包含杜仲花提取物的中藥組合物的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種包含杜仲花提取物的中藥組合物，按重量百分比由下列組分組成：含70%～98%綠原酸的杜仲葉提取物5.0%～50.0%，含20%～27%水解氨基酸的杜仲花提取物15.0%～50.0%，含60%～90%茶多酚的綠茶提取物2.5%～70.0%。本發(fā)明所述的組合物具有平衡三高，溫補(bǔ)肝腎，抗疲勞和善睡眠的功效，原料來源易得，易于產(chǎn)業(yè)化；可根據(jù)需要制成各種劑型，更加有效、質(zhì)量更加可控，為患者帶來更多的利益，從而產(chǎn)生巨大的社會效益。
【專利說明】包含杜仲花提取物的中藥組合物
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種包含杜仲花提取物的中藥組合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]隨著人們生活水平的不斷提高，飲食結(jié)構(gòu)的改變，冠心病的發(fā)病率日漸攀升。冠心病是由于冠狀動脈粥樣硬化引起管腔狹窄，造成心肌供血供氧障礙而引起的心臟病，被稱為是“世界殺手”。半個世紀(jì)以來，冠心病已成為威脅人類健康最嚴(yán)重的疾病之一。流行病學(xué)調(diào)查顯示，近五十年來不論在農(nóng)村或城市，心腦血管疾病的發(fā)病率和死亡率均呈上升趨勢。1975年以后心腦血管疾病死亡者已占全部疾病死因第一位。30年中循環(huán)系統(tǒng)死因構(gòu)成將增高59.6%，冠心病和腦卒中分別增高74.6%和75%。這些資料充分說明，心腦血管疾病不僅是危害人類健康的主要疾病，更是目前和未來20年內(nèi)人類致死、致殘的“頭號殺手”。
[0003]在心腦血管疾病的治療藥物中，中藥副作用小。在目前眾多治療心腦血管疾病的中成藥中，復(fù)方制劑占有重要的位置，尤其以有效部位為主要活性成分的中成藥也愈來愈受到人們的重視。治療心腦血管疾病的各種中藥有效部位的功效各有不同和側(cè)重，臨床上存在聯(lián)合用藥的巨大需求，因此，以有效部位制備的具有劑量小、療效好、質(zhì)量穩(wěn)定等特點(diǎn)復(fù)方制劑，有著廣闊的市場前景。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種包含杜仲花提取物的中藥組合物。
[0005]本發(fā)明的另一目的是提 供一種上述組合物的制備方法。
[0006]本發(fā)明的中藥有效部位組合物，按重量百分比包括下列組分:
含70%~98%綠原酸的杜仲葉提取物 5.0%~50.0%
含20%~27%水解氨基酸的杜仲花提取物 15.0%~50.0%
含60%~90%茶多酚的綠茶提取物 2.5%~70.0%。
[0007]本發(fā)明的中藥有效部位組合物，優(yōu)選為按重量百分比包括下列組分:
含70%~98%綠原酸的杜仲葉提取物 10.0%~38.0%
含20%~27%水解氨基酸的杜仲花提取物 20.0%~35.0%
含60%~90%茶多酚的綠茶提取物 8%~55.0%。
[0008]本發(fā)明的中藥有效部位組合物，更優(yōu)選為按重量百分比包括下列組分:
含70%~98%綠原酸的杜仲葉提取物 27.0%
含20%~27%水解氨基酸的杜仲花提取物 28.0%
含60%~90%茶多酚的綠茶提取物 45.0%
所述的杜仲花提取物中包含黃酮(以無水蘆丁計(jì))6%~7%，綠原酸2%~3%，水解氨基酸20%~27%，桅子苷1%~2%，京尼平苷酸2%~2.5%,桃葉珊瑚苷3%~6%。
[0009]優(yōu)選的，所述的杜仲花提取物中包含黃酮(以無水蘆丁計(jì))6.57%，綠原酸2.88%，水解氨基酸23.32%，桅子苷1.12%，京尼平苷酸2.08%，桃葉珊瑚苷4.77%。[0010]所述的杜仲花優(yōu)選杜仲雄花。
[0011]所述的綠原酸可以從市場上購得后純化至70%~98%，也可以采用以下步驟制得: 取杜仲葉，將其粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇(1:1)，加熱回流40min，提取3次，濾液合
并得提取液I。藥渣加入70%乙醇，加熱回流40min，提取2次，濾液合并得提取液II，將提取液II濃縮成浸膏，用50%甲醇溶解浸膏，采用0DS-C18柱對其進(jìn)行分離，首先用8%甲醇作為流動相，得洗脫液I，然后改換60%甲醇作為流動相，得洗脫液II，濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品:制備色譜的分離條件:色譜柱為半制備柱(LichrospherC18;10.0mm --250mm，5mm)，流動相為水(A)和乙腈(B)，梯度洗脫程序如下:
Omin時，流動相A為85%，流動相B為15% ；
IOmin時，流動相A為79%，流動相B為21% ；
15min時，流動相A為69%，流動相B為31% ；
30min時，流動相A為63%，流動相B為37% ；
35min時，流動相A為15%，流動相B為85% ；
45min時，流動相A為15%，流動相B為85% ；
流速為2ml/min，柱溫為室溫；樣品用100%乙醇溶解，經(jīng)制備液相色譜分離，在時間段13.5~32.5min收集溶液，溶液經(jīng)濃縮干燥后得到有效組分。
[0012]優(yōu)選的，在時間段15.5~28.5min收集溶液。
[0013]流動相A和B為體積比`；流動相A是在100ml水中加入醋酸0.1ml ;流動相B是乙
腈溶液。
[0014]所述的含水解氨基酸的杜仲花提取物可以從公開市場上購得后再純化使得水解氨基酸含量達(dá)到20%~27%，也可以采用以下方法制備:
取杜仲花，將其粉碎后加入體積比1:2的乙酸乙酯和60%乙醇，加熱回流提取3次，第一次I~3小時，第二次和第三次分別I~2小時，濾液合并得提取液I，藥渣加入65%乙醇，加熱回流提取3次，第一次I~1.5小時，第二次和第三次分別0.5~I小時，濾液合并得提取液II，合并提取液I和II，濃縮成浸膏，用65%乙醇溶解浸膏，采用非極性或弱極性大孔樹脂對其進(jìn)行分離，首先以水洗脫，得洗脫液I ;然后以60%~70%乙醇洗脫，再以90%~95%乙醇洗脫，得洗脫液II，回收，減壓濃縮，干燥，即得杜仲花提取物。
[0015]所述的洗脫流速為2~4BV/h ;優(yōu)選的，洗脫流速為2~3BV/h，更優(yōu)選的為3BV/h0
[0016]所述的大孔樹脂優(yōu)選為AB-8和X-5，更優(yōu)選為AB-8。所述的乙醇濃度為體積濃度。
[0017]經(jīng)檢測，水解氨基酸純度可達(dá)20~27%。
[0018]所述的茶多酚可以從市場上購得后純化至60%~90%，也可以采用以下方法制備: 綠茶粉碎，加80%乙醇，100°C回流提取3次，料液重量體積比1:8-10，提取時間
10-30min,合并提取液；
離心，棄殘?jiān)蒙锨逡海?br> 聚酰胺樹脂吸附:柱高與直徑比20，去離子水洗滌0.5h ；
洗脫:去離子水和80%乙醇洗脫，流速6ml/min,去離子水中含有少量咖啡因，棄去，收集乙醇洗脫液，濃縮，即得。
[0019]經(jīng)檢測，茶多酚80%以上。[0020]本發(fā)明所述的綠原酸、杜仲花提取物和茶多酚含量測定均采用現(xiàn)有技術(shù)記載的方法。
[0021]本發(fā)明的中藥組合物，可與任何一種或一種以上藥劑學(xué)上輔料如淀粉、糊精、乳糖、微晶纖維素、羥丙甲基纖維素、聚乙二醇、硬脂酸鎂、微粉硅膠、木糖醇、乳糖醇、葡萄糖、甘氨酸、甘露醇、甘氨酸等混合制成的各種劑型，例如，可制成水針劑、片劑、緩釋片、滴丸、顆粒劑、粉針劑、膠囊劑、微粒劑、口服液。優(yōu)選劑型為口服液、片劑。
[0022]本發(fā)明中藥組合物具有平衡三高，溫補(bǔ)肝腎，抗疲勞和善睡眠的功效，原料來源易得，易于產(chǎn)業(yè)化；可根據(jù)需要制成各種劑型，更加有效、質(zhì)量更加可控，為患者帶來更多的利益,從而產(chǎn)生巨大的社會效益。
[0023]實(shí)驗(yàn)例
幾種中藥提取物抗心肌缺血作用的實(shí)驗(yàn)研究
1、分組及給藥
Wister雄性大鼠70只，體重247.8±21.1,按體重隨機(jī)分為7組:生理鹽水對照組；實(shí)施例二的杜仲花提取物組；實(shí)施例二的綠原酸提取物組；實(shí)施例二的茶多酚提取物組；實(shí)施例六的中藥組合物；實(shí)施例五的中藥組合物。各藥物均以生理鹽水稀釋至所需濃度,給藥量為4ml/kg,尾靜脈給藥。
[0024]2、方法
(O大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗死模型:動物戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉(45mg/kg)，仰位固定。氣管插管，在胸骨左側(cè)作2cm的縱 切口，近胸骨側(cè)剪斷第3、第4勒軟骨，打開胸腔后，連接人工呼吸機(jī)(通氣量2ml/100g，50次/min)。剪開心包膜，暴露心臟，冠狀動脈左前降支根部穿線以備結(jié)扎，記錄標(biāo)準(zhǔn)II導(dǎo)聯(lián)心電圖，穩(wěn)定10分鐘，結(jié)扎冠狀動脈左前降支，關(guān)閉胸腔。用針筒吸出動物喉部分泌物，使動物恢復(fù)自主呼吸。結(jié)扎冠狀動脈15min后，靜脈給藥。結(jié)扎冠狀動脈4小時后，摘取心臟，在結(jié)扎線以下橫切5片，進(jìn)行氯化硝基四氮唑藍(lán)(NBT)染色，計(jì)算心肌梗死區(qū)面積占心室及心臟面積的百分比，并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理(t檢驗(yàn))。
[0025](2)離體IangendorfT心臟灌流法:參考藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)第三版進(jìn)行。
[0026]3、結(jié)果
(I)對大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞范圍的影響，結(jié)果見表1。
[0027]表1各種提取物對大鼠實(shí)驗(yàn)性心肌梗塞范圍的影響(￡±幻
M 1.各持對大》實(shí)驗(yàn)性心肌?塞薇,《?影_ > ★ r f )
【權(quán)利要求】
1. 一種包含杜仲花提取物的中藥組合物，按重量百分比由下列組分組成: 含70%~98%綠原酸的杜仲葉提取物 5.0%~50.0% 含20%~27%水解氨基酸的杜仲花提取物 15.0%~50.0% 含60%~90%茶多酚的綠茶提取物 2.5%~70.0%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于，所述組分的重量百分比為: 含70%~98%綠原酸的杜仲葉提取物 10.0%~38.0% 含20%~27%水解氨基酸的杜仲花提取物 20.0%~35.0% 含60%~90%茶多酚的綠茶提取物 8%~55.0%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物，其特征在于，所述組分的重量百分比為: 含70%~98%綠原酸的杜仲葉提取物 27.0% 含20%~27%水解氨基酸的杜仲花提取物 28.0% 含60%~90%茶多酚的綠茶提取物 45.0%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一權(quán)利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述的杜仲花提取物中包含黃酮6%~7%，綠原酸2%~3%，水解氨基酸20%~27%，桅子苷1%~2%，京尼平苷酸2%~2.5%,桃葉珊瑚苷3%~6%ο
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的中藥組合物，其特征在于，所述的杜仲花提取物中包含黃酮6.57%，綠原酸2.88%，水解氨基酸23.32%，桅子苷1.12%，京尼平苷酸2.08%,桃葉珊瑚苷4.77%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一權(quán)利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述的綠原酸采用以下步驟制得:取杜仲葉，將其粉碎后加入乙酸乙酯和乙醇(1:1)，加熱回流40!^11，提取3次，濾液合并得提取液I ;藥渣加入70%乙醇，加熱回流40min，提取2次，濾液合并得提取液II，將提取液II濃縮成浸膏，用50%甲醇溶解浸膏，采用ODS-C18柱對其進(jìn)行分離，首先用8%甲醇作為流動相，得洗脫液I，然后改換60%甲醇作為流動相，得洗脫液II，濃縮干燥后得樣品；用制備液相色譜繼續(xù)分離得到的樣品:制備色譜的分離條件:色譜柱為半制備柱(Lichrospher C18; 10.0mm --250mm, 5mm),流動相為水(A)和乙腈(B),梯度洗脫程序如下: Omin時，流動相A為85%，流動相B為15% ； IOmin時，流動相A為79%，流動相B為21% ； 15min時，流動相A為69%，流動相B為31% ； 30min時，流動相A為63%，流動相B為37% ； 35min時，流動相A為15%，流動相B為85% ； 45min時，流動相A為15%，流動相B為85% ； 流動相A是在100ml水中加入醋酸0.1ml ;流動相B是乙腈溶液，流速為2ml/min，柱溫為室溫；樣品用100%乙醇溶解，經(jīng)制備液相色譜分離，在時間段13.5~32.5min收集溶液，溶液經(jīng)濃縮干燥后得到有效組分。
7.根據(jù)權(quán)利要求7所述的中藥組合物，其特征在于，在時間段15.5~28.5min收集溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一權(quán)利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述的的杜仲黃酮采用以下方法制備:取杜仲皮，將其粉碎后加入體積比2:3的乙酸乙酯和65%乙醇，加熱回流提取3次，第一次I~3小時，第二次和第三次分別I~2小時，濾液合并得提取液I，藥渣加入70%乙醇，加熱回流提取3次，第一次I~1.5小時，第二次和第三次分別0.5~I小時，濾液合并得提取液II，合并提取液I和II，濃縮成浸膏，用70%乙醇溶解浸膏，采用非極性或弱極性大孔樹脂對其進(jìn)行分離，首先以水洗脫，得洗脫液I ;然后以60%~70%乙醇洗脫，再以90%~95%乙醇洗脫，得洗脫液II，回收，減壓濃縮，干燥，即得杜仲總黃酮提取物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的中藥組合物，其特征在于，所述的洗脫流速為2~6BV/h，優(yōu)選為2~4BV/h，最優(yōu)為3BV/h。
10.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一權(quán)利要求所述的中藥組合物，其特征在于，所述的茶多酚采用以下方法制備:綠茶粉碎，加80%乙醇，100°C回流提取3次，料液重量體積比1:8-10，提取時間10-30min，合并提取液；離心，棄殘?jiān)?，得上清液；聚酰胺樹脂吸?柱高與直徑比·20，去離子水洗滌0.5h ;去離子水和80%乙醇洗脫，流速6ml/min，去離子水中含有少量咖啡因，棄去， 收集乙醇洗脫液，濃縮，即得。
【文檔編號】A61P9/10GK103520375SQ201310479574
【公開日】2014年1月22日 申請日期:2013年10月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年10月15日
【發(fā)明者】蹇奇先, 范仕明, 柯昌林 申請人:廣元億明生物科技有限公司