從疏海綿中提取到的一種aaptamine生物堿類化合物及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及海洋生物及醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，本發(fā)明提供了一種從產(chǎn)自西沙群島附近海域的海洋動(dòng)物疏海綿Aaptos?aaptos中經(jīng)提取、分離純化得到一種aaptamine生物堿類化合物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如式(Ⅰ)所示：本發(fā)明的化合物經(jīng)體外活性試驗(yàn)證明，對(duì)人急性白血病細(xì)胞HL60，人慢性白血病細(xì)胞K562，人乳腺癌細(xì)胞MCF-7，人鼻咽癌細(xì)胞KB，人肝癌Hep?G2以及人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29等多種不同的腫瘤細(xì)胞均有顯著的抑制活性，可用于制備抗腫瘤藥物。
【專利說明】從疏海綿中提取到的一種aaptamine生物堿類化合物及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及海洋生物及醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種從產(chǎn)自西沙群島附近海域的海洋動(dòng)物疏海綿Aaptos aaptos中經(jīng)提取、分離純化得到的一種新型生物堿類化合物及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]海綿是一種低等的多細(xì)胞動(dòng)物，其分布廣泛，并且常含有很多結(jié)構(gòu)罕見的具有抗腫瘤活性的次生代謝產(chǎn)物，因此一直是海洋天然產(chǎn)物化學(xué)家首選海洋生物研究對(duì)象。
[0003]本發(fā)明的藥源材料疏海綿Aaptos aaptos屬尋常綱(Demospongiae)韌海綿目(Hardromerida)皮海綿科(Suberitidae)海綿，產(chǎn)自西沙群島附近海域。已經(jīng)從該屬海綿中分離得到了一些生物堿類化合物，這些生物堿類化合物顯示了一定的抗腫瘤活性，如從A.suberitoides中分離得到的Suberitine B和Suberitine D對(duì)小鼠白血病細(xì)胞P388顯示了較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性，IC5tl值分別為1.8和3.5 μ M(參見文獻(xiàn):Liu C-X, Tang X-L, LiP-Lj Li G-Qj Suberitine A-Dj Four New Cytotoxic Dimeric Aaptamine Alkaloids fromtheMarine Sponge Aaptos suberitoides.0rganic Letters2012，14 (8)，1994-1997.)。
[0004]但是至今未見從該屬海綿中分離得到具有抗腫瘤活性的aaptamine類生物堿C16H17N3O2 的報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于從疏海綿Aaptos aaptos中經(jīng)提取、分離純化得到的新的生物堿類化合物，本發(fā)明的另一目的是提供該新化合物的提取方法和醫(yī)藥用途。
[0006]本發(fā)明的第一方面，是提供了一種源于中國西沙群島附近海域的疏海綿Aaptosaaptos的具有抗腫瘤活性的新的生物堿類化合物，即一種aaptamine生物堿類化合物,或
其藥用鹽，其化學(xué)結(jié)構(gòu)如式(I )所示:
[0007]
【權(quán)利要求】
1.一種aaptamine生物堿類化合物或其藥用鹽,其化學(xué)結(jié)構(gòu)如式(I )所示:

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種aaptamine生物堿類化合物或其藥用鹽,其特征在于，所述的藥用鹽為有機(jī)酸鹽、無機(jī)酸鹽以及堿鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種aaptamine生物堿類化合物或其藥用鹽,其特征在于，所述的無機(jī)酸是指鹽酸、硫酸、磷酸、二磷酸、氫溴酸或硝酸；所述的有機(jī)酸是指乙酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、琥珀酸、乳酸、對(duì)甲苯磺酸、水楊酸或草酸；所述的堿是指氫氧化鋰、氫氧化鈉、氫氧化鈣、氫氧化鉀、氨水、碳酸鈉、碳酸氫鈉。
4.一種如權(quán)利要求1所述的aaptamine生物堿類化合物的制備方法,其特征在于,該制備方法包括: A、制備總提物: 將干燥的疏海綿Aaptos aaptos粉碎后，用95%乙醇冷浸萃取，得提取液，將提取液濃縮得浸膏，加入二氯甲烷進(jìn)行提取，得二氯甲烷總提物； B、分離純化: ①制備粗提物:將二氯甲烷總提物用90%甲醇混懸，經(jīng)正己烷脫脂后，加水將混懸液的甲醇濃度調(diào)至60%，用二氯甲烷萃取，濃縮萃取液得到二氯甲烷粗提物； ②分離純化:將二氯甲烷粗提物經(jīng)減壓液相柱色譜(VLC)，以甲醇:二氯甲烷=100:1,80:1，60:1，50:1，30:1，20:1，10:1，8:1，5:1，1:1,0:1 為溶劑進(jìn)行梯度洗脫，根據(jù) TLC 薄層層析顯色合并相似流分，得到7個(gè)組分Fr.A - G ; ③對(duì)組分Fr.D進(jìn)行減壓液相柱色譜(VLC)，以甲醇:二氯甲烷=60:1,50:1,30:1,15:1,10:1,8:1,5:1,0:1為溶劑進(jìn)行梯度洗脫，根據(jù)TLC薄層層析顯色合并相似流分，得到7 個(gè)組分 Fr.Dl - D7 ； ④對(duì)組分Fr.D3組分反復(fù)進(jìn)行正相、反相柱色譜,最后經(jīng)反相高效液相,條件為50%乙腈/ 7K，流速2mL/min，檢測(cè)波長為244nm，保留時(shí)間為16.3分鐘，即得。
5.—種如權(quán)利要求1所述的aaptamine生物堿類化合物或其藥用鹽在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的aaptamine生物堿類化合物或其藥用鹽在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的腫瘤為人急性白血病細(xì)胞HL60、人慢性白血病細(xì)胞K562、人乳腺癌細(xì)胞MCF-7、人鼻咽癌細(xì)胞KB、人肝癌H印G2，或人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK103936733SQ201410180478
【公開日】2014年7月23日 申請(qǐng)日期:2014年4月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月30日
【發(fā)明者】林厚文, 于豪冰, 楊帆, 焦偉華 申請(qǐng)人:中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)