專利名稱：一種中藥組合物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種天然藥物組合物，更具體地涉及一種由山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚組成的天然藥物組合物，該天然藥物組合物的制備方法以及該天然藥物組合物在用于制備減少癌癥化療相關性腹瀉并對癌癥治療起增效作用的藥物中的用途。
背景技術：
惡性腫瘤是當前危害人類生存，健康的主要疾病之一，其治療手段包括手術、化療、放療、中醫(yī)藥治療，而化療治療腫瘤的效果尤為突出。化療藥單用或聯(lián)合用均會引起患者腹瀉等毒副反應，腫瘤化療后腹瀉又叫化療相關性腹瀉。近年來隨著化療藥物如5-氟尿嘧啶、紫杉烷類、羥基喜樹堿、伊立替康、希羅達等的面世及推廣應用，化療相關性腹瀉的發(fā)生率逐年提高，而且若不進行積極治療，易導致患者脫水、營養(yǎng)不良、血清電解質紊亂、酸堿平衡失調等，不僅對機體的康復帶來極大的不利，也給周期性化療帶來一定的困難，因此對化療相關性腹瀉的有效治療已成為腫瘤患者整體治療的重要組成部分。化療相關性腹瀉就其臨床表現來看，當屬中醫(yī)學“泄瀉”范疇，中醫(yī)藥對于泄瀉的研究，令人矚目，但是目前尚無對抗癌癥化療具有減輕腹瀉及增效作用的中成藥。因此，研發(fā)一種高效低毒、價格低廉，易于推廣的可用于減輕癌癥化療相關性腹瀉并起化療增效作用的天然中藥成為臨床亟待解決的問題。

山楂主治飲食積滯，泄瀉痢疾。丁香為桃金娘科蒲桃屬植物丁香的花蕾和果實，用于治療呃逆、吐瀉，主治痢疾。近年來，山楂和丁香抗癌作用得到證實，本發(fā)明人經過大量的各配方比例的研究和實驗，最后獲得了本發(fā)明的最佳藥物比例組合物，并證明了其對癌癥化療相關性腹瀉有極好的療效并能同時對化療增效，由此完成了本發(fā)明。

發(fā)明內容
本發(fā)明提供的一種天然藥物組合物，由山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚以重量計按2-4: 3-6: 3-7: 5-8的比例組成。上述天然藥物組合物，其中山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚的用量比例是4: 6: 7: 8。其中，山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物可通過本領域技術人員公知的常規(guī)方法進行提純獲得，采用常規(guī)方法獲得的這些成分或采用商業(yè)購得的成分組成的本發(fā)明的天然藥物均能獲得相同的療效。優(yōu)選地，上述天然藥物組合物中山楂丁香水煎濃縮提取物的制備方法是:按照配伍比例為1-4: I取山楂、丁香，蒸餾水浸泡lh，加熱煎煮，絹布過濾，藥渣再加蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，加熱濃縮至小體積，超濾膜過濾，70°C減壓干燥，即得。上述天然藥物組合物中山楂總黃酮的制備方法是:
取山楂果肉，以60%乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，回收乙醇，得浸膏，浸膏分別加入適量蒸餾水，攪勻，加入CaCl2Ig,靜置過夜，離心，收集上清液，用氨水調pH至7 8，加入大孔吸附樹脂柱中，調節(jié)流速5mL/min，用蒸餾水洗去雜質，以乙醇為流動相解吸附，回收乙醇，即得。上述天然藥物組合物中丁香乙醇提取物制備方法是:取丁香，干燥，粉碎，過篩，用乙醇浸泡12h，過濾，殘渣繼續(xù)浸泡12h，將兩次濾液合并，3000rpm離心15min，分離上清液，蒸餾去除乙醇，乙酸乙酯提取，再減壓干燥成干浸膏，粉碎，過篩，即得。上述天然藥物組合物中丁香酚制備方法是:將丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，過濾，濾液用5%的氫氧化鈉固定，過濾，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水層鹽酸酸化，調溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用無水硫酸鈉干燥，蒸除乙醚，得淡黃色油狀液體，即為丁香酚。本發(fā)明還提供了該天然藥物組合物的優(yōu)選的制備方法，包括:(I)山楂丁香水煎濃縮提取物的制備按照配伍比例為1-4: I取山楂、丁香，蒸餾水浸泡lh，加熱煎煮，絹布過濾，藥渣再加蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，加熱濃縮至小體積，超濾膜過濾，70°C減壓干燥，即得。(2)山楂總黃酮的制備取山楂果肉，以60%乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，回收乙醇，得浸膏，浸膏分別加入適量蒸餾水，攪勻，加入CaCl2Ig,靜置過夜，離心，收集上清液，用氨水調pH至7 8，加入大孔吸附樹 脂柱中，調節(jié)流速5mL/min，用蒸餾水洗去雜質，以乙醇為流動相解吸附，回收乙醇，即得。(3) 丁香乙醇提取物制備取丁香，干燥，粉碎，過篩，用乙醇浸泡12h，過濾，殘渣繼續(xù)浸泡12h，將兩次濾液合并，3000rpm離心15min，分離上清液，蒸餾去除乙醇，乙酸乙酯提取，再減壓干燥成干浸膏，粉碎，過篩，即得。(4) 丁香酚制備將丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，過濾，濾液用5%的氫氧化鈉固定，過濾，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水層鹽酸酸化，調溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用無水硫酸鈉干燥，蒸除乙醚，得淡黃色油狀液體，即為丁香酚。(5)按比例取山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚，均勻混合，即得。上述天然藥物組合物的制備方法，還包括:將步驟(5)制得的產品進一步通過常規(guī)的制藥手段制成含有天然藥物組合物IOOmg或200mg規(guī)格的膠囊或片劑。本發(fā)明天然藥物組合物在抗化療相關性腹瀉及抑制腫瘤方面的有益效果如下:1、本發(fā)明天然藥物組合物，在伊立替康導致小鼠腹瀉模型的研究表明:對于伊立替康所致小鼠的腹瀉反應有明顯的對抗作用。2、證明了本天然藥物組合物能增強化療藥物對腫瘤的抑制作用，采用了小鼠腫瘤模型，觀察該天然藥物組合物與環(huán)磷酰胺聯(lián)合對小鼠體內腫瘤的抑制作用。研究表明:該天然藥物組合物能明顯增加環(huán)磷酰胺對于腫瘤的抑制作用。3、本發(fā)明人獨創(chuàng)地將山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚進行組合，并通過大量實驗確定這些組分之間的用量配比，使該組合物發(fā)揮協(xié)同作用，經過反復實驗研究，本發(fā)明的天然藥物組合物各組分之間的比例在2-4: 3-6: 3-7: 5-8時產生協(xié)同作用，增效明顯，對副作用起到非常好的效果，尤其在各組分的用量比例是4: 6: 7: 8時尤其明顯，這是本發(fā)明人付出大量創(chuàng)造性勞動而獲得的，本領域普通技術人員僅僅通過公開的內容無法簡單獲得這種配比以及最佳用量比例。4、該天然藥物組合物山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚各組分均可通過常規(guī)手段獲得，其中組分如丁香酚還可通過商業(yè)購得，這樣的組合物本身具有獲得方便、成本較低的效果。這也是發(fā)明人通過大量創(chuàng)造性勞動方獲得的兼具極佳療效和較高工業(yè)實用性的產品。
具體實施例方式下面通過實施例和試驗例進一步闡述本發(fā)明天然藥物組合物的制備，以及其在抗腹瀉和抗腫瘤中應用的有益效果。實施方案第一步:各種提取物的制備(I)山楂丁香水煎濃縮提取物的制備按照配伍比例為1-4: I取山楂、丁香，蒸餾水浸泡lh，加熱煎煮，絹布過濾，藥渣再加蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，加熱濃縮至小體積，超濾膜過濾，70°C減壓干燥，即得。(2)山楂總黃酮的制備取山楂果肉，以60%乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，回收乙醇，得浸膏，浸膏分別加入適量蒸餾水，攪勻，加入CaCl2Ig,靜置過夜，離心，收集上清液，用氨水調pH至7 8，加入大孔吸附樹脂柱中，調節(jié)流速5mL/min，用蒸餾水洗去雜質，以乙醇為流動相解吸附，回收乙醇，即得。(3) 丁香乙醇提取物制備取丁香，干燥，粉碎，過篩，用乙醇浸泡12h，過濾，殘渣繼續(xù)浸泡12h，將兩次濾液合并，3000rpm離心15min，分離上清液，蒸餾去除乙醇，乙酸乙酯提取，再減壓干燥成干浸膏，粉碎，過篩，即得。(4) 丁香酚制備將丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，過濾，濾液用5%的氫氧化鈉固定(pH = 9 10)，過濾，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水層鹽酸酸化，調溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用無水硫酸鈉干燥，蒸除乙醚，得淡黃色油狀液體，即為丁香酚。第二步:制劑的制備(I)本發(fā)明天 然藥物組合物膠囊制劑的制備分別稱取上述步驟制備的山楂丁香水煎濃縮提取物16mg、山楂總黃酮24mg、丁香乙醇提取物28mg與丁香酹32mg,稱取淀粉395mg、硬脂酸鎂5mg,均勻混合,填充成膠囊劑。
(2)本發(fā)明天然藥物組合物片劑的制備分別稱取上述步驟制備的山楂丁香水煎濃縮提取物16mg、山楂總黃酮24mg、丁香乙醇提取物28mg與丁香酹32mg,稱取淀粉295mg、乳糖IOOmg,均勻混合,用濕法制粒、干燥，整粒后與5mg硬脂酸鎂混合，壓成片劑。藥效及藥理學資料:在下述試驗例子中組合物為:山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚的用量比例為4: 6: 7: 8。發(fā)明人對上述各成分用量比例在2-4: 3-6: 3-7: 5-8之間時的多種配比組合獲得的組合物進行了與上相同的實驗，均發(fā)現在這種用量范圍內的天然藥物組合物能獲得很好的協(xié)同作用，對癌癥化療相關性腹瀉能起到很好的效果并對癌癥的治療有增效作用。以下是優(yōu)選的實施方式獲得的藥效學資料:試驗例1:天然藥物組合物治療化療相關性腹瀉作用的藥效學研究1、試驗材料(I)山楂，丁香，購于藥材市場。(2)小鼠，雄性，實驗前自由進食飲水。2、試驗方法:將小鼠隨機分為5組，每組5只，A組為模型組，B組為山楂丁香水煎濃縮提取物IOg.kg—1 (相當于含生藥量)，C組為山楂總黃酮10g.kg—1 (相當于含生藥量)，D組丁香乙醇提取物與丁香酚按7: 8比例混合10g.kg-1 (相當于含生藥量)，E組為本發(fā)明的天然藥物組合物10g.kg-1 (相當于含生藥量)，伊立替康腹腔注射給藥(75mg/kg),每天I次,連續(xù)4天，復制化療相關性腹瀉模 型。B、C、D、E組連續(xù)用相應提取物灌胃8天，將小鼠置于代謝籠，籠底鋪白色濾紙以觀察大便情況，并且觀察小鼠肛周情況及鼠尾糞便污染情況，結合棉簽刺激肛門排便，每日觀察記錄2次。腹瀉程度標準評分如下:0分:大便正?；驔]有；1分:輕度腹瀉，大便可見輕微濕軟；2分:中度腹瀉，大便較濕且不成型。并且有輕度肛周著色；3分，重度腹瀉，水樣便并伴有重度肛周著色。3、實驗結果與模型組比較，山楂丁香水煎濃縮提取物組化療相關性腹瀉的程度低于模型組，而本發(fā)明的天然藥物組合物組腹瀉發(fā)生率明顯減輕。結果見表1.
表I本發(fā)明組合物對小鼠化療相關性腹瀉發(fā)生率及評分影響
評分標準組別劑量腹瀉發(fā)生率
O1^23
AOO55/5
BIOaI224/5CIOaOI45/5 D IOa O I 4 5/5 E IOa 2 2 1 3/5注:a相當于含生藥量
試驗例2:本發(fā)明天然藥物組合物抗腫瘤作用的藥效學研究1、實驗材料(I)昆明種小鼠，體重20±2g，實驗前自由進食飲水，24h自然光照射。(2)環(huán)磷酰胺，江蘇恒瑞醫(yī)藥制藥股份有限公司產品。2、試驗方法:對小鼠S18tl肉瘤生長的抑制試驗采用傳代5-7天，生長良好的乳白色腹水，以適量無菌生理鹽水稀釋成瘤細胞懸液，細胞數為lOVmL，每組5只，每鼠右腋窩皮下接種0.2mL (含瘤細胞2 X IO6個)。接種次日隨機分組，實驗組將本發(fā)明的天然藥物組合物分為(200，100mg/mL)兩個劑量組，每鼠灌胃0.5ml,同時給予環(huán)磷酰胺IOg.kg-1.(Γ1 ;陰性對照組給予0.5mL蒸懼水；陽性藥物組給予環(huán)磷酰胺IOgCf1，連續(xù)給藥10天。常規(guī)飼養(yǎng)，飲水，食物不限。停藥次日，小鼠全部脫頸椎處死，剝取皮下實體瘤瘤塊，稱重，按下列公式計算腫瘤抑制率(％):腫瘤抑制率=〔對照組平均瘤重(C)-實驗組平均瘤重(T)〕/對照組平均瘤重(C)3、試驗結果本發(fā)明天然藥物組 合物低、高劑量組均可增強環(huán)磷酰胺劑與對S18tl的抑制程度作用，尤其以高劑量組作用最強。(如表2)表2本發(fā)明天然藥物組合物對S18tl小鼠的腫瘤抑制作用
權利要求
1.一種減少癌癥化療相關性腹瀉并對治療癌癥起增效作用的天然藥物組合物，其特征在于該組合物由山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚以重量計按2-4: 3-6: 3-7: 5-8的比例組成， 其中山楂丁香水煎濃縮提取物的制備方法是: 按照配伍比例為1-4: I取山楂、丁香，蒸餾水浸泡lh，加熱煎煮，絹布過濾，藥渣再加蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，加熱濃縮至小體積，超濾膜過濾，70°C減壓干燥，即得； 其中山楂總黃酮的制備方法是: 取山楂果肉，以60%乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，回收乙醇，得浸膏，浸膏分別加入適量蒸餾水，攪勻，加入CaCl2Ig,靜置過夜，離心，收集上清液，用氨水調pH至7 8，加入大孔吸附樹脂柱中，調節(jié)流速5mL/min，用蒸餾水洗去雜質，以乙醇為流動相解吸附，回收乙醇，即得； 其中丁香乙醇提取物的制備方法是: 取丁香，干燥，粉碎，過篩，用乙醇浸泡12h，過濾，殘渣繼續(xù)浸泡12h，將兩次濾液合并，3000rpm離心15min，分離上清液，蒸餾去除乙醇，乙酸乙酯提取，再減壓干燥成干浸膏，粉碎，過篩，即得； 其中丁香酚的制備方法是: 將丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，過濾，濾液用5%的氫氧化鈉固定，過濾，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水層鹽酸酸化，調溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用無水 硫酸鈉干燥，蒸除乙醚，得淡黃色油狀液體，即為丁香酚。
2.如權利要求1所述的天然藥物組合物，其特征在于其中山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚的用量比例是4: 6: 7: 8。
3.如權利要求1或2的天然藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法包括: (1)山楂丁香水煎濃縮提取物的制備 按照配伍比例為1-4: I取山楂、丁香，蒸餾水浸泡lh，加熱煎煮，絹布過濾，藥渣再加蒸餾水，同法浸泡、煎煮、過濾，將兩次濾液混合，加熱濃縮至小體積，超濾膜過濾，70°C減壓干燥，即得； (2)山楂總黃酮的制備 取山楂果肉，以60%乙醇回流提取2次，每次1.5h，合并提取液，回收乙醇，得浸膏，浸膏分別加入適量蒸餾水，攪勻，加入CaCl2Ig,靜置過夜，離心，收集上清液，用氨水調pH至7 8，加入大孔吸附樹脂柱中，調節(jié)流速5mL/min，用蒸餾水洗去雜質，以乙醇為流動相解吸附，回收乙醇，即得； (3)丁香乙醇提取物的制備 取丁香，干燥，粉碎，過篩，用乙醇浸泡12h，過濾，殘渣繼續(xù)浸泡12h，將兩次濾液合并，3000rpm離心15min，分離上清液，蒸餾去除乙醇，乙酸乙酯提取，再減壓干燥成干浸膏，粉碎，過篩，即得； (4)丁香酚的制備 將丁香粉碎，用95%的乙醇微沸下回流30min，過濾，濾液用5%的氫氧化鈉固定，過濾，蒸除乙醇，每次用25mL乙醚萃取3次；水層鹽酸酸化，調溶液pH = 5，用乙醚萃取3次，合并萃取液，用無水硫酸鈉干燥，蒸除乙醚，得淡黃色油狀液體，即為丁香酚； (5)按比例選取山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚均勻混合，即得。
4.如權利要求3所述的天然藥物組合物的制備方法，其特征在于還包括:將步驟(5)制得的產品進一步通過常規(guī)的制藥手段制成含有天然藥物組合物IOOmg或200mg規(guī)格的膠囊，或將按濕法制粒工藝制成含天然藥物組合物IOOmg或200mg規(guī)格的片劑。
5.如權利要求1-2任一項所述的天然藥物組合物在制備減少癌癥化療相關性腹瀉反應并對治療癌癥起增效 作用的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種中藥組合物及其制備方法，該中藥組合物由山楂丁香水煎濃縮提取物、山楂總黃酮、丁香乙醇提取物與丁香酚按2-4∶3-6∶3-7∶5-8的比例組成，該組合物對由癌癥化療相關性腹瀉有極好的療效并能同時對癌癥化療起增效作用。
文檔編號A61K36/734GK103223029SQ20131013249
公開日2013年7月31日 申請日期2013年4月8日 優(yōu)先權日2013年4月8日
發(fā)明者張宗升 申請人:張宗升