一種從卷柏中提取總黃酮的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種從卷柏中提取總黃酮的方法，即采用表面活性劑輔助微波提取卷柏中的總黃酮。即將卷柏全株干燥并粉碎，用含有適當濃度表面活性劑的稀乙醇水溶液浸沒，多次微波照射提取，提取后快速上大孔樹脂柱吸附，乙醇洗脫干燥得到卷柏總黃酮。本發(fā)明的優(yōu)點是微波提取技術(shù)和表面活性劑結(jié)合起來運用到卷柏總黃酮的提取中，減少了溶劑使用量，提高了提取效率，對設(shè)備要求不高，流程簡單適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【專利說明】一種從卷柏中提取總黃酮的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種從卷柏中提取總黃酮的方法，更具體涉及一種利用表面活性劑輔助微波提取卷柏中總黃酮的方法，屬于醫(yī)藥化工領(lǐng)域范疇。

【背景技術(shù)】
[0002]卷柏(Herba Selaginellae),為石松植物門_石松綱-卷柏目-卷柏科植物，又名九死還魂草，過去劃為蕨類植物門。其干燥全草，具有活血通經(jīng)之功效，為2010年版《中國藥典(一部)》所收載。近年來，國內(nèi)外學者對卷柏屬植物的化學成分進行了大量的研究，報道發(fā)現(xiàn)的活性成分主要是黃酮類化合物和有機酸類，還發(fā)現(xiàn)了色酮。其中黃酮類物質(zhì)藥理作用顯著，全草含蘇鐵雙黃酮(sotetsuf Iavone),穗花杉雙黃酮(amentof Iavone),扁柏雙黃酮(hinokifIavone)，異柳杉雙黃酮(isocryptomerin)，柳杉雙黃酮(cryptomerin)B,芹菜素(apigenin)。其中穗花杉雙黃酮的含量遠遠高于其他中草藥。穗花杉雙黃酮是一種磷酸酯酶C的抑制劑，在一些腫瘤中，磷酸肌醇的轉(zhuǎn)換增強，磷酸酯酶C是磷酸肌醇轉(zhuǎn)換的限速酶。穗花杉雙黃酮通過抑制過分表達的磷酸酯酶C，從而抑制磷酸肌醇的轉(zhuǎn)換。其他幾種卷柏來源的雙黃酮對多種人癌細胞也有顯著的細胞毒性。這些說明卷柏屬藥用植物總黃酮是潛在的抗癌藥物，此外卷柏中的黃酮類物質(zhì)是具有很強的抗氧化性，可有效清除體內(nèi)自由基，抑制油脂性過氧化物的合成，阻止細胞的退化，衰老，改變血液循環(huán)，降低膽固醇，提高人體免疫力。綜上所述，卷柏中的總黃酮類物質(zhì)極具開發(fā)成藥物的潛在價值。
[0003]公開的文獻和專利報道的方法普遍采用常規(guī)溶劑浸潤后回流提取。由于卷柏組織溶脹破壁效果差，需多次回流提取，導致溶劑消耗量大、提取耗時長，雜質(zhì)多，工業(yè)化生產(chǎn)成本高。我們采用的微波協(xié)同表面活性劑提取技術(shù)，原理是微波能從細胞內(nèi)部迅速升溫，使細胞迅速溶脹，促進黃酮類物質(zhì)溶出并向外擴散，同時添加表面活性劑，可以降低細胞膜和溶劑間的表面張力，能增強溶劑對卷柏細胞組織的潤濕性和滲透性，對總黃酮也具助溶作用，可以減少提取溶劑的用量，提高提取效率。目前尚未有公開卷柏總黃酮類物質(zhì)的表面活性劑輔助微波提取方法的相關(guān)報道。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是為了提供一種從卷柏中提取總黃酮的方法，該方法可以節(jié)約提取溶劑，降低提取能耗，提高提取效率，生產(chǎn)出成本更低，質(zhì)量更優(yōu)的卷柏總黃酮。
[0005]為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明運用表面活性劑輔助微波的方法，制備卷柏總黃酮，包括以下步驟下:
[0006](I)將卷柏全株晾曬干燥后，粉碎過40?60目篩；
[0007](2)將所述的卷柏粉末加入一定濃度的乙醇水溶液中，卷柏粉末和乙醇水溶液的重量比為1: 20?1: 40 (kg/L)，再添加混合物重量0.3?0.8%的表面活性劑；
[0008](3)在微波功率為400?600w/L的條件下，作用2?5min，控制溫度在65?80°C攪拌提取，攪拌強度為60?100rpm/min,重復作用10?20次；
[0009](4)將所述的提取液過濾后，加入0.3?1.0% (V/V)的無機酸，調(diào)ρΗ3.0?4.0為宜，流過大孔吸附樹脂進行吸附，流速為2?3BV/h ；
[0010](5)用95% (V/V)乙醇洗脫，減壓濃縮去除乙醇，堿溶酸沉，過濾后用95%乙醇結(jié)晶，干燥得到卷柏總黃酮。
[0011]本發(fā)明步驟⑵中乙醇水溶液的質(zhì)量百分比濃度為20?35%，優(yōu)濃度為30%。
[0012]本發(fā)明步驟(2)中表面活性劑為十二烷基硫酸鈉(SDS)或者十二烷基苯磺酸鈉(LAS)或者十六烷基三甲基氯化銨(1631)，表面活性劑可以降低固液相的界面張力，縮短浸潤時間，提聞提取效率。
[0013]本發(fā)明步驟(4)中的過濾方法包括離心機甩濾、陶瓷膜過濾，優(yōu)選陶瓷膜過濾，該方法濾液澄清度高，減少下一步大孔吸附的負擔。
[0014]本發(fā)明步驟(4)中的大孔吸附樹脂選用對卷柏總黃酮的吸附率和解析率較高的ADS-17，AB-8或DM130 ;達到85%以上，更優(yōu)選的樹脂吸附率和解析率分別達到92.1%和94.5%。
[0015]本發(fā)明步驟(4)中的過柱后流出液，加入步驟(4)中等摩爾量的濃度在0.3?1.0% (V/V)無機堿后，可以直接用來投入到下一批卷柏的提取工序中，省去回收溶劑的工序。
[0016]本發(fā)明利用表面活性劑輔助微波提取卷柏中總黃酮具有如下優(yōu)點:(I)提取時間短，速度快，能耗低；(2)利用表面活性劑增容作用，輔助微波提取，溶劑消耗少，溶劑濃度低；(3)低乙醇濃度的提取液無需濃縮去除溶劑，調(diào)pH后直接可過柱吸附總黃酮，過柱液可以套用，重新用來提取卷柏，減少回收溶劑的能耗和溶劑損失，同時減少過柱廢液的排放量。

【具體實施方式】
[0017]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進一步描述，但本發(fā)明要求保護保護的范圍絕不局限于下列實施方式。
[0018]實施例一:
[0019]取將卷柏全株晾曬干燥后，粉碎過50目篩，稱取100g，加入3L的25% (V/V)乙醇水溶液，再添加15g十二燒基硫酸鈉,60rpm/min攪拌下,調(diào)節(jié)微波功率400w/L,照射4min,冷卻控制溫度在65?80°C，再重復照射15次。將提取液用陶瓷膜過濾，加入0.5% (V/V)鹽酸溶液調(diào)節(jié)PH3.0，流過大孔吸附樹脂AB-8進行吸附，流速為3BV/h ;用95% (V/V)乙醇洗脫，減壓濃縮去除乙醇后用95%乙醇結(jié)晶，過濾干燥得到卷柏總黃酮；大孔吸附樹脂流出液用0.5% NaOH調(diào)節(jié)pH至6.0，作為下一批次卷柏的提取溶劑。
[0020]實施例二:
[0021]取將卷柏全株晾曬干燥后，粉碎過40目篩，稱取100g，加入2.5L的30% (V/V)乙醇水溶液，再添加20g十六燒基三甲基氯化銨,60rpm/min攪拌下,調(diào)節(jié)微波功率500w/L,照射2min，冷卻控制溫度在65?80°C，再重復照射10次。將提取液用陶瓷膜過濾，加入0.5%(V/V)鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH3.0，流過大孔吸附樹脂DM130進行吸附，流速為3BV/h ;用95% (V/V)乙醇洗脫，減壓濃縮去除乙醇后用95%乙醇結(jié)晶，過濾干燥得到卷柏總黃酮；大孔吸附樹脂流出液用0.5% NaOH調(diào)節(jié)pH至6.0,作為下一批次卷柏的提取溶劑。
[0022]實施例三:
[0023]取將卷柏全株晾曬干燥后，粉碎過60目篩，稱取100g，加入3.5L的30% (V/V)乙醇水溶液，再添加25g十二燒基苯磺酸鈉,70rpm/min攪拌下,調(diào)節(jié)微波功率500w/L,照射2min，冷卻控制溫度在65?80°C，再重復照射12次。將提取液用陶瓷膜過濾，加入0.6%(V/V)鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH3.0，流過大孔吸附樹脂DM130進行吸附，流速為3BV/h ;用95% (V/V)乙醇洗脫，減壓濃縮去除乙醇后用95%乙醇結(jié)晶，過濾干燥得到卷柏總黃酮；大孔吸附樹脂流出液用0.5% NaOH調(diào)節(jié)pH至6.0,作為下一批次卷柏的提取溶劑。
【權(quán)利要求】
1.一種從卷柏中提取總黃酮的方法，其特征在于利用表面活性劑輔助微波提取卷柏中總黃酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的利用表面活性劑輔助微波提取卷柏中總黃酮的方法，其特征包括如下步驟: (1)將卷柏全株晾曬干燥后，粉碎過40?60目篩； (2)將所述的卷柏粉末加入一定濃度的乙醇水溶液中，卷柏粉末和乙醇水溶液的重量比為1: 20?1: 40 (kg/L)，再添加混合物重量0.3?0.8%的表面活性劑； (3)在微波功率為400?600w/L的條件下，作用2?5min，控制溫度在65?80°C攪拌提取，攪拌強度為60?100rpm/min,重復作用10?20次； (4)將所述的提取液過濾后，加入0.3?1.0% (v/v)的無機酸，調(diào)pH3.0?4.0為宜，流過大孔吸附樹脂進行吸附，流速為2?3BV/h ； (5)用乙醇洗脫，減壓濃縮去除乙醇，堿溶酸沉，過濾后用95%乙醇結(jié)晶，過濾干燥得到卷柏總黃酮。
【文檔編號】A61K36/11GK104248648SQ201310274414
【公開日】2014年12月31日 申請日期:2013年6月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年6月28日
【發(fā)明者】魏元剛, 楊永安, 易銘, 章海燕, 唐希燦 申請人:江蘇天晟藥業(yè)有限公司