一種痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用，其特征在于痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱具有新的用途。本發(fā)明的藥理試驗(yàn)結(jié)果表明，痹克片對(duì)尿酸鈉致痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠具有一定的治療作用，表現(xiàn)為抑制踝關(guān)節(jié)腫脹度、改善大鼠腫脹足步態(tài)、減輕腫脹足疼痛感；痹克片對(duì)酵母膏致高尿酸血癥大鼠也具有一定的防治作用，痹克片不同程度降低大鼠血清尿酸和黃嘌呤氧化酶活性、促進(jìn)24h尿量及24h尿酸總排泄量增加。
【專利說(shuō)明】一種痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種已知物質(zhì)的新用途，確切地說(shuō)是一種痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】[0002]痛風(fēng)是指長(zhǎng)期嘌呤代謝異常、血尿酸增高引起組織損傷的一組疾病，屬中醫(yī)的痹證、痛風(fēng)、歷節(jié)等范疇，是指因外邪阻滯經(jīng)絡(luò)，氣血凝滯，肝腎兩虛引起的關(guān)節(jié)肌肉疼痛麻木、重著、屈伸不利的病癥，慢性病人多伴有關(guān)節(jié)畸形僵硬、痛風(fēng)石、腎臟病變等。我國(guó)痛風(fēng)發(fā)病率高達(dá)1.14%，男性發(fā)病率明顯高于女性，比例約為20:1.[0003]痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎是嘌呤代謝障礙、血尿酸增高所致反復(fù)發(fā)作的關(guān)節(jié)炎癥，有急、慢性之分。急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎的發(fā)作是由于血尿酸濃度過(guò)高，呈過(guò)飽和狀態(tài)，從而使尿酸鈉微結(jié)晶沉積在關(guān)節(jié)軟骨、骨膜及周圍組織中，激活局部單核巨噬細(xì)胞，誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞等炎細(xì)胞浸潤(rùn)，分泌炎癥因子等一系列炎癥反應(yīng)，最終造成關(guān)節(jié)損傷。但部分急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)作時(shí)也可無(wú)高尿酸血癥,而某些大量痛風(fēng)石的患者,往往無(wú)急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎發(fā)作史。當(dāng)血尿酸水平持續(xù)超過(guò)其飽和度時(shí)，可致尿酸鹽以結(jié)晶形式沉積在關(guān)節(jié)軟骨、骨質(zhì)、滑膜、肌腱和皮下組織，引起慢性炎癥反應(yīng)，其周圍有大量單核吞噬細(xì)胞包繞，形成上皮肉芽腫。急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎反復(fù)發(fā)作可發(fā)展為多關(guān)節(jié)受累，并從急性期的關(guān)節(jié)局部腫脹發(fā)展為慢性期骨內(nèi)痛風(fēng)石造成的局部骨質(zhì)缺損和關(guān)節(jié)畸形。
[0004]痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎屬中醫(yī)痹證、痛風(fēng)、歷節(jié)等范疇?！端貑?wèn).痹論篇》有謂:“所謂痹者，各以其時(shí)，重感風(fēng)寒濕之氣也”，從而奠定了中醫(yī)對(duì)痹證的認(rèn)識(shí)。并對(duì)其證候進(jìn)一步分類為“其風(fēng)氣勝者為行痹；寒氣勝者為痛痹；濕氣勝者為著痹”。究其病因，主要責(zé)于正氣不足，感受風(fēng)、寒、濕、熱之邪所致。其中，感受風(fēng)熱，與濕相博，是為痹證濕熱證，亦有感受風(fēng)濕，郁久化熱，是謂風(fēng)濕郁熱證。
[0005]痹克片是貴州苗族民間經(jīng)典驗(yàn)方，選云貴高原天然野生的中草藥白斂，五匹鳳，腫節(jié)風(fēng)，青風(fēng)藤，追風(fēng)傘等數(shù)味中藥為原料，制成的純中藥提取物(生物堿)制劑，經(jīng)臨床驗(yàn)證療效確切，本品清熱除濕，活血止痛。用于痹病濕熱痹阻，淤血阻絡(luò)證所致的肌肉、關(guān)節(jié)疼痛，以及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等具有良好療效。
[0006]我們?cè)谂R床推廣過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，痹克片對(duì)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎風(fēng)濕郁熱證有著較為顯著的治療效果，極具臨床推廣使用價(jià)值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的是提供一種一種痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的新用途。
[0008]上述目的通過(guò)以下方案實(shí)現(xiàn):
[0009]本發(fā)明的特征在于:是由以下重量份的白蘞500-1500、腫節(jié)風(fēng)200-400、五匹風(fēng)200-400、追風(fēng)傘200-400、青風(fēng)藤500-1500、知母100-200、丹參100-200組成的復(fù)方中藥痹
克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用。[0010]所述的復(fù)方中藥的新用途，其特征在于:是由以下重量份的白蘞1000、腫節(jié)風(fēng)333.3、五匹風(fēng)333.3、追風(fēng)傘333.3、青風(fēng)藤1000、知母166.7、丹參166.7組成的復(fù)方中藥痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用。
[0011]所述的痹克片在治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎風(fēng)濕郁熱證中的應(yīng)用。
[0012]所述的復(fù)方中藥可以為片劑(痹克片)、膠囊劑(痹克膠囊)或顆粒劑(痹克顆粒)。
[0013]本發(fā)明的有益效果為:
[0014]藥理試驗(yàn)結(jié)果表明，痹克片對(duì)尿酸鈉致痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠具有一定的治療作用，表現(xiàn)為抑制踝關(guān)節(jié)腫脹度、改善大鼠腫脹足步態(tài)、減輕腫脹足疼痛感；痹克片對(duì)酵母膏致高尿酸血癥大鼠也具有一定的防治作用，痹克片不同程度降低大鼠血清尿酸和黃嘌呤氧化酶活性、促進(jìn)24h尿量及24h尿酸總排泄量增加。
[0015]以上藥理試驗(yàn)結(jié)果無(wú)疑為痹克片治療痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎提供了試驗(yàn)依據(jù)。且相對(duì)于西藥效果更佳，從而為傳統(tǒng)中藥制劑增加了新的治療用途，極具推廣使用價(jià)值。
【具體實(shí)施方式】
[0016]本發(fā)明是由以下重量份的白蘞1000、腫節(jié)風(fēng)333.3、五匹風(fēng)333.3、追風(fēng)傘333.3、青風(fēng)藤1000、知母166.7、丹參166.7組成的復(fù)方中藥在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用。
[0017]發(fā)明人已通過(guò)大鼠實(shí)驗(yàn) 與臨床實(shí)驗(yàn)證明了本發(fā)明在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用。
[0018]一、動(dòng)物試驗(yàn)
[0019]I 材料
[0020]1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
[0021]雄性SD大鼠120只，體重180_220g，安徽長(zhǎng)臨河醫(yī)藥科技有限公司提供。實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)lw，動(dòng)物自由攝食、飲水，室溫控制在20-25°C，濕度40%-60%。
[0022]1.2藥物與試劑
[0023]痹克片(合肥今越制藥有限公司，批號(hào):121201)，別嘌呤醇片(合肥久聯(lián)制藥有限公司，批號(hào):20120825),秋水仙堿片(西雙版納版納藥業(yè)有限責(zé)任公司，批號(hào):120611),酵母膏(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào):20121108)，尿酸(Sigma公司，批號(hào):20101124)，氫氧化鈉(上海蘇懿化學(xué)試劑有限公司，批號(hào):201002201);尿酸測(cè)定試劑盒(北京利德曼生化股份有限公司，批號(hào):206072E)，黃嘌呤氧化酶測(cè)試盒(南京建成生物工程研究所，批號(hào):20130401);水合氯醛(國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號(hào):20090724);生理鹽水(安徽豐原藥業(yè)股份有限公司，批號(hào):091135)。
[0024]1.3主要儀器
[0025]AU640型全自動(dòng)生化分析儀，日本奧林巴斯；BS-110S精密電子天平，北京賽多利斯天平有限公司JDL-16C臺(tái)式高速離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠；MP6001電子天平，上海恒平科學(xué)儀器有限公司產(chǎn)品；YLS-7A型足趾容積測(cè)量?jī)x，山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站；UV-160型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)，上海美譜達(dá)儀器有限公司生產(chǎn)；TGL-16G型離心機(jī)，上海安亭科學(xué)儀器廠產(chǎn)品；HH-S2系列恒溫水浴鍋，江蘇省金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠等。
[0026]2 方法
[0027]2.1痹克片對(duì)尿酸鈉致痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠的影響
[0028]2.1.1尿酸鈉結(jié)晶及尿酸鈉溶液的制備[0029]將6mLlmol/L的NaOH和Ig尿酸加入至194mL蒸餾水中煮沸，待尿酸完全溶解后，滴入lmol/LHCL調(diào)pH值至7.2，溶液呈現(xiàn)乳白色后，攪拌冷卻，再將其貯存于4°C冰箱中，24h后除去上清液，用濾紙將析出沉淀物水份吸干，至烘箱內(nèi)干燥即得尿酸鈉結(jié)晶。使用前180°C滅菌2h，稱取尿酸鈉結(jié)晶1250mg，用45mL生理鹽水、5mL吐溫80配制成25mg/mL50mL尿酸鈉溶液，并通過(guò)超聲破碎處理,備用。
[0030]2.1.2模型的制備
[0031]Coderr經(jīng)典方法:將大鼠緊握于手掌中俯臥固定，再將其右踝關(guān)節(jié)彎曲，捫及兩骨突起，局部消毒后，用4號(hào)注射針自兩骨突之間45°方向進(jìn)針，插入脛骨肌腱內(nèi)側(cè)，感覺(jué)有脫空感后，注入尿酸鈉溶液0.1mL,以關(guān)節(jié)囊對(duì)側(cè)鼓起為注入標(biāo)準(zhǔn)，制備痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型。正常對(duì)照組右踝關(guān)節(jié)腔注射等容量對(duì)照液。密切觀察在模型制備后6-72h內(nèi)，痹克片對(duì)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹度、步態(tài)、屈關(guān)節(jié)疼痛感的影響。[0032]2.1.3實(shí)驗(yàn)分組與給藥
[0033]取體質(zhì)量180_220g、健康雄性SD大鼠60只，常規(guī)飼養(yǎng)觀察lw。大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、秋水仙堿組(0.3mg.kg-1)、痹克片高(1440mg.kg-1)，中(480mg.kg-1)，低劑量組(160mg.kg-1)，每組10只，各組分別灌服相應(yīng)藥物，正常對(duì)照組和模型組給予等容量蒸餾水，I次/d，連續(xù)15d。實(shí)驗(yàn)每5d稱取動(dòng)物體重I次，根據(jù)體重調(diào)整給藥容量。
[0034]2.1.4觀察指標(biāo)
[0035]2.1.4.1 一般狀態(tài)觀察
[0036]每日觀察動(dòng)物的外觀、毛色、活動(dòng)、食量、二便，實(shí)驗(yàn)每5d稱體重I次，記錄動(dòng)物體重的變化并調(diào)整給藥容量。制備痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型后密切觀察大鼠活動(dòng)情況。
[0037]2.1.4.2踝關(guān)節(jié)腫脹率檢測(cè)
[0038]實(shí)驗(yàn)第15d末次給藥Ih后，先在每組大鼠右后足踝關(guān)節(jié)偏上Icm處用筆標(biāo)記一圈，再將標(biāo)記的大鼠右后足置YLS-7A型足趾容積測(cè)量?jī)x內(nèi)，測(cè)量各組大鼠右踝關(guān)節(jié)容積，作為造模前各組大鼠右踝關(guān)容積值。測(cè)量后，按上述方法建立痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎模型，各組于建模611、1211、2411、4811、7211后測(cè)量大鼠右踝關(guān)節(jié)容積，以造模后與造模前右踝關(guān)節(jié)容積計(jì)算右踝關(guān)節(jié)腫脹率。
[0039]腫脹率(%) =(致炎后踝關(guān)節(jié)容積-致炎前踝關(guān)節(jié)容積)/致炎前踝關(guān)節(jié)容積 X 100%O
[0040]2.1.4.3行為學(xué)評(píng)分
[0041]造模6h、12h、24h、48h、72h后按Coderre等方法觀察大鼠步行時(shí)步態(tài)。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)改良為:
[0042]O級(jí):正常步態(tài)，雙足均勻著地，計(jì)O分；
[0043]I級(jí):輕度跛行，注射尿酸鈉的下肢略有彎曲，計(jì)I分；
[0044]II級(jí):中度跛行，注射尿酸鈉的下肢剛觸及地面，計(jì)2分；
[0045]III級(jí):嚴(yán)重跛行，注射尿酸鈉的下肢離開(kāi)地面，出現(xiàn)3肢行走步態(tài)，計(jì)3分。
[0046]2.1.4.4屈關(guān)節(jié)疼痛度評(píng)分
[0047]造模6h、12h、24h、48h、72h后參照文獻(xiàn)中慢性關(guān)節(jié)痛的測(cè)定評(píng)分方法及標(biāo)準(zhǔn)略以改進(jìn)。踝關(guān)節(jié)疼痛實(shí)驗(yàn)評(píng)分方法:將大鼠裝進(jìn)特制的鼠筒內(nèi)，后腿及尾部伸出筒外，穩(wěn)定幾分鐘后測(cè)定，向腳掌側(cè)緩慢屈曲動(dòng)物的右側(cè)踝關(guān)節(jié)，每隔5秒進(jìn)行I次，共5次。屈關(guān)節(jié)時(shí)，動(dòng)物出現(xiàn)短促而明顯的縮腿反應(yīng)或撕叫則評(píng)為I分，無(wú)反應(yīng)為O分。
[0048]2.2痹克片對(duì)酵母膏致高尿酸血癥大鼠的影響
[0049]2.2.1酵母膏致致高尿酸血癥大鼠模型
[0050]按照文獻(xiàn)的方法造模:以酵母膏20g/kg灌胃，I次/d，連續(xù)10d，復(fù)制大鼠高尿酸血癥模型，空白組給予等體積蒸餾水。實(shí)驗(yàn)第5天稱取動(dòng)物體重I次，根據(jù)體重調(diào)整酵母膏給予容量。
[0051]2.2.2實(shí)驗(yàn)分組與給藥
[0052]取體質(zhì)量180_220g、健康雄性SD大鼠60只，常規(guī)飼養(yǎng)觀察lw。大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、別嘌呤醇組(20mg.kg-1)、痹克片高(1440mg.kg-1),中(480mg.kg-1),低劑量組(160mg.kg-1)，每組10只，各組分別灌服相應(yīng)藥物，正常對(duì)照組和模型組給予等容量蒸餾水，I次/d，連續(xù)15d。實(shí)驗(yàn)每5天稱取動(dòng)物體重I次,根據(jù)體重調(diào)整給藥容量。
[0053]給藥第5天，按照上述方法建立高尿酸血癥大鼠模型，正常對(duì)照組和模型組給予等容量蒸餾水。實(shí)驗(yàn)第13天開(kāi)始收集大鼠24h尿液，記錄尿量，按磷鎢酸法測(cè)定尿液中尿酸值，并計(jì)算24h尿酸排泄量。第15天給藥Ih后，腹主動(dòng)脈取血，分離血清，按磷鎢酸法測(cè)定血清尿酸值，按酶比色法測(cè)定血清黃嘌呤氧化酶活性。
[0054]2.2.3觀察指標(biāo)
[0055]2.2.3.1 一般狀態(tài)觀察
[0056]每日觀察動(dòng)物的外觀、毛色、活動(dòng)、食量、二便，實(shí)驗(yàn)每5d天稱動(dòng)物體重I次，觀察動(dòng)物體重的變化并調(diào)整灌胃容量。
[0057]2.2.3.2血清中尿酸及黃嘌呤氧化酶的測(cè)定
[0058]實(shí)驗(yàn)第15天給藥Ih后，腹主動(dòng)脈取血，分離血清，測(cè)定血清中尿酸及黃嘌呤氧化酶，按照試劑盒說(shuō)明書的方法檢測(cè)。
[0059]2.2.3.324h尿量及尿液尿酸水平的測(cè)定
[0060]實(shí)驗(yàn)第13天開(kāi)始收集大鼠24h尿液，記錄尿量，按磷鎢酸法測(cè)定尿液中尿酸值，并計(jì)算24h尿酸排泄量。
[0061]2.3實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)方法與處理
[0062]實(shí)驗(yàn)結(jié)果連續(xù)型變量均以“均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差(? 士s)”表示，應(yīng)用SPSS16.0forwindows軟件系統(tǒng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。組間比較采用One-Way ANOVA分析。P〈0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
[0063]3 結(jié)果
[0064]3.1痹克片對(duì)尿酸鈉致痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠的影響
[0065]3.1.1動(dòng)物一般狀態(tài)觀察
[0066]正常對(duì)照組大鼠毛色致密光滑，反應(yīng)靈敏，兩眼有神，活躍，飲食與二便正常。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始后，痹克片高、中、低劑量組大鼠毛色致 密光滑，反應(yīng)靈敏，兩眼有神，活動(dòng)自如，飲食與二便正常；造模組大鼠活動(dòng)量逐漸減少，毛色稍欠光澤，飲食與二便皆正常。秋水仙堿組大鼠毛色亦欠光澤，精神欠佳，懶動(dòng)，食量稍減少，二便正常。
[0067]3.1.2痹克片對(duì)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹率的影響
[0068]模型組大鼠右踝關(guān)節(jié)注射尿酸鈉溶液6h后，關(guān)節(jié)明顯腫脹，12h關(guān)節(jié)腫脹度達(dá)高峰，關(guān)節(jié)腫脹率在24h、48h、72h雖有所減退，但與正常對(duì)照組比較，兩組差別仍具有非常顯著意義(P〈0.01)。與模型組比較，痹克片高劑量組(1440mg/kg)在造模后6h、12h、48h大鼠關(guān)節(jié)腫脹率均明顯降低(P〈0.05)，痹克片中劑量組(480mg/kg)在造模后6h大鼠關(guān)節(jié)腫脹率明顯降低(P〈0.05)，痹克片低劑量組(160mg/kg)大鼠關(guān)節(jié)腫脹率有降低的趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表1。
[0069]表1痹克片對(duì)痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠踝關(guān)節(jié)腫脹率的影響(λ: 土S)
[0070]
【權(quán)利要求】
1.一種痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用，其特征在于痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱具有新的用途。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用，其特征在于:所述的痹克片是由以下重量份的原料組成的:白蘞500-1500、腫節(jié)風(fēng)200-400、五匹風(fēng)200-400、追風(fēng)傘 200-400、青風(fēng)藤 500-1500、知母 100-200、丹參 100-200。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種痹克片在治療痛風(fēng)風(fēng)濕郁熱的應(yīng)用，其特征在于:所述的痹克片可以為片劑、膠囊 劑或顆粒劑。
【文檔編號(hào)】A61P29/00GK103505618SQ201310415770
【公開(kāi)日】2014年1月15日 申請(qǐng)日期:2013年9月12日 優(yōu)先權(quán)日:2013年9月12日
【發(fā)明者】趙棟磊, 楊波, 劉廷武, 王旦, 李洋, 田開(kāi)鵬 申請(qǐng)人:合肥今越制藥有限公司