總狀蕨藻中α–生育螺醌的提取方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種化合物α–生育螺醌提取方法。該化合物是從總狀蕨藻中采用提取、減壓濃縮、萃取、硅膠柱色譜法以及凝膠柱色譜法純化而得到的α–生育螺醌，其結(jié)構(gòu)是由理化常數(shù)測定及波譜數(shù)據(jù)分析而確定的。經(jīng)初步的活性篩選試驗證明：該化合物對β淀粉樣蛋白25–35(Aβ25-35)損傷的SH-SY5Y細胞具有顯著的保護作用，可用于制備神經(jīng)保護劑和防止阿爾茨海默癥藥物。
【專利說明】總狀藤藻中a -生育螺醒的提取方法

【技術(shù)領域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種從總狀藤藻中提取a -生育螺釀的方法；本發(fā)明還涉及該化合 物為對A目損傷的甜-SY5Y細胞具有保護作用的活性成分，從而它可用于制備神經(jīng)保護 藥物和防止阿爾茨海默癥藥物。

【背景技術(shù)】
[0002] 總狀藤藻姑"7ei77<3 racefflfwa (Forsskjil) J. Agar化系綠藻口（化1〇1'〇地八3) 綠藻綱（Qiloro地yceae)管藻目（Siphonales)藤藻科（Caule;rpaceae)藤藻屬 (Cau7er/7a)海洋植物，主要分布于熱帶和亞熱帶海域，生長在潮間帶W下的巖石、珊瑚礁上 或者中、低潮帶的沙地上。在我國海域也有廣泛分布，主要集中于福建東山、臺灣、海南、西 沙、廣東沿海。國內(nèi)外研究表明，總狀藤藻中含有倍半聰類、二聰類、留體類、甘油醋類、芳香 類、醜胺類及生物堿類等成分（Alarif, W. M. et al, C7ea/7.-況)/7,心W別er, 2010, 38 巧-6)，548 - 557;Wang, H. et al,《Wanicaiferi化?，2007，50(3)，185 - 190; Ayyad, S. -E. N. et al, Alexandria Journal of Pharmaceutical Scie打ces, 1994, 8(3), 217-219; Anjaneyulu, A. S. R. et al, /otfrnay 〇/惦化(9血cts, 1992, 55(4)，496 - 499)。其中多數(shù)聰類化合物含有天然界罕見的1，4-二己醜氧基(酵基)下二帰 結(jié)構(gòu)片斷，而生物堿類則為結(jié)構(gòu)奇特的雙剛巧類化合物?，F(xiàn)代藥理學研究表明，從總狀藤藻 中發(fā)現(xiàn)的次級代謝產(chǎn)物經(jīng)常表現(xiàn)出很強的抗菌、抗炎、抗病毒、殺蟲、抗腫瘤及毒魚等多樣 的生物活性（Anjaneyulu, A. S. R. et al,化曲i占化7，1991, 30 巧），3041-3042; Anjaneyulu, A. S. R. et al, Journal of the I打dian Chemical Society， 1991, 68 巧），480; Capon, R. J. 曲 化7，1983, 22 巧），1465-1467; Nielsen, F*. G. et al, Phytochemistry, 1982, 21(7), 1643 - 1645; Doty, M. S. et al, Nature, 1966， 211(5052)， 990)。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明在于提供一種化合物a -生育螺釀及其制備方法和用途。該化合物是從 總狀藤藻中采用提取、減壓濃縮、萃取、娃膠柱色譜法W及凝膠柱色譜法純化而得到的a -生育螺釀，其結(jié)構(gòu)是由理化常數(shù)測定及波譜數(shù)據(jù)分析而確定的。經(jīng)藥理試驗研究表明，該化 合物對A目2W5損傷的SH-SY5Y細胞具有顯著的保護作用。
[0004] 因此，本發(fā)明的一個目的是提供一種從總狀藤藻中制備化合物a -生育螺釀的 方法。
[0005] 本發(fā)明的另一個目的是提供化合物a -生育螺釀的用途。具體地說，該化合物對 A目損傷的甜-SY5Y細胞具有顯著的保護作用，可用于制備神經(jīng)保護劑和防止阿爾茨海 默癥的藥物。
[0006] 根據(jù)本發(fā)明的第一個目的，本發(fā)明提供一種從總狀藤藻中采用提取、減壓濃縮、萃 取、娃膠柱色譜法W及凝膠柱色譜法制備化合物a -生育螺釀的方法，具體步驟如下： 1) 制備提取物浸膏 將冷凍的總狀藤藻（C race柳義0常溫下解凍，用己醇按常規(guī)滲漉提取H次，每次24 小時，得提取液，將提取液減壓濃縮回收己醇，得粗浸膏； 2) 分離純化 (1) 將上述粗浸膏分散于水中成混息液，將混息液依次用石油離、己酸己醋和正下醇 分別萃取H次，所得萃取液濃縮分別得到石油離提取浸膏、己酸己醋提取浸膏和正下醇提 取浸膏； (2) 將己酸己醋浸膏進行娃膠柱層析，W石油離/丙麗梯度洗脫，根據(jù)TLC顯色合并相 似流份得到5個組分A、B、C、D、E ;其中組分C即石油離/丙麗體積比8:2和7:3洗脫部分 依次經(jīng)Se地adex LH-20凝膠柱層析（W二氯甲焼/甲醇洗脫)、娃膠柱層析石油離/二氯 甲焼體積比為6:4-4:6梯度洗脫)，得到化合物a -生育螺釀，化學名為a-tocospirone， 化學結(jié)構(gòu)式為：

【權(quán)利要求】
1. 一種從總狀蕨藻中提取a -生育螺醌的方法，其特征在于按下列步驟進行： 1) 制備提取物浸膏 將冷凍的總狀蕨藻常溫下解凍，用乙醇按常規(guī)滲漉提取三次，每次24小時，得提取液， 將提取液減壓濃縮回收乙醇，得粗浸膏； 2) 分離純化 (1) 將上述粗浸膏分散于水中成混懸液，將混懸液依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇 分別萃取三次，所得萃取液濃縮分別得到石油醚提取浸膏、乙酸乙酯提取浸膏和正丁醇提 取浸膏； (2) 將乙酸乙酯浸膏進行硅膠柱層析，以石油醚/丙酮梯度洗脫，根據(jù)TLC顯色合并相 似流份得到5個組分A、B、C、D、E ;其中組分C即石油醚/丙酮體積比8:2和7:3洗脫部分 依次經(jīng)S印hadex LH-20凝膠柱層析二氯甲烷/甲醇洗脫、硅膠柱層析石油醚/二氯甲烷體 積比為6:4 - 4:6梯度洗脫，得到化合物a -生育螺醌。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，在制備提取物浸膏步驟中，所述乙醇為95% 乙醇。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征是，在分離純化步驟中，所述Sephadex LH-20 凝膠柱層析中用的二氯甲烷/甲醇洗脫濃度為體積比1:1。
【文檔編號】A61P25/28GK104447651SQ201410608592
【公開日】2015年3月25日 申請日期:2014年11月3日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月3日
【發(fā)明者】毛水春, 章海燕, 郭躍偉, 劉定權(quán) 申請人:南昌大學