重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物及其制備方法，所述重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，以重量百分比計，含有：重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子0～1%，蛋白滲透輔助材料0～20%，緩沖液組分（pH5～9）0～5%，無機鹽0～5%，水0～99%。本發(fā)明的優(yōu)點在于：控制體重效果與注射給藥相當(dāng)，且不易產(chǎn)生抗體。
【專利說明】重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子組合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]據(jù)最新的流行病學(xué)調(diào)查資料，我國居民超重率為17.16%、肥胖率為5.16%。超重和肥胖已成為影響居民健康的重要疾患。因超重和肥胖而導(dǎo)致高血壓的患者將近40%、導(dǎo)致糖尿病的將近35%，由超重和肥胖造成疾病的直接經(jīng)濟負擔(dān)是369.9億人民幣(2003年數(shù)據(jù))。針對肥胖癥及其相關(guān)疾病的治療有巨大的市場容量。因此，開發(fā)治療肥胖癥的藥物具有廣闊的市場前景。
[0003]人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(humanciliary neurotmphic factor, hCNTF),因最初發(fā)現(xiàn)它能促進雞胚睫狀神經(jīng)節(jié)神經(jīng)元存活而得名，是NGF家族以外的一種神經(jīng)營養(yǎng)因子。它在體內(nèi)具有多種生物學(xué)活性，主要作用于神經(jīng)系統(tǒng)，對中樞和外周多種神經(jīng)元有廣泛的促存活作用。近年來，在hCNTF作為治療肌萎縮性側(cè)索硬化病治療藥物研究時，發(fā)現(xiàn)CNTF可引起體重下降、食欲減退等反應(yīng)。隨后研究表明，CNTF有類似瘦素的作用，可抑制食欲、減輕體重、調(diào)節(jié)血糖和血脂代謝，并對某些糖尿病慢性并發(fā)癥有一定療效。
[0004]重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(rhCNTF)有別于傳統(tǒng)化學(xué)類減肥藥，是與人體分泌的CNTF氨基酸序列完全相同，或?qū)π〔糠职被徇M行改變(突變體)的蛋白大分子藥物。在多種嚙齒動物肥胖癥或II型糖尿病模型中發(fā)現(xiàn)，rhCNTF給藥可糾正或改善高胰島素血癥，食欲過高以及高血脂等與肥胖有關(guān)的疾病，還可調(diào)節(jié)血糖和其他代謝指標(biāo)，對II型糖尿病及其并發(fā)癥的防治有重要 作用，具有廣泛的臨床應(yīng)用前景。已經(jīng)完成的動物藥效學(xué)及臨床前安全性評價實驗結(jié)果證實，rhCNTF是安全有效的治療肥胖和糖尿病型肥胖的藥物。
[0005]美國Regeneron公司的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子Axokine,為CNTF經(jīng)基因工程改造后制成，Ι/ΙΙ/ΠΙ期臨床試驗結(jié)果顯示，該藥具有良好的安全性和非常小的毒副作用。給藥12周后隨訪12個月，體重反彈極慢，作用能維持12月。但是因為長期注射產(chǎn)生抗體暫未上市。
[0006]由于rhCNTF是一種蛋白藥物，體內(nèi)半衰期短，作為減肥藥物需要每天一次皮下注射，約3個月一療程，使用不便，亟需開發(fā)非注射給藥制劑。由于蛋白藥物的穩(wěn)定性差，口服難吸收、易降解等問題，目前尚無rhCNTF非注射給藥的研究報道。
[0007]由于鼻黏膜的吸收限制，大于1000分子量的藥物被認為是難以經(jīng)鼻進入人體并發(fā)揮作用的，因而分子量高達2萬以上的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子，通常認為是不可能從鼻腔給予并起作用的，因此未見到任何有關(guān)該藥物在鼻腔給藥方面的報道和專利申請。實際上，通過試驗證實，將rhCNTF的溶液直接給予動物鼻腔，確實是觀察不到任何相關(guān)的藥理作用的發(fā)生的。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]本發(fā)明的目的是提供一種重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物及其制備方法，滿足臨床應(yīng)用的需要。
[0009]本發(fā)明在大量的實驗基礎(chǔ)上，意外地發(fā)現(xiàn)了一種有效克服技術(shù)障礙的方法，成功地將蛋白大分子藥物經(jīng)鼻腔傳輸至生物體內(nèi)，產(chǎn)生與注射相當(dāng)?shù)臏p肥療效。
[0010]所述的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，以重量百分比計，含有:
[0011]
【權(quán)利要求】
1.重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，其特征在于，以重量百分比計，含有:
重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子0~1%蛋白滲透輔助材料O~20%緩沖液組分(pH5~9)0-5%無機鹽O~5%水O~99% 組分的百分比之和為100%。
2.重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，其特征在于，以重量百分比計，含有:
重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子0.0丨~0.1%蛋白滲透輔助材料I~10%pH=5~9的緩沖液組分O~2%無機鹽O~2%水86~97% 組分的百分比之和為100%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的·重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，其特征在于，所述重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(hCNTF)的分子量為20，000~24，OOODa0
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，其特征在于，所述重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(hCNTF)的分子量為20，000~24，OOODa0
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，其特征在于，所述重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子，是與天然人CNTF完全一致的蛋白序列、或是經(jīng)過基因工程改造后的各種人CNTF突變體，包括將17位半胱氨酸改為丙氨酸，63位谷氨酸改為精氨酸，C端缺失14~16個氨基酸的突變體。
6.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，其特征在于，所述蛋白滲透輔助材料，選自殼聚糖、多聚磷酸鈉、魚精蛋白、環(huán)糊精或其衍生物、膽酸鹽及其衍生物、氨肽酶抑制劑、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯月桂醇醚、聚乙二醇硬脂酸酯、聚氧乙烯與聚氧丙烯共聚物、聚山梨酯、泊洛沙姆、梭鏈孢酸衍生物、PLGA、磷脂及其衍生物或堿性氨基酸聚合物中的一種以上； 其中: 所述的磷脂及其衍生物選自卵磷脂、二癸酰磷脂酰膽堿、溶血磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰膽堿或二肉豆蘧酰磷脂酰甘油等； 所述膽酸鹽優(yōu)選膽酸鈉、甘氨膽酸鈉、熊去氧膽酸或?；悄懰猁}等； 所述堿性氨基酸聚合物優(yōu)選聚精氨酸(如八聚精氨酸)、聚賴氨酸、(HIV-1)病毒基因組的轉(zhuǎn)錄激活因子Tat (49-57)等； 所述梭鏈孢酸衍生物選自二氫褐霉酸鈉(STDHF)、二氫留酸霉素鈉等； 所述環(huán)糊精或其衍生物選自α-，β-，Υ-環(huán)糊精，二甲基-α-或β-環(huán)糊精，羥丙基-β -或環(huán)糊精等；所述pH=5~9的緩沖液組分選自Tris-HCl、醋酸-醋酸鈉、檸檬酸-檸檬酸鈉或磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉等； 所述無機鹽為氯化鈉或氯化鉀。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，其特征在于，還包括防腐劑或/和粘附材料的一種以上。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥組合物，其特征在于，以重量百分比計，含有:重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子0.01~0.1%蛋白滲透輔助材料3.0~10.0%pH=5~9的緩沖液組分0.1~1.0%無機鹽0~0.6%防腐劑或/和生物粘附材料0.0~5.0%水83~96% 組分的百分比之和為100%。
9.根據(jù)權(quán)利要求1~8任一項所述的含有重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子鼻腔組合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟: 將蛋白滲透輔助材料和適量水，采用均質(zhì)乳化、噴霧干燥、離子凝膠法等方法制成納米混懸液，再與rhCNTF、其他蛋白滲透輔助材料均勻混合、加入pH=5~9的緩沖液組分、無機鹽等，即可獲得所述的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥制劑； 或者: 將蛋白滲透輔助材料與rhCNTF分別用適量緩沖液溶解混合，再和其他組分均勻混合，即可獲得所述的重組人睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子的鼻腔給藥制劑。
【文檔編號】A61K47/36GK103845727SQ201310534314
【公開日】2014年6月11日 申請日期:2013年10月31日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月31日
【發(fā)明者】吳聞?wù)? 侯惠民, 姚孝林, 羅世華, 徐曉寒 申請人:上?，F(xiàn)代藥物制劑工程研究中心有限公司