一種防治環(huán)境污染物甲醛所致學(xué)習(xí)記憶損害的中藥組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種防治環(huán)境污染物甲醛所致學(xué)習(xí)記憶損害的中藥組合物。其活性成分由以下重量份的中藥組成：人參3～15份，黃芪3～15份，白術(shù)3～12份，炙甘草2～9份。所述中藥組合物的制備方法，包括如下步驟：將所述質(zhì)量份的人參、黃芪、白術(shù)和炙甘草混合得到混合物；向所述混合物中加入水進(jìn)行浸泡；然后進(jìn)行煎煮2～3次，過濾，合并濾液，即得所述中藥組合物。本發(fā)明提供的中藥組合物，充分考慮到環(huán)境污染物甲醛首先侵入肺衛(wèi)，具有致病影響范圍大，持續(xù)時(shí)間長的致病特點(diǎn)，通過衛(wèi)護(hù)人體機(jī)能，健運(yùn)脾胃，通過整體調(diào)節(jié)機(jī)體功能，達(dá)到提高學(xué)習(xí)記憶的作用。
【專利說明】一種防治環(huán)境污染物甲醛所致學(xué)習(xí)記憶損害的中藥組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種防治環(huán)境污染物甲醛所致學(xué)習(xí)記憶損害的中藥組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]環(huán)境中存在的大量污染物使人類賴以生存的生態(tài)系統(tǒng)和人類自身的生長和發(fā)展受到嚴(yán)重威脅，現(xiàn)代人平均有90%時(shí)間是在室內(nèi)度過的，在經(jīng)歷了 “煤煙型”、“光化學(xué)煙霧型”污染后，人類社會(huì)進(jìn)入以“室內(nèi)空氣污染”為特點(diǎn)的第三次污染時(shí)期[I]。隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，中國于2004年超過美國成為全球最大的甲醛生產(chǎn)與消費(fèi)國。調(diào)查表明，我國空氣甲醛染污不但遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于西方發(fā)達(dá)國家水平，也高于發(fā)展中國家水平，甲醛作為室內(nèi)空氣中的首要污染物，成為我國“不良建筑綜合癥”的主要誘因(Xiao jiang Tang, Yang Bai1AnhDuong, Martyn T，Smith, Laiyu Li，Luoping Zhang.Formaldehyde in China: Production，consumption, exposur elevels, and health effects[J].Environment Internationa1，2009，35:1210-1224.;宋廣生.我國城市家庭室內(nèi)甲醛污染分析[J].環(huán)境經(jīng)濟(jì)雜志，2006，28:55-59.)?
[0003]神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)環(huán)境因素有特殊易感性，正如倫墩大學(xué)威廉斯博士說“人類的大腦正被人類自己的行為所損壞，沒有任何一個(gè)生態(tài)系統(tǒng)像現(xiàn)在這樣如此嚴(yán)重的傷害大腦?！?。流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，甲醛可對(duì)人的認(rèn)知功能造成損害:從事甲醛作業(yè)工人可出現(xiàn)回憶功能及近時(shí)、遠(yuǎn)時(shí)記憶力下降，感知運(yùn)動(dòng)速度減弱，且癥狀與室內(nèi)甲醛污染的濃度相關(guān)(Tomoko TakigawajTokushi HorikejYasuhiro OhashijHiroyuki KataokajDa-HongWang, Shohei Kira.Were volatile organic compounds the inducing factors forsubjective symptoms of employees working in newly constructed hospitals[J].Environ Toxicol，2004，19 (4): 280-290.)。同樣，對(duì)迀入新建居室者的調(diào)查結(jié)果也發(fā)現(xiàn)其行為功能以及認(rèn)知感覺功能受損`，同時(shí)伴有頭暈、輕度頭痛、喪失平衡、睡眠障礙及精力不集中等癥狀(Kilburn，Kaye H..1ndoor air effects after building renovation and inmanufactured homes [J].Am J Med Sci，2000，320 (4): 249—254.)。長期接觸低劑量甲醒可導(dǎo)致免疫力降低、體質(zhì)下降、甚至發(fā)生嚴(yán)重的智力障礙(范衛(wèi)，王法弟，賈曉東，等.近十年國內(nèi)有關(guān)甲醛的環(huán)境與職業(yè)危害調(diào)查研究[J].環(huán)境與職業(yè)醫(yī)學(xué)，2004，21 (2):157-159.)。
[0004]動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)甲醛的吸入能改變大鼠嗅球和海馬神經(jīng)細(xì)胞的形態(tài)，并抑制海馬長時(shí)程增強(qiáng)(LTP)的形成，從而導(dǎo)致大鼠空間學(xué)習(xí)記憶能力下降(HuseyinAslan, AhmetSongurjAyten TurkkanlTuncjOguz Aslan OzenjOrhan Basj MuratYagmurcaj Mehmet Turgutj Mustafa Sarsilmazj Suleyman Kaplan.Effects offormaldehyde exposure on granule cell number and volume of dentategyrus:ahistopathological and stereological study.Brain Res，2006，(1):191-200.);還可以使皮層編碼長時(shí)程記憶相關(guān)蛋白及其DNA甲基化模式破壞，誘發(fā)海馬和皮層神經(jīng)兀死亡，引起記憶下降(Z.Lu, C.M.Li，Y.Qiaoj Y.Yanj X.Yang.Effect of inhaledformaldehyde on learning and memory of mice.1ndoor Air，2008，(2):77-83.)。[0005]臨床對(duì)142例老年癡呆患者尿甲醛濃度進(jìn)行分析，分別有42%輕度癡呆患者，
82.05%中度癡呆患者和88.46%重度癡呆患者尿甲醛濃度高于正常水平，提示老年癡呆患者尿甲醒濃度與認(rèn)知功能損傷程度之間呈正相關(guān)(Zhi qian Tong, Jinling Zhang, WenhongLuoj Weishan Wang, Fangxu Li，Hui Li，Hongjun Luoj Jing Lu，Jiangning Zhou,YouWan, Rongqiao He.Urine formaldehyde level is inversely correlated to mini mentalstate examination scores in senile dementia.Neurobiol Aging，2011，(I):31_41)。從流行病學(xué)的角度分析，家族遺傳性癡呆僅占老年癡呆病例的3%以下，而散發(fā)性癡呆患者的比例則大于97%，因此，有學(xué)者認(rèn)為甲醛在腦內(nèi)蓄積造成的慢性進(jìn)行性損傷是散發(fā)性老年癡呆發(fā)病的重要原因之一(王維山，都智慧，張力，李文杰，李沫，張金玲，赫榮喬.正常老年人與阿爾茨海默病患者尿甲醛濃度的研究.中華老年心腦血管病，2010，12(8):721-722)。
[0006]以上研究警示人們，環(huán)境甲醛已成為不容忽視的衛(wèi)生學(xué)問題，防治環(huán)境甲醛致病與養(yǎng)生防病、延緩衰老息息相關(guān)。因此，如何防治環(huán)境甲醛對(duì)神經(jīng)功能的損傷，是人們關(guān)注的重點(diǎn)。近年來，國內(nèi)學(xué)者開展了藥物防護(hù)甲醛致神經(jīng)功能損傷的研究工作，研究發(fā)現(xiàn)抗氧化劑N-乙酰半胱氨酸對(duì)甲醛引起的神經(jīng)行為改變有一定的防護(hù)作用，藥理作用尚需進(jìn)一步明確。甲醛作為“不良建筑綜合癥”的主要誘因，主要損傷神經(jīng)行為和學(xué)習(xí)記憶功能，目前針對(duì)防治環(huán)境污染物甲醛導(dǎo)致學(xué)習(xí)記憶損害的中藥組合物未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供一種防治環(huán)境污染物甲醛所致學(xué)習(xí)記憶損害的中藥組合物，具有益氣健脾益智之功。
[0008]本發(fā)明首先提供了一種中藥組合物，其活性成分由以下重量份的中藥組成:
[0009]人參3~15份，黃苗3~15份，白術(shù)3~12份，和炎甘草2~9份。
[0010]優(yōu)選地，所述中藥組合物的活性成分由以下質(zhì)量份的中藥組成:
[0011]人參10份，黃芪10份，白術(shù)9份，炙甘草6份。
[0012]本發(fā)明進(jìn)一步提供了所述中藥組合物的制備方法，包括如下步驟:
[0013]將所述質(zhì)量份的人參、黃芪、白術(shù)和炙甘草混合得到混合物；向所述混合物中加入水進(jìn)行浸泡；然后進(jìn)行煎煮2~3次，過濾，合并濾液，即得所述中藥組合物。
[0014]上述的制備方法中，所述加入水的質(zhì)量可為所述混合物質(zhì)量的6~10倍；
[0015]所述浸泡的時(shí)間可為20min~120min ；
[0016]每次所述煎煮的時(shí)間可為0.5~2小時(shí)。
[0017]本發(fā)明還提供了所述中藥組合物在制備提高學(xué)習(xí)記憶能力藥物或制備防治環(huán)境中甲醛所致學(xué)習(xí)記憶能力下降藥物中的應(yīng)用。
[0018]所述應(yīng)用具體表現(xiàn)為下述I) -4)中任意一種:
[0019]I)所述中藥組合物提高腦組織中谷胱甘肽的含量；
[0020]2)所述中藥組合物提高腦組織中谷胱甘肽過氧化物酶的活力；
[0021]3)所述中藥組合物增加大腦海馬CAl區(qū)Gray I型突觸的突觸后致密物的厚度和/或長度；
[0022]4)所述中藥組合物提高大腦海馬CAl區(qū)Gray I型突觸的界面曲率。[0023]本發(fā)明還提供了所述中藥組合物的如下任一種應(yīng)用:
[0024]I)制備具有提高腦組織中谷胱甘肽的含量功能的產(chǎn)品；
[0025]2)制備具有提高腦組織中谷胱甘肽過氧化物酶的活力功能的產(chǎn)品；
[0026]3)制備具有增加大腦海馬CAl區(qū)Gray I型突觸的突觸后致密物的厚度和/或長度功能的產(chǎn)品；
[0027]4)制備具有提高大腦海馬CAl區(qū)Gray I型突觸的界面曲率功能的產(chǎn)品。
[0028]本發(fā)明提供了一種提高學(xué)習(xí)記憶能力的藥物或防治環(huán)境中甲醛所致學(xué)習(xí)記憶能力下降的藥物，其活性成分為所述中藥組合物。
[0029]本發(fā)明提供的中藥組合物，充分考慮到環(huán)境污染物甲醛首先侵入肺衛(wèi)，具有致病影響范圍大，持續(xù)時(shí)間長的致病特點(diǎn)，通過衛(wèi)護(hù)人體機(jī)能，健運(yùn)脾胃，通過整體調(diào)節(jié)機(jī)體功能，達(dá)到提高學(xué)習(xí)記憶的作用。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0030]圖1為本發(fā)明實(shí)施例2中各組大鼠在隱藏平臺(tái)定位航行試驗(yàn)中的逃避潛伏期的變化曲線，圖中，與染毒組相比**Ρ〈0.01，*ρ〈0.05。
[0031]圖2為本發(fā)明實(shí)施例2中各組大鼠空間探索能力比較的柱狀圖，圖中，與染毒組相比,**ρ〈0.01*ρ〈0.05。
[0032]圖3為本發(fā)明實(shí)施例2中各組大鼠工作記憶能力比較的柱狀圖，圖中，與染毒組相比,**ρ〈0.01, ρ〈0.05。
`[0033]圖4為本發(fā)明實(shí)施例2中益氣健脾益智方對(duì)甲醛暴露大鼠腦組織GSH含量和GSH-PX活力的影響，圖中，與染毒組相比，*ρ〈0.05。
[0034]圖5為本發(fā)明實(shí)施例2中各組大鼠海馬CAl區(qū)突觸電鏡照片(放大20000倍)。
[0035]圖6為本發(fā)明實(shí)施例2中各組大鼠海馬CAl區(qū)Gray I型突觸界面結(jié)構(gòu)參數(shù)比較的柱狀圖，圖中，與染毒組相比，**ρ〈0.01, *ρ〈0.05。
【具體實(shí)施方式】
[0036]下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0037]下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0038]實(shí)施例1、制備中藥組合物
[0039]1、稱取下述重量的原料藥:人參10g、黃芪10g、白術(shù)9g和炙甘草6g。
[0040]2、將上述原料加入8倍質(zhì)量的水，浸泡30min ;然后進(jìn)行加熱煎煮2次，每次煎煮時(shí)間均為Ih,過濾,合并濾液,減壓濃縮至70ml。
[0041]實(shí)施例2、益氣健脾益智方(實(shí)施例1制備的中藥組合物)防治甲醛所致學(xué)習(xí)記憶能力下降的試驗(yàn)研究
[0042]1、動(dòng)物分組、給藥和模型制備
[0043]SD大鼠，隨機(jī)分為3個(gè)組，模型組(染毒組)，陰性對(duì)照組和給藥組。
[0044]模型制備方法:選用裝修材料中應(yīng)用廣泛的膠合板和粘合劑自制染毒室，模擬裝修后的居住環(huán)境(甲醛濃度均控制在1.21 ±0.2mg/m3)。
[0045]染毒組大鼠放置于染毒室中，4h/d，進(jìn)行30天的連續(xù)染毒；對(duì)照組大鼠放置在對(duì)照房間(甲醛濃度控制在國家衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的最高容許濃度0.08mg/m3以內(nèi))。每天甲醛染毒結(jié)束后，給藥組大鼠灌胃給益氣健脾益智方(4g/kg，相當(dāng)于臨床人用劑量)，每天I次，連續(xù)給藥30天。
[0046]染毒組和對(duì)照組大鼠灌服等量的生理鹽水。30天后，進(jìn)行行為學(xué)觀察和病理學(xué)指標(biāo)檢測(cè)。
[0047]2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0048]2.1益氣健脾益智方可明顯提高甲醛暴露大鼠學(xué)習(xí)記憶能力
[0049]采用Morris水迷宮測(cè)試大鼠空間參考記憶及工作記憶能力，評(píng)價(jià)藥物對(duì)甲醛暴露大鼠學(xué)習(xí)記憶功能的影響。
[0050]2.1.1益氣健脾益智方可提高甲醛暴露大鼠空間參考記憶能力
[0051](I)定位航行試驗(yàn)
[0052]平臺(tái)放在西南象限(第III象限)正中距池壁22cm處，通過記錄大鼠尋找平臺(tái)的逃避潛伏期反映大鼠對(duì)平臺(tái)空間位置的記憶，評(píng)價(jià)大鼠的空間參考記憶獲得能力，逃避潛伏期越短則說明大鼠對(duì)平臺(tái)的空間位置記憶越好。
[0053]結(jié)果如圖1所示，圖1表明，各組大鼠第I天游泳訓(xùn)練逃避潛伏期及游泳路徑未見明顯差異，從第2天游泳訓(xùn)練開始甲醛染毒大鼠搜尋平臺(tái)的逃避潛伏期較對(duì)照組明顯延長(P〈0.05或P〈0.01)，這說明模型大鼠存在明顯的空間參考記憶獲得能力的障礙；益氣健脾益智方治療組大鼠在第3天和第4天的游泳訓(xùn)練時(shí)段，尋找平臺(tái)的逃避潛伏期明顯縮短，和模型組差異顯著(P〈0.05或P〈0.01)。
[0054](2)空間搜索試驗(yàn)
[0055]用于測(cè)量動(dòng)物對(duì)平臺(tái)空間位置準(zhǔn)確記憶，即記憶保持能力。定位航行試驗(yàn)結(jié)束后第5d撤除平臺(tái)，在30s時(shí)限內(nèi)觀察并記錄以下指標(biāo):①tP/tT:以原平臺(tái)所在的象限(第III象限)作為目標(biāo)區(qū)，計(jì)算各組大鼠的平臺(tái)象限游泳時(shí)間與總游泳時(shí)間的比值dP/dT以原平臺(tái)所在的象限(第III象限)作為目標(biāo)區(qū)，測(cè)量各組大鼠在平臺(tái)象限的游泳距離占總游泳距離的比值；③記錄各組大鼠在水池中穿過原平臺(tái)所在位置的次數(shù)，即計(jì)數(shù)穿環(huán)次數(shù)(穿環(huán)次數(shù))。
[0056]結(jié)果如圖2所示，圖2表明，甲醛暴露大鼠tP/tT、dP/dT以及準(zhǔn)確穿越原平臺(tái)所在位置的次數(shù)明顯比正常組減少(ρ〈ο.01)，說明空間記憶保持能力受到損害。益氣健脾益智方治療組大鼠tP/tT、dP/dT及準(zhǔn)確穿越原平臺(tái)次數(shù)較染毒組大鼠均有不同程度的提高(Ρ〈0.05 或Ρ〈0.01)。
[0057]2.1.2益氣健脾益智方可提高甲醛暴露大鼠工作記憶能力
[0058]空間搜索實(shí)驗(yàn)結(jié)束后第6d，將平臺(tái)位置移動(dòng)，分別放置于第1、II和IV象限，從平臺(tái)象限對(duì)側(cè)投放動(dòng)物，記錄動(dòng)物尋找平臺(tái)的逃避潛伏期，評(píng)價(jià)大鼠的工作記憶。
[0059]結(jié)果如圖3所示，圖3表明，當(dāng)平臺(tái)位置移動(dòng)后，模型大鼠搜索平臺(tái)的逃避潛伏期較對(duì)照組明顯延長(p〈0.01)，和模型組相比，益氣健脾益智方組大鼠搜索平臺(tái)的時(shí)間明顯縮短(P〈0.05)。
[0060]2.2益氣健脾益智方可提高甲醛暴露大鼠腦組織谷胱甘肽(GSH)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的含量和活力
[0061]甲醛染毒結(jié)束后，取各組大鼠腦組織，生化法檢測(cè)GSH和GSH-PX。谷胱甘肽(GSH)試劑盒貨號(hào)A006及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)試劑盒貨號(hào)A005由南京建成生物工程研究所提供。
[0062]結(jié)果如圖4所示，圖4表明，甲醛暴露可明顯降低大鼠腦組織GSH含量及GSH-PX酶活力(P〈0.05);益氣健脾益智方(4g/kg)可提高甲醛暴露大鼠腦組織GSH含量及GSH-PX酶活力，和染毒組相比差異顯著(Ρ〈0.05)。
[0063]3、益氣健脾益智方可以明顯增加大腦海馬Gray I型突觸后致密質(zhì)(PSD)的厚度和長度，并提高界面曲率
[0064]本研究結(jié)果為益氣健脾中藥調(diào)控谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)，防治甲醛致學(xué)習(xí)記憶功能損傷提供了最直接的證據(jù)。
[0065]大腦海馬部位突觸可塑性增強(qiáng)與學(xué)習(xí)記憶有著密不可分的關(guān)系，而這種可塑性的增強(qiáng)主要是以谷氨酸為神經(jīng)遞質(zhì)的。突觸界面結(jié)構(gòu)是最易受環(huán)境因素的刺激、藥物等影響而發(fā)生可塑性變化，其中以突觸后致密質(zhì)(PSD)最為敏感。興奮性突觸后膜上有密集的谷氨酸受體，這些受體與PSD相連，因此PSD的變化反映了突觸傳遞功效的變化。[0066]應(yīng)用透射電鏡和形態(tài)計(jì)量學(xué)分析甲醛暴露大鼠海馬興奮性突觸Gray I型突觸的突觸界面結(jié)構(gòu)參數(shù)的變化。結(jié)果如圖5和圖6所示，結(jié)果顯示，甲醛暴露大鼠Gray I型突觸的突觸界面曲率、突觸后致密物(PSD)厚度及長度均比對(duì)照組明顯減小(p〈0.01)證明甲醛暴露可損傷突觸超微結(jié)構(gòu)，大大降低了神經(jīng)信息傳遞的有效性，引起學(xué)習(xí)記憶能力減退。
[0067]綜上，益氣健脾益智方可以明顯增加突觸PSD的厚度和長度，并提高界面曲率(p〈0.01 或 ρ〈0.05)。
【權(quán)利要求】
1.一種中藥組合物，其活性成分由以下重量份的中藥組成: 人參3~15份，黃芪3~15份，白術(shù)3~12份，炙甘草2~9份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于:其活性成分由以下質(zhì)量份的中藥組成: 人參10份，黃芪10份，白術(shù)9份，炙甘草6份。
3.權(quán)利要求1或2所述中藥組合物的制備方法，包括如下步驟: 將所述質(zhì)量份的人參、黃芪、白術(shù)和炙甘草混合得到混合物；向所述混合物中加入水進(jìn)行浸泡；然后進(jìn)行煎煮2~3次，過濾，合并濾液，即得所述中藥組合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于:所述加入水的質(zhì)量為所述混合物質(zhì)量的6~10倍； 所述浸泡的時(shí)間為20~120min ； 每次所述煎煮的時(shí)間為0.5~2小時(shí)。
5.權(quán)利要求1或2所述中藥組合物在制備提高學(xué)習(xí)記憶能力藥物或制備防治環(huán)境中甲醛所致學(xué)習(xí)記憶能力下降藥物中的應(yīng)用。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應(yīng)用，其特征在于:所述應(yīng)用表現(xiàn)為下述1)-4)中任意一種: 1)所述中藥組合物提高腦組織中谷胱甘肽的含量； 2)所述中藥組合物提高 腦組織中谷胱甘肽過氧化物酶的活力； 3)所述中藥組合物增加大腦海馬CAl區(qū)GrayI型突觸的突觸后致密物的厚度和/或長度； 4)所述中藥組合物提高大腦海馬CAl區(qū)GrayI型突觸的界面曲率。
7.權(quán)利要求1或2所述中藥組合物的如下任一種應(yīng)用: O制備具有提高腦組織中谷胱甘肽的含量功能的產(chǎn)品； 2)制備具有提高腦組織中谷胱甘肽過氧化物酶的活力功能的產(chǎn)品； 3)制備具有增加大腦海馬CAl區(qū)GrayI型突觸的突觸后致密物的厚度和/或長度功能的廣品； 4)制備具有提高大腦海馬CAl區(qū)GrayI型突觸的界面曲率功能的產(chǎn)品。
8.一種提高學(xué)習(xí)記憶能力的藥物或防治環(huán)境中甲醛所致學(xué)習(xí)記憶能力下降的藥物，其活性成分為權(quán)利要求1或2所述中藥組合物。
【文檔編號(hào)】A61P1/14GK103860629SQ201410058483
【公開日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2014年2月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月20日
【發(fā)明者】趙暉, 溪?jiǎng)倨G, 鄒海艷, 王蕾, 張秋霞 申請(qǐng)人:首都醫(yī)科大學(xué)