梓醇在制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種地黃在用于制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用，以及地黃中的梓醇成分在用于制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用。特別是，梓醇對于口腔潰瘍具有顯著的治療作用和愈合作用。
【專利說明】梓醇在制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用
【技術領域】:
[0001]本發(fā)明主要涉及地黃中的梓醇成分在制備治療口腔潰瘍藥物中的應用。
【背景技術】:
[0002]口腔潰瘍，又稱口瘡、口炎、復發(fā)性阿弗他潰瘍等，是口腔黏膜疾病中發(fā)病率最高的一種疾病，感冒、消化不良、精神緊張、郁悶壓抑等均能偶然引起該病的發(fā)生，好發(fā)于口腔、唇、頰、舌緣等，在黏膜的任何部位均能出現(xiàn)?？谇粷儗儆谥嗅t(yī)口瘡范疇，多為素體虛弱，陰虛、大病之后或勞傷過度，陰虧耗液，水不制火，虛火上浮口腔而發(fā)為潰瘍。其病因病機多與肝、脾、腎有關，治療應重視肝、脾、腎的調治。發(fā)病年齡一般在10~30歲之間，女性較多，一年四季均能發(fā)生?？谇粷冇凶韵扌?，能在10天左右自愈。該病還具有周期性、復發(fā)性等特點。
[0003]口腔潰瘍主要包括以下幾種類型:
[0004]1.輕型復發(fā)性阿弗他潰瘍
[0005]初起病變處敏感或出現(xiàn)針尖樣大小或稍大的充血區(qū)，短期內即形成直徑在2~4_左右，圓形或橢圓形，邊界清晰的淺小潰瘍。中心微凹陷，表面覆有一層淡黃色假膜，潰瘍周圍黏膜充血呈紅暈狀，其底捫之不硬。潰瘍數(shù)目一般為2~3個左右。潰瘍形成后有較劇烈的燒灼痛。經(jīng)7~10天左右潰瘍可逐漸自愈，不留瘢痕。但經(jīng)長短不一的間歇期后又可復發(fā)?；颊呱鯙橥纯唷?br> [0006]2.皰疹型復發(fā)性阿弗他潰瘍
[0007]亦稱口炎型口瘡。此型除潰瘍小、數(shù)目多(可達20~30個)外，其余與輕型復發(fā)性阿弗他潰瘍表現(xiàn)相似。潰瘍散在，分布廣泛，黏膜充血明顯。有劇烈疼痛及伴有頭痛、發(fā)熱、局部淋巴結腫大等。
[0008]3.重型復發(fā)性阿弗他潰瘍
[0009]亦稱復發(fā)性壞死性黏膜腺周圍炎或腺周口瘡，為各型中最嚴重的一型。潰瘍常單個發(fā)生，2個或2個以上者少見。好發(fā)于唇內側及口角區(qū)黏膜。初起時潰瘍與輕型復發(fā)性阿弗他潰瘍相同，但其直徑逐漸擴大至I~2cm，并向深層發(fā)展至黏膜腺。潰瘍?yōu)樽霞t色或暗紅色，邊緣不規(guī)則，呈瓣狀隆起，中央凹陷，似“彈坑”。底不平、微硬、呈小結節(jié)狀，潰瘍周圍紅暈，局部有劇烈疼痛及可伴局部淋巴結腫大、發(fā)熱等。病程常在月余以上。愈后遺留瘢痕，嚴重者可形成組織缺損或畸形。
[0010]近年來，臨床治療口腔潰瘍的中藥復方有六味地黃丸,知柏地黃丸、杞菊地黃丸等。
[0011]六味地黃丸主要原料是熟地黃、山茱萸(制)、牡丹皮、山藥、茯苓、澤瀉，具有滋陰補腎的功效，可用于腎陰虧損，頭暈耳鳴，腰膝酸軟，骨蒸潮熱，盜汗遺精。六味地黃丸是目前臨床運用最多的一個補陰方劑。該方用熟地滋腎填精為主；輔以山萸肉養(yǎng)肝而澀精，山藥補益脾陰而固精，三藥合用，達到三陰并補之功。又配茯苓淡滲脾濕，以助山藥之益脾；澤瀉清泄腎火，并防熟地之滋膩；丹皮清泄肝火，并制山萸肉之溫。各藥合用，有補有瀉，使之滋補而不留邪，降泄而不傷正，相輔相成。現(xiàn)代藥理研究也表明，六味地黃丸中的許多藥有局部抑菌作用。如山茱萸煎劑于體外可抑制金黃色葡萄球菌、皮膚真菌。六味地黃丸可以使?jié)?特別是腎陰虧虛型口腔潰瘍)復發(fā)周期延長，潰瘍個數(shù)減少，疼痛程度減輕，潰瘍愈合時間縮短，明顯改善復發(fā)性口腔潰瘍患者的臨床癥狀。
[0012]知柏地黃丸主要成分為:知母、黃柏、熟地黃、山茱萸(制)、牡丹皮、茯苓、澤瀉、山藥，具有滋陰降火的功效，用于陰虛火旺，潮熱盜汗，口干咽痛，耳鳴遺精，小便短赤等，可治療西醫(yī)診斷之慢性腎炎、慢性腎功能不全、慢性腎盂腎炎、甲亢、糖尿病等。知柏地黃丸中熟地滋陰補腎，山茱萸補養(yǎng)肝腎，山藥補益脾陰，澤瀉利濕泄?jié)?，丹皮清泄虛熱，茯苓淡滲脾濕，知母、黃柏滋陰降火。知柏地黃丸既能調補肝、脾、腎三臟之陰，又能降相火。因此，也可用于口腔潰瘍的治療。
[0013]關于六味地黃丸、知柏地黃丸等治療復發(fā)性口腔潰瘍的臨床報道?？梢娪卺t(yī)學雜
O
[0014]上述中藥復方制劑中都含有地黃。地黃為玄參科植物地黃(Rehm anniaglutinasa Liboschde.)的新鮮塊莖。作為常用中藥之一，地黃的臨床應用極為廣泛，尤其擅長補血、涼血、調血，常用于熱病舌絳、內熱消渴、肝腎陰虛，骨蒸潮熱等癥。依照炮制方法在藥材上分為:鮮地黃、干地黃與熟地黃，同時其藥性和功效也有較大的差異，鮮地黃為清熱涼血藥；熟地黃則為補益藥。
[0015]近年來，國內外對地黃的化學成分及藥理作用進行了很多研究。地黃的生物活性十分廣泛，化學成分以包括皂苷類、環(huán)烯醚萜甙類、多糖類等。從鮮地黃分得的環(huán)烯醚職式有:益母草式(I eonuride),桃葉珊瑚式(aucubin),梓醇(catalpol),地共同式(rehmannioside),美利妥雙式(melittoside),都桷子式(melittoside)等；多糖類:D_ 半乳糖，棉子糖，水蘇糖，甘露三糖，毛蕊花糖等，以水蘇糖的含量最高；還含賴氨酸，組氨酸，精氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，蘇氨酸(threonine)，等氨基酸以及葡萄糖胺，D-甙露醇，磷酸，β-谷留醇，胡蘿卜甙及無機元 素等。
[0016]梓醇是地黃的有效成分之一，是其“滋陰”作用的有效活性成分，為一種不很穩(wěn)定的環(huán)烯醚萜苷類化合物，常與多種環(huán)烯醚萜苷類成分如桃葉珊瑚苷和胡黃連苷等同時存在于植物組織中，具有利尿、緩瀉、降血糖、保肝及抗衰老等多種藥理活性。研究表明，在暫時缺血情況下，梓醇有顯著的神經(jīng)保護功能，并發(fā)現(xiàn)梓醇能激活腦神經(jīng)元，可以治療因外傷、代謝障礙、腦缺血和帕金森氏病等引起的腦神經(jīng)病。
[0017]本發(fā)明 申請人:通過大量實驗和研究，發(fā)明了地黃在用于制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用，特別是地黃中的梓醇成分在用于制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用。

【發(fā)明內容】
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[0018]本發(fā)明的目的在于提供了地黃在用于制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用，特別是地黃中的梓醇成分在用于制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用。
[0019]本申請的發(fā)明人通過大量的對比研究和藥理實驗，在眾多具有治療口腔潰瘍功效的中藥復方中篩選出地黃可單獨作為治療口腔潰瘍的藥物，并通過進一步的對比分析、實驗研究，從地黃的眾多有效成分中篩選出梓醇成分可單獨作為治療口腔潰瘍的藥物，并具有顯著的治療作用和愈合作用。[0020]具體地說，本發(fā)明是通過如下技術方案實現(xiàn)的。
[0021]一、地黃在用于制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用[0022] 申請人:在對眾多包含地黃的、臨床上可用于治療口腔潰瘍的中藥復方進行了分析和研究，包括六位地黃丸、知柏地黃丸等在內，發(fā)現(xiàn)地黃可單獨用于治療口腔潰瘍。不僅如此， 申請人:在對地黃治療糖尿病功效進行研究時，在進行糖尿病動物實驗中，有部分動物發(fā)生口腔潰瘍的情況，喂服地黃后發(fā)現(xiàn)3天左右潰瘍面愈合。針對這個發(fā)現(xiàn)用地黃對致病性動物進行試驗，驗證了地黃對口腔潰瘍的有效性。在此研究結果上， 申請人:對地黃進行工藝研究，提取地黃皂苷，多糖及環(huán)烯迷萜類的梓醇，并進行相關動物試驗和研究，結果顯示梓醇生物活性最強水溶性好，血管通透性明顯，治療口腔潰瘍最為有效(具體見第二點)。
[0023]此外，我們將生地黃和金銀花單獨對比進行研究和藥理實驗，具體如下:
[0024]1、實驗目的:研究生地黃與金銀花對動物實驗性口腔潰瘍的治療作用。
[0025]2、實驗方法:通過燒灼法制備口腔黏膜淺表性潰瘍模型、大鼠角叉菜膠足趾腫脹實驗、體外抑菌試驗、小鼠腹腔毛細血管通透性試驗考察生地黃與金銀花治療效果。
[0026]3、實驗材料
[0027](I)、藥品
[0028]生地黃與金銀花噴劑(生地黃與金銀花粉研細過120目篩，分裝于塑料捏噴瓶內，批號110309);生地黃與金銀花軟膏(以凡士林、羊毛脂為基質，配制成5%，10%軟膏制劑，批號1103016);生地黃與金銀花含片(含量0.5g，批號1103021)；
[0029](2)、動物
[0030]SD大鼠；日本大耳白家兔。
[0031]4、實驗方法
[0032](I)、對家兔實驗性口腔潰瘍的治療作用
[0033]日本大耳白家兔8只，公兔，體質量2.0-2.5kg，自由進水飲食，適應環(huán)境I周。以燒灼法制備口腔黏膜淺表性潰瘍模型:將動物以異戊巴比妥麻醉并固定，用內徑4mm玻璃管，內置一棉球，使棉球的底部與玻璃管下口取平，在管內滴入液化苯酚(含苯酚90% )，以浸透小棉球為宜，然后，將玻璃管下端平置于家兔左側口角頰黏膜同一部位燒灼30s，24h后在家兔燒灼黏膜部位形成直經(jīng)約4.5mm的圓形或橢圓形潰瘍，潰瘍表面呈灰白色。隨機分成I組，設為8只，。對潰瘍部位捏噴生地黃與金銀花一次，每次約12mg藥物。每日在第I次用藥前用分規(guī)測量和記錄所有動物潰瘍的大小和愈合情況。結果表明，生地黃比金銀花對家兔口腔潰瘍的療效更好，平均愈合時間為(8.2±0.6)。
[0034](2)對大鼠實驗性口腔潰瘍的治療作用
[0035]SD大鼠15只，公鼠，體質量約250g，實驗前適應環(huán)境I周，自由飲水進食。異戊巴比妥麻醉，由大鼠面頰外側進針，將15%醋酸0.05mL準確注入頰黏膜下。24h后，分開大鼠嘴唇，可見表面呈灰白色的圓形或橢圓形的潰瘍。按上述家兔的方法治療和觀察。結果表明，生地黃比金銀花對大鼠口腔潰瘍更有效，平均愈合時間為(8.5±1.2)d。
[0036]5、結論
[0037]實驗結果表明，生地黃與金銀花對動物實驗性口腔潰瘍均有治療作用果和愈合作用；生地黃與要比金銀花對實驗性口腔潰瘍的治療愈合作用更好。
[0038]二、地黃中的梓醇成分在用于制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用[0039]地黃含有眾多有效活性成分，包括皂苷類、環(huán)烯醚萜甙類、多糖類、氨基酸類等。 申請人:通過大量的研究和實驗，確定了地黃可單獨作為治療口腔潰瘍的藥物。但現(xiàn)有技術中并未公開地黃之所以具有治療口腔潰瘍的功效是因為地黃中各種有效成分的綜合作用，還是其中某一類或某一種活性成分發(fā)揮的作用；如果是某一類或某一種活性成分發(fā)揮作用，那么該活性成分是什么。為了更精確地確定地黃中對于口腔潰瘍的有效成分，提高藥物的生物利用率和更好的藥效，發(fā)明人選取了地黃中的主要有效成分地黃皂苷、地黃多糖和環(huán)烯醚萜甙類進行了對比實驗分析和研究；考慮到梓醇是環(huán)烯醚萜甙類成分的指標成分。 申請人:選取了地黃皂苷、地黃多糖和梓醇進行了對比研究，具體如下:
[0040]1、地黃皂苷對實驗性口腔黏膜潰瘍的藥效學
[0041](I)、實驗目的:研究地黃有效部位地黃皂苷對動物實驗性口腔黏膜潰瘍的治療作用。
[0042](2)實驗方法:通過燒灼法制備口腔黏膜淺表性潰瘍模型、大鼠角叉菜膠足趾腫脹實驗、體外抑菌試驗、小鼠腹腔毛細血管通透性試驗考察地黃皂苷治療效果。
[0043](3)、實驗材料
[0044]3.1 藥品
[0045]地黃皂苷噴劑(分裝于塑料捏噴瓶內，批號110409);地黃皂苷軟膏(以凡士林、羊毛脂為基質，配制成5%，10%軟膏制劑，批號1104016);地黃皂苷含片(含量0.5g，批號1104021)；
[0046]3.2 動物
[0047]SD大鼠；日本大耳白 家兔。
[0048](4)、實驗方法
[0049]4.1對家兔實驗性口腔潰瘍的治療作用
[0050]日本大耳白家兔10只，公兔，體質量2.0-2.5kg，自由進水飲食，適應環(huán)境I周。以燒灼法制備口腔黏膜淺表性潰瘍模型:將動物以異戊巴比妥麻醉并固定，用內徑4mm玻璃管，內置一棉球，使棉球的底部與玻璃管下口取平，在管內滴入液化苯酚(含苯酚90% )，以浸透小棉球為宜，然后，將玻璃管下端平置于家兔左側口角頰黏膜同一部位燒灼30s，24h后在家兔燒灼黏膜部位形成直經(jīng)約4.5mm的圓形或橢圓形潰瘍，潰瘍表面呈灰白色。分成I組，設為一組10只。對潰瘍部位捏噴地黃皂苷，每次約12mg藥物。每日在第1次用藥前用分規(guī)測量和記錄所有動物潰瘍的大小和愈合情況。結果表明，地黃皂苷對家兔口腔潰瘍的療效不顯著，實驗過程只有I只在12小時有愈合現(xiàn)象，不做統(tǒng)計。
[0051]4.2對大鼠實驗性口腔潰瘍的治療作用
[0052]SD大鼠15只，公鼠，體質量約250g，實驗前適應環(huán)境I周，自由飲水進食。異戊巴比妥麻醉，由大鼠面頰外側進針，將15%醋酸0.05mL準確注入頰黏膜下。24h后，分開大鼠嘴唇，可見表面呈灰白色的圓形或橢圓形的潰瘍。隨機分成3組，按上述家兔的方法治療和觀察。結果表明，地黃皂苷對大鼠口腔潰瘍未有療效。
[0053](5)、結論
[0054]實驗結果表明，地黃皂苷對動物模擬的口腔潰瘍未有明顯的治療作用和愈合作用。
[0055]2、地黃多糖對實驗性口腔黏膜潰瘍的藥效學[0056](I)、實驗目的:研究地黃多糖對動物實驗性口腔黏膜潰瘍的治療作用。
[0057](2)、實驗方法:通過燒灼法制備口腔黏膜淺表性潰瘍模型、大鼠角叉菜膠足趾腫脹實驗、體外抑菌試驗、小鼠腹腔毛細血管通透性試驗考察地黃多糖治療效果。
[0058](3)、實驗材料
[0059]3.1 藥品
[0060]地黃多糖(含量80% )噴劑(分裝于塑料捏噴瓶內，批號110509);地黃多糖軟膏(以凡士林、羊毛脂為基質，配制成5%，10%軟膏制劑，批號1105016);地黃多糖含片(含量 0.5g，批號 1105021) ο
[0061]3.2 動物
[0062]SD大鼠；昆明種小鼠；豚鼠；日本大耳白家兔(天津藥物研究院實驗動物中心)。
[0063](4)、實驗方法
[0064]4.1對家兔實驗性口腔潰瘍的治療作用
[0065]日本大耳白家兔24只，公兔，體質量2.0-2.5kg，自由進水飲食，適應環(huán)境I周。以燒灼法制備口腔黏膜淺表性潰瘍模型:將動物以異戊巴比妥麻醉并固定，用內徑4mm玻璃管，內置一棉球，使棉球的底部與玻璃管下口取平，在管內滴入液化苯酚(含苯酚90% )，以浸透小棉球為宜，然后，將玻璃管下端平置于家兔左側口角頰黏膜同一部位燒灼30s，24h后在家兔燒灼黏膜部位形成直經(jīng)約4.5_的圓形或橢圓形潰瘍，潰瘍表面呈灰白色。分成I組，設為一組8只。對潰瘍部位捏噴地黃多糖一下，每次約12mg藥物。每日在第1次用藥前用分規(guī)測量和記錄所有動物潰瘍的大小和愈合情況。結果表明，地黃多糖對家兔口腔潰瘍的療效有效，平均愈合時間為(8.9±0.6)d。
[0066]4.2對大鼠實驗性口腔潰瘍的治療作用
[0067]SD大鼠30只，公鼠，體質量約250g，實驗前適應環(huán)境I周，自由飲水進食。異戊巴比妥麻醉，由大鼠面頰外側進針，將15%醋酸0.05mL準確注入頰黏膜下。24h后，分開大鼠嘴唇，可見表面呈灰白色的圓形或橢圓形的潰瘍。按上述家兔的方法治療和觀察。結果表明，地黃多糖對大鼠口腔潰瘍有效，平均愈合時間為(9.l±1.2)d。
[0068](5)、結論
[0069]實驗結果表明，地黃多糖對動物模擬的口腔潰瘍具有一定治療作用，愈合時間較長；對多種細菌具有抑制作用，但不能很好降低毛細血管的通透性；不能明顯抑制致炎劑引起的炎癥反應。
[0070]3、梓醇對實驗性口腔黏膜潰瘍的藥效學
[0071](1)、實驗目的:研究梓醇對動物實驗性口腔黏膜潰瘍的治療作用。
[0072](2)、實驗方法:通過燒灼法制備口腔黏膜淺表性潰瘍模型、大鼠角叉菜膠足趾腫脹實驗、體外抑菌試驗、小鼠腹腔毛細血管通透性試驗考察梓醇治療效果。我們研制出幾無刺激性的梓醇，在家兔和大鼠模擬的口腔潰瘍模型上進行了藥效學實驗，并進行了相關的藥理、毒理實驗。
[0073](3)、實驗材料
[0074]3.1 藥品
[0075]梓醇噴劑(梓醇含量90%，分裝于塑料捏噴瓶內，批號110609);梓醇軟膏(以凡士林、羊毛脂為基質，配制成5%，10%軟膏制劑，批號1106016);梓醇含片(含量0.5g，批號1106021);桂林西瓜霜噴劑(桂林中藥制藥廠，批號110126)。
[0076]3.2 動物
[0077]SD大鼠；昆明種小鼠；豚鼠；日本大耳白家兔(天津藥物研究院實驗動物中心)。
[0078](4)、實驗方法
[0079]4.1對家兔實驗性口腔潰瘍的治療作用
[0080]日本大耳白家兔24只，公兔，體質量2.0_2.5kg，自由進水飲食，適應環(huán)境I周。以燒灼法制備口腔黏膜淺表性潰瘍模型:將動物以異戊巴比妥麻醉并固定，用內徑4mm玻璃管，內置一棉球，使棉球的底部與玻璃管下口取平，在管內滴入液化苯酚(含苯酚90%)，以浸透小棉球為宜，然后，將玻璃管下端平置于家兔左側口角頰黏膜同一部位燒灼30s，24h后在家兔燒灼黏膜部位形成直經(jīng)約4.5mm的圓形或橢圓形潰瘍，潰瘍表面呈灰白色。隨機分成3組，每組8只，設梓醇組、桂林西瓜霜對照組和空白對照組。分別對潰瘍部位捏噴梓醇和桂林西瓜霜各一下，每次約12mg藥物，bid，對照組不作任何處理。每日在第1次用藥前用分規(guī)測量和記錄所有動物潰瘍的大小和愈合情況。結果表明，梓醇對家兔口腔潰瘍的療效顯著，平均愈合時間為(3.8±0.6)d，與桂林西瓜霜的的(9.4±1.2)d和空白對照組的(9.7± 1.6) d相比，差異具有顯著性(P〈0.01)。
[0081]4.2對大鼠實驗性口腔潰瘍的治療作用
[0082]SD大鼠30只，公鼠，體質量約250g，實驗前適應環(huán)境I周，自由飲水進食。異戊巴比妥麻醉，由大鼠面頰外側進針，將15%醋酸0.05mL準確注入頰黏膜下。24h后，分開大鼠嘴唇，可見表面呈灰白色的圓形或橢圓形的潰瘍。隨機分成3組，按上述家兔的方法治療和觀察。結果表明，梓醇對大鼠口腔潰瘍的療效顯著，平均愈合時間為(3.9± 1.2) d，與桂林西瓜霜的(9.2± 1.5) d和空白對 照組的(9.8± 1.3) d相比，差異具有顯著性(P〈0.01)。
[0083](5)、藥理及毒理試驗
[0084]5.1小鼠腹腔毛細血管通透性實驗
[0085]取小鼠隨機分成3組，每組10只，其中第I組0.32g / kg梓醇溶液(以0.5%CMC-Na作溶媒)灌胃給藥，qd，連續(xù)3d ;第2組以0.32g / kg西瓜霜溶液(以0.5% CMC-Na作溶媒)給藥方法同梓醇組；第3組以0.5% CMC-Na溶液灌胃給藥0.5mL，方法同梓醇組。按Whittle法末次給藥后Ih小鼠靜注0.5%伊文氏蘭0.2mL，腹腔注射0.25%冰醋酸0.4mL /10g, 30min后殺死動物，放血后剖開腹腔，用適量純化水分次清洗腹腔，收集洗出液,過濾后定容到10mL，于616nm處分別測量吸收度并作組間統(tǒng)計學。結果表明，梓醇的毛細血管通透抑制率可達到70.40%，與西瓜霜組對照組比較，差異顯著(P〈0.01)。
[0086]5.2抗炎試驗
[0087]SD大鼠隨機分成3組，每組8只，分別涂以10%梓醇軟膏、10%桂林西瓜霜軟膏和凡士林。每組上、下午各I次于右后肢下部涂藥0.2g，連涂2d，第3天上午涂藥30min后于右后肢足趾腱膜下注射I %角叉菜膠0.1mL /只，于致炎后I~6h，分別測定(容積測量法)大鼠右后肢容積，以其致炎前后的足容積差值為腫脹程度，結果表明，梓醇有明顯的抗炎作用，梓醇與西瓜霜對照組比較，抗炎作用差異顯著(P〈0.01)。
[0088]5.3實驗室抑囷試驗
[0089]選取硫乙醇鹽液體培養(yǎng)基，在凈化臺上，加入經(jīng)精密稱定的梓醇，濃度梯度分別為1:50,1:100,1:200,1:400，1: 800，I =1600,1:3200。然后，再分別加入經(jīng)活化 24h 并稀釋100倍的金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、白色念珠菌、大腸桿菌、白色葡萄球菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌2mL ;同法做陽性對照,置37e培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每日振搖培養(yǎng)液3~4次，連續(xù)培養(yǎng)5d，每日觀察和記錄。結果在需氧菌、厭氧菌培養(yǎng)基中，梓醇對金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、白色念珠菌、白色葡萄球菌的MIC為181600 ;對大腸桿菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌的MIC為18800。
[0090]5.4梓醇急性毒性試驗
[0091]取昆明種小鼠70只，體質量18_22g，公母各半。隨機分成7組，以梓醇混懸液按不同劑量一次性灌胃，然后觀察14d。記錄逐日小鼠毒性反應及死亡數(shù)，用Bliss法以NDST程序計算小鼠的半數(shù)致死量，結果表明，小鼠經(jīng)口服LD50為2.15g / kg。
[0092]2.3.5皮膚毒性試驗
[0093]5.4.1完整皮膚毒性試驗
[0094]SD大鼠30只，隨機分成3組，于給藥前24h將大鼠背部脊柱兩側毛脫掉，去毛范圍約相當于體表面積有10%左右。第I組每只大鼠涂10%的梓醇軟膏3g，第2組每只大鼠涂50%的梓醇軟膏3g，第3組每只大鼠涂軟膏基質3g，紗布固定，24h后去除殘留的受試物和賦形劑，每日觀察，連續(xù)7d。結果3組大鼠的皮膚、毛發(fā)、眼睛、四肢活動均無變化。處死觀察肝、腎組織，未見異常。
[0095]5.4.2燙傷皮膚毒性試驗
[0096]SD大鼠20只，隨機分成2組，以上法脫毛，并造成三度燙傷，各組分別涂10%梓醇和基質，約厚2mm，每日用藥I次，連續(xù)用藥14d。停藥I周后處死動物，觀察肝、腎組織，并進行病理切片。結果未見毒性反應，肝、腎病理切片未見損傷。
[0097]5.5皮膚刺激試驗
[0098]日本大耳白家兔4只，于用藥前24h將家兔背部兩側毛脫掉，不損傷皮膚，脫毛面積為體表面積的10% (兩側各50cm2)。一側脫毛區(qū)作正常皮膚刺激試驗，分為梓醇軟膏區(qū)(給藥區(qū))和凡士林區(qū)(空白對照區(qū))，給藥區(qū)涂10%梓醇軟膏1.0g，對照區(qū)涂以等量的白凡士林；另一側脫毛區(qū)作損傷皮膚刺激試驗，給藥前用大頭針在脫毛區(qū)劃出#形擦傷，直徑2cm,以刺傷皮膚，不傷真皮，使皮膚出現(xiàn)密集出血點，立即在擦傷部位涂10%梓醇軟膏。觀察指標同上，并與對照組比較。給藥24h后擦干凈藥物和賦形劑，觀察發(fā)現(xiàn)局部無紅斑和水腫反應。然后連續(xù)涂藥7d,同樣觀察24，48，72h的皮膚反應，結果正常皮膚和破損皮膚均未發(fā)現(xiàn)紅斑和水腫反應。
[0099]5.6皮膚過敏試驗
[0100]白色豚鼠30只，體質量250_300g，公母各半，隨機分為3組，每組10只。于用藥前24h將豚鼠背部兩側對稱脫毛3mm@3mm。致敏接觸:3組分別涂0.2gl0%梓醇軟膏、陽性致敏物(2，4-二硝基氯代苯配制成I %的致敏濃度和0.1 %的激發(fā)濃度)和軟膏基質，用適宜方法固定。6、7、14d以同樣方法重復I次。激發(fā)接觸，于末次給10%梓醇軟膏致敏后的14d，將10%梓醇軟膏0.2g涂于右側脫毛區(qū)，6h后去掉10%梓醇軟膏，即刻觀察，于24、48、72h再次觀察皮膚過敏反應情況。試驗結果梓醇和基質組對豚鼠均無致敏性，與陽性對照組比較差異有極顯著性。
[0101](6)、結論
[0102]實驗結果表明，對動物實驗性口腔黏膜潰瘍有顯著的治療作用和促進愈合作用；對多種細菌有較強的抑制作用；能明顯抑制致炎劑引起的炎癥和降低毛細血管通透性。各項指標與對照組相比存在顯著性差異(p〈0.05)。梓醇局部給藥能在潰瘍面上保持較大的接觸面積和較長的時間，有利于保護創(chuàng)面和發(fā)揮療效，是局部用藥的理想藥品。
[0103]4、對地黃皂苷、地黃多糖和梓醇對口腔潰瘍實驗結果的對比和分析
[0104]
【權利要求】
1.地黃在制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用。
2.地黃作為唯一原料藥在制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用。
3.梓醇在制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用。
4.梓醇作為唯一活性成分在制備治療口腔潰瘍的藥物中的應用。
5.—種治療口腔潰瘍的藥物，其特征在于:活性成分為梓醇，輔料為藥劑學上的常用制劑輔料，按照藥劑學上常規(guī)的制劑方法制成。
6.一種如權利要求5所述的藥物，其特征在于為噴劑。
7.—種如權利要求 5所述的藥物，其特征在于為片劑。
【文檔編號】A61P1/02GK103494938SQ201310444993
【公開日】2014年1月8日 申請日期:2013年9月27日 優(yōu)先權日:2013年9月27日
【發(fā)明者】張玲 申請人:張玲