一種含有三七素和三七皂苷r1藥物組合物及其制劑的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥【技術(shù)領(lǐng)域】，本發(fā)明公開了一種含有三七素和三七皂苷R1藥物組合物及其制劑，其中藥物組合物原料包括三七素、三七皂苷R1。藥理實驗表明，本發(fā)明藥物組合物具有協(xié)同作用，與血栓通注射液比較，具有更好的藥理作用。
【專利說明】一種含有三七素和三七皂苷R1藥物組合物及其制劑
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于醫(yī)藥【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種含有三七素和三七皂苷Rl的藥物組合物及其制劑。
【背景技術(shù)】
[0002]三七別名田七、金不換，為五加科(araliaceae)人參屬植物三七[panaxnotoginseng (Burk.)F.H.Chen]的干燥根?！侗静菥V目》言三七“止血散血定痛，金刃箭傷跌撲杖瘡血出不止者，嚼爛涂，或為末摻之，其血即止。亦主吐血衄血，下血血痢，崩中經(jīng)水不止，產(chǎn)后惡血不下，血運血痛，赤目痛腫，虎咬蛇傷諸病”。《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》稱其“化淤血而不傷新血，允為理血妙品”?！侗静菪戮帯贩Q:“三七根，止血之神藥也”。歷版《中國藥典》對三七的主要功能均界定為“散淤止血，消腫定痛”。數(shù)千年來三七廣泛用于跌打損傷、內(nèi)傷出血等內(nèi)外出血癥。
[0003]以三七為原料的中藥注射劑主要為血栓通注射液，血栓通注射液是用于視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞，腦血管病后遺癥，內(nèi)眼病，眼前房出血等，多用于眼科，心血管內(nèi)科，神經(jīng)內(nèi)科。血栓通注射液具有很好的臨床作用，但其主要成分為三七總皂苷，為多組分注射劑，在臨床應(yīng)用中，產(chǎn)生不良反應(yīng)，無法追溯，給醫(yī)生和患者帶來潛在的安全隱患。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]基于上述原因，本發(fā)明的目的是提供一種新的藥物組合物，該組合物包括三七素與三七皂苷Rl，通過廣泛而深入的研究，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)二者在一定重量比進行組方具有協(xié)同的藥理作用，并且優(yōu)于市售血栓通注射液，在節(jié)省資源、具有更好的藥效作用的基礎(chǔ)上，有效成分組合物具有更好的安全性。
[0005]本發(fā)明通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)的。
[0006]一種藥物組合物，所述藥物組合物活性成分包括三七素、三七皂苷Rl。
[0007]上述所述藥物組合物，優(yōu)選三七素與三七皂苷Rl的重量比為1-10:5-15。
[0008]所述的一種藥物組合物，優(yōu)選三七素與三七皂苷Rl的重量比為1-5:5-10。
[0009]所述的一種藥物組合物，優(yōu)選三七素與三七皂苷Rl的重量比為3:6.5。
[0010]所述藥物組合物制備成注射制劑。
[0011]其中藥物組合物包括輔料。
[0012]所述其中輔料包括L-纈氨酸。
[0013]所述輔料L-纈氨酸與三七素重量比為0.05-0.3:1。
[0014]藥物組合物制備成注射劑，其中注射劑的制備方法為:取三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至全量，分裝，滅菌，即得。
[0015]上述所述三七素的制備方法為:
[0016](I)取三七，粉碎至80-120目；[0017](2)將三七粉末加入質(zhì)量百分比濃度為30%_80%的乙醇溶液中，再加入糖苷水解酶，三七粉末與乙醇溶液的質(zhì)量體積比為1:5-20，三七粉末與糖苷水解酶的質(zhì)量比為10-100:1，攪拌均勻，于45°C _50°C，密封酶解浸提6_72小時；
[0018](3)將酶解后的反應(yīng)液過濾，濾液濃縮后上60-300目聚酰胺層析分離柱，先用質(zhì)量百分比濃度為60%- 90%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的粗品；
[0019](4)將上述三七素粗品用熱水溶解，再上200-600目聚酰胺層析柱，先用質(zhì)量百分比濃度為80%-90%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得二七素的純品。
[0020]本發(fā)明所述三七素、三七皂苷Rl也可以購自購自上海融禾醫(yī)藥科技發(fā)展有限公司純度分別99.5%, 99.5%ο
[0021]本發(fā)明所述糖苷水解酶(glycosidehydrolase),又名糖苷酶。
[0022]制備實施例
[0023]實施例1
[0024]三七素的制備:
[0025](I)取三七50g，5 5°C烘干，粉碎至120目；
[0026](2)將三七粉末加入質(zhì)量百分比濃度為80%的乙醇溶液1000ml中，再加入糖苷水解酶0.5g，攪拌均勻，于50°C，密封酶解浸提72小時；
[0027](3)將酶解后的反應(yīng)液過濾，濾液濃縮后上300目聚酰胺層析分離柱，先用質(zhì)量百分比濃度為90%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的粗品，其純度為60% ；
[0028](4)將上述三七素粗品用熱水溶解，再上600目聚酰胺層析柱，先用質(zhì)量百分比濃度為90%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的純品，其純度為99.8%。
[0029]實施例2
[0030]三七素的制備:
[0031](I)取三七50g，40°C烘干，粉碎至100目；
[0032](2)將三七粉末加入質(zhì)量百分比濃度為40%的乙醇溶液500ml中，再加入糖苷水解酶2.5g，攪拌均勻，于46 °C，密封酶解浸提62小時；
[0033](3)將酶解后的反應(yīng)液過濾，濾液濃縮后上100目聚酰胺層析分離柱，先用質(zhì)量百分比濃度為70%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的粗品，其純度為50% ；
[0034](4)將上述三七素粗品用熱水溶解，再上300目聚酰胺層析柱，先用質(zhì)量百分比濃度為85%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的純品，其純度為99.5%。
[0035]實施例3
[0036]三七素的制備:
[0037](I)取三七50g，自然曬干，粉碎至90目；
[0038](2)將三七粉末加入質(zhì)量百分比濃度為60%的乙醇溶液400ml中，再加入糖苷水解酶2g，攪拌均勻，于45 °C，密封酶解浸提32小時；
[0039] (3)將酶解后的反應(yīng)液過濾，濾液濃縮后上200目聚酰胺層析分離柱，先用質(zhì)量百分比濃度為70%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的粗品，其純度為53.5% ；
[0040](4)將上述三七素粗品用熱水溶解，再上400目聚酰胺層析柱，先用質(zhì)量百分比濃度為87%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的純品，其純度為99.7%。
[0041]實施例4
[0042]三七素的制備:
[0043](I)取三七50g，自然曬干，粉碎至80目；
[0044](2)將三七粉末加入質(zhì)量百分比濃度為30%的乙醇溶液中250ml，再加入糖苷水解酶5g，攪拌均勻，于45°C，密封酶解浸提6小時；
[0045](3)將酶解后的反應(yīng)液過濾，濾液濃縮后上60目聚酰胺層析分離柱，先用質(zhì)量百分比濃度為60%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得二七素的粗品，其純度為40% ；
[0046](4)將上述三七素粗品用熱水溶解，再上200目聚酰胺層析柱，先用質(zhì)量百分比濃度為80%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的純品，其純度為99.3%。
[0047]實施例5
[0048]三七素的制備:
[0049](I)取三七50g，55°C烘干，粉碎至110目；
[0050](2)將三七粉末加入質(zhì)量百分比濃度為75%的乙醇溶液600nl中，再加入糖苷水解酶3g，攪拌均勻，于45 °C，密封酶解浸提24小時；
[0051](3)將酶解后的反應(yīng)液過濾，濾液濃縮后上200目聚酰胺層析分離柱，先用質(zhì)量百分比濃度為85%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的粗品，其純度為57.3% ；
[0052](4)將上述三七素粗品用熱水溶解，再上500目聚酰胺層析柱，先用質(zhì)量百分比濃度為85%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的純品，其純度為99.8%。
[0053]實施例6
[0054]三七素lg，三七皂苷R15g，輔料L-纈氨酸0.05g。
[0055]制備方法:取實施例1制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml，制備成2ml水針劑,滅菌，得到注射液1000瓶。
[0056]實施例7
[0057]三七素10g，三七皂苷R115g，輔料L-纈氨酸3g。
[0058]制備方法:取實施例1制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml,裝瓶,每瓶2ml,普通干燥，得到粉針劑。[0059]實施例8
[0060]三七素5g，三七皂苷R15g，輔料L-纈氨酸lg。
[0061]制備方法:取實施例2制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml,裝瓶,每瓶2ml,冷凍干燥，得到凍干粉針劑。
[0062]實施例9
[0063]三七素lg，三七皂苷Rl 10g，輔料L-纈氨酸0.15g。
[0064]制備方法:取實施例3制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml，制備成2ml水針劑,滅菌，得到注射液1000瓶。
[0065]實施例10[0066]三七素4g，三七皂苷R19g，輔料L-纈氨酸0.8g。
[0067]制備方法:取實施例5制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml，制備成2ml水針劑,滅菌，得到注射液1000瓶。
[0068]實施例11
[0069]三七素lg，三七皂苷R15g，輔料L-纈氨酸0.05g。
[0070]制備方法:取實施例4制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml,裝瓶,每瓶2ml,冷凍干燥，得到粉針劑。
[0071]實施例12
[0072]三七素4g，三七皂苷R19.5g，輔料L-纈氨酸0.8g。
[0073]制備方法:取實施例1制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml,裝瓶,每瓶2ml,冷凍干燥，得到凍干粉針劑。
[0074]實施例13
[0075]三七素2g，三七皂苷R114g，輔料L-纈氨酸0.2g。
[0076]制備方法:取實施例4制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml，制備成2ml水針劑,滅菌，得到注射液1000瓶。
[0077]實施例14
[0078]三七素9g，三七皂苷R16g，輔料L-纈氨酸1.8g。
[0079]制備方法:取實施例3制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml，制備成2ml水針劑,滅菌，得到注射液1000瓶。
[0080]實施例15
[0081]三七素8g，三七皂苷R15g，輔料L-纈氨酸0.8g。
[0082]制備方法:取實施例2制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml，制備成2ml水針劑,滅菌，得到注射液1000瓶。
[0083]實施例16
[0084]三七素3g，三七皂苷R16.5g，輔料L-纈氨酸0.45g。
[0085]制備方法:取實施例1制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml，制備成2ml水針劑,滅菌，得到注射液1000瓶。
[0086]實施例17
[0087]三七素3g，三七皂苷R18g，輔料L-纈氨酸0.6g。
[0088]制備方法:取實施例1制備的三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至2000ml,裝瓶,每瓶2ml,冷凍干燥，得到凍干粉針劑。
[0089]試驗例I
[0090]測試方法:
[0091](I)色譜條件分析柱 Waters? Carbolydrate Caryridge ColumnC18(5.9X150nm)，流動相:95%緩沖液A(0.001%醋酸)-5%緩沖液B(46%乙腈:10%甲醇:46%水);流速1.0ml/min ;檢測波長213nm ；
[0092]柱溫:室溫。
[0093](2)穩(wěn)定性考察
[0094]精密稱取三七素對照品1.0mg，用水溶解定容于ImL容量瓶中在Id內(nèi)重復(fù)進樣5次，按上述色譜條件進行測定，結(jié)果峰面積積分值的平均值為34250670，其RSD為0.95%。結(jié)果表明三七素在24小時內(nèi)穩(wěn)定性良好。
[0095](3)線性關(guān)系考察
[0096]精密稱取三七素對照品lmg，加水定容于Iml容量瓶中精密吸取10.0,30.0,50.0，70.0，90.Ομ L進樣，按上述色譜條件測定峰面積積分值，以三七素量為縱坐標峰面積積分值為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程Υ=2.8X10- 7Χ+0.0072, r2=0.9996。實驗表明三七素在10.0~90.0 μ g具有良好的線性關(guān)系。
[0097](4)精密度實驗
[0098]精密吸取上述對照品溶液，重復(fù)進樣5次，測定。三七素峰面積積分值的平均值為34221870，其 RSD 為 0.85%。
[0099](5)重復(fù)性實驗
[0100]取相同的樣品5份，精密稱定，按供試品溶液制備方法制備樣品溶液，按上述色譜條件測定平均含量為0.49%，其RSD為1.75%。
[0101](6)供試品溶液的制備與測定
[0102]取各樣品粉末約5g，精密稱定，置具塞三角瓶中，精密加水25ml，稱定重量，超聲提取60min，放冷，再稱定重量，加水補足減失的重量，搖勻，以4000rpm離心5min，收取上清液。用0.2 μ m濾膜過濾，取續(xù)濾液加水適量，調(diào)整三七素濃度至線性范圍內(nèi)，進樣20 μ L，測定峰面積積分值 ，用外標法根據(jù)峰面積積分值計算三七素的含量，結(jié)果見表1。
[0103]本實驗例參照以下對比文件的方法制備了三七素，并采用上述測試方法，測定了三七素的含量。[0104]樣品I為參照專利200610027962的實施例1的方法制備的三七素提取物；
[0105]樣品2為參照專利01136697.4的實施例1的方法制備的三七素提取物；
[0106]樣品3為參照專利申請99114721.9的實施例1的方法制備的三七素提取物；
[0107]表1三七素提取物純度測試結(jié)果
[0108]
【權(quán)利要求】
1.一種藥物組合物，其特征在于藥物組合物活性成分包括三七素、三七皂苷Rl。
2.根據(jù)權(quán)利要 求1所述的一種藥物組合物，其中三七素與三七皂苷Rl的重量比為1-10:5-15。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藥物組合物，其中三七素與三七皂苷Rl的重量比為1-5:5-10。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種藥物組合物，其中三七素與三七皂苷Rl的重量比為3:6.5ο
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的一種藥物組合物，其特征在于藥物組合物制備成注射制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項所述的一種藥物組合物，其中藥物組合物包括輔料。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種藥物組合物，其中輔料包括L-纈氨酸。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種藥物組合物，其中輔料L-纈氨酸與三七素重量比為0.05_0.3:1。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項所述的一種藥物組合物，其特征在于藥物組合物制備成注射劑，其中注射劑的制備方法為:取三七素和三七皂苷Rl混合均勻，加注射用水溶解完全，過濾，濾液加輔料，溶解完全，過濾，濾液加注射用水至全量，分裝，滅菌，即得。
10.根據(jù)權(quán)利要求1-9任一項所述的藥物組合物，其中三七素的制備方法為: (1)取三七，粉碎至80-120目； (2)將三七粉末加入質(zhì)量百分比濃度為30%-80%的乙醇溶液中，再加入糖苷水解酶，三七粉末與乙醇溶液的質(zhì)量體積比為1:5-20，三七粉末與糖苷水解酶的質(zhì)量比為10-100:1，攪拌均勻，于45°C _50°C，密封酶解浸提6_72小時； (3)將酶解后的反應(yīng)液過濾，濾液濃縮后上60-300目聚酰胺層析分離柱，先用質(zhì)量百分比濃度為60%-90%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的粗品； (4)將上述三七素粗品用熱水溶解，再上200-600目聚酰胺層析柱，先用質(zhì)量百分比濃度為80%-90%的乙醇溶液洗脫，然后用100%乙醇洗脫，收集100%乙醇的洗脫液，濃縮后得三七素的純品。
【文檔編號】A61P9/10GK103919795SQ201410127161
【公開日】2014年7月16日 申請日期:2014年3月30日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月30日
【發(fā)明者】吳靜 申請人:吳靜