本發(fā)明屬于保健食品領(lǐng)域，具體涉及一種包含青錢(qián)柳葉和葛根的降血糖保健組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：糖尿病(diabetesmellitus，DM)是一組由遺傳和環(huán)境因素相互作用而引起的臨床綜合征，由于胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足以及靶組織細(xì)胞對(duì)胰島素敏感性降低，引起糖、脂肪、蛋白質(zhì)等代謝紊亂，以高血糖為主要標(biāo)志，導(dǎo)致一系列臨床表現(xiàn)。糖尿病是一種常見(jiàn)的多病因的有遺傳傾向的內(nèi)分泌代謝紊亂性疾病，隨著生活水平的提高，其發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)，成為繼癌癥、心腦血管疾病之后危害人體健康的第三殺手。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的最新資料顯示，在未來(lái)15年中，中國(guó)的糖尿病患者人數(shù)將達(dá)到目前的4倍，全世界糖尿病患者人數(shù)將是現(xiàn)在的2倍。我國(guó)1997年完成的有關(guān)糖尿病流行病學(xué)調(diào)查課題顯示，全國(guó)糖尿病發(fā)病率從1980年的1％上升到3.2％，北京市的發(fā)病率為4％以上，更為嚴(yán)重的是60歲以上的老年人中糖尿病的發(fā)病率超過(guò)11％。2012年的最新研究報(bào)告顯示，我國(guó)糖尿病人位居全球第一。在西方發(fā)達(dá)國(guó)家糖尿病的情況也較為嚴(yán)重，美國(guó)估計(jì)約有1600萬(wàn)以上的糖尿病患者，約占人口總數(shù)的6％。糖尿病屬中醫(yī)的“消渴”或“消癉”的范疇。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)將糖尿病主要分為兩種類(lèi)型：一類(lèi)是I型的胰島素依賴(lài)型(TDDM)，以遺傳因素為主，多發(fā)生于青少年。另一類(lèi)為II型的非胰島素依賴(lài)型(NIDDM)，因胰島素抵抗及胰島素分泌相對(duì)不足或延遲，導(dǎo)致血糖升高，病程長(zhǎng)者可出現(xiàn)糖尿病的并發(fā)癥，多發(fā)于成年或中老年人。在所有糖尿病患者中，90％以上是患II型糖尿病。目前，糖尿病的治療除用胰島素外還配用一些口服降糖藥物，如：磺酰脲類(lèi)、二甲雙胍類(lèi)、α-葡萄糖苷酶抑制劑、噻唑烷酮等。西藥治療效果雖然比較明顯，但副作用大，如易造成低血糖、乳酸中毒、腸道不適等。盡管胰島素療法和口服降糖藥能極大地降低糖尿病患者的死亡率，但病人會(huì)產(chǎn)生多種并發(fā)癥，有些并發(fā)癥在一定程度上比糖尿病本身更能致人于死地。該病如得不到控制，將會(huì)導(dǎo)致嚴(yán)重慢性并發(fā)癥進(jìn)而致殘致死。因此，加強(qiáng)糖尿病的防治措施已受到世界各國(guó)的重視，研究防治糖尿病的新型藥物和保健食品是國(guó)內(nèi)外相關(guān)領(lǐng)域的前沿課題。非藥物性治療糖尿病已成為當(dāng)今醫(yī)學(xué)、營(yíng)養(yǎng)學(xué)、食品科學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。盡管?chē)?guó)內(nèi)外很多大的企業(yè)和科研機(jī)構(gòu)爭(zhēng)相研究和開(kāi)發(fā)降糖藥物或者替代產(chǎn)品，但大多都因價(jià)格昂貴、載體不理想、效果不穩(wěn)定或者服用麻煩而不被人們認(rèn)可和接受。此外，高血壓、高血脂也是近年來(lái)困擾人們的“現(xiàn)代文明病”，對(duì)人體健康的危害極大，對(duì)其防治的困難與糖尿病類(lèi)似。高脂血癥(hyperlipemia)又稱(chēng)高脂蛋白血癥，可表現(xiàn)為膽固醇血癥、高三酰甘油血癥或兩者兼有，它與動(dòng)脈粥樣性硬化、糖尿病、脂肪肝、腎病等關(guān)系十分密切。尤其在心腦血管病的發(fā)病中有重要的地位而日益引起人們的重視。中醫(yī)認(rèn)為高脂血癥屬“濁阻”、“痰濕”、“肥胖”、“濕熱”等范疇。高血壓是一種以動(dòng)脈壓異常升高為主要特征的心血管疾病。病因分為原發(fā)性高血壓和繼發(fā)性高血壓。前者占高血壓的90％，稱(chēng)為高血壓病(hypertension)?！?999年WHO/ISH指南》將高血壓定義為：未服抗高血壓藥物情況下，收縮壓＞18.7kpa和舒張壓＞12.0kpa，并根據(jù)血壓升高的程度、危險(xiǎn)因素的數(shù)量、靶器官損害的程度以及并存的臨床情況把高血壓分為三期：(1)輕度高血壓：無(wú)器官損害客觀條件；(2)中度高血壓：至少有一項(xiàng)器官損害表現(xiàn)(左心室肥厚，視網(wǎng)膜動(dòng)脈變窄，蛋白尿和血肌酐升高，超聲檢查有動(dòng)脈硬化斑塊)；(3)重度高血壓：出現(xiàn)器官損害的臨床表現(xiàn)(心絞痛、心肌梗死、心力衰竭、短暫腦缺血發(fā)作、腦卒中、高血壓腦病、視網(wǎng)膜出血、血肌酐＞l0mmol/L及腎功能衰竭、動(dòng)脈閉塞性疾病)。本病屬于中醫(yī)的“眩暈”、“頭痛”等范疇。高血糖、高血脂、高血壓(“三高”)病因復(fù)雜，目前病因尚不完全明確，西醫(yī)一般認(rèn)為其主要是由遺傳因素、環(huán)境因素、高胰島素血癥和胰島素抵抗、肥胖、脂代謝異常等相互影響所致。目前雖然西醫(yī)治療的療效比較肯定，但對(duì)合并癥及其并發(fā)癥的治療困難較大，同時(shí)會(huì)導(dǎo)致程度不同的副作用，患者往往難以忍受，不能堅(jiān)持治療。中醫(yī)對(duì)上述疾病的認(rèn)識(shí)和防治，則是從整體調(diào)理、辨證論治入手的，雖然沒(méi)有西藥快速，但通過(guò)整體調(diào)理，癥狀和指標(biāo)都會(huì)得到有效控制，同時(shí)能夠有效保護(hù)靶器官等。從臨床上看，往往是高血脂、高血糖、高血壓常合并出現(xiàn)，互為因果?？茖W(xué)研究證明，輕度的長(zhǎng)期的慢性高血糖就可以導(dǎo)致所有慢性并發(fā)癥的發(fā)生，而長(zhǎng)期血壓增高，同樣導(dǎo)致各種心腦血管系統(tǒng)疾病的發(fā)生。最近，更多的研究結(jié)果證實(shí)，為了達(dá)到防 止和延緩并發(fā)癥發(fā)生和發(fā)展的目的，應(yīng)該十分強(qiáng)調(diào)多種因素的控制，例如在II型糖尿病中，除了嚴(yán)格控制血糖、血壓水平之外，還應(yīng)該采取嚴(yán)格控制血脂水平，嚴(yán)格控制體重，常規(guī)抗凝治療等措施，以進(jìn)一步降低大血管病變的風(fēng)險(xiǎn)。但截至目前能夠同時(shí)預(yù)防或輔助治療“三高”的中藥保健組合物了了無(wú)幾，能夠取得滿(mǎn)意的效果且患者依從性高的保健組合物更是鮮有報(bào)道，因此，研究開(kāi)發(fā)能同時(shí)預(yù)防和輔助治療“三高”的安全有效的保健品，是當(dāng)務(wù)之急，迫在眉睫。近些年來(lái)，從天然產(chǎn)物中尋找新的有生理活性的成分或先導(dǎo)化合物以開(kāi)發(fā)新藥或保健食品已成為全球關(guān)注和研究的熱點(diǎn)。尋求降糖、降壓和降脂食物資源并對(duì)其功能因子進(jìn)行剖析，進(jìn)而開(kāi)發(fā)生產(chǎn)出降血糖、降血壓、降血脂的保健食品基料可望成為治療這些疾病的好途徑。青錢(qián)柳葉(cyclocaryapaliurus(Batal.)Ijinsk)屬胡桃科青錢(qián)柳葉屬的喬木植物。現(xiàn)僅存一種，為我國(guó)特有，是國(guó)家重點(diǎn)保護(hù)的瀕危植物之一，廣泛分布于長(zhǎng)江流域各省，江西省北部及中部丘陵山地分布較多。據(jù)《中華本草》記載，青錢(qián)柳葉具有祛風(fēng)、消炎止痛和殺蟲(chóng)止癢等功效。其主要成分有皂苷、黃酮、萜類(lèi)、多糖、微量元素等。研究表明青錢(qián)青錢(qián)柳葉具有多種功效，例如青錢(qián)青錢(qián)柳葉能明顯抑制脂肪酶活性、減少脂肪的消化吸收，并能促進(jìn)脂類(lèi)物質(zhì)的代謝分解，能有效降低血糖、明顯改善糖耐量，抗氧化、抗疲勞等。青錢(qián)青錢(qián)柳葉系列保健產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，必將豐富我國(guó)的保健品市場(chǎng)，提高人民的健康生活水平。葛根(PuerariaeRadix)為豆科植物野葛的干燥根，習(xí)稱(chēng)野葛。秋、冬二季采挖，味甘、辛，性涼。具有解肌退熱、透疹、生津止渴、升陽(yáng)止瀉之功，常用于表證發(fā)熱、項(xiàng)背強(qiáng)痛、麻疹不透、熱病口渴、陰虛消渴、熱瀉熱痢以及脾虛泄瀉?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，葛根具有擴(kuò)張冠脈血管和改善心肌缺血缺氧狀態(tài)、降血壓、降血糖、抑制血小板聚集β-受體阻斷、改善腦血循環(huán)等作用。雖然目前生產(chǎn)具有降糖功能的藥物及替代產(chǎn)品很多，但兼具降血糖、降血壓和降血脂功能的主要包含青錢(qián)青錢(qián)柳葉和葛根的保健品至今未見(jiàn)報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明人經(jīng)廣泛搜集探索民間驗(yàn)方、在浩瀚的藥食原材料中，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期的研究和實(shí)踐，意外的獲得了一種兼具降血糖、降血壓和降血脂功能，包含 青錢(qián)青錢(qián)柳葉和葛根的保健組合物，從而克服了現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，提供了一種包含青錢(qián)柳葉和葛根的保健組合物，其中二者的重量百分比為10-90％的青錢(qián)柳葉和10-90％的葛根。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，青錢(qián)柳葉和葛根的重量百分比為20-80％的青錢(qián)柳葉和20-80％的葛根。優(yōu)選的，青錢(qián)柳葉和葛根的重量百分比可以為30-70％的青錢(qián)柳葉和30-70％的葛根。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，所述保健組合物中還可以包含陳皮、山藥、玉竹、茯苓、石斛中的一種或其任意組合，所述青錢(qián)柳葉、葛根與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為1-98％∶1-98％∶1-98％。優(yōu)選的，青錢(qián)柳葉、葛根與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為10-80％∶10-80％∶10-80％。進(jìn)一步優(yōu)選的，青錢(qián)柳葉、葛根與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為20-60％∶20-60％∶20-60％。進(jìn)一步優(yōu)選的，青錢(qián)柳葉、葛根與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為20-40％∶20-40％∶20-40％。更優(yōu)選的，青錢(qián)柳葉、葛根與上述五味中藥之一或其任意組合的重量百分比可以為80％∶10％∶10％；或者20％∶50％∶30％；或者37.5％∶37.5％∶25％或者60％∶20％∶20％。在本發(fā)明的又一個(gè)實(shí)施方案中，上述保健組合物中還可包含選自由枸杞子、黃精、昆布、烏梅、桑白皮、人參、三七、女貞子、山茱萸、川芎、蒼術(shù)、玄參、生地黃、白芍、當(dāng)歸、紅景天、西洋參、蘆薈、五味子、麥門(mén)冬、制大黃、知母、蒺藜、銀杏葉、黃芪、絞股藍(lán)、苦瓜、苦蕎麥、南瓜、魔芋、芹菜、玉米須、銀耳、猴頭菇和大蒜所組成的組中的一種或更多種。在本發(fā)明中，所述保健組合物可以通過(guò)本領(lǐng)域任何常規(guī)的制備方法進(jìn)行制備。根據(jù)本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供了所述保健組合物在制備輔助治療高血糖、高血壓或高血脂保健組合物方面的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的再一個(gè)方面，提供了一種含有所述保健組合物的藥物制劑。本發(fā)明的保健組合物可以根據(jù)需要和藥學(xué)上可接受的輔料制備成任何合適的口服制劑用于降血糖、降血壓或降血脂。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述口服制劑可以為顆粒劑、膠囊劑、片劑、散劑、泡騰劑、袋泡劑等劑型。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述藥學(xué)上可接受的輔料例如可以選自預(yù)膠化淀粉、β-環(huán)糊精、卡波姆、微晶纖維素、羥丙基甲基纖維素、低取代羥丙基纖維素、聚乙二醇(PEG)、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、乙基纖維素、甘露醇、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、硬脂酸鎂、滑石粉、微粉硅膠、阿斯巴甜、碳酸氫鈉、碳酸鈉中的一種或更多種。本發(fā)明的技術(shù)方案具有如下優(yōu)勢(shì)：傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論強(qiáng)調(diào)藥效的互補(bǔ)及協(xié)同作用，中藥復(fù)方是中華傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的精華。本發(fā)明以青錢(qián)柳葉和葛根為主要原料，根據(jù)中藥作用的系統(tǒng)論原則，為“三高”人群研制出降血糖、降血壓、降血脂的保健組合物，其具有功效明確、協(xié)同作用明顯和易于大眾服用等優(yōu)點(diǎn)；本發(fā)明的保健組合物以天然中草藥為基礎(chǔ)，不存在任何細(xì)胞毒作用，使“三高”人群在正常飲食的情況下，自覺(jué)地維護(hù)血糖、血壓和血脂穩(wěn)定，獲得“三高”的非藥物治療效果；本發(fā)明的保健組合物依據(jù)高血糖可能的機(jī)理，結(jié)合動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探討保健組合物的降血糖作用機(jī)制；本發(fā)明在制備保健組合物時(shí)還考慮到糖尿病患者的營(yíng)養(yǎng)平衡和代謝問(wèn)題，同時(shí)也適用于高血壓和高血脂人群的日常保健。具體實(shí)施方式下面將進(jìn)一步的詳細(xì)說(shuō)明本發(fā)明。需要指出的是，以下說(shuō)明僅僅是對(duì)本發(fā)明要求保護(hù)的技術(shù)方案的舉例說(shuō)明，并非對(duì)這些技術(shù)方案的任何限制。本發(fā)明的保護(hù)范圍以所附權(quán)利要求書(shū)記載的內(nèi)容為準(zhǔn)。實(shí)施例1配方組成：青錢(qián)柳葉1.0kg、葛根9.0kg。制備方法：2.1按照上述配方準(zhǔn)確稱(chēng)取各味中藥，用清水清洗干凈，煮沸提取2次；第一次加12倍量水，提取2小時(shí)，第二次加10倍量水，提取1小時(shí)，100目過(guò)濾；2.2合并提取液，過(guò)濾，濾液濃縮至60℃熱測(cè)相對(duì)密度1.05-1.08，備用；2.3將濾液加入噴霧干燥機(jī)中，首先預(yù)熱塔溫，待進(jìn)風(fēng)溫度達(dá)210℃±10℃后開(kāi)始進(jìn)料；進(jìn)料后要進(jìn)行流量、風(fēng)速的調(diào)節(jié)，將出風(fēng)溫度控制在95℃±5℃，得提取物粉末，用雙層潔凈塑料袋包裝密封粉末；2.4將提取物粉末與甘露糖醇，混合3-5分鐘；2.5將混合物料以70％食用酒精潤(rùn)濕制軟材，過(guò)20目，得濕顆粒，濕顆粒烘干得干顆粒；2.6以20目和60目篩網(wǎng)整粒，取小于20目和大于60目的干顆粒按3g/袋進(jìn)行分裝，即得。實(shí)施例21、配方組成：青錢(qián)柳葉2.0kg、葛根5.0kg、玉竹3.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例31、配方組成：青錢(qián)柳葉3.5kg、葛根3.5kg、玉竹3.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例41、配方組成：青錢(qián)柳葉6.0kg、葛根2.0kg、山藥2.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例51、配方組成：青錢(qián)柳葉8.0kg、葛根1.0kg、山藥1.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。實(shí)施例61、配方組成：青錢(qián)柳葉1.0kg、葛根1.0kg、山藥1.0kg、枸杞子1.0kg、黃精1.0kg、人參1.0kg、玄參1.0kg、五味子1.0kg、苦瓜1.0kg、苦蕎麥1.0kg。2、制備方法：同實(shí)施例1。對(duì)比例1選取青錢(qián)柳葉10kg按實(shí)施例1中的制備方法制得的樣品作為對(duì)比例1。對(duì)比例2選取葛根10kg按實(shí)施例1中的制備方法制得的樣品作為對(duì)比例2。對(duì)比例3選取玉竹10kg按實(shí)施例1中的制備方法制得的樣品作為對(duì)比例3。本發(fā)明的范圍并不局限于以上實(shí)施例，上述實(shí)施例中的各組分均可選自市售商品，通過(guò)本領(lǐng)域常規(guī)的制劑工藝，可以制成藥劑學(xué)上所說(shuō)的多種劑型，例如膠囊劑、顆粒劑、粉劑、片劑、口服液、袋泡茶等。實(shí)驗(yàn)例1：降血糖實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1樣品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；鏈脲佐菌素，SIGMA公司產(chǎn)品，規(guī)格：1g/支，批號(hào)：SLBJ7785V；胰島素檢測(cè)試劑盒，進(jìn)口分裝，南京建成生物工程公司，20141022；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；高脂飼料配方(79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油)，苦味酸等。1.2儀器W-80A漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠產(chǎn)品；電子天平，mettlerToledo，madebymettler-toledogroup，型號(hào)：pl303；LDZ5-2離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠；強(qiáng)生穩(wěn)豪血糖儀(強(qiáng)生(中國(guó))醫(yī)療器材有限公司)；BECKMANSynchronCX5全自動(dòng)血液生化分析儀(美國(guó))；酶標(biāo)儀，bio-rad(美國(guó))，型號(hào)：iMark；DCA2000型糖化血紅蛋白分析儀，為德國(guó)拜耳公司產(chǎn)品；其他：臺(tái)秤、固定籠等。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD大鼠，體重160～180g，雄性，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(粵)2011-0015。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠 的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果2.1方法2.1.1大鼠飼料普通飼料：玉米粉80％，面粉15％，黃豆粉5％；高脂飼料：79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油。2.1.2造模：取160-180gSPF級(jí)SD大鼠110只，雄性，體重160～180g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對(duì)照組，以正常飼料喂養(yǎng)，其它各組先用高脂飼料喂養(yǎng)1個(gè)月，抽查血脂指標(biāo)明顯升高后，腹腔注射STZ35mg/kg誘發(fā)糖尿病模型(STZ臨用前用0.1mmol/LpH＝4.5的檸檬酸/檸檬酸鈉緩沖液配成6mg/mL的溶液，且在60min內(nèi)用完)。于注射后第7d，斷尾采集空腹靜脈血，以血糖儀測(cè)定血糖，將血糖值大于等于16.7mmol/L視為建模成功。模型穩(wěn)定后，根據(jù)血脂血糖高低分組，口服給予受試藥物以及對(duì)照藥物，觀察各項(xiàng)指標(biāo)。2.1.3分組與給藥：選取狀態(tài)較好的100只造模成功動(dòng)物按照血糖值和體重均勻分成10組：每組10只，即II型糖尿病模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。正常不造模的SD大鼠10只為正常對(duì)照組(給予蒸餾水)。各組按相應(yīng)劑量口服給藥，每天給藥1次，給藥周期：4周(4W)。2.2測(cè)定指標(biāo)2.2.1使用血糖儀分別測(cè)定給藥前以及給藥后2W和4W血糖值。2.2.2檢測(cè)血清胰島素、糖化血紅蛋白含量。2.2.4糖耐量試驗(yàn)：于實(shí)驗(yàn)結(jié)束前兩天進(jìn)行檢測(cè)；糖耐量檢測(cè)：動(dòng)物禁食約6小時(shí)，各組給予不同濃度受試樣品，15-20分鐘后經(jīng)口給予葡萄糖2.0g/kg，測(cè)定給葡萄糖后0、0.5、2小時(shí)的血糖值，觀察模型對(duì)照組與受試樣品組給葡萄糖后各時(shí)間點(diǎn)血糖曲線(xiàn)下面積的變化。血糖曲線(xiàn)下面積＝1/2×(0小時(shí)血糖值+0.5小時(shí)血糖值)×0.5+1/2×(2小時(shí)血糖值+0.5小時(shí)血糖值)×1.5＝0.25×(0小時(shí)血糖值+4×0.5小時(shí)血糖值+3×2小時(shí)血糖值)。2.3結(jié)果2.3.1對(duì)II型糖尿病大鼠血糖的影響由表1可見(jiàn)，與正常對(duì)照組比較，給藥前糖尿病造模各組大鼠血糖顯著升高，表明糖尿病模型造模成功。給藥2w后，與模型對(duì)照組比較，S1-S6組和D1組血糖均有下降。給藥4w后，S1-S6組和D1組血糖均有下降。表1.樣品對(duì)II型糖尿病大鼠血糖的影響注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.012.3.2對(duì)II型糖尿病大鼠血清胰島素和糖化血紅蛋白的影響由表2可見(jiàn)，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組喂高脂飼料和糖尿病造模后，大鼠血清胰島素明顯降低(p＜0.01)，糖化血紅蛋白明顯升高(p＜0.01)，表明高脂血癥大鼠模型造模成功。與模型對(duì)照組比較，S1-S6組和D1組血清胰島素均有增加。與模型對(duì)照組比較，S1-S6組和D1組糖化血紅蛋白均有下降(與模型組比較P＜0.05)。表2.樣品對(duì)II型糖尿病大鼠血清胰島素和糖化血紅蛋白的影響組別n胰島素(mmol/L)糖化血紅蛋白(mmol/L)正常對(duì)照組1019.91±2.913.92±0.63模型對(duì)照組109.57±2.04##9.35±1.35##S1組1013.28±2.12*7.17±1.65*S2組1013.50±2.58*6.67±1.54*S3組1014.55±1.96**6.38±1.34**S4組1013.45±2.22*7.08±1.46*S5組1013.62±2.27*7.12±1.42*S6組1013.58±2.19*7.09±1.35*D1組1013.10±2.01*7.20±1.28*D2組1010.83±2.668.56±2.04D3組1010.92±2.358.32±1.97注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.012.3.3對(duì)II型糖尿病大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果由表3可見(jiàn)，與模型對(duì)照組比較，S1-S6組和D1組的血糖曲線(xiàn)下面積均有下降。表3.樣品對(duì)II型糖尿病大鼠糖耐量試驗(yàn)結(jié)果組別n血糖曲線(xiàn)下面積正常對(duì)照組1010.09±0.55模型對(duì)照組1040.62±5.78##S1組1032.31±6.25*S2組1031.69±6.33*S3組1026.74±5.80**S4組1031.52±6.83*S5組1031.83±5.89*S6組1031.79±6.24*D1組1032.42±5.90*D2組1036.60±6.51D3組1035.87±6.24注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型對(duì)照組比較：p均大于0.05.3.結(jié)論：S1-S6和D1對(duì)糖尿病模型大鼠具有明顯的降血糖作用，且S1-S6的組合物在降血糖方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實(shí)驗(yàn)例2：降血脂實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1藥品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；高脂飼料配方(79％基礎(chǔ)飲食+1％膽固醇+15％鮮蛋黃+5％豬油)，蒸餾水、苦味酸，等。1.2儀器W-80A漩渦混合器，上海醫(yī)大儀器廠產(chǎn)品；電子天平，mettlerToledo，madebymettler-toledogroup，型號(hào)：pl303；LDZ5-2離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠；BECKMANSynchronCX5全自動(dòng)血液生化分析儀(美國(guó))；其他：臺(tái)秤、固定籠等。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SD大鼠，體重160～180g，雄性，由南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(粵)2011-0015。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果2.1分組與方法取SPF級(jí)SD大鼠110只，雄性，體重160～180g，適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后取10只作為正常對(duì)照組，以正常飼料喂養(yǎng)；剩余給予高脂飼料喂養(yǎng)。連續(xù)喂養(yǎng)4周(通過(guò)定時(shí)抽血檢測(cè)血脂四項(xiàng)來(lái)確定造模是否成功)后，選取狀態(tài)較好的100只造模成功動(dòng)物按照血脂數(shù)值和體重均勻分成10組：每組10只，即高脂血癥模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。高脂飼料喂養(yǎng)4周后按以上分組情況開(kāi)始給藥并繼續(xù)喂養(yǎng)高脂飼料(正常對(duì)照組喂養(yǎng)普通飼料)，每天1次，連續(xù)給藥4w。末次給藥后，隔夜禁食，次日稱(chēng)量體重后，水合氯醛麻醉，下腔靜脈采血后處死。離心后取上清液測(cè)血清中的生化指標(biāo)。2.2檢測(cè)指標(biāo)：(1)一般狀況觀察，并記錄每周體重。(2)各組大鼠血清脂質(zhì)指標(biāo)：每?jī)芍苎劭綮o脈叢取血，分離血清檢測(cè)：總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)。2.3結(jié)果2.3.1對(duì)血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C的影響表4.造模成功均勻分組后大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型對(duì)照組比較：p均大于0.05.表5.給藥2W后各組大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.01表6.給藥4W后各組大鼠血清中脂質(zhì)數(shù)據(jù)注：與正常對(duì)照組比較：#p＜0.05，##p＜0.01；與模型組比較：＊p＜0.05，＊＊p＜0.01由表4可見(jiàn)，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組喂高脂飼料4W后，大鼠血清TC、LDL-C顯著升高(p＜0.01)，TG明顯升高(p＜0.05)，表明高脂血癥大鼠模型造模成功。根據(jù)血脂水平均勻分成4組。由表5可見(jiàn)，給藥2W后，與模型對(duì)照組比較，S1-S6組和D1組均有降低血清中脂質(zhì)水平的作用。由表6可見(jiàn)，給藥4W后，與模型對(duì)照組比較，S1-S6組和D1組能降低血清中TC、TG、LDL-C水平(p＜0.05或p＜0.01)。3.結(jié)論：S1-S6和D1對(duì)高脂血癥模型大鼠有明顯的降血脂作用，且S1-S6的組合物在降血脂方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。實(shí)驗(yàn)例3：降血壓實(shí)驗(yàn)1、材料和方法1.1藥品及試劑：實(shí)施例1-6以及對(duì)比例1-3制備的樣品，分別命名為S1、S2、S3、S4、S5、S6，以及D1、D2、D3；0.9％的氯化鈉注射液(生理鹽水)，規(guī)格：250ml/瓶，四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：C13102005-1；蒸餾水，苦味酸，等。1.2儀器DKB-501A型超級(jí)恒溫水槽，為上海森信實(shí)驗(yàn)儀器有限公司產(chǎn)品；電熱恒溫干燥箱，為長(zhǎng)沙醫(yī)療器械廠產(chǎn)品；Powlab/4spML125型無(wú)創(chuàng)測(cè)壓系統(tǒng)(ML125/RNIBP，MLT1199BPTrans-ducer/CableKit)，澳大利亞埃德儀器有限公司產(chǎn)品；MP120-1電子天平，為上海第二天平儀器廠產(chǎn)品。1.3實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SPF級(jí)SHR大鼠，體重190～230g，雄性，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，合格證號(hào)：SCXK(京)2012-0001。動(dòng)物于SPF級(jí)屏障級(jí)動(dòng)物房飼養(yǎng)，動(dòng)物使用許可證號(hào)為：SYXK(粵)2012-0081，SPF級(jí)WISTAR雄性大鼠，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)為：SCXK(京)2012-0001。1.4劑量設(shè)置成人擬用劑量為3.0g/60kg·BW·天，人體10倍量為大鼠的劑量，劑量是以生藥量計(jì)。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，參數(shù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示，組間比較用ANOVA方差分析檢驗(yàn)，p＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。2.方法與結(jié)果將9-10周齡雄性自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)隨機(jī)分10組，每組10只，即高血壓模型對(duì)照組(給予蒸餾水)，S1組、S2組、S3組、S4組、S5組、S6組、D1組、D2組和D3組。另取正常WISTAR大鼠10只為正常對(duì)照組(給予蒸餾水)。各組動(dòng)物分別灌胃給予各種劑量藥物，每天1次，共給藥4周。分別于給藥前以及給藥后2周、4周以無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈測(cè)壓系統(tǒng)檢測(cè)大鼠尾動(dòng)脈血壓值(收縮壓，SAP，mmHg)。無(wú)創(chuàng)尾套法(NIBP)：將大鼠放入大鼠固定器內(nèi)，露出鼠尾。用紅外取暖器，溫度設(shè)置為38℃，照射加熱鼠尾大約10min后，鼠尾變軟，鼠尾動(dòng)脈充分?jǐn)U張。將其穿過(guò)加壓尾套并固定在鼠尾的根部，使大鼠尾動(dòng)脈與PowerlabML125/R無(wú)創(chuàng)尾動(dòng)脈血壓測(cè)定分析系統(tǒng)的脈搏傳感器緊密接觸，同時(shí)觀測(cè)系統(tǒng)的脈搏波形，出現(xiàn)穩(wěn)定的脈搏波時(shí)即可開(kāi)始測(cè)定血壓。待動(dòng)物安靜后，選擇90～420BPM(大鼠加壓檔)給尾套充氣加壓，可見(jiàn)脈搏波逐漸減小至消失，然后尾套開(kāi)始放氣，鼠套壓力降低，當(dāng)壓力等于收縮壓時(shí)，開(kāi)始出現(xiàn)脈搏波，此點(diǎn)的血壓值即為鼠尾收縮壓。重復(fù)測(cè)量3次，取平均值。計(jì)算壓降值(血壓下降值)，給藥后SAP減去給藥前SAP得。結(jié)果見(jiàn)表7：表7樣品對(duì)SHR大鼠血壓(SAP，mmHg)的影響注：與正常對(duì)照組比較：#為P＜0.01；與模型對(duì)照組比較：＊為P＜0.05.結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組大鼠血壓顯著升高，可見(jiàn)自發(fā)性高血壓大鼠模型成功。與模型對(duì)照組，S1-S6組和D1組在給藥4W能顯著降低SHR大鼠的血壓(P＜0.05)。3.結(jié)論：S1-S6和D1樣品有顯著的降血壓作用，且S1-S6的組合物在 降血壓方面產(chǎn)生了顯著的協(xié)同效果。本
發(fā)明內(nèi)容僅僅舉例說(shuō)明了要求保護(hù)的一些具體實(shí)施方案，其中一個(gè)或更多個(gè)技術(shù)方案中所記載的技術(shù)特征可以與任意的一個(gè)或多個(gè)技術(shù)方案相組合，這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案也在本申請(qǐng)保護(hù)范圍內(nèi)，就像這些經(jīng)組合而得到的技術(shù)方案已經(jīng)在本發(fā)明公開(kāi)內(nèi)容中具體記載一樣。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3