶液將基因組DNA進一步稀釋為0.1μg/ml的工作液備用。⑤選取一塊制備好的2.5％含有0.5μg/mlEB瓊脂糖凝膠塊，置于含有0.5×TBE緩沖液的電泳槽中，在凝膠塊加樣孔中加入3μl樣品基因DNA，用入膠前5V/cm，入膠后8V/cm的電壓進行電泳，30分鐘后紫外燈下觀察提取的DNA純度和亮度。3-2-2-2、引物的涉及及配制在互聯(lián)網(wǎng)上搜索到的美國生物技術(shù)信息中心GenBank中的DNA原序列進行比對的方法，來確保所要擴增的目標片段的正確無誤。MTHFR基因一對引物序列如下正義引物：5，-TGAAGGAGAAGGTGTCTGCGGGA-3，反義引物：5，-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3，將引物配制成10μM的儲存液，-20℃冷凍保存?zhèn)溆?。PCR反應(yīng)體系將0.5ml的Eppendorf管置于冰水浴中，在管中依次加入如下試劑將上述混合液體快速混勻并離心10秒后加入30μl液體石蠟油覆蓋在總反應(yīng)液的表層。在加Taq酶和10×PCRBuffer時，因為里面含有表面活性劑，會使液體的表面張力增加，所以在每次加樣的時候均需要更換新的加樣吸液頭。PCR循環(huán)條件將含有混合反應(yīng)液的Eppendorf管置于PCR儀中，按表1所述條件進行反應(yīng)：表1MTHFR基因擴增的條件PCR擴增產(chǎn)物的基因型鑒定①取預先制備好的瓊脂糖凝膠，放入裝有0.5×TBE緩沖液的電泳槽中，緩沖液的液面超過瓊脂糖凝膠塊1mm。②用加液槍取1μl的10×溴酚藍溶液，滴在一塊平的毛玻璃上，再用加液槍取3μl的PCR擴增產(chǎn)物滴在10×溴酚藍溶液上，用加液槍反復混合，直至混勻(至少混合3次)。③用加液槍小心的把混合好的PCR產(chǎn)物加入到瓊脂糖凝膠塊的加樣孔中(注意加樣的時候，必須把瓊脂糖凝膠塊浸在緩沖液中，以免加樣出現(xiàn)不均勻)。④選擇一個合適的加樣孔，加入8μl的DNAMarker分子標準尺。⑤蓋上電泳蓋子，先讓加樣孔內(nèi)的樣品自然沉淀10分鐘，再跑電泳。⑥選擇好適合的電壓和電泳時間，先選用1-5V/cm的電壓(實際根據(jù)兩極間的距離來計算)，通電之后在正確接電極的前提下，電泳槽的負極會產(chǎn)生小氣泡，約5分鐘后可見溴酚藍向正極方向泳動，約溴酚藍泳動在瓊脂糖凝膠塊的中間靠正極方向左右的時候斷電。⑦取出瓊脂糖凝膠塊(注意取出時要戴好乳膠手套，因為凝膠塊有EB)，將其放入紫外凝膠成像儀下觀察，用100bp的DNA梯度分子量標準物作為參照物。按電泳后的條帶分布情況來判斷擴增產(chǎn)物是否為目標產(chǎn)物，并拍照留存圖像。3-2-3、PCR擴增產(chǎn)物酶切反應(yīng)MTHFR基因C677T基因型的酶切反應(yīng)體系：用限制性內(nèi)切酶HinfⅠ對擴增后的MTHFR基因C677T分型進行酶切消化。限制性核酸內(nèi)切酶HinfⅠ的酶切位點的選擇：5′…G↓ANTC…3′3′…CTNA↑G…5′選取一個無菌的200μl的Eppendorf管，在其中按秩序加入以下反應(yīng)液PCR反應(yīng)產(chǎn)物5μl10×BufferR，1μlHinfⅠ(10U/μl)0.5μl加滅菌雙蒸水8.5μl總體系15μl將混合好的反應(yīng)物在微型離心機上離心5秒后置于37℃的恒溫水浴鍋中，水浴5h。20液的表層。在加Taq酶和10×PCRBuffer時，因為里面含有表面活性劑，會使液體的表面張力增加，所以在每次加樣的時候均需要更換新的加樣吸液頭。3-2-4、酶切產(chǎn)物電泳和基因型的確定采用上述鑒定PCR擴增產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳的方法，用預先制備好的含有EB2.5％的瓊脂糖凝膠來檢測酶切產(chǎn)物片段，用0.5×TBE的緩沖液，在加樣孔中加入10μl的酶切產(chǎn)物，用100V的電壓進行電泳60分鐘，結(jié)果在紫外凝膠成像儀下觀察，用100bp的DNA梯度分子量標準物作為參照物。按照酶切產(chǎn)物在電泳后的條帶分布情況來判斷各自不同的三種基因型，拍照留存圖像并分別逐個進行標記和詳細記錄。試驗結(jié)果按照如下統(tǒng)計學處理：①計量資料用均數(shù)±標準差(X±s)表示；②計量資料均數(shù)的比較均需先進行正態(tài)性檢驗；③對于符合正態(tài)分布的計量資料均數(shù)的兩兩比較用t檢驗；三組或以上比較用方差分析。對于不符合正態(tài)分布的計量資料，先進行對數(shù)轉(zhuǎn)換或者平方根轉(zhuǎn)換基本滿足正態(tài)分布后再使用上述方法進行統(tǒng)計學分析。假如還是不能滿足正態(tài)性分布的計量資料，且樣本量偏少、極性大，則采用非正態(tài)分布樣本的非參數(shù)檢驗來分析這些計量資料；④計數(shù)資料使用四格表或者R×C表的卡方(χ2)檢驗。⑤基因型頻率分布和等位基因頻率分布用χ2檢驗。⑥研究對象的基因型頻率分布用Excel表中的Hardy-Weinberg平衡檢驗。⑦采用優(yōu)勢比評價相對危險度，使用公式計算OR值，并通過卡方檢驗和95％；可信區(qū)間(95％CI)評價OR的顯著性。以上的統(tǒng)計學分析采用Excel2003和SPSS17.0等軟件進行分析，以P＜0.05作為有統(tǒng)計學差異的評判標準。3-3、檢測結(jié)果3-3-1、大鼠體重變化實驗期間，試驗組大鼠體重隨時間明顯增加，精神狀況良好，毛皮有光澤，反應(yīng)靈敏。模型組大鼠均出現(xiàn)多飲、多食、多尿及消瘦等癥狀，毛皮雜亂、失去光澤，倦怠少動，反應(yīng)遲鈍，模型組有一只大鼠死于糖尿病胃輕癱。中藥組大鼠整體狀況雖不及正常組，但較模型組有所改善。大鼠體重檢測結(jié)果如表2所示。表2各組大鼠體重的變化結(jié)果注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01，與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01從表1可看出，0周(即未進行藥物干預時)，模型組與空白對照組、試驗組、陽性對照組大鼠體重比較，均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，表示三組體重無差別；造模后的第4周，模型組與正常組、中藥組與正常組比較，體重均有差別，有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，模型組、中藥組大鼠體重均比正常組減輕，且體重增長幅度減緩；中藥組與模型組比較，體重亦有差別，有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，中藥組體重較模型組有所增長；第8周的趨勢與第4周基本相同。3-3-2、大鼠生化指標的變化大鼠空腹血糖的變化如表3所示；大鼠餐后2h血糖變化如表4所示；大鼠甘油三酯變化如表5所示；大鼠總膽固醇變化如表6所示；大鼠高密度脂蛋白變化如表7所示；大鼠低密度脂蛋白變化如表8所示；大鼠同型半胱氨酸變化如表9所示。表3大鼠空腹血糖的變化結(jié)果注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01，與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01從表3可看出，0周(即造模后72小時，未進行藥物干預時)測定血糖，模型組和試驗組血糖值均≥16.7mmol/L，符合糖尿病大鼠的診斷標準，兩組相比，無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)；造模后的第4周，與空白組比較，模型組和試驗組均呈高血糖狀態(tài)，有統(tǒng)計學差異(P＜0.01)，而模型組與試驗組比較，血糖水平無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)；第8周的趨勢與第4周基本相同。表4大鼠餐后2h血糖變化結(jié)果注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01，與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01表5大鼠甘油三酯變化結(jié)果注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01，與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01表6大鼠總膽固醇變化結(jié)果注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01，與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01表7大鼠高密度脂蛋白變化結(jié)果注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01，與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01表8大鼠低密度脂蛋白變化結(jié)果注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01，與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01表9大鼠同型半胱氨酸變化結(jié)果注：與正常組比較，*P<0.05，**P<0.01，與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.013-3-3、大鼠心臟病理的變化如圖1A、B所示：空白對照組(正常組)大鼠心肌組織纖維纖細，分布比較均勻；模型組大鼠心肌縱切面可見粗大纖維排列紊亂，分布不均，甚至有肌纖維斷裂，并以8周組改變更為顯著，如圖1C、D；而試驗組(中藥組)大鼠心肌纖維組織損害有所逆轉(zhuǎn)，如圖1E、F。3-3-4、PCR擴增和酶切的結(jié)果(1)基因組DNA的提取結(jié)果對大鼠周圍血液白細胞基因組DNA的提取，提取完成后用2.5％的瓊脂糖凝膠電泳予以證實提取結(jié)果，結(jié)果顯示提取成功，提取結(jié)果如圖2所示。(2)MTHFR基因C677T基因型PCR擴增結(jié)果對大鼠提取的基因組DNA均進行PCR定向擴增，擴增后用2.5％的瓊脂糖凝膠電泳予以證實擴增結(jié)果，結(jié)果顯示擴增成功，可見一條長度為198bp的SNP條帶，凝膠電泳圖如圖3所示。(3)MTHFR基因C677T基因型酶切結(jié)果MTHFR基因C677T基因型酶切結(jié)果如圖4所示，酶切后用2.5％的瓊脂糖凝膠電泳予以證實酶切結(jié)果。根據(jù)電泳的結(jié)果，按照條帶分布有三種結(jié)果產(chǎn)生。CC野生純合子型：198bp單一的條帶；CT突變雜合子：一個198bp的條帶和一個175bp的條帶，還有一個23bp的條帶，因為太小而不能顯影，但不影響結(jié)果的判斷；TT突變型純合子：175bp單一的條帶。3-3-5、MTHFR基因C677T多態(tài)性的分布空白對照組中檢出CC、CT和TT三種基因型，各基因型頻率分別為：30.0％、40.0％和30.0％；模型組中檢出CC、CT和TT三種基因型，各基因型頻率分別為：20.0％、40.0％和40.0％，本發(fā)明藥物試驗組中檢出CC、CT和TT三種基因型，各基因型頻率分別為：40.0％、30.0％和30.0％。三組基因型頻率分布比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。模型組CT和TT基因型頻率分布均高于試驗組，MTHFR基因C677T多態(tài)性分布檢測結(jié)果如表10所示。表10MTHFR基因C677T多態(tài)性分布檢測結(jié)果3-3-6、MTHFR基因C677T等位基因頻率的分布空白對照組C等位基因的分布頻率為50.0％，T等位基因的分布頻率為50.0％；模型組C等位基因的分布頻率為40.0％，T等位基因的分布頻率為60.0％，試驗組C等位基因的分布頻率為60.0％，T等位基因的分布頻率為40.0％。三組等位基因頻率分布比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，MTHFR基因C677T等位基因頻率的分布檢測結(jié)果如表11所示。表11MTHFR基因C677T等位基因頻率的分布3-3-7、MTHFR不同基因型血漿同型半胱氨酸平均水平的比較按基因型不同進行血漿Hcy平均水平比較，結(jié)果顯示CC、CT和TT型者漿Hcy平均水平分別為(10.86±4.30)μmol/L、(13.44±5.26)μmol/L和(16.22±5.40)μmol/L，三組間血漿Hcy平均水平不等，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。TT基因型者血漿Hcy平均水平顯著高于CC型者和CT型，并且CT型者血漿Hcy平均水平又顯著高于CC型。所有入選者的血漿Hcy平均水平為(13.26±5.07)μmol/L。比較結(jié)果如表12所示。表12MTHFR不同基因型血漿同型半胱氨酸平均水平的比較結(jié)構(gòu)基因型Hcy值(μmol/L)CC組10.86±4.30CT組13.44±5.26TT組16.22±5.40合計13.26±5.073-3-8、三組相同基因型血漿Hcy水平的比較正常組攜帶CC型血漿Hcy平均水平為(12.24±4.36)μmol/L，模型組血漿Hcy平均水平13.57±6.02μmol/L，中藥組攜帶CC型血漿Hcy平均水平為(10.06±3.90)μmol/L，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；正常組攜帶CT型血漿Hcy平均水平為(14.41±5.16)μmol/L，模型組血漿Hcy平均水平的(12.39±4.90)μmol/L，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；模型組攜帶TT型血漿Hcy平均水平為(16.71±5.55)μmol/L高于同基因型對照者血漿Hcy平均水平的(15.43±4.93)μmol/L，但差異沒有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。比較結(jié)果如表13。表13三組相同基因型血漿Hcy水平的比較結(jié)果試驗例2本發(fā)明降低血糖組合物毒理試驗(一)急性毒性試驗將本發(fā)明的用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物顆粒劑對昆明小鼠灌服1000g(生藥)/kg。未出現(xiàn)任何毒性反應(yīng)，一周內(nèi)無動物死亡。(二)長期毒性試驗將本發(fā)明的用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物丸劑對大鼠進行長期毒性試驗，連續(xù)大劑量(成人劑量的100倍)灌胃給藥，給藥時間長(90天)，以動物給藥前后的一般表現(xiàn)、體重、攝食量、血液學及血清生化指標、尿常規(guī)、骨髓分類、臟器重量、臟器系數(shù)為檢測指標，并輔以動物各組織臟器的病理學檢查，綜合評價藥物的毒性情況。結(jié)果顯示大鼠的各項指標均正常。病理組織學檢查結(jié)果顯示，大鼠各組織臟器未見異常。綜上所述：本發(fā)明的用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物毒性低，安全范圍廣，本發(fā)明用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物食用安全可靠。試驗例3治療糖尿病合并冠心病的臨床療效觀察1、研究對象選擇門診和住院患者100例，隨機分為兩組。治療組50例，男性36例，女性14例；平均年齡(61.8±9.7)歲。對照組50例，男性34例，女性16例；平均年齡(60.2±10.3)歲。兩組年齡、性別差異無顯著性(P>0.05)。2、診斷標準糖尿病采用《實用內(nèi)科學》診斷標準；冠心病采用《臨床冠心病學》中有關(guān)診斷標準：以心電圖或動態(tài)心電圖改變(ST段下降0.5mV以上，T波平坦、倒置或抬高，心律失常，QRS間期增寬，Q-T間期延長，U波倒置等)為主要指標。中醫(yī)辨證參照《中醫(yī)病證診斷療效標準》中胸痹心痛的診斷依據(jù)，辨證屬心氣虛弱型、心血瘀阻型。3、治療方法兩組均予合理膳食，適量運動，控制體重，戒煙限酒等。兩組均給予前期治療，包括糖尿病飲食、心電監(jiān)護、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、吸氧、抗血小板、抗凝、降壓、降脂等，上述情況基本穩(wěn)定后開始實驗，療程為2個月。對照組給予格列吡嗪7.5mg/d～30mg/d，分3次口服；二甲雙胍0.5g/d～1.5g/d，分3次口服；復方丹參片3片，每日3次，飯后服用。治療組服用本發(fā)明實施例1中制備的顆粒劑，每天3次，每次1袋，每袋顆粒劑內(nèi)含中藥提取物2克(相當于8g生藥)，飯后溫開水送服。4、觀察指標(1)心電圖療效；(2)治療前后空腹血糖、血脂指標；(3)不良反應(yīng)狀況。5、療效標準參照《臨床冠心病學》及《中醫(yī)病證診斷療效標準》擬定。治愈：臨床癥狀基本消失，心電圖基本恢復正常。好轉(zhuǎn)：臨床癥狀明顯減輕，心電圖改變明顯改善。無效：臨床癥狀無明顯改善，心電圖無改變。6、統(tǒng)計學處理計量資料以(平均值±方差)表示，采用t檢驗。7、結(jié)果7-1、臨床療效比較臨床療效比較結(jié)果如下：本發(fā)明中藥組合物治療組50例，治愈12例，好轉(zhuǎn)36例，無效2例，總有效率96％；對照組50例，治愈6例，好轉(zhuǎn)41例，無效3例，總有效率94％，兩組療效相類似。7-2、兩組治療前后生化指標比較兩組治療前后空腹血糖(FBS)、血脂指標比較見表l4。結(jié)果顯示治療后治療組、對照組的各項指標均得到改善，且效果優(yōu)于對照組，使用本發(fā)明的藥物組合物的治療組治療效果優(yōu)異。治療前后生化指標測定結(jié)果如表14。表14兩組治療前后血糖、血脂比較(mmol/L，平均值±方差)8、結(jié)論使用本發(fā)明的藥物組合物治療糖尿病性冠心病，能夠明顯改善患者體內(nèi)的血糖水平，影響TC和TG，同時升高HDL-C，降低LDL-C。由于糖尿病性冠心病的發(fā)病危險與體內(nèi)各項指標的狀況密切相關(guān)，使用本發(fā)明的藥物組合物能夠明顯升高HDL-C，降低LDL-C，改善患者血液狀況，從而降低了冠心病的發(fā)病率。實施例1本發(fā)明降糖心絡(luò)通顆粒制備1)按照以下配比稱取原料(單位：×10g)黃芪20、地黃20、丹參20、赤芍20、僵蠶62)將藥材黃芪、地黃、丹參、赤芍、僵蠶漂洗后，置于中藥多功能提取釜中并混合均勻，加入自來水浸泡30min，其中，加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為9：1；3)開啟多功能提取釜電源進行加熱，加熱至100℃，保持在此溫度下恒溫提取3h，然后過濾，得到第一次提取液備用；加熱溫度不限于100℃，其他溫度均適用于本發(fā)明。4)向濾渣中加入自來水，加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為5：1，加熱提取，保持加熱溫度為100℃下提取3h，過濾得到第二次提取液；5)將2次提取液合并后置于真空高能蒸發(fā)濃縮器內(nèi)進行減壓蒸發(fā)濃縮，制得濃縮浸膏，其中，減壓濃縮的相對壓力為-0.07MPa(即以一個大氣壓為0，控制減壓濃縮時的壓力相對于一個大氣壓為-0.07MPa)，濃縮溫度為80℃，將2次提取液濃縮成相對密度為1.2的浸膏；6)濃縮浸膏于45-50℃下進行干燥，粉碎后過180目篩，得干浸膏粉末；7)將干浸膏粉末與輔料糊精混合，乙醇作黏合劑，制粒，干燥，即制得本發(fā)明用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物(降糖心絡(luò)通顆粒)。實施例2本發(fā)明降糖心絡(luò)通膠囊制備1)按照以下配比稱取原料(單位：×10g)黃芪10、地黃30、丹參10、赤芍30、僵蠶102)將藥材黃芪、地黃、丹參、赤芍、僵蠶漂洗后，置于中藥多功能提取釜中并混合均勻，加入自來水浸泡90min，其中，加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為6：1；3)開啟多功能提取釜電源進行加熱，加熱至80℃，保持在此溫度下恒溫提取4小時，然后過濾，得到第一次提取液備用；4)向濾渣中加入自來水，加熱提取1次，加熱提取過程中加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為5：1，加熱提取，保持加熱溫度為80℃下提取3h，過濾得到1次提取液；5)將2次提取液合并后置于真空高能蒸發(fā)濃縮器內(nèi)進行減壓蒸發(fā)濃縮，制得濃縮浸膏，其中，減壓濃縮的相對壓力為-0.07MPa(即以一個大氣壓為0，控制減壓濃縮時的壓力相對于一個大氣壓為-0.07MPa)，濃縮溫度為80℃，將3次提取液濃縮成相對密度為1.1的浸膏；6)將混合濃縮液進行冷凍干燥，并粉碎，制得用于降低血糖的中藥組合物干粉；7)將干浸膏粉末與輔料微晶纖維混合后，裝入明膠硬膠囊，制成本發(fā)明用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物(降糖心絡(luò)通膠囊)。實施例3本發(fā)明降糖心絡(luò)通片制備1)按照以下配比稱取原料(單位：×10g)黃芪30、地黃10、丹參30、赤芍10、僵蠶32)將藥材黃芪、地黃、丹參、赤芍、僵蠶漂洗后，置于中藥多功能提取釜中并混合均勻，加入自來水浸泡20min，其中，加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為12：1；3)開啟多功能提取釜電源進行加熱，加熱至100℃，保持在此溫度下恒溫提取2小時，然后過濾，得到第一次提取液備用；4)向濾渣中分3次加入自來水，加熱提取3次，每次加熱提取過程中加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為1：1，加熱提取溫度為90℃，提取時間為1小時，過濾得到3次提取液；5)將4次提取液合并后置于真空高能蒸發(fā)濃縮器內(nèi)進行減壓蒸發(fā)濃縮，制得濃縮浸膏，其中，減壓濃縮的相對壓力為-0.095MPa(即以一個大氣壓為0，控制減壓濃縮時的壓力相對于一個大氣壓為-0.095MPa)，濃縮溫度為80℃，將3次提取液濃縮成相對密度為1.5的浸膏；6)濃縮浸膏于45-50℃下進行干燥，粉碎后過100目篩，得干浸膏粉末；7)將干浸膏粉末與輔料糊精混合，乙醇制粒，干燥，壓片機壓片，即制得本發(fā)明用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物(降糖心絡(luò)通片)。實施例4本發(fā)明降糖心絡(luò)通口服液制備1)按照以下配比稱取原料(單位：×10g)黃芪5、地黃2、丹參35、赤芍5、僵蠶202)將藥材黃芪、地黃、丹參、赤芍、僵蠶漂洗后，置于中藥多功能提取釜中并混合均勻，加入自來水浸泡60min，其中，加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為9：1；3)開啟多功能提取釜電源進行加熱，加熱至100℃，保持在此溫度下恒溫提取3小時，然后過濾，得到第一次提取液備用；4)向濾渣中分2次加入自來水，加熱提取2次，每次加熱提取過程中加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為5：1，加熱提取，保持加熱溫度為100℃下提取3小時，過濾得到2次提取液；5)將3次提取液合并后置于真空高能蒸發(fā)濃縮器內(nèi)進行減壓蒸發(fā)濃縮，制得濃縮浸膏，其中，減壓濃縮的相對壓力為-0.07Pa(即以一個大氣壓為0，控制減壓濃縮時的壓力相對于一個大氣壓為-0.07MPa)，濃縮溫度為100℃，將3次提取液濃縮成相對密度為1.1的浸膏；6)將濃縮液分裝于塑料復合膜包裝中，制成本發(fā)明用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物(降糖心絡(luò)通口服液)。實施例5本發(fā)明降糖心絡(luò)通丸制備1)按照以下配比稱取原料(單位：×10g)黃芪40、地黃35、丹參5、赤芍35、僵蠶12)將藥材黃芪、地黃、丹參、赤芍、僵蠶漂洗后，置于中藥多功能提取釜中并混合均勻，加入自來水浸泡60min，其中，加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為6：1；3)開啟多功能提取釜電源進行加熱，加熱至80℃，保持在此溫度下恒溫提取5小時，然后過濾，得到第一次提取液備用；4)向濾渣中分2次加入自來水，加熱提取2次，每次加熱提取過程中加入的自來水的重量與藥材混合物的重量(干重)之比為4：1，加熱提取溫度為80℃，提取時間2小時，過濾得到2次提取液；5)將3次提取液合并后置于真空高能蒸發(fā)濃縮器內(nèi)進行減壓蒸發(fā)濃縮，制得濃縮浸膏，其中，減壓濃縮的相對壓力為-0.05MPa(即以一個大氣壓為0，控制減壓濃縮時的壓力相對于一個大氣壓為-0.05MPa)，濃縮溫度為100℃，將3次提取液濃縮成相對密度為1.3的浸膏；6)將混合濃縮液進行噴霧干燥，制得用于降糖組合物干浸膏干粉；7)將干浸膏粉末與輔料煉蜜混合，攪拌均勻后置于制丸機制中進行制丸，然后干燥，即得本發(fā)明用于治療糖尿病合并冠心病的中藥組合物(降糖心絡(luò)通濃縮丸)。當前第1頁1 2 3